云南省新平縣家畜O 型口蹄疫血清學(xué)監(jiān)測

郭紅佳，普朝華，陶忠永

（1.新平縣動物疫病預(yù)防控制中心，云南新平 653400；2.新平縣畜牧站，云南新平 653400；3.戛灑鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村綜合服務(wù)中心，云南新平 653400）

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起的一種急性熱性高度接觸性傳染病[1]，偶蹄動物易感，世界動物衛(wèi)生組織（WOAH）將其列為須通報動物疫病，我國將其歸為一類動物疫病[2-4]。FMD 發(fā)病急、傳播速度快、傳播范圍廣，通常春秋兩季高發(fā)。FMDV 常見的血清型有A、O、C、Asial、SAT1、SAT2 和SAT3 等7種[5-6]，主要通過接觸（直接接觸、間接接觸）和空氣傳播。患病動物主要臨床癥狀表現(xiàn)為口、蹄、乳房等部位出現(xiàn)水皰和潰瘍。病豬和帶毒豬是FMD 主要傳染源。FMD 沒有特效的藥物治療，疫苗免疫是預(yù)防該病的主要手段。

新平縣位于云南省中部偏西南，地處哀勞山中段東麓，是滇中地區(qū)重要的畜牧業(yè)養(yǎng)殖大縣。截至2022年11 月，全縣生豬存欄約37.37 萬頭、牛約7.51 萬頭、羊約11.33 萬只。為了解家畜口蹄疫免疫效果，本研究利用O 型FMDV 抗體ELISA 試劑盒，對新平縣2018—2022年豬牛羊血清樣品進行抗體檢測，然后匯總檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析，旨在為新平縣FMD 防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 抽樣設(shè)計與采集

按照玉溪市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局印發(fā)的《玉溪市動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃》，新平縣每年對全縣應(yīng)免豬牛羊進行O 型FMD 強制免疫，規(guī)模場按各自的免疫程序?qū)嵤┟庖?，散養(yǎng)戶實行春防、秋防集中免疫。本研究分別于每年春季（4月10—30日）、秋季（9 月20 日—10 月10 日），在全縣12 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）采集免疫豬牛羊的血液樣品，離心分離血清后進行O 型FMDV 免疫抗體檢測。

飼養(yǎng)規(guī)模劃分標(biāo)準：生豬存欄300 頭或年出欄500 頭以上、牛存欄100 頭或年出欄50 頭以上、羊存欄100 只或年出欄100 只以上為規(guī)模場，達不到劃定標(biāo)準的為散養(yǎng)戶[7]。合格場戶標(biāo)準：場戶內(nèi)免疫抗體個體合格率≥70%為合格場戶。采樣設(shè)計：原則上每個鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）隨機抽取豬牛羊規(guī)模場至少各1 個，散養(yǎng)戶1～10 戶；每個規(guī)模場隨機至少采集血液樣品10 份，每戶散養(yǎng)戶至少采集樣品5 份。

2018—2022年，分別累計采集豬、牛、羊場群255、236、315 個，其中規(guī)模場分別為95、85、95 個，散養(yǎng)戶分別為160、151、220 戶；分別分離豬、牛、羊血清樣品2 289、2 020、2 491 份，其中規(guī)模場分別為1 385、1 186、1 168 份，散養(yǎng)戶分別為904、834、1 323 份。

1.2 主要儀器和試劑

Multiskan FC 酶標(biāo)儀，購自Thermo 公司；10～1 000 μL單道移液器及30～300 μL多道移液器，購自德國Brand 公司；O 型FMDV 抗體ELISA 檢測試劑盒，購自北京金諾百泰生物技術(shù)有限公司。

1.3 檢測方法

按照O 型FMDV 抗體ELISA 檢測試劑盒說明書進行檢測。試驗成立條件：陰性對照OD450平均值＞0.7，陽性對照S/N平均值＜0.3。如果檢測結(jié)果不在界定范圍，則需要重新進行檢測。判定標(biāo)準：S/N=樣品OD 值/陰性對照OD 值；S/N≤0.5 為抗體陽性，判為抗體合格，＞0.5為抗體陰性，判為不合格。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用Excel 軟件和SPSS 22.0 軟件，對檢測數(shù)據(jù)按不同畜種、不同規(guī)模、不同季節(jié)進行分類統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同畜種

本次檢測的血清樣品覆蓋全縣12 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道），涉及豬、牛、羊3 個畜種的806 個場群。不同畜種統(tǒng)計結(jié)果（表1）顯示：2018—2022年，豬、牛、羊O 型FMDV 平均個體抗體合格率分別為68.20%（1 561/2 289）、86.53%（1 748/2 020）、81.65%（2 034/2 491），場群合格率分別為75.29%（192/255）、88.56%（209/236）、84.76%（267/315），不同種類畜群間的個體抗體合格率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。

