標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果影響的研究與探討

劉金華++++++簡(jiǎn)慶佳++++++符傳東++++++邱輝強(qiáng)++++++黃健林++++++趙雙玉

[摘要]目的 探討標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響分析。方法 選擇2015年9～12月在我院門診進(jìn)行體檢的100名正常志愿者的血液標(biāo)本作為研究對(duì)象，采用日立7600-010型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血液標(biāo)本溶血前后谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽紅素（TBil）、直接膽紅素（DBil）、總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、肌酸激酶（CK）、K+、Ca2+、葡萄糖（Glu）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）等12項(xiàng)生化指標(biāo)，觀察溶血前后各項(xiàng)指標(biāo)的水平差異。結(jié)果 研究對(duì)象血液標(biāo)本溶血前后AST、ALT、TBil、DBil、TP、ALB、CK、K+、Glu、BUN水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義（P<0.05）；溶血前后血液中UA、Ca2+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義（P>0.05）。結(jié)論 標(biāo)本溶血現(xiàn)象對(duì)很多臨床生化檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)有很大的影響，為了盡可能減少或避免標(biāo)本溶血的發(fā)生，要求臨床工作人員采血時(shí)嚴(yán)格按照要求操作，對(duì)標(biāo)本的采集、運(yùn)送、分離以及檢測(cè)過程嚴(yán)格操作，做好臨床標(biāo)本分析前的質(zhì)量控制，使檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。

[關(guān)鍵詞]溶血；生化檢驗(yàn)；標(biāo)本溶血；臨床標(biāo)本

[中圖分類號(hào)] R446.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）03（c）-0138-03

[Abstract]Objective To discuss the influence of blood specimen hemolysis on the results of chemical biochemical tests.Methods The blood samples from 100 cases of normal volunteers carried out physical examination in outpatient of our hospital from September to December 2015 for the research object.12 tested indexes of biochemical index blood samples such as alanine aminotransferase （ALT） and aspartate aminotransferase （AST），values of total bilirubin （TBil），direct bilirubin （DBil），total protein （TP），albumin （ALB），creatine kinase （CK），K+，calcium （Ca2+），glucose （GLU），urea nitrogen （BUN），uric acid （UA） were detected before and after hemolysis by the Hitachi Model 7600-010 automatic biochemical analyzer and the levels difference of each indexe was analyzed.Results Levels of AST，ALT，Tbil，Dbil，TP，ALB，CK，K+，Glu，BUN before and after the hemolysis had statistically significant differences （P<0.05）；the value of UA，Ca2+ had no statistical difference before and after the hemolysis （P>0.05）. Conclusion The hemolysis has a great influence on on the clinical and biochemical test，the effect of clinical laboratory tests，in order to reduce or avoid hemolysis phenomenon，clinical staff should be strict in the operating of samples collecting，transport，separate and detecting，and keep higher quality control before test，that can make the results more accurate and reliable.

[Key words]Haemolysis；Biochemistry；Specimen hemolysis；Clinical specimen

標(biāo)本溶血的原因很多，但主要原因是指醫(yī)護(hù)人員由于采血操作不當(dāng)或臨床檢驗(yàn)操作不規(guī)范造成紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致某些物質(zhì)進(jìn)入血清中，使標(biāo)本呈現(xiàn)紅色[1]，血小板、白細(xì)胞、紅細(xì)胞等血細(xì)胞破壞所釋放的某些細(xì)胞內(nèi)成分對(duì)臨床生化指標(biāo)測(cè)定會(huì)形成干擾，是臨床生化檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)中最常見的一種干擾因素[2]。這些釋放的成分在細(xì)胞內(nèi)的濃度如果與血清的濃度不同，則這些成分的逸出將會(huì)影響其在血清中的濃度，使測(cè)定結(jié)果有所改變[3]。由于造成標(biāo)本溶血的責(zé)任多部分在醫(yī)護(hù)一方，所以一旦有醫(yī)療糾發(fā)生紛事件，醫(yī)護(hù)一方將處于非常不利的條件[4]。本文通過標(biāo)本溶血的測(cè)定試驗(yàn)，明確標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定的干擾與影響，分析其的干擾因素，并提出有效的解決方法。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2015年9～12月在我院門診做健康體檢的100名正常志愿者為研究對(duì)象，其中男60例，女40例，年齡25～49歲，平均（32.5±1.5）歲。所有研究對(duì)象均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書。排除肝腎功能異常、合并呼吸系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病、糖尿病及乙型肝炎者。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1儀器 本次生化試驗(yàn)采用的儀器為日立7600-010型全自動(dòng)生化分析儀。

