油茶皂素脫色及色澤評(píng)價(jià)方法比較研究

肖志強(qiáng)， 劉傳杰， 陳殿松， 蔣建新*

(1.北京林業(yè)大學(xué) 材料科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京 100083； 2.廣州德谷個(gè)人護(hù)理用品有限公司，廣東 廣州 510000；3.國(guó)家林業(yè)和草原局木本香料(華東)工程研究中心，江西 南昌 330045)

茶皂素又名茶皂苷，是山茶科植物中含有的一類糖苷類物質(zhì)，由糖體、皂苷元(配基)和有機(jī)酸三部分組成的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的五環(huán)三萜化合物[1-2]。茶皂素是一種性能良好的非離子表面活性劑，具有起泡、分散和乳化等作用，且具有抑菌、溶血、抗癌和抗炎等生理活性，在生產(chǎn)各類乳化劑、洗滌劑和殺菌劑等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用[3-6]。目前油茶皂素的提取方法主要是水提法和醇提法[7]，這兩種方法具有工藝簡(jiǎn)單、成本低和污染小等特點(diǎn)，但得到的茶皂素往往純度不高[8]，含有黃酮、多酚、蛋白質(zhì)和色素等雜質(zhì)，導(dǎo)致茶皂素的色澤較深，進(jìn)而影響茶皂素在洗發(fā)香波等中高檔產(chǎn)品中的應(yīng)用。因此工業(yè)生產(chǎn)中要對(duì)茶皂素進(jìn)行脫色，從而拓寬茶皂素的應(yīng)用領(lǐng)域。傳統(tǒng)的物理吸附脫色方法對(duì)油茶皂素并沒有很好的脫色效果，甚至?xí)捎谖絼┑臒o選擇性導(dǎo)致目標(biāo)產(chǎn)物的損失[9]。過氧化氫能通過產(chǎn)生高反應(yīng)性氧化劑羥基自由基與自由物發(fā)生反應(yīng)，達(dá)到漂白作用[10]。凹凸棒土是一種富含鎂鋁硅酸鹽黏土礦物，其特有的纖維狀或棒狀晶體形態(tài)使其具備了較大的比表面積和良好的吸附性能，有研究表明，凹凸棒土有較強(qiáng)的吸附脫色功能[11]。目前相關(guān)領(lǐng)域?qū)υ硭氐纳珴稍u(píng)價(jià)方法僅停留在類似色階比色計(jì)分析等較淺層次的階段，不同茶皂素色澤評(píng)價(jià)方法的優(yōu)劣之處也未見有系統(tǒng)且深層次的研究。而對(duì)茶皂素進(jìn)行系統(tǒng)且合理的色澤評(píng)價(jià)至關(guān)重要，因?yàn)椴煌纳珴稍u(píng)價(jià)方法在同一樣品的研究中可能產(chǎn)生不同的結(jié)果。因此,開展茶皂素色澤評(píng)價(jià)方法的建立勢(shì)在必行。本研究采用過氧化氫/凹凸棒土耦合體系對(duì)油茶皂素進(jìn)行脫色，探究最適宜茶皂素脫色的條件，并通過比較不同的顏色評(píng)價(jià)方法，為茶皂素的色澤鑒定奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，以期為今后油茶皂素的工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 試劑與儀器

油茶皂素(純度40%，粒徑約0.075 mm)，產(chǎn)自浙江；過氧化氫溶液(30%)，氫氧化鈉和鹽酸，均為市售分析純；凹凸棒土(純度≥95%，粒徑約0.075 mm)，常州鼎邦礦產(chǎn)品科技有限公司。

LGJ-12冷凍干燥機(jī)，北京松源華興科技發(fā)展有限公司；UV- 6100A紫外可見分光光度計(jì)，上海比朗儀器有限公司；FE28 pH計(jì)，瑞士梅特勒公司；分光輻射亮度計(jì)(PR715)，美國(guó)Photo Research公司；WSL系列羅維朋比色計(jì)，上海儀電物理光學(xué)儀器有限公司；SONY CORP系列數(shù)碼相機(jī)，日本SONY公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1油茶粗皂素預(yù)處理 油茶粗皂素經(jīng)無水乙醇在料液比1 ∶10(g ∶mL)、 70 ℃下純化1 h，離心除去蛋白質(zhì)和多糖等水溶性物質(zhì)，同一批粗皂素純化3次，旋蒸濃縮，真空干燥后得到純化皂素。將此純化皂素作為后續(xù)脫色實(shí)驗(yàn)的原料。純化皂素得率為(42.08±0.68)%，純度根據(jù)香草醛濃硫酸法測(cè)得為(60.20±1.32)%。實(shí)驗(yàn)時(shí)做兩組平行實(shí)驗(yàn)，取平均值。純化皂素得率根據(jù)式(1)計(jì)算。

