外泌體在腫瘤中的作用及靶向治療的研究進(jìn)展

楊麗娟, 張加苗, 張 晶, 陳小平

(南通大學(xué)第四附屬醫(yī)院/江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 江蘇 鹽城, 224000)

腫瘤是由各種內(nèi)外致瘤因素長(zhǎng)期協(xié)同作用下引起的細(xì)胞基因水平突變和功能調(diào)控異常，導(dǎo)致細(xì)胞過度增生，從而形成具有異常結(jié)構(gòu)和功能的新生物。腫瘤的特點(diǎn)包括無限增殖、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性，早預(yù)防、早診斷和早治療是關(guān)鍵。目前臨床上腫瘤生物的標(biāo)志物主要為血清中蛋白類分子，其特異性和敏感性均欠佳[1], 所以尋找新的診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)十分重要。本文將外泌體作為標(biāo)志物在腫瘤中的作用及其靶向治療藥物的研究進(jìn)展予以綜述，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 外泌體

無論是正常細(xì)胞還是病態(tài)細(xì)胞，在細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育過程中都會(huì)不斷地向外界環(huán)境釋放充滿液體的囊泡，通常稱之為“細(xì)胞外囊泡”(EV)。其最初被認(rèn)為是細(xì)胞碎片，但近年來細(xì)胞外囊泡被認(rèn)為是細(xì)胞之間通訊、疾病診斷和疾病預(yù)后循環(huán)生物標(biāo)志物的重要載體，具有巨大的臨床應(yīng)用潛力。根據(jù)直徑的不同，其可分為4個(gè)亞群: 外泌體、微囊泡、凋亡小體和癌小體。其中外泌體是最重要的一種細(xì)胞外囊泡, 1983年研究者[2]在用抗轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體標(biāo)記綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞孵育期間，在體外培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基上清液中發(fā)現(xiàn), 1987年JOHNSTONE R M等[3]將這些囊泡命名為外泌體。外泌體直徑為30～150 nm, 密度為1.13～1.19 g/mL, 用透視電子顯微鏡標(biāo)準(zhǔn)負(fù)染色方法可以觀察到外泌體具有脂質(zhì)雙層，典型的盤樣圓形囊泡，具有特征性杯形[4]。外泌體可以由多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型分泌，包括B細(xì)胞和T細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞，間充質(zhì)干細(xì)胞，上皮細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞和癌細(xì)胞。外泌體還被發(fā)現(xiàn)廣泛存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、淋巴液、尿液、腦脊液、精液、乳汁、羊水、汗液及月經(jīng)血等[5]。而且癌細(xì)胞比正常細(xì)胞分泌更多的外泌體[6], 這提示了外泌體可以作為腫瘤的生物標(biāo)志物及靶向治療的目標(biāo)。

2 外泌體與腫瘤的關(guān)系

2.1 外泌體促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和增長(zhǎng)

現(xiàn)有研究表明外泌體參與腫瘤的形成和發(fā)展。首先，外泌體蛋白可以通過自分泌途徑改變細(xì)胞自身的命運(yùn)，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。RAIMONDO S等[7]在研究慢性髓系白血病的過程中發(fā)現(xiàn)，來自慢性髓系白血病細(xì)胞的外泌體中的細(xì)胞因子TGF-β1與白血病細(xì)胞上的TGF-β1受體相互作用，通過升高抗凋亡因子的表達(dá)水平、降低促凋亡因子的表達(dá)水平和激活細(xì)胞中的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(AKT)通路來促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。在最近的一項(xiàng)卵巢癌研究[8]中，明確地證明了外泌體作為人類脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(hAMSC)衍生的條件培養(yǎng)基(CM)(hAMSC-CM)的重要生物成分，能夠抑制A2780和SKOV-3癌細(xì)胞的增殖、傷口修復(fù)和集落形成能力。同樣，乳腺癌來源的外泌體處理后可以誘導(dǎo)腫瘤促進(jìn)因子SDF-1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、趨化因子(CCL5)和TGFβ的表達(dá)增加，通過SMAD介導(dǎo)的信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的進(jìn)展[9]。其次，外泌體DNA改變細(xì)胞生存本身。外泌體是否攜帶DNA一直存在爭(zhēng)議，因?yàn)橥饷隗w來自于細(xì)胞質(zhì)中的多囊體，與細(xì)胞核不相連。然而，一些研究小組已經(jīng)在外泌體中發(fā)現(xiàn)了雙鏈DNA片段和DNA突變。KAHLERT C等[10]發(fā)現(xiàn)在胰腺癌細(xì)胞和胰腺導(dǎo)管腺癌患者血清的外泌體中除包含線粒體和少量單鏈DNA外，還包含了大片段(>10 kb)的雙鏈基因組DNA。同年，另一個(gè)研究組THAKUR B K等[11]在多種癌細(xì)胞系中，包括黑色素瘤、乳腺癌、肺癌、前列腺癌和胰腺癌，均檢測(cè)到了雙鏈DNA，且外泌體DNA代表了整個(gè)基因組，這和前面研究結(jié)論相同。TAKAHASHI A等[12]用透射電子顯微鏡對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行免疫金標(biāo)記，發(fā)現(xiàn)外泌體中存在DNA, 抑制外泌體的分泌后，導(dǎo)致細(xì)胞核DNA在細(xì)胞質(zhì)中積累，從而激活活性氧依賴的DNA損傷反應(yīng)導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯或凋亡，破壞了細(xì)胞的穩(wěn)定性，導(dǎo)致細(xì)胞異常。