表1 2018—2022年不同畜種O 型FMDV 抗體合格率統(tǒng)計 單位：%

2.2 不同規(guī)模

不同飼養(yǎng)規(guī)模場戶統(tǒng)計結(jié)果（表2～3）顯示：2018—2022年，規(guī)模場豬、牛、羊平均個體抗體合格率分別為73.36%（1 016/1 385）、89.54%（1 062/1 186）、83.48%（975/1 168），散養(yǎng)戶豬、牛、羊平均個體抗體陽性率分別為62.09%（545/904）、82.25%（686/834）、80.05%（1 059/1 323），豬規(guī)模場和散養(yǎng)戶（P＜0.001）、牛規(guī)模場和散養(yǎng)戶（P＜0.001）、羊規(guī)模場和散養(yǎng)戶（P=0.027 ＜0.05）的個體抗體合格率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；豬、牛、羊規(guī)模場群體合格率均為100%，散養(yǎng)戶群體合格率分別為60.63%（97/160）、82.12%（124/151）、78.18%（172/220），不同畜種規(guī)模場和散養(yǎng)戶間的群體抗體合格率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。結(jié)果表明，規(guī)模場的免疫合格率明顯高于散養(yǎng)戶。

表2 2018—2022年不同規(guī)模場點O 型FMDV 個體抗體合格率 單位：%

2.3 不同季節(jié)

不同季節(jié)統(tǒng)計結(jié)果（表4）顯示：2018—2022年，春季、秋季間的豬平均個體陽性率（P=0.230 ＞0.05）、牛平均個體陽性率（P=0.626 ＞0.05）、羊平均個體陽性率（P=0.540 ＞0.05）差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

表4 2018—2022年家畜春秋季節(jié)O 型FMDV 抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計 單位：%

表3 2018—2022年不同規(guī)模場點O 型FMDV 群體抗體合格率 單位：%

3 討論

3.1 不同畜種

本研究發(fā)現(xiàn)，不同畜種的免疫合格率存在差異，其中牛羊的免疫合格率均在80%以上，免疫效果較好，而豬的免疫合格率不足70%，免疫效果較差。其原因可能是：當(dāng)?shù)貙ωi實行“三針同免”，即口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征疫苗同時接種，疫苗間可能存在相互干擾而降低口蹄疫疫苗的免疫效果；牛僅免疫口蹄疫疫苗，不存在疫苗混用情況；羊主要免疫小反芻獸疫和口蹄疫疫苗，但這兩種疫苗不同時免疫，疫苗間相互影響較小。此外，也有動物自身個體差異（品種、日齡、性別、營養(yǎng)、健康狀況）[8]，以及疫苗免疫操作不規(guī)范及免疫密度等原因。新平縣豬口蹄疫免疫效果不理想的原因需要進一步分析，找出具體原因，提出對策，同時加大對豬口蹄疫免疫抗體水平的監(jiān)測力度，做好補免工作，使豬群免疫抗體達到保護水平。

3.2 不同飼養(yǎng)規(guī)模

散養(yǎng)戶的抗體陽性率無論是個體水平還是群體水平均低于規(guī)模場。其原因可能是：散養(yǎng)戶大多飼養(yǎng)環(huán)境較差，飼舍簡陋、設(shè)備落后，飼養(yǎng)過程無專業(yè)人士指導(dǎo)[9]，自身文化素質(zhì)不高，每年僅進行春防、秋防兩次集中免疫，存在漏免現(xiàn)象，補免意識也欠缺，未能根據(jù)牲畜生長狀況適時免疫；而規(guī)模場管理相對精細化，且多聘有駐場獸醫(yī)，有科學(xué)系統(tǒng)的疫苗接種程序，免疫檔案記錄詳細，補免及時，部分規(guī)模場定期進行抗體水平監(jiān)測，能確定合理的首免和加強免疫時間，有效減少免疫真空期。此外，散養(yǎng)戶的免疫工作多由村級防疫員負責(zé)，其專業(yè)技能普遍不高，免疫時存在“飛針”“漏針”現(xiàn)象，會影響免疫效果[10]。建議加強對散養(yǎng)戶的免疫和監(jiān)測工作，不斷強化村級防疫員隊伍建設(shè)，加大培訓(xùn)宣傳力度，提高散養(yǎng)戶的飼養(yǎng)管理水平和補免意識。

3.3 不同季節(jié)

從春季、秋季的免疫抗體統(tǒng)計數(shù)據(jù)來看，同一畜種不同季節(jié)的免疫合格率差異不大，說明規(guī)模場的程序免疫和散養(yǎng)戶的春秋集中免疫對保證豬牛羊的O 型口蹄疫免疫抗體水平全年穩(wěn)定起到了積極作用，效果較好。建議規(guī)模場定期進行抗體監(jiān)測，適時調(diào)整免疫程序；散養(yǎng)戶在春防、秋防集中免疫時，保證免疫密度和免疫操作規(guī)范。

4 結(jié)論

綜合分析認為，2018年以來云南省新平縣牛羊O 型FMD 免疫效果較好，抗體合格率超過了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部70%的要求，但豬免疫效果相對較差，尤其是散養(yǎng)戶，抗體合格率不足70%，存在疫情發(fā)生風(fēng)險，亟需采取措施進一步提高生豬疫苗免疫接種強度和抗體監(jiān)測力度，以降低豬群O 型FMDV感染風(fēng)險。