Y1=m1/m×100%

(1)

式中:Y1—純化皂素得率，%；m1—浸提后皂素總質(zhì)量，g；m—浸提前粗皂素質(zhì)量，g。

1.2.2皂素的脫色 用去離子水將純化后的茶皂素配置成質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的皂素溶液(用10%的氫氧化鈉將溶液pH值調(diào)至10)，加入一定量的過氧化氫溶液，加熱反應(yīng)一段時(shí)間，反應(yīng)完后取出錐形瓶，用鹽酸將溶液pH值調(diào)至4.39(原料溶液的pH值)，再加入凹凸棒土吸附25 min，最后取出溶液于4 000 r/min 離心15 min，離心后的上清液稀釋成1%的溶液在分光光度計(jì)下測(cè)定吸光度，然后濃縮、冷凍和干燥制得脫色皂素，保存至干燥器中，用作其他色澤評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)時(shí)做兩組平行實(shí)驗(yàn)。脫色皂素的得率根據(jù)式(2)計(jì)算。

Y2=m2/m3×100%

(2)

式中：Y2—脫色皂素得率，%；m2—脫色后皂素質(zhì)量，g；m3—脫色前皂素質(zhì)量，g。

1.2.3正交試驗(yàn) 在實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化油茶皂素脫色條件。選擇H2O2用量4%～8%，脫色溫度60～80 ℃，脫色時(shí)間1～3 h，凹凸棒土用量1%～3%(以脫色前皂素質(zhì)量計(jì))，以分光光度計(jì)(510 nm)的脫色率為指標(biāo)，每個(gè)條件均進(jìn)行兩次平行試驗(yàn)。

1.3 顏色的評(píng)價(jià)

1.3.1分光光度計(jì)法 將脫色后的皂素稀釋成質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的溶液，以去離子水為空白，分別在510和480 nm波長(zhǎng)下利用分光光度計(jì)測(cè)量其吸光度值(所測(cè)吸光度值均在0.2～1.0之間)，脫色率根據(jù)式(3)計(jì)算。

η=(A0-A1)/A0×100%

(3)

式中：η—脫色率，%；A0—1%原料在一定波長(zhǎng)下的吸光度,510 nm下A0=0.676 0,480 nm下A0=0.797 6；A1—脫色后皂素溶液在一定波長(zhǎng)下的吸光度。

1.3.2分光輻射亮度計(jì)法 參考嚴(yán)俊等[12]的方法，使用分光輻射亮度計(jì)進(jìn)行顏色測(cè)定，并將測(cè)定記錄的數(shù)據(jù)(L*、a*和b*值)進(jìn)行綜合分析。L*值是顏色的明度值，表示色彩的明暗度，其范圍從0到100，值為0時(shí)明度最低，值為100時(shí)明度最高。a*、b*值是色彩的色度值，其中a*值從紅(正值)到綠(負(fù)值)漸變，b*值則由黃(正值)到藍(lán)(負(fù)值)漸變。其中L*值是衡量亮度的一個(gè)重要的指標(biāo)，故使用L*值作為脫色效果的衡量標(biāo)準(zhǔn)。脫色率根據(jù)式(4)計(jì)算。

(4)

式中：L0*—皂素脫色前的明度值；L1*—皂素脫色后的明度值。

1.3.3羅維朋比色計(jì)法 將5%的脫色后的皂素溶液注入比色皿中，再把比色皿放到比色箱的槽里即可開始測(cè)量(使比色皿緊貼色片盒窗口)，通過觀察目鏡，移動(dòng)儀器配套的羅維朋濾色片使比色箱內(nèi)兩視場(chǎng)的顏色保持一致，記錄此時(shí)的濾色片數(shù)據(jù)。采用配套的比色皿尺寸(nm)為10×20×40。脫色率根據(jù)式(5)計(jì)算。

η=(R0-R1)/R0×100%

(5)

