柑橘主要遺傳性狀的分子標(biāo)記研究進(jìn)展

茍文濤 曾莎芮 張志標(biāo) 陶星星 卓國(guó)寧謝岳昌 馬瑞豐 杜小珍 李國(guó)華

（1 梅州市農(nóng)林科學(xué)院，廣東梅州514071；2 梅州市農(nóng)林科學(xué)院果樹研究所，廣東梅州514071；3 國(guó)家柑橘產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系梅州沙田柚綜合試驗(yàn)站，廣東梅州514071；4 廣東省梅州柚品質(zhì)改良工程技術(shù)研究中心，廣東梅州514071）

柑橘（Citrus reticulataBlanco.）屬蕓香科柑橘屬，由于其品種繁多、形態(tài)各異、口感和風(fēng)味多樣，能滿足各類人群的需要，在市場(chǎng)上廣受消費(fèi)者青睞[1-2]。根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織FAOSTAT 數(shù)據(jù)顯示，2022 年我國(guó)柑橘園面積為303.3540 萬hm2、柑橘產(chǎn)量為6003.89 萬t（約占全球總產(chǎn)量1/3 左右）[3]，國(guó)家統(tǒng)計(jì)局發(fā)布（http：//www.stats.gov.cn/sj/）數(shù)據(jù)顯示中國(guó)柑橘栽培面積及柑橘產(chǎn)量常年穩(wěn)居世界首位。在如此產(chǎn)業(yè)背景下，我國(guó)的柑橘育種研究得到迅猛發(fā)展，種質(zhì)資源不斷創(chuàng)新且數(shù)量逐年增加。柑橘是高經(jīng)濟(jì)附加值的農(nóng)作物之一，對(duì)提高農(nóng)民的收入具有重要意義。

柑橘常規(guī)育種年限長(zhǎng)、效率低且成本高，目前國(guó)內(nèi)的柑橘育種以傳統(tǒng)的芽變育種和雜交育種技術(shù)為主，分子標(biāo)記育種還處在起步階段，未建立完善的柑橘分子標(biāo)記輔助育種體系。隨著近些年分子標(biāo)記技術(shù)迅猛發(fā)展，分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)（MAS，Marker assisted selcection）為品種創(chuàng)制和選育工作提供了創(chuàng)新思路[4]。分子標(biāo)記技術(shù)以不同物種間核苷酸序列為基礎(chǔ)，開展個(gè)體間基因差異研究，是解決生物鑒定難的重要手段，其鑒定結(jié)果穩(wěn)定，在精準(zhǔn)鑒定易混淆品種近緣種方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。分子標(biāo)記技術(shù)彌補(bǔ)了柑橘類育種研究領(lǐng)域發(fā)展的技術(shù)短板，在柑橘種質(zhì)資源鑒定、系統(tǒng)進(jìn)化、遺傳多樣性和分子育種等方面能夠發(fā)揮重要作用。

1 DNA 分子標(biāo)記技術(shù)的概述及類型

DNA 分子標(biāo)記技術(shù)是20 世紀(jì)60 年代繼形態(tài)標(biāo)記、細(xì)胞標(biāo)記和生化標(biāo)記之后發(fā)展起來的以遺傳物質(zhì)（核酸）的多態(tài)性為基礎(chǔ)的遺傳標(biāo)記形式[5]。因其不受植物內(nèi)部因素（組織類別、發(fā)育階段）和外部環(huán)境條件的限制，還具有數(shù)量多、分布廣、多態(tài)性高、穩(wěn)定性好、檢測(cè)迅速、操作簡(jiǎn)便等諸多優(yōu)勢(shì)，因而被廣泛應(yīng)用到植物遺傳多樣性分析、品種鑒定、親緣關(guān)系分析、基因定位等方面[6]。

