溶血對(duì)肝功能檢驗(yàn)的臨床影響

徐成蘭

【摘要】目的：研究溶血對(duì)肝功能檢驗(yàn)的臨床影響。方法：2020年5月—2022年5月，選入于本院接受肝功能檢驗(yàn)的243例健康體檢者，獲取溶血、非溶血標(biāo)本各243份。溶血標(biāo)本行肝功能檢測(cè)所得數(shù)據(jù)為試驗(yàn)組。非溶血標(biāo)本行肝功能檢測(cè)所得數(shù)據(jù)為參照組。評(píng)價(jià)各組相關(guān)酶、蛋白、膽紅素等指標(biāo)。結(jié)果：（1）試驗(yàn)組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶：（31.74±5.22）U/L；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶：（34.90±4.82）U/L；堿性磷酸酶：（52.21±2.97）U/L；總蛋白：（85.97±6.13）g/L；清蛋白：（54.15±4.33）g/L，參照組各指標(biāo)分別為（22.26±5.16）U/L、（22.57±4.31）U/L、（94.27±5.11）U/L、（72.02±5.28）g/L、（43.70±5.22）g/L，試驗(yàn)組相關(guān)酶均比參照組高，存在統(tǒng)計(jì)價(jià)值（P<0.05）。（2）試驗(yàn)組γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶：（13.17±2.05）U/L；直接膽紅素：（7.48±0.42）μmol/L；總膽紅素：（17.28±0.27）μmol/L，參照組各指標(biāo)為（21.58±2.50）U/L、（4.69±0.55）μmol/L、（12.41±2.54）μmol/L，試驗(yàn)組直接膽紅素、總膽紅素指標(biāo)比參照組高，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶比參照組低，統(tǒng)計(jì)意義存在（P<0.05）。結(jié)論：溶血會(huì)影響肝功能檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性，難以為臨床提供有效數(shù)據(jù)，不利于臨床診斷有效性的提升。后續(xù)檢測(cè)期間，應(yīng)重視降低溶血發(fā)生，確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，進(jìn)而為診治工作開展提供有效借鑒。

【關(guān)鍵詞】肝功能檢驗(yàn)；溶血；檢驗(yàn)準(zhǔn)確度

Clinical effect of hemolysis on liver function test

XU Chenglan

Xinganjie Skull Injury Hospital Co.， Ltd. （laboratory）， Guilin， Guangxi 541000， China

【Abstract】Objective： To study the clinical effect of hemolysis on liver function test. Methods： From May 2020 to May 2022， 243 healthy people who underwent liver function test in our hospital were selected， and 243 hemolytic and non-hemolytic samples were obtained. The data obtained from liver function test of hemolysis samples were the experimental group. The data obtained from liver function test of non-hemolytic samples were used as the reference group. The indexes of related enzymes， proteins and bilirubin were evaluated. Results：（1） Alanine aminotransferase in experimental group： （31.74±5.22） U/L； Aspartate aminotransferase： （34.90±4.82） U/L； Alkaline phosphatase： （52.21±2.97） U/L； Total protein： （85.97±6.13） g/L； Albumin： （54.15±4.33） g/L， the indexes of the reference group were （22.26±5.16） U/L， （22.57±4.31） U/L， （94.27±5.11） U/L， （72.02±5.28） g/L， （43.70±5.22） g/L， respectively. The related enzymes of the experimental group were higher than those of the reference group. There was statistical value（P<0.05）. （2） γ-glutamyl transpeptidase in experimental group： （13.17±2.05） U/L； Direct bilirubin： （7.48±0.42） μmol/L； Total bilirubin： （17.28±0.27） μmol/L， and the indexes of the reference group were （21.58±2.50） U/L， （4.69±0.55） μmol/L， （12.41±2.54） μmol/L. The indexes of direct bilirubin and total bilirubin in the experimental group were higher than those in the reference group， and the γ-glutamyl transpeptidase was lower than that in the reference group. Statistical significance existed（P<0.05）. Conclusion： hemolysis can affect the accuracy of liver function test， difficult to provide effective data for clinical practice， and not conducive to the effectiveness of clinical diagnosis. During the follow-up testing period， attention should be paid to reducing the occurrence of hemolysis to ensure the accuracy of the test results， and then provide effective reference for the diagnosis and treatment.