1.2.2試劑 本次生化試驗(yàn)采用的試劑：天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒，批號(hào)：150830；谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒，批號(hào)：150821；總膽紅素（TBil）試劑盒，批號(hào)：150917；直接膽紅素（DBil）試劑盒，批號(hào)：150917；總蛋白（TP）試劑盒，批號(hào)：150918；白蛋白（ALB）試劑盒，批號(hào)：150916；肌酸激酶（CK）試劑盒，批號(hào)：150921；K+試劑盒，批號(hào)：150925；Ca2+試劑盒，批號(hào)：20150923；葡萄糖（Glu）試劑盒，批號(hào)：150923；尿素氮（BUN）試劑盒，批號(hào)：20150925；尿酸（UA）試劑盒，批號(hào)：150923。以上試劑由寧波美康生物技術(shù)有限公司和上?？迫A生物技術(shù)有限公司提供。

1.2.3檢測(cè)方法 所有受檢者均要求空腹12 h以上，清晨抽靜脈血8 ml，將所采集的血液分別置于2支干凈的試管中，每支4.0 ml靜脈血，其中1支試管的靜脈血在室溫條件下進(jìn)行自然分離，待30 min后，1500 r/min離心10 min，將血清進(jìn)行充分分離，取分離后的血清1.5 ml，備用，即為溶血前樣本；另一支試管中的靜脈血標(biāo)本，采用物理方法溶血，再取血清1.5 ml以相同的速度進(jìn)行離心分離，備用，即為溶血后樣本。采用日立7600-010型全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，利用上?？迫A生物試劑與寧波美康生物試劑進(jìn)行測(cè)定血清中的AST、ALT、TBil、DBil、TP、ALB、CK、K+、Ca2+、Glu、BUN、UA等12項(xiàng)指標(biāo)水平，操作步驟和方法均按照試劑盒說明書及日立7600-010型全自動(dòng)生化分析儀上的操作規(guī)程進(jìn)行，每份標(biāo)本的溶血血清與正常血清分別進(jìn)行15次的12項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定，求出兩組每份血清的平均值，分別計(jì)算100例標(biāo)本中12項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定的平均值，得到兩組測(cè)定的平均值，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析與總結(jié)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

溶血后AST、ALB、TP、ALT、BUN、CK及K+水平均有顯著升高，與溶血前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），分別升高了23.02%、8.33%、9.41%、23.01%、10.86%、16.21%及36.00%；而TBil、GLU、DBil則有明顯的降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），分別下降了18.10%、17.59%、18.19%；Ca2+、UA溶血前后對(duì)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

3討論

數(shù)據(jù)表明，標(biāo)本溶血對(duì)大多數(shù)臨床生化檢驗(yàn)結(jié)果均有影響。而標(biāo)本溶血對(duì)臨床生化檢驗(yàn)有影響的干擾和因素主要有以下幾個(gè)方面。第一，標(biāo)本溶血對(duì)血液中被測(cè)物質(zhì)的濃度有影響。由于紅細(xì)胞中K+的含量約為血清中的20倍[5]，如果標(biāo)本溶血，作為K+電解質(zhì)測(cè)定時(shí)，鉀離子的檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)大大升高[6]。倘若1%的紅細(xì)胞因破壞而造成標(biāo)本溶血時(shí)，CK檢驗(yàn)的結(jié)果可為實(shí)際水平的212%，ALT檢驗(yàn)的結(jié)果可為實(shí)際水平的220%[7]。因此，做上述項(xiàng)目K+、CK、ALT等臨床生化檢測(cè)時(shí)，不能有絲毫溶血[8]。第二，標(biāo)本溶血對(duì)有色物質(zhì)的吸光度和散光度產(chǎn)生較大的誤差。標(biāo)本溶血可干擾臨床生化檢驗(yàn)的顯色反應(yīng)，例如溶血時(shí)，某些被測(cè)物質(zhì)的的性質(zhì)發(fā)生變化，其摩爾吸光系數(shù)也會(huì)隨之發(fā)生改變，從而使檢測(cè)結(jié)果不同[9]。第三，標(biāo)本溶血對(duì)某些物質(zhì)的檢測(cè)有影響。當(dāng)標(biāo)本溶血時(shí)，血紅蛋白被釋放出來從而進(jìn)入血漿中，其可干擾臨床生化試驗(yàn)中BUN、Bil等物質(zhì)的檢測(cè)[10]。第四，標(biāo)本溶血可使線粒體酶和一些離子的濃度升高[11]。當(dāng)標(biāo)本溶血時(shí)，除了紅細(xì)胞被破壞之外，粒細(xì)胞系統(tǒng)也可破壞，并釋放出谷氨酸脫氫酶（GLDH或GDH）等線粒體酶類，使被測(cè)的血清線粒體酶含量升高[12]。除此以外，標(biāo)本溶血時(shí)血小板也被破壞，使被測(cè)的血清K+、Mg2+等離子檢測(cè)含量升高[13]。第五，標(biāo)本溶血可改變鐵離子化合價(jià)。溶血標(biāo)本中的紅色Fe2+，被氧化成黃色的Fe3+，對(duì)比兩點(diǎn)的色差，利用比色法來確定待測(cè)物質(zhì)含量將會(huì)被造成干擾，當(dāng)血紅蛋白過多時(shí)，可造成TBil、TP、AST、ALB等增高[14]；第六，血紅蛋白可抑制反應(yīng)。當(dāng)血紅蛋白達(dá)到一定濃度時(shí)，可以抑制生物化學(xué)反應(yīng)[15]，導(dǎo)致測(cè)定值要低于實(shí)際值。