根據(jù)對(duì)DNA 多態(tài)性的檢測(cè)方法不同，可將分子標(biāo)記技術(shù)分為4 類[7]：一是基于分子雜交技術(shù)的分子標(biāo)記，如限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記（RFLP，Restriction fragment length polymorphism）、 可 變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性（VNTR，Variable number of tandem repeat）等；二是基于PCR 的分子標(biāo)記，如隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD，Randomly amplified polymorphic DNA）、特征性片段擴(kuò)增區(qū)域（SCAR，Sequence characterized amplified regions）、簡(jiǎn)單重復(fù)序列（SSR，Simple sequence repeats）、簡(jiǎn)單序列重復(fù)區(qū)間擴(kuò)增多態(tài)性（ISSR，Intersimple sequence repeat）、相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性（SRAP，Sequence related amplified polymorphism）等；三是基于PCR 與限制性酶切技術(shù)結(jié)合的分子標(biāo)記，如擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（AFLP，Amplified fragment length polymorphism）、酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列（CAPS，Cleaved amplified polymorphic sequences）等；四是以DNA 序列分析為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記，如內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS，Internal transcribed spacer）、轉(zhuǎn)錄單位間隔區(qū)（IGS，Intergenic spacers）、單核苷酸多 態(tài) 性（SNPs，Single nucleotide polymorphisms）等。目 前，RFLP、RAPD、AFLP、ISSR、SRAP、SCAR以及SSR 等分子標(biāo)記技術(shù)在柑橘研究中均有報(bào)道。

2 DNA 分子標(biāo)記技術(shù)在柑橘中的應(yīng)用研究

柑橘是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物，其重要性狀包括果實(shí)品質(zhì)、植物生長(zhǎng)和抗逆性等。DNA 分子標(biāo)記技術(shù)可用于開發(fā)與控制果實(shí)品質(zhì)、植物生長(zhǎng)和抗逆性的基因位點(diǎn)相關(guān)的分子標(biāo)記。這些分子標(biāo)記可以用于選擇具有優(yōu)良性狀的柑橘植株，提高育種效率?？傊肿訕?biāo)記開發(fā)是柑橘遺傳學(xué)研究的重要手段，有助于揭示柑橘重要性狀的遺傳基礎(chǔ)，為育種提供指導(dǎo)，促進(jìn)柑橘遺傳改良和品種培育。

2.1 柑橘外在品質(zhì)相關(guān)的分子標(biāo)記柑橘的外在品質(zhì)性狀除了胚型、花藥顏色以外，果實(shí)形狀、大小和色澤等相關(guān)性狀是由多基因控制的數(shù)量性狀，受到內(nèi)外多種因素的影響，研究難度較大，目前關(guān)于其遺傳調(diào)控的機(jī)制尚不清楚[8]。然而，果實(shí)大小是柚類的最重要農(nóng)藝性狀之一，不僅影響柚的產(chǎn)量和外觀品質(zhì)，也影響生產(chǎn)成本和消費(fèi)者的選擇。長(zhǎng)期以來柚果的外觀品質(zhì)已成為果實(shí)品質(zhì)評(píng)價(jià)和售價(jià)的主要參考指標(biāo)。Imai 等[9]研究發(fā)現(xiàn)，柑橘果實(shí)大小介于150～300g 范圍內(nèi)，是理想的柑橘果實(shí)大小育種目標(biāo)。García 等[10]對(duì)Citrus volkameriana×Poncirus trifoliata 雜交群體進(jìn)行遺傳分析，檢測(cè)到Fs1、Fs2和Fs3等3 個(gè)與柑橘單果重相關(guān)的QTL 位點(diǎn)；Yu等[11]對(duì)Fortune 橘×Murcott 橘橙雜交群體進(jìn)行遺傳分析得到48 個(gè)與果實(shí)品質(zhì)相關(guān)的QTL，其中FW4.2、FW5.1和FW8等3 個(gè)QTL 與果實(shí)大小相關(guān)。羅艾等[12]通過晚蜜2 號(hào)×梨橙2 號(hào)的94 株F1材料為分離群體探究柑橘果實(shí)大小與質(zhì)量的遺傳調(diào)控機(jī)制，定位到4 個(gè)與果實(shí)質(zhì)量相關(guān)的QTL，3 個(gè)與橫徑相關(guān)的QTL，4 個(gè)與縱徑相關(guān)的QTL，都分別位于WL3 和WL8 連鎖群上。在果皮果肉顏色方面，近年來，張亞飛等[13]從柑橘全基因組中鑒定出的CcCCD4a基因與柑橘果肉顏色高度相關(guān)，其表達(dá)量的高低與果肉顏色深淺變化呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。湯雨晴等[14]以紅橘與枳雜交F1群體為材料，對(duì)果肉色澤和類胡蘿卜素代謝進(jìn)行QTL 分析，定位到與柑橘果肉色澤相關(guān)的8 個(gè)QTL 位點(diǎn)，并篩選出與色澤高度相關(guān)的候選基因Ciclev10019730m和Ciclev10021268m。苑平等[15]利用SRAP 分子標(biāo)記從克里曼丁紅橘芽變植株中克隆到具有差異序列的基因Cs4g12370，推測(cè)其可能與果皮色澤調(diào)控有關(guān)。