式中：R0—脫色前皂素的羅維朋紅度值，數(shù)值為2.0；R1—脫色后皂素的羅維朋紅度值。

1.3.4直觀觀察拍照法 將脫色后的皂素研磨后過0.425 mm篩，稱取0.48 g樣品，為了杜絕普通玻璃反光導(dǎo)致的色度不均一，放置于定制的帶圓槽的石英比色皿中并將其緊壓，最后采用SONY CORP系列相機(jī)在同一光照環(huán)境下對(duì)凍干樣品進(jìn)行拍照。

1.3.5色階比色法 制備標(biāo)準(zhǔn)色階比色卡，將脫色后的皂素和純化皂素進(jìn)行比色。表1為制備的標(biāo)準(zhǔn)色階比色卡。圖1為制備的標(biāo)準(zhǔn)色階比色卡顏色變化。

表1 標(biāo)準(zhǔn)色階比色卡

圖1 標(biāo)準(zhǔn)色階比色卡顏色變化

2 結(jié)果與分析

2.1 脫色正交試驗(yàn)結(jié)果分析

在此最優(yōu)條件下進(jìn)行2組驗(yàn)證試驗(yàn)，510 nm下脫色率為78.99%和80.04%，平均值為79.52%，脫色效果顯著，證明該優(yōu)化條件可行。

表2 油茶皂素脫色情況的正交試驗(yàn)結(jié)果

2.2 顏色測(cè)定結(jié)果

2.2.1分光光度計(jì)法 分光光度計(jì)法是一種基于朗伯比爾定律原理的顏色測(cè)定方法。在可見光波段，通常采用鎢燈作為可見光區(qū)的光源，具有較大共軛體系的分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)(黃酮等物質(zhì))在這一波段會(huì)出現(xiàn)特定的吸收，吸收的強(qiáng)度能提供有效的信息并以此作為定量分析基礎(chǔ)[14]。如Verma等[15]利用分光光度計(jì)對(duì)染料顏色的脫色率進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)色效果良好。

皂素的最大吸收波長(zhǎng)在210 nm左右，提取的皂素中一般含有色素、黃酮和單寧等顯色雜質(zhì)[16]。然而，在查閱大量資料后發(fā)現(xiàn)：這些顯色物質(zhì)根據(jù)現(xiàn)有理論并無統(tǒng)一和準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)，并不能簡(jiǎn)單地通過類似黃酮一種單一物質(zhì)的最大顯色波長(zhǎng)來論定。而由分光光度計(jì)的原理可知，溶液之所以呈現(xiàn)不同顏色，與它對(duì)光的選擇性吸收有關(guān)，即溶液對(duì)可見光區(qū)的光吸收越強(qiáng)，則該溶液顏色越深，反之越淺，在此理論基礎(chǔ)上同時(shí)參考相關(guān)文獻(xiàn)[17]，選取與皂素?zé)o交叉影響的可見光波長(zhǎng)510 nm作為脫色率計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)采用了現(xiàn)有研究中480 nm波長(zhǎng)作為研究標(biāo)準(zhǔn)[18]進(jìn)行對(duì)比研究。

物質(zhì)對(duì)光的吸收是有選擇性的，本實(shí)驗(yàn)選用的510和480 nm屬于可見光的范疇，脫色前后的皂素溶液在分光光度計(jì)上的吸光度會(huì)發(fā)生變化，從表3可看出，有些實(shí)驗(yàn)組(樣品1、 2、 7、 8和9)脫色率相差細(xì)微，說明分光光度計(jì)是一種對(duì)溶液顏色十分敏感的顏色檢測(cè)儀器。當(dāng)溶液顏色較深時(shí)，對(duì)光的吸收較大；溶液顏色較淺時(shí)，對(duì)光的吸收也較小。

