猴痘病原學(xué)、流行病學(xué)特征及其檢測防控技術(shù)

李香，楊婧，趙合平

（1.陜西省動物疫病預(yù)防控制中心，陜西西安 710002；2.宜君縣畜牧業(yè)發(fā)展中心，陜西宜君 727200）

在新型冠狀病毒病（COVID-19）全球流行的同時，另一種人獸共患病——猴痘（monkeypox）正在逼近人類。自2022年5 月7 日英國發(fā)現(xiàn)人猴痘病例以來，全球人間猴痘病例數(shù)迅速上升，截至2022年12 月14 日，超過100 個國家和地區(qū)報告出現(xiàn)82 553 例病例[1]，其發(fā)病率、死亡率和住院率呈持續(xù)增長趨勢。全球受猴痘影響最嚴(yán)重的10個國家是美國、巴西、西班牙、法國、英國、德國、哥倫比亞、秘魯、墨西哥和加拿大[2]。我國首例猴痘病例是2022年6 月24 日在臺灣地區(qū)發(fā)現(xiàn)的，截至2022年10 月，我國已經(jīng)發(fā)現(xiàn)6 例病例，其中臺灣4 例，香港和重慶各1例[3]。

猴痘是由猴痘病毒（monkeypox virus）引起的一種病毒性人獸共患病。猴痘病毒最早在猴子身上被發(fā)現(xiàn)[4]，1970年報告了第一例動物向人傳播的猴痘病例[5]。目前猴痘在人間的傳播速度超出預(yù)期，引起了人們的高度重視。當(dāng)前，嚴(yán)密監(jiān)視猴痘全球流行情況并做好防控，阻止猴痘的人際傳播以及人與動物間的傳播具有重要意義。本文從猴痘的病原學(xué)、流行病學(xué)、檢測技術(shù)、防控措施等方面進(jìn)行綜述，以期幫助人們?nèi)嬲J(rèn)識猴痘，提高防范意識，同時為相關(guān)機(jī)構(gòu)做好防控及技術(shù)儲備工作提供參考。

1 病原學(xué)

1.1 病毒分類及命名

根據(jù)國際病毒分類委員會（International Committee on Taxonomy of Viruses，ICTV）最新分類，猴痘病毒屬于痘病毒科（Poxviridae）脊椎動物痘病毒亞科（Chordopoxvirinae）正痘病毒屬（Orthopoxvirus）成員。遺傳進(jìn)化分析顯示，猴痘病毒分為兩大遺傳進(jìn)化分支（clade）：西非分支和剛果盆地（中非）分支[6-7]。其中，剛果盆地分支病毒1970年在剛果民主共和國被發(fā)現(xiàn)[8]，西非分支病毒1986年在西非國家（塞拉利昂、尼日利亞、利比里亞和科特迪瓦）被報道[9]。研究數(shù)據(jù)[7]表明：不同分支毒株的全基因組核苷酸差異為0.55%～0.56%；剛果盆地分支病毒對人類的毒力比西非分支更強(qiáng)，西非分支導(dǎo)致的死亡率約為1%，而剛果盆地分支則為10%。猴痘病毒最新基因序列結(jié)果顯示，2022年全球流行株與2018年和2019年英國流行株一致，均屬于西非分支[10-11]。系統(tǒng)發(fā)育樹見圖1-A。猴痘是因在猴子身上被分離出來而命名的，但為了避免病毒名稱對任何國家、區(qū)域、文化、社會、專業(yè)或民族群體等造成傷害，世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）2022年8 月12 日宣布對猴痘病毒分支重新命名，新名稱由羅馬數(shù)字和小寫英文字母組成，使用羅馬數(shù)字表示病毒分支，用小寫字母表示亞分支。將剛果盆地分支稱為分支I，西非分支稱為分支II。分支II 又包括兩個亞分支，即IIa 和IIb，其中IIb 是2022年主要流行的一組病毒變種[12-13]。系統(tǒng)發(fā)育樹見圖1-B。

圖1 猴痘病毒基因組系統(tǒng)發(fā)育樹

1.2 病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)及理化特性

電子顯微鏡下，猴痘病毒顆粒為橢圓形或圓角磚狀，大小200～250 nm，是有包膜的雙鏈DNA病毒，基因組大小約197 kb，約有190 個不重復(fù)的ORF，每個ORF 長度均超過180 nt，核苷酸56～120 kb 處的中央編碼區(qū)序列（CRS）高度保守，兩側(cè)包含可變的反向末端重復(fù)序列（ITRs），ITR區(qū)域至少包含4 個ORF[14-16]。猴痘病毒與所有痘病毒一樣，編碼病毒復(fù)制酶和結(jié)構(gòu)蛋白的基因相對保守，這些基因大部分位于基因組的中心區(qū)域，編碼病毒DNA 復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、組裝和釋放所需的所有蛋白質(zhì)，成熟的病毒顆粒具有啞鈴狀的核蛋白核心，包含一個大的雙鏈線性DNA 基因組[17]。猴痘病毒與所有痘病毒相似，細(xì)胞外包膜病毒（EEV）和細(xì)胞裂解過程中釋放的細(xì)胞內(nèi)成熟病毒（IMV）兩種成熟形式均可感染細(xì)胞（圖2）[14]。猴痘病毒對宿主細(xì)胞的侵襲主要通過吸附、膜融合和核侵3 個步驟完成，在被感染細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中完成復(fù)制的全過程[18]。猴痘病毒不耐熱，56 ℃處理30 min 可失活；易被甲醛、甲醇、十二烷基磺酸鈉（SDS）、苯酚和氯仿等有機(jī)溶劑滅活；耐干燥和低溫，4 ℃的溫度下能長期保持活力[4]。