2.2 柑橘內(nèi)在品質(zhì)相關(guān)的分子標(biāo)記目前，評(píng)價(jià)柑橘內(nèi)在品質(zhì)的指標(biāo)有香味、苦味、酸味、甜味和質(zhì)地等[16]。這些風(fēng)味屬性在一定程度上受內(nèi)源性化學(xué)物質(zhì)影響，如揮發(fā)性物質(zhì)含量決定香味的濃度，類黃酮和檸檬苦素類似物決定果實(shí)的苦味，可溶性糖含量決定果肉的甜味，有機(jī)酸含量影響果汁的酸味，木質(zhì)素、果膠、纖維素和半纖維素的含量影響果實(shí)的化渣率，氨基酸和異味的醇、醛等物質(zhì)影響果實(shí)的鮮味[1]。隨著人們生活水平的提高，市場(chǎng)對(duì)不同風(fēng)味的柑橘需求日益凸顯，前人也對(duì)柑橘風(fēng)味進(jìn)行了一定程度的研究。Asins 等[17]在C.clementinaHort×C.tangerinaHort 群體中，將果實(shí)含糖量性狀控制位點(diǎn)鎖定在9 號(hào)連鎖群，在可溶性固形物含量和酸度之間存在相關(guān)性的情況下，在連鎖群9b 和4b 中檢測(cè)到了2 個(gè)性狀的QTL，但沒有發(fā)現(xiàn)QTL 的聚類，這表明連鎖至少部分地解釋了相關(guān)性。張亞飛[18]對(duì)柑橘果實(shí)GWAS 分析，研究發(fā)現(xiàn)CcGLDH與柑橘果實(shí)苦味、糖含量、酸含量以及果皮果肉顏色有著緊密的關(guān)聯(lián)。Kita 等[19]以溫州蜜柑、葡萄柚、臍橙和酸橙等材料進(jìn)行苦味調(diào)控機(jī)理探究時(shí)發(fā)現(xiàn)LGT基因與苦味性狀相關(guān)聯(lián)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)CitLGT-2可以延遲溫州蜜柑中的苦味，而CitLGT-1等位基因則可以延遲臍橙果實(shí)中的苦味。Fang 等[20]對(duì)不同柑橘品種果實(shí)酸度進(jìn)行檢測(cè)，在無酸柚6 個(gè)不同雜交群體中開發(fā)了3 個(gè)不同的RAPD 連鎖標(biāo)記。江東等[21]通過對(duì)低酸和高酸柚群體的Fst 和XPCLR 選擇性清除分析，進(jìn)行柚類果實(shí)中決定檸檬酸含量基因的初步定位，定位到7 號(hào)染色體上與可滴定酸含量顯著關(guān)聯(lián)的SNP 位點(diǎn)。