分光光度計(jì)對(duì)茶皂素溶液色澤的評(píng)價(jià)能夠達(dá)到精確且量化的程度，受人為因素影響小，這也是Wang等[19]使用分光光度計(jì)對(duì)水溶液中酸性橙7的脫色定量測(cè)定的原因之一，因此，選用此法作為本研究的主要依據(jù)。由數(shù)據(jù)可知，對(duì)比510、 480 nm下脫色皂素溶液的測(cè)定結(jié)果，發(fā)現(xiàn)在兩個(gè)波段的原料皂素吸光度和脫色皂素吸光度均稍有相同，且在510 nm的脫色率均比480 nm高，這可能是由茶皂素中色素和黃酮等顯色物質(zhì)在不同波段的吸光度有差異導(dǎo)致的，但兩個(gè)波段脫色率呈現(xiàn)一致規(guī)律，且最佳條件的脫色率均達(dá)到較高水平。由此可見分光光度計(jì)適用于對(duì)茶皂素溶液進(jìn)行精確且量化的顏色測(cè)定；同時(shí)在選用分光光度計(jì)作為色澤評(píng)價(jià)工具時(shí)需綜合考察顯色物質(zhì)在不同可見光波段對(duì)結(jié)果的影響。

表3 分光光度計(jì)脫色率和羅維朋比色計(jì)脫色率

2.2.2羅維朋比色計(jì)法 羅維朋比色計(jì)是一種目視顏色測(cè)量?jī)x器，它采用了國(guó)際公認(rèn)的專用色標(biāo)——羅維朋色標(biāo)度來測(cè)量各種液體、膠體、固體和粉末樣品的色度。如Irshad等[20]使用羅維朋比色計(jì)成功地評(píng)價(jià)了一種固體肉制品的顏色。該儀器具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作便利的特點(diǎn)，常用于食油、飲料、果醬等物質(zhì)的顏色測(cè)定[21-22]。

羅維朋比色計(jì)利用一系列的濾色片對(duì)白光加以吸收，通過濾色片后的光色與待測(cè)顏色進(jìn)行比較得到結(jié)果，是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便的目視測(cè)色儀器。可以測(cè)定固體和液體等物質(zhì)的顏色，是國(guó)際上普遍采用的測(cè)量色度的儀器，該法只需測(cè)定紅、黃、藍(lán)3個(gè)值，且本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不需使用藍(lán)色濾色片。本實(shí)驗(yàn)測(cè)得的黃度值都是10，故不列出，只測(cè)量紅度值的大小。

分光光度計(jì)適合樣品中顯色物質(zhì)在可見光波段有明顯吸收時(shí)使用，而羅維朋比色計(jì)雖然無法達(dá)到其精確量化程度，但羅維朋比色不受吸光度需介于0.2～1.0條件的拘束，在需要對(duì)物質(zhì)顏色進(jìn)行更廣泛的測(cè)定場(chǎng)景中占有優(yōu)勢(shì)。但因?yàn)橛绊懥_維朋比色計(jì)測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確度的因素較多[23]，例如不同觀察者用同一儀器測(cè)量同一樣品有可能會(huì)有不同的測(cè)量值，張靜雯等[24]和周德祥等[25]研究發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)中比色片的顏色會(huì)隨著使用者的長(zhǎng)時(shí)間使用而逐漸失真，因此羅維朋比色計(jì)只能間歇使用，長(zhǎng)時(shí)間使用會(huì)出現(xiàn)視覺疲勞，出現(xiàn)誤差，影響顏色評(píng)價(jià)準(zhǔn)確性。此方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，且能夠達(dá)到定性分析和粗略定量分析程度。