圖2 猴痘病毒粒子結(jié)構(gòu)[14]

2 流行病學(xué)

2.1 傳染源

猴痘病毒最早于1958年在非洲熱帶雨林中的一組用于研究的獼猴屬食蟹猴身上被分離到[4，19]。目前已發(fā)現(xiàn)松鼠、岡比亞鼠、土撥鼠、不同種類的非人類靈長類動物以及人類均能感染猴痘病毒成為傳染源[20]。1970年，一名兒童成為第一例人類猴痘病例[21]，此后多個國家多次暴發(fā)人間猴痘疫情。高風(fēng)險人群包括未接種牛痘的人員、寵物商店工作人員、寵物愛好者、動物飼養(yǎng)人員、醫(yī)院傳染科醫(yī)護(hù)人員等[22]。

2.2 傳播途徑

起初的人類猴痘病例主要通過接觸、被咬傷、食入猴肉或者松鼠而被感染，由此推測接觸被感染動物的皮膚或黏膜傷口、體液、血液等都會感染猴痘病毒[23]。人間傳播途徑可以是人與人的直接接觸傳播，也可以通過飛沫、呼吸道分泌物、被感染者污染的用品等傳播，還可以通過母嬰傳播[24-25]。2022年5 月18 日以來，多國的猴痘疫情報告顯示，人間也可以通過性傳播，并且性傳播不局限于男男性行為[26]。2022年流行的猴痘疫情主要是通過性接觸傳播引起的，多在與男性發(fā)生性關(guān)系的男性中被診斷出來，特別是有多重性行為的男性[27]。另外，英國的一項新研究表明，感染猴痘病毒的人在出現(xiàn)明顯的疾病癥狀之前，可將病毒傳播給他人，而且這種類型的傳播在當(dāng)前國際疫情中占很大一部分[28]。專家們預(yù)計，2022年的疫情不會造成像COVID-19 那種的全球破壞，因為猴痘并不像COVID-19 可通過空氣傳播，也不像天花高度傳播，更不像艾滋病在病毒體內(nèi)持久存在。

2.3 全球疫情現(xiàn)狀

2022年5 月，多個無猴痘流行的國家以及有流行的非洲國家發(fā)現(xiàn)猴痘病例。之后，全球發(fā)現(xiàn)的猴痘病例數(shù)量出現(xiàn)了前所未有的增長，美國、英國、西班牙和加拿大等幾個過去無猴痘流行的國家也出現(xiàn)了不可控的人際傳播病例[29]。目前，猴痘疫情已蔓延到100 多個國家和地區(qū)，報告的病例超過8萬例[30]。雖然自2022年8 月中旬以來，美國和歐洲確認(rèn)的猴痘病例數(shù)量呈現(xiàn)下降趨勢（圖3）[31]，但是疫情發(fā)展勢態(tài)仍然不明，各國應(yīng)提高警惕，減少猴痘國際傳播對人們造成的恐慌。

圖3 2022年5—9 月全球猴痘病例發(fā)展趨勢[31]

3 臨床癥狀

猴痘患者一般都有相關(guān)病毒接觸史。如：發(fā)病前21 d 內(nèi)有境外猴痘病例報告地區(qū)旅居史；發(fā)病前21 d 內(nèi)與猴痘病例有密切接觸；發(fā)病前21 d內(nèi)接觸過猴痘病毒感染病例的血液、體液或分泌物等[32]。猴痘的臨床癥狀與天花相似，但是沒有天花嚴(yán)重。猴痘潛伏期一般為7～14 d，最長可達(dá)21 d。猴痘病毒的感染過程主要分為兩個階段：先是前驅(qū)期（0～2 d），患者表現(xiàn)發(fā)熱、疲勞、嚴(yán)重頭痛、淋巴結(jié)腫大、肌肉疼痛等癥狀。之后是典型的皮疹期（7～21 d），患者表現(xiàn)為面部（95%）、手掌和腳底（75%）、口腔黏膜（70%）、生殖器（30%）和結(jié)膜（20%）等部位的皮疹[33]；皮疹持續(xù)2～4 周，從斑塊開始，由丘疹變成小泡，然后出現(xiàn)膿皰，最后結(jié)痂；嚴(yán)重情況下，病變區(qū)域會融合，導(dǎo)致大片皮膚脫落[34]。在2022年的猴痘疫情報告中還出現(xiàn)輕微癥狀或無癥狀感染者[35]。猴痘的非典型特征包括潛伏期短、臨床表現(xiàn)輕，生殖器和肛周處出現(xiàn)局部有時疼痛的皮疹和病變[36-38]。值得注意的是，免疫功能低下的猴痘患者，如孕婦和兒童，還有可能繼發(fā)其他疾病。