3 柑橘主要病害相關(guān)的分子標(biāo)記

柑橘病害是導(dǎo)致產(chǎn)量損失和品質(zhì)下降的主要原因之一。分子標(biāo)記輔助育種為培育抗病性強(qiáng)、產(chǎn)量高、品質(zhì)好的品種提供了新的可能性。例如，利用與抗病性相關(guān)的分子標(biāo)記，可以幫助育種家在較短時(shí)間內(nèi)篩選出具有良好抗病性的柑橘品種。近年來，隨著各柑橘產(chǎn)區(qū)種植面積不斷擴(kuò)大，廢棄果園清理不善，柑橘病害日益凸顯。同時(shí)柑橘極易感染一種或多種病害，從而使得植株生長(zhǎng)發(fā)育受阻、產(chǎn)量降低、果實(shí)品質(zhì)下降，甚至導(dǎo)致植株死亡。目前，世界上已報(bào)道的柑橘病毒和類似病毒病約有80 余種，多具有易傳播、危害性大、多種病原復(fù)合侵染率高、感染后樹體終身帶毒和難以防治等特點(diǎn)[22]。我國(guó)柑橘常見且危害較大的病害有柑橘黃龍?。℉LB，Cirtus huanglongbing）、柑 橘 衰 退 病（CTV，Citrus tristeza virus）和柑橘潰瘍病（CBC，Citrus bacterial canker）等[22]。這些病害不但通過苗木轉(zhuǎn)運(yùn)和芽條嫁接引種進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播，而且還能在田間通過農(nóng)事操作和昆蟲等進(jìn)行近距離擴(kuò)散。目前，針對(duì)柑橘病毒類病害尚無有效的防治措施，本文通過對(duì)柑橘病毒病相關(guān)的分子標(biāo)記研究進(jìn)展進(jìn)行概述，為柑橘病毒病的快速診斷和抗病性研究提供參考。

3.1 黃龍病分子標(biāo)記柑橘黃龍病是一種嚴(yán)重影響柑橘產(chǎn)業(yè)的重要病害，給全球柑橘產(chǎn)業(yè)帶來了巨大的損失。為了應(yīng)對(duì)柑橘黃龍病的威脅，研究者們正在努力探索與之相關(guān)的分子標(biāo)記。Chen 等[23]首次利用簡(jiǎn)單重復(fù)單位（AGACACA）證明了佛羅里達(dá)州和中國(guó)廣東省黃龍病菌株存在顯著差異。Katoh 等[24]利用可變數(shù)目的串聯(lián)重復(fù)序列（VNTR，Variable number of tandem repeats）構(gòu)建黃龍病的SSR 標(biāo)記，成功篩選到27 個(gè)具有4～63 個(gè)核苷酸的SSR 分子標(biāo)記，為黃龍病遺傳多樣性研究奠定基礎(chǔ)。Matos 等[25]用其中4 個(gè)SSR 分子標(biāo)記分析黃龍病新流行區(qū)的菌株，發(fā)現(xiàn)佛羅里達(dá)州南北的菌株存在差異。Ming 等[26]在枳遺傳圖譜LG6、LG8 和LG9 以及甜橙遺傳圖譜LG7 上，分別鑒定到4 個(gè)HLB 誘導(dǎo)葉片和冠層反應(yīng)的QTL，揭示多個(gè)QTL參與柑橘HLB 反應(yīng)的遺傳控制，為今后研究HLB抗性或耐受性的遺傳結(jié)構(gòu)提供了一個(gè)起點(diǎn)。目前，對(duì)于柑橘黃龍病分子標(biāo)記的研究還處于初級(jí)階段，尚未有成熟的分子標(biāo)記應(yīng)用于育種實(shí)踐。未來的研究需要進(jìn)一步探索這些基因及其作用機(jī)制，以便更好地理解柑橘黃龍病的發(fā)病機(jī)理，并找到更有效的育種策略來應(yīng)對(duì)這種病害的威脅。

3.2 衰退病分子標(biāo)記柑橘衰退病是一種由線性病毒引起的嚴(yán)重病害，其既是植物病毒中基因組最大的病毒，也是編碼RNA 沉默抑制子較多的病毒之一[27]。加強(qiáng)植物檢疫，選用抗病性強(qiáng)的品種作為砧木，加強(qiáng)栽培管理，及時(shí)防治蚜蟲等措施都是有效預(yù)防衰退病的方法。在選育品種時(shí)，利用分子標(biāo)記輔助育種可以幫助選擇具有良好抗病性的品種。Mestre 等[28]采用BSA 方法對(duì)枳的衰退病進(jìn)行遺傳分析，找到7 個(gè)RAPD 標(biāo)記，并將這些RAPD 連鎖標(biāo)記轉(zhuǎn)化成SCAR 標(biāo)記。Deng 等[29]克隆了柑橘NBS-LRR 類抗病基因，并成功定位到3 個(gè)與衰退病連鎖的CAP 標(biāo)記（18P33a、Pt9a 和Pt8a）。Asins等[30]利用病毒積累的QTL 分析研究CTV 與柑橘的互作效應(yīng)，從中篩選定位到3 個(gè)QTL（CTV-A1、CTV-A3和CTV-A5）及其候選基因；后來，Asins等[31]又找到了4 個(gè)與抗CTV 相關(guān)的候選基因位點(diǎn)（CTVCh14、CTVCh15、CTVCh17和VIC）。 雖 然柑橘衰退病的分子標(biāo)記研究還面臨許多挑戰(zhàn)，但隨著分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用，未來的研究有望為柑橘育種提供更多的工具和方法。通過探索和利用分子標(biāo)記，可以更好地了解和控制柑橘衰退病的遺傳基礎(chǔ)，從而提高品種的抗病性和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。