2.2.3分光輻射亮度計(jì)法 分光輻射亮度計(jì)通過測(cè)量物體反射的光譜功率分布或者物體本身的反射光度特性，然后根據(jù)光譜測(cè)量數(shù)據(jù)計(jì)算出物體在各種標(biāo)準(zhǔn)光源和標(biāo)準(zhǔn)照明體下的三刺激值(L*、a*和b*)。三刺激值系統(tǒng)在顏色科學(xué)和紡織物色彩[26]領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用，近年來在其他領(lǐng)域也被逐漸應(yīng)用。Peterson等[27]就在視覺評(píng)價(jià)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用分光輻射亮度計(jì)對(duì)小麥籽粒顏色進(jìn)行了客觀的評(píng)價(jià)，研究也表明L*、a*和b*3個(gè)數(shù)值難以捕捉到視覺上的“微妙之處”。Schelkopf等[28]利用類似的裝置測(cè)定成熟牛肉的3個(gè)刺激值(L*、a*和b*)，評(píng)估了成熟牛肉的胸長(zhǎng)肌。分光輻射亮度計(jì)是一種對(duì)固體顏色評(píng)價(jià)的儀器，該法將脫色后的皂素進(jìn)行干燥研磨后再進(jìn)行測(cè)定。測(cè)得的3個(gè)指標(biāo)L*、a*和b*能形成一個(gè)簡(jiǎn)化的顏色空間，它在三維色空間的各個(gè)方向軸上具有視覺生態(tài)學(xué)的等距性，而且在明度指數(shù)和色品指數(shù)有區(qū)分，越來越受到各行業(yè)的廣泛重視和應(yīng)用[29]。其中，明度值L*是衡量顏色深淺的一個(gè)指標(biāo)(表4)，因此，將L*值用作脫色率計(jì)算的評(píng)價(jià)指標(biāo)。與分光光度計(jì)法相比，最優(yōu)條件下脫色率依舊達(dá)到一個(gè)很高的水平，進(jìn)一步證明了此正交試驗(yàn)得出的最佳條件是可行的。由表4可知，有些試驗(yàn)的脫色率與分光光度計(jì)法相比較低，脫色率較低(樣品3)的測(cè)得的b*值(由1.3.2節(jié)可知b*為正值時(shí)樣品的黃色比藍(lán)色占優(yōu)勢(shì))明顯高于其他試驗(yàn)，這有可能是H-K效應(yīng)[30]導(dǎo)致的，即樣品的明度值會(huì)隨著顏色強(qiáng)度的加深而降低，進(jìn)而影響測(cè)量結(jié)果。也就是說分光輻射亮度計(jì)作為一種顏色測(cè)定的補(bǔ)充辦法較為合適，這與陳泠等[31]對(duì)小麥顏色測(cè)定的結(jié)論相一致。與分光光度計(jì)相比，分光輻射亮度計(jì)不僅可用于茶皂素顏色的定量分析，在此基礎(chǔ)上細(xì)分了明度與色品的極差，而且可適用于較小色差情況下的顏色測(cè)量、比較和討論。

表4 分光輻射亮度計(jì)數(shù)據(jù)

2.2.4直觀觀察拍照法 直觀觀察拍照法可以直觀地看出物體顏色的深淺，不同光照條件下物質(zhì)的顏色會(huì)發(fā)生變化，所以本研究是在實(shí)驗(yàn)室中同一光照環(huán)境使用相機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行拍照(圖2)。

圖2 直觀觀察拍照法評(píng)價(jià)油茶皂素顏色結(jié)果

由圖可以看出，原料的顏色較深，而經(jīng)脫色后的皂素分別呈現(xiàn)不同程度的脫色效果，經(jīng)最佳條件脫色后的皂素顏色呈現(xiàn)乳白色，不僅證明了本研究的脫色條件的可行性，同時(shí)間接佐證了分光光度計(jì)法的精確性和量化性。且在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，茶皂素保存時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，其顏色有可能會(huì)因?yàn)檠趸确磻?yīng)而發(fā)生改變。為了更方便地對(duì)茶皂素顏色進(jìn)行時(shí)間和空間上的記錄，相對(duì)于普通相機(jī)，使用數(shù)碼相機(jī)能夠達(dá)到更完整和更持久的保存目標(biāo)。

2.2.5色階比色法 色階比色法也是一種較為常用的皂素色澤評(píng)價(jià)方法[32]。該法通過制備不同濃度的皂素溶液，即色階比色卡，其溶液顏色隨濃度的降低而減淡，利用脫色前和脫色后的溶液與色階比色卡進(jìn)行比對(duì)，找出最接近的色階序列號(hào)。王超等[33]利用色階比色法對(duì)皂素顏色進(jìn)行比較，但其僅通過一人試驗(yàn)即得出結(jié)果，誤差較大。本研究為了減小由于人為感官之間的差異性而導(dǎo)致的誤差，通過 3個(gè)不同的測(cè)試者對(duì)脫色皂素試液和原料試液顏色進(jìn)行比色，色階比色結(jié)果見表5。其中測(cè)試樣品包含原料、正交試驗(yàn)1～9號(hào)及最優(yōu)條件下的皂素。由表可見，最優(yōu)條件下的比色結(jié)果仍然處于優(yōu)勢(shì)地位。

與羅維朋比色法類似，色階比色法使用時(shí)人為因素影響較大，但與其不同的是，色階比色法不會(huì)出現(xiàn)由于長(zhǎng)時(shí)間眼睛使用產(chǎn)生的視覺疲勞，只需將樣品與比色卡進(jìn)行短暫地比對(duì)便能得出結(jié)果，操作簡(jiǎn)便，可行性強(qiáng)。當(dāng)皂素顏色難以用肉眼區(qū)分時(shí)，但又亟需一個(gè)辨別標(biāo)準(zhǔn)時(shí)色階比色法能起到事半功倍的效果。