綜上所述，只要標(biāo)本溶血，對(duì)大部分生化檢查項(xiàng)目的結(jié)果影響都很大。首先，檢驗(yàn)工作人員的技術(shù)和素養(yǎng)很重要，如果檢驗(yàn)科工作人員不及時(shí)識(shí)別，結(jié)果不僅僅會(huì)直接影響臨床醫(yī)生對(duì)就診者的正確診斷，甚至?xí)斐蓢?yán)重性誤診。所以檢驗(yàn)科的工作人員在日常工作中必須嚴(yán)格做好標(biāo)本分析前的質(zhì)量控制。其次，負(fù)責(zé)抽血的醫(yī)護(hù)人員也要做好崗前技術(shù)培訓(xùn)，保證抽血方法規(guī)范化，以減少就診者二次痛苦。常見的因護(hù)理因素引起溶血有以下幾點(diǎn)：①穿刺前由于消毒乙醇未干；②穿刺部位不準(zhǔn)確，造成瘀血而溶血；③注射器漏氣，產(chǎn)生氣泡造成溶血；④抽血后未卸下針頭，強(qiáng)力注入試管；⑤長(zhǎng)時(shí)間或用力搖動(dòng)或剝動(dòng)血塊；⑥采血時(shí)壓迫時(shí)間過長(zhǎng)；⑦抗凝劑和血液的比例不適；⑧注射器、容器內(nèi)有水；全血放置時(shí)間過長(zhǎng)[16]。最后，采用空白試驗(yàn)方法消除溶血的干擾和影響，對(duì)于溶血后標(biāo)本，血紅蛋白對(duì)物質(zhì)的吸光度和散光度的影響可通過空白實(shí)驗(yàn)等措施克服系統(tǒng)誤差，以便提高實(shí)驗(yàn)的精密度。

[參考文獻(xiàn)]

[1]張?zhí)K，唐先平，沈朝輝.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及預(yù)防對(duì)策探討[J].中外醫(yī)療，2010，29（18）：187.

[2]刁殿琰.溶血樣本對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].中外醫(yī)療，2009，28（23）：52-55.

[3]Guder WG.Haemolysis as a influence and interference factor in clinical chemistry[J].J Clin Chem Biochem，1986，24（2）：125-126.

[4]謝小文.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及處理對(duì)策[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2012，19（4）：90，92.

[5]趙麗.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及對(duì)策[J].醫(yī)學(xué)綜述，2011，17（19）：3031-3032.

[6]張勇軍，郭越文.標(biāo)本溶血對(duì)常規(guī)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（10）：1239-1240.

[7]李姝.標(biāo)本溶血后對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].甘肅醫(yī)藥，2008， 27（5）：74-75.

[8]游其勇.溶血標(biāo)本對(duì)臨床生化80例檢驗(yàn)結(jié)果的影響分析[J].中國中醫(yī)藥資訊，2010，2（16）：169-170.

[9]李兵，李豫英.溶血對(duì)肝功能檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響及糾正[J].中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2008，11（11）：1663-1664.

[10]唐清.溶血現(xiàn)象對(duì)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目影響的觀察[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2010，17（27）：86，91.

[11]彭杰.溶血對(duì)干化學(xué)生化檢驗(yàn)的結(jié)果影響觀察[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（1）：43-44.

[12]李明宏.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（2）：221-222.

[13]李恒.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及對(duì)策 [J].海軍總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2011，24（1）：54-55.

[14]孟焱.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].臨床合理用藥雜志，2015，13（17）：122-123.

[15]羅祖軍，鄒德學(xué)，王強(qiáng)，等.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾和影響及處理對(duì)策的研究[J].重慶醫(yī)學(xué)，2014，43（22）：2879-2880，2883.

[16]石凌波，崔偉力，張鳳川.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分析前質(zhì)量控制[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2008：13-14.