3.3 潰瘍病分子標(biāo)記柑橘潰瘍病是一種由地毯黃單胞桿菌柑橘致病變種引起的細(xì)菌性病害。柑橘潰瘍病的主要癥狀包括植株葉片、果實(shí)和枝條上出現(xiàn)褪綠的斑點(diǎn)，隨后這些斑點(diǎn)會(huì)擴(kuò)大并變成黃色的潰瘍狀，最終導(dǎo)致這些部分脫落[32]。在柑橘潰瘍病研究方面，Xiang 等[33]通過類受體激酶的候選抗病基因序列，發(fā)現(xiàn)了與柑橘潰瘍病抗性密切相關(guān)的分子標(biāo)記位點(diǎn)。彭祝春等[34]通過構(gòu)建抗性分離群體進(jìn)行田間抗性測(cè)試，再結(jié)合SSR 分子標(biāo)記技術(shù)，篩選并驗(yàn)證了與柑橘潰瘍病抗性相關(guān)的分子標(biāo)記，得到1 個(gè)與柑橘潰瘍病抗性相關(guān)的分子標(biāo)記CCR-110。對(duì)于柑橘潰瘍病的分子標(biāo)記研究，目前還相對(duì)較少。然而，已有一些研究表明，可能與某些基因有關(guān)，這些基因可能涉及到抗病性、耐病性以及與病毒的互作等方面?？偟膩碚f，對(duì)于柑橘潰瘍病的分子標(biāo)記研究目前尚未得到足夠的關(guān)注，需要更多研究者共同努力來推動(dòng)這一領(lǐng)域的發(fā)展。隨著分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用，未來的研究有望能夠更深入地了解和應(yīng)對(duì)柑橘潰瘍病的威脅。

4 柑橘抗逆性相關(guān)的分子標(biāo)記

柑橘抗逆性是指柑橘植株在逆境條件下仍然能夠正常生長(zhǎng)和繁殖的能力，這種能力受到許多因素的影響，包括柑橘植株的基因型、環(huán)境因素、土壤和氣候條件等[35]。在柑橘抗逆性的分子標(biāo)記研究方面，一些研究者正在致力于尋找與抗逆性相關(guān)的分子標(biāo)記。這些分子標(biāo)記可能涉及到多個(gè)基因和蛋白質(zhì)，包括與細(xì)胞保護(hù)、抗氧化、抗炎和免疫反應(yīng)等相關(guān)基因。例如，在柑橘耐冷性狀研究方面，Weber等[36]使用柚和枳雜交F1群體，檢測(cè)到3 個(gè)與抗低溫相關(guān)的QTL；馬喜軍[37]運(yùn)用電導(dǎo)法進(jìn)行抗寒力測(cè)定，檢測(cè)到7 個(gè)與抗寒性相關(guān)的QTL，分別分布于LW1、LW2、LW3 和LW8 連 鎖 群 上。Hong等[38]在LG1、LG2、LG3 和LG4 上檢測(cè)到4 個(gè)抗寒性相關(guān)的QTL（qFT1.1/2.1/3.1/4.1），可解釋較多的表型變異。Abouzari 等[39]研究發(fā)現(xiàn)了與柑橘耐冷能力相關(guān)的SSR 和AFLP 分子標(biāo)記，并且其中的一些分子標(biāo)記與植株的超氧化物歧化酶活性和脯氨酸含量相關(guān)。在柑橘耐鹽性狀研究方面，Kolstad[40]以枳和柚的BC1群體為材料，在鹽和非鹽環(huán)境中進(jìn)行Na+和Cl-積累相關(guān)性狀的QTL 分析，發(fā)現(xiàn)了73 個(gè)潛在數(shù)量性狀位點(diǎn)。Raga 等[41]對(duì)柑橘砧木Trifoliata 和CleopatraMandarin 的雜交后代進(jìn)行遺傳研究，通過區(qū)間定位和多QTL 定位共檢測(cè)到98 個(gè)與耐鹽性相關(guān)的QTL。在柑橘耐旱性狀研究方面，肖金平等[42]通過cDNA-AFLP 方法篩選到干旱脅迫下柑橘葉片中的差異表達(dá)基因TDF；此外，盧婷等[43]研究表明WRKY75基因受多種非生物脅迫誘導(dǎo)表達(dá)，推測(cè)其可能在柑橘響應(yīng)非生物脅迫過程中發(fā)揮了重要作用。李瀟等[44]研究發(fā)現(xiàn)，甜橙CsMYB96能被低溫和干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)。檸檬ClMYB96和金柑FmMYB96在高鹽脅迫下被誘導(dǎo)表達(dá)，而蘆柑CrMYB96的表達(dá)量在低溫、干旱和高鹽脅迫下都有不同程度的下調(diào)表達(dá)。