【Key Words】Liver function test； Hemolysis； Test accuracy

在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)屬于關(guān)鍵性的構(gòu)成部分，能夠?yàn)榧膊≡\斷、治療提供有效參考。近些年，檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展迅速，尤其是各類新儀器、檢驗(yàn)方法的應(yīng)用，使得新的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目出現(xiàn)。這就使得臨床醫(yī)師對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果過的可靠性、準(zhǔn)確性重視程度提升[1]。肝功能檢驗(yàn)屬于臨床常見檢查項(xiàng)目，利于對(duì)相關(guān)疾病作出判斷。但是在血液標(biāo)本采集后，難以避免出現(xiàn)溶血情況，進(jìn)而影響各指標(biāo)的準(zhǔn)確性。在多因素影響下，存在于血液標(biāo)本中紅細(xì)胞會(huì)受到破壞，進(jìn)而導(dǎo)致紅細(xì)胞中出現(xiàn)血紅蛋白溢出現(xiàn)象，最終影響檢驗(yàn)結(jié)果。因紅細(xì)胞內(nèi)存在的成分較多，所以在溶血情況下，會(huì)使得相關(guān)檢驗(yàn)項(xiàng)目指標(biāo)出現(xiàn)偏差，進(jìn)而導(dǎo)致臨床診斷出現(xiàn)錯(cuò)誤[2]。本研究分析溶血對(duì)肝功能檢驗(yàn)的臨床，作如下報(bào)告。

1.1 基礎(chǔ)資料

選入于本院接受肝功能檢驗(yàn)的健康體檢者243例，時(shí)間為2020年5月—2022年5月，獲取溶血、非溶血標(biāo)本各243份，溶血標(biāo)本行肝功能檢測(cè)所得數(shù)據(jù)為試驗(yàn)組。非溶血標(biāo)本行肝功能檢測(cè)所得數(shù)據(jù)為參照組。243例健康體檢者中，男142例，女101例，年齡25～77歲，平均年齡（52.12±4.50）歲，體質(zhì)量47～83kg，平均體質(zhì)量（64.08±5.11）kg。所有入選者均知情本研究。

1.2 方法

將所得血液標(biāo)本制作為溶血、非溶血標(biāo)本。標(biāo)記明確后，送至實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行記錄，并行相關(guān)分析，詳細(xì)操作流程如下：（1）標(biāo)本采集。所有體檢者受檢當(dāng)天，均保持清晨空腹?fàn)顟B(tài)。采集靜脈血6mL。3mL放于A管中，3mL放于B管中。A管為不進(jìn)行溶血處理，血液標(biāo)本采集完成后，將其放在水浴箱，溫度設(shè)定為37℃，時(shí)間為20min。再進(jìn)行離心處理，3000r/min。分離血清，備用。所有血清經(jīng)由肉眼檢查，均無黃疸、溶血、脂肪血存在。B管內(nèi)采集的血液標(biāo)本進(jìn)行溶血處理。標(biāo)本采集完成后，將其放在溫度為零下30℃的冰箱內(nèi)。放置30min后，將標(biāo)本取出，再開展解凍工作。當(dāng)解凍完成，行離心干預(yù)，時(shí)間為10min，速度為3000r/min。分離血清后備用。②檢驗(yàn)方法：亞硝酸鹽氧化法。設(shè)定有關(guān)參數(shù)。溫度：37℃。主、次波長：450mm、540mm。取10μL血液樣本，加入亞硝酸鹽氧化法試劑1（240μL），反應(yīng)時(shí)間為180s。反應(yīng)結(jié)束后，獲得數(shù)值A(chǔ)1。加入亞硝酸鹽氧化法試劑2，總計(jì)25μL，共反應(yīng)300s，所得數(shù)據(jù)為A2。血清膽紅素濃度值為A2與A1差值。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）相關(guān)酶指標(biāo)檢測(cè)值。檢驗(yàn)指標(biāo)：①丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。②天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。③r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶。④堿性磷酸酶。（2）相關(guān)蛋白、膽紅素指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果。相關(guān)蛋白：總蛋白、清蛋白。相關(guān)膽紅素：直接膽紅素、總膽紅素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行2χ檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（χ±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.1 相關(guān)酶指標(biāo)檢測(cè)值

試驗(yàn)組γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、堿性磷酸酶水平低于參照組，其余指標(biāo)高于參照組，存在統(tǒng)計(jì)意義（P<0.05），見表1。

2.2 相關(guān)蛋白、膽紅素指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

試驗(yàn)組總蛋白、清蛋白、直接膽紅素、總膽紅素指標(biāo)高于參照組（P<0.05），見表2。

血樣檢驗(yàn)在臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目中較為常見。尤其是肝功能檢驗(yàn)的開展，不僅能夠?qū)膊∽鞒鲈缙谠\斷，而且還可指導(dǎo)臨床選擇合適的治療方案，從而達(dá)到改善患者預(yù)后的目的。但是在血樣采集至檢驗(yàn)時(shí)間期間，溶血不可避免[3]。溶血即紅細(xì)胞破裂，或者紅蛋白溢出。導(dǎo)致溶血發(fā)生因素較為復(fù)雜，并且具有多樣性特征。根據(jù)溶血情況不同，可將其分為體內(nèi)、體外溶血兩種。就體外溶血而言，所致的結(jié)果即血漿或血清中乳酸脫氫酶水平升高。同時(shí)，鉀離子、血紅蛋白指標(biāo)升高，也提示為體外溶血。就體內(nèi)溶血而言，鉀離子水平并不會(huì)受到影響，但是血清中乳酸脫氫酶、血紅蛋白指標(biāo)會(huì)以升高為表現(xiàn)監(jiān)測(cè)[4]。