表5 色階比色結(jié)果1)

2.3 幾種方法結(jié)果對(duì)比

不同色澤評(píng)價(jià)方法對(duì)兩組最優(yōu)脫色條件下得到的脫色皂素評(píng)價(jià)結(jié)果見表6。

表6 最優(yōu)條件色澤評(píng)價(jià)表

由表可見，在最優(yōu)條件下脫色后的茶皂素，其分光光度計(jì)(510 nm)色澤評(píng)價(jià)結(jié)果與分光光度計(jì)(480 nm)接近，說明分光光度計(jì)法的可視化數(shù)據(jù)使其準(zhǔn)確度更高。羅維朋評(píng)價(jià)結(jié)果相差較大，可能因?yàn)槭且环N目視比色法，導(dǎo)致誤差較大。色階比色法結(jié)果相同，這是因?yàn)橄噜弮蓚€(gè)色階差異明顯，更易比色，這也證明了最優(yōu)條件方案的可行性，且經(jīng)直接觀察拍照驗(yàn)證，脫色后的油茶皂素經(jīng)研磨后呈現(xiàn)乳白色，其脫色效果顯著，證明該優(yōu)化條件可行。雖然幾種方法測(cè)的脫色率略低于實(shí)際生產(chǎn)中白色皂素的脫色率值，有可能是不同皂素前處理過程的不同和脫色率計(jì)算方式差異所導(dǎo)致的，但本研究使用的脫色劑僅有過氧化氫和凹凸棒土，在生產(chǎn)應(yīng)用中具有成本低廉和操作簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)。Lin等[34]和Chahbane等[35]研究發(fā)現(xiàn)，H2O2可以憑借其強(qiáng)氧化性而用于含有還原性強(qiáng)的活性染料的紡織品廢水的脫色，說明茶皂素中的顯色物質(zhì)是具有還原性的，而通過乙醇提取的茶皂素通常含有多糖、蛋白質(zhì)等還原性強(qiáng)的物質(zhì)[36]，H2O2會(huì)與這些物質(zhì)發(fā)生氧化反應(yīng)而導(dǎo)致皂素色澤的變淺；凹凸棒土具有吸附茶皂素中色素類物質(zhì)的作用，色素含量的降低同樣會(huì)對(duì)茶皂素顏色產(chǎn)生影響。本研究結(jié)果證明：過氧化氫/凹凸棒土耦合體系適用于油茶皂素這類五環(huán)三萜類化合物中雜質(zhì)的顏色去除，并且脫色效果顯著。

3 結(jié) 論

3.1 通過水浸提或者醇提的皂素通常含有多酚、多糖和色素等雜質(zhì)，且色素類物質(zhì)大多含有共軛雙鍵，本研究利用過氧化氫/凹凸棒土耦合體系對(duì)油茶皂素進(jìn)行脫色，通過正交試驗(yàn)得出最佳脫色條件：H2O2用量6%，溫度80 ℃，時(shí)間3 h，凹凸棒土用量3%。在此條件下可得到顏色為乳白色的脫色皂素，其脫色率達(dá)到(79.52±0.53)%(分光光度計(jì)510 nm)和(78.33±0.9)%(分光光度計(jì)480 nm)。其他色澤評(píng)價(jià)結(jié)果基本相近。

3.2 運(yùn)用不同色澤評(píng)價(jià)方法對(duì)油茶皂素脫色效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明：分光光度計(jì)法精確度高、人為因素影響小，能夠達(dá)到對(duì)茶皂素溶液顏色的定量分析。分光輻射亮度計(jì)細(xì)分了明度與色品的極差，適用于較小色差情況下的顏色測(cè)量、比較和討論。羅維朋比色計(jì)是一種目視比色儀，受人為因素影響較大，但在需要對(duì)油茶皂素溶液進(jìn)行較廣泛的色澤分析場(chǎng)景中具有優(yōu)勢(shì)。直觀拍照法可以直觀顯現(xiàn)出油茶皂素的顏色深淺，可以作為其他顏色鑒定的直接佐證和依據(jù)。色階比色法不易出現(xiàn)視覺疲勞，可行性強(qiáng)。