5 結(jié)語與展望

在過去的半個(gè)多世紀(jì)以來，我國(guó)的柑橘育種進(jìn)程逐漸加快，先后經(jīng)歷了4 個(gè)重要的育種時(shí)代，即利用自然變異時(shí)代（V1.0）、雜交產(chǎn)生變異時(shí)代（V2.0）、生物技術(shù)育種的細(xì)胞水平時(shí)代（V3.0）和分子水平時(shí)代（V4.0）。從最初的芽變選育時(shí)代到分子育種時(shí)代，柑橘育種進(jìn)程呈現(xiàn)快速發(fā)展趨勢(shì)[3]。然而，由于柑橘類型繁多、形態(tài)復(fù)雜且易發(fā)生芽變，其模糊的遺傳背景在一定程度上阻礙了柑橘類的育種進(jìn)程。此外，由于實(shí)生苗生長(zhǎng)速度緩慢，導(dǎo)致育種年限長(zhǎng)、育種效率低。

分子標(biāo)記能夠直接鑒別生物個(gè)體間的本質(zhì)差異，不受時(shí)間和空間的限制。但是當(dāng)前大多數(shù)分子標(biāo)記還停留在實(shí)驗(yàn)室階段，距離實(shí)際應(yīng)用還有較大距離，并且在實(shí)際應(yīng)用中簡(jiǎn)單照搬就可以使用的分子標(biāo)記并不多見。因此需要應(yīng)用分子標(biāo)記技術(shù)深入研究柑橘的重要性狀，詳細(xì)可靠地對(duì)其遺傳規(guī)律進(jìn)行分析，并開發(fā)與重要性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記利用分子標(biāo)記輔助基因聚合育種，將控制不同優(yōu)良性狀的基因聚合，有效縮短選育周期，培育柑橘新種質(zhì)。

未來的研究將更加關(guān)注于尋找與品質(zhì)和抗病性相關(guān)的分子標(biāo)記。分子標(biāo)記技術(shù)與蛋白組、代謝組等生物技術(shù)相結(jié)合，更深入地了解品質(zhì)和抗病的機(jī)制。同時(shí)，柑橘品種選育要以消費(fèi)者的需求為目標(biāo)，新品種創(chuàng)制應(yīng)朝著優(yōu)質(zhì)多元化方向發(fā)展。在果實(shí)品質(zhì)提升方面，深入挖掘易剝皮、無籽、有香味、風(fēng)味濃等相關(guān)性狀的分子標(biāo)記。在滿足柑橘周年化市場(chǎng)供應(yīng)需求方面，找尋與早、中、晚熟品種相對(duì)應(yīng)的分子標(biāo)記。還需要積極探索適合機(jī)械化栽培的柑橘砧木和接穗品種，如開發(fā)矮化、直立樹形和枝條無刺等性狀相關(guān)的分子標(biāo)記。此外，還應(yīng)利用分子標(biāo)記輔助育種篩選高抗性柑橘品種，特別是高抗黃龍病的品種或砧木。