4 實驗室檢測

4.1 核酸檢測

猴痘的臨床癥狀與天花等痘病毒病臨床癥狀相似，因此確診猴痘還需通過進(jìn)一步的實驗室檢測。猴痘的檢測方法有多種，其中實時熒光定量PCR是當(dāng)前核酸檢測中最常用的方法，主要用于早期檢測，其靈敏度高，檢測速度快，適合出入境檢疫工作[39]。通過采集口鼻咽分泌物以及疑似病例的皮疹、皰液、痂皮等標(biāo)本提取DNA 進(jìn)行PCR 檢測，確定病毒相關(guān)基因存在與否。必要時還可以分離病毒進(jìn)行病毒全基因組測序，確定病毒的種、屬、分支以及基因突變情況[40]。目前還建立了環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增（LAMP）、限制性長度片段多態(tài)性（RFLP）、重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA）等多種猴痘病毒核酸檢測方法[41-44]。

4.2 血清學(xué)檢測

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）可分別檢測猴痘患者感染5 d 和8 d 后血清中的特異性IgM 和IgG抗體[45]，尤其在急性期和恢復(fù)期血清抗體可增至原來的4 倍，用ELISA 方法較易診斷猴痘。由于猴痘病毒與其他痘病毒存在抗原交叉反應(yīng)，特異性不足，因此該方法不能準(zhǔn)確識別猴痘，常用于流行病學(xué)調(diào)查[46]。

4.3 其他檢測方法

電鏡檢查、免疫化學(xué)分析和多重免疫熒光成像也可用于猴痘病毒的抗原檢測[47-48]。為了確定診斷，還需要從患者標(biāo)本中分離和培養(yǎng)活病毒并對病毒基因組進(jìn)行分析[40]。

5 防治措施

應(yīng)對當(dāng)前的猴痘疫情，WHO 表示應(yīng)從以下3點加強(qiáng)防控：（1）中斷人際傳播，優(yōu)先關(guān)注接觸風(fēng)險高的社區(qū)；（2）保護(hù)處境危險的易感人群；（3）盡量控制人和動物間的傳播[49]。另外，各國還應(yīng)建立完善的猴痘病毒檢測系統(tǒng)，做到早發(fā)現(xiàn)、早隔離，避免猴痘病毒擴(kuò)散。

目前還沒有專門針對猴痘的特效疫苗，但天花疫苗可以對其提供85%的保護(hù)[40]?？墒褂玫奶旎ㄒ呙缬袃煞N：一種是第二代疫苗ACAM2000（減毒活疫苗），另一種是第三代疫苗JYNNEOS（Imvamune、Imvanex、MVA-BN，復(fù)制缺陷型減毒疫苗）[50-51]。但WHO 表示，目前不需要也不建議對猴痘進(jìn)行大規(guī)模疫苗接種；建議對高危人群接種初級預(yù)防（接觸前）疫苗，對病例接觸者接種預(yù)防性疫苗（PEPV），最好是在首次接觸后4 d 內(nèi)，在沒有癥狀的情況下最多14 d 內(nèi)接種疫苗[52]。

目前尚無針對猴痘的特效抗病毒藥物。抗天花病毒藥物可以起到抗猴痘病毒的作用，可以適當(dāng)減輕患者癥狀，控制并發(fā)癥。對于病癥嚴(yán)重的患者，建議考慮抗病毒療法，通常使用Tecovirimat、西多福韋（cidofovir）或布林西多福韋[53]，但這些治療是非正式的，因為沒有確切的指南證實此療法可緩解癥狀。

6 結(jié)語

猴痘病毒是一種類似于天花的病毒，其引起的病死率比天花病毒低，但傳播較快，容易引起人們恐慌。目前猴痘不僅在西非和中非國家流行，也在全世界流行開來，是一個值得全世界關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。在一些基礎(chǔ)設(shè)施差、高素質(zhì)醫(yī)務(wù)人員缺乏、公共衛(wèi)生體系薄弱、基本醫(yī)療保障不足的發(fā)展中國家，猴痘更易發(fā)生流行，因此這些國家更應(yīng)該重視猴痘防控。

目前我國雖然只報道了2 例境外輸入猴痘病例，但應(yīng)時刻保持警惕，首選建立科學(xué)的猴痘防控策略并不斷完善，防止猴痘再次傳入國內(nèi)；其次仍需繼續(xù)推進(jìn)快速、特異、高效的猴痘病毒檢測技術(shù)研究和應(yīng)用評估。