血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血情況，與保存、運(yùn)送、搖勻、環(huán)境等均存在相關(guān)性。此外，藥物所致的毒性反應(yīng)、化學(xué)因素等，也會(huì)增加溶血發(fā)生率。溶血對(duì)不同肝功能檢驗(yàn)結(jié)果的影響機(jī)制存在差異，具體可概括為以下幾點(diǎn)：（1）細(xì)胞內(nèi)外成分在濃度方面存在一定的區(qū)別。舉例說明，紅細(xì)胞內(nèi)中的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶存在于紅細(xì)胞內(nèi)情況下，濃度明顯更高，是血清中的38倍、7倍。當(dāng)溶血發(fā)生后，細(xì)胞內(nèi)低濃度物質(zhì)會(huì)對(duì)血漿標(biāo)本進(jìn)行稀釋。此類物質(zhì)包括脂蛋白、鈉等。在此情況下，開展相關(guān)監(jiān)測(cè)，會(huì)發(fā)現(xiàn)數(shù)值降低。（2）血紅蛋白會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)造成干擾。受此影響，對(duì)總蛋白指標(biāo)進(jìn)行分析，可見其濃度比實(shí)際濃度更高。（3）溶血發(fā)生后，吸收光譜會(huì)受到有色物質(zhì)影響[5]?；诖耍t蛋白顏色使得原實(shí)驗(yàn)最佳波長選取出現(xiàn)偏差。這就使得吸光度、散光度之間的誤差增加，進(jìn)而導(dǎo)致白蛋白指標(biāo)出現(xiàn)錯(cuò)誤。其中對(duì)此影響最大的為終點(diǎn)法。對(duì)于干擾結(jié)果而言，涉及正、負(fù)方面。正干擾即為被測(cè)溶液顏色、有色物質(zhì)顏色存在相似性。負(fù)干擾屬于被測(cè)溶液顏色、有色物質(zhì)顏色相差較大。有關(guān)研究指出，測(cè)定總膽紅素的試劑盒使用重氮法，結(jié)果顯示偶氮膽紅素為紫紅色[6]。而紫紅色波長最高為560m，最低為540m，在該階段內(nèi)，存在光吸收。但是就血紅蛋白而言，光吸收的波長最高為550m，最低為540m。因二者比色波長存在較為相近，故溶血現(xiàn)象出現(xiàn)后，紅細(xì)胞破裂而進(jìn)入血清內(nèi)，會(huì)使得總膽紅素水平出現(xiàn)異常[7]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶水平低于參照組、相關(guān)膽紅素指標(biāo)高于參照組，其余相關(guān)酶指標(biāo)、蛋白指標(biāo)高于參照組（P<0.05）。

為降低標(biāo)本溶血現(xiàn)象發(fā)生率，為臨床提供準(zhǔn)確、有效的檢驗(yàn)結(jié)果，在標(biāo)本采集、存儲(chǔ)、檢驗(yàn)期間，還應(yīng)注意以下事項(xiàng)：（1）確保血標(biāo)本采集方式正確。一般情況下，采集靜脈選擇肘正中靜脈、貴要靜脈。如果為嬰幼兒，則可以頸外靜脈、股靜脈為采集部位[8]。針對(duì)采集困難者，應(yīng)注意不可長時(shí)間扎止血帶，并且不能夠多次對(duì)穿刺位置進(jìn)行拍打，避免造成機(jī)械性溶血。（2）在操作期間，需要嚴(yán)格按照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)程。確保抽血部位選擇正確后，在消毒液完全干燥后進(jìn)行血液采集，且盡可能做到以此穿刺成功。（3）標(biāo)本保存期間，需要盡快送至檢驗(yàn)科，并在室溫環(huán)境下存放。血液標(biāo)本運(yùn)輸期間，還應(yīng)確保平穩(wěn)，盡可能避免過度振蕩。（4）醫(yī)院采購人員應(yīng)確保采購的注射器、試管質(zhì)量合格，進(jìn)而提高檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性，以免給患者造成非必要痛苦、經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)等[9]。

綜上所述，標(biāo)本溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果、臨床治療方案的選取影響嚴(yán)重。針對(duì)發(fā)現(xiàn)存在溶血情況的標(biāo)本，及時(shí)采取處理方案，能夠最大程度上確保肝功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。

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