2.2 外泌體促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移

腫瘤轉(zhuǎn)移是指惡性腫瘤細(xì)胞從原發(fā)部位，經(jīng)淋巴道、血管或體腔等途徑，到達(dá)其他部位繼續(xù)生長(zhǎng)的這一過程，是腫瘤治療失敗的主要原因。研究表明外泌體對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移有著重要的影響，其相關(guān)機(jī)制主要有以下4種。第一，外泌體控制腫瘤細(xì)胞的極性和運(yùn)動(dòng)的方向。2012年, LUGA V等[13]研究報(bào)告了癌相關(guān)成纖維細(xì)胞分泌的CD81陽性的外泌體，通過激活自分泌的WNT/PCP信號(hào)通路，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的前伸活性、運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移。第二，來自腫瘤細(xì)胞的外泌體可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。例如，來自大鼠胰腺腺癌細(xì)胞系(ASML)的四跨膜蛋白中的CD151/和Tspan8陽性的外泌體，通過調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞基質(zhì)重組，影響造血細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的活化，包括淋巴管和血管生成[14]。第三，外泌體可以解除緊密連接，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的內(nèi)滲。研究[15]發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞中特征性表達(dá)和分泌miR-105外泌體，通過靶向緊密連接蛋白ZO-1，有效地破壞了內(nèi)皮單層細(xì)胞的緊密連接和這些天然屏障的完整性，促進(jìn)轉(zhuǎn)移。第四，來自癌細(xì)胞的外泌體可以促進(jìn)受體細(xì)胞的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT), 促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。最新研究表明，來自轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌細(xì)胞系SW620的外泌體miR-335-5p通過靶向RAS p21蛋白激活因子1(RASA1)促進(jìn)EMT, 促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。在宮頸癌的研究中發(fā)現(xiàn)，癌細(xì)胞源性外泌體miR-663b在暴露于TGF-β1后，被鄰近或遠(yuǎn)處的宮頸癌細(xì)胞內(nèi)吞，抑制甘露糖苷乙酰氨基葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶3(MGAT3)的表達(dá)，從而加速EMT過程，促進(jìn)癌細(xì)胞的局部和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[16-17]。

2.3 外泌體促進(jìn)了腫瘤的血管生成

腫瘤的血管生成是腫瘤生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移的基本條件。腫瘤來源的外泌體含有四次跨膜Tspan8, 能有效地誘導(dǎo)腫瘤的血管生成。內(nèi)皮細(xì)胞攝取含有Tspan8-CD49d復(fù)合物的外泌體后，通過上調(diào)血管生成相關(guān)基因，增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管生成[18]。癌細(xì)胞來源的含Notch配體DLL4的外泌體，在體外通過抑制Notch信號(hào)增加了血管分支和血管密度，在體內(nèi)，增加了血管分支、血管長(zhǎng)度和血管大小[19]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是最有效的促血管生成蛋白，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、發(fā)芽和血管形成。研究[20]發(fā)現(xiàn)，來源于卵巢上皮癌細(xì)胞系OVACAR-3的外泌體可增加內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移率，還對(duì)VEGF的表達(dá)和分泌有促進(jìn)作用。此外，賴氨酸氧化酶樣4 (LOXL4)已被發(fā)現(xiàn)在多種人類惡性腫瘤中發(fā)生失調(diào)，最近有研究LOXL4在肝細(xì)胞癌(HCC)進(jìn)展中的作用，發(fā)現(xiàn)HCC衍生的外泌體在HCC細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移LOXL4, 而LOXL4通過過氧化氫介導(dǎo)的機(jī)制激活FAK/Src通路，促進(jìn)細(xì)胞遷移。此外, HCC衍生的外泌體通過旁分泌機(jī)制將LOXL4轉(zhuǎn)移到人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中，以促進(jìn)血管生成[21]。

2.4 外泌體促進(jìn)了腫瘤的耐藥

外泌體對(duì)腫瘤耐藥具有強(qiáng)大的影響，并可以通過多種機(jī)制誘導(dǎo)腫瘤耐藥。正如在卵巢癌中所觀察到的，與對(duì)照組相比，外源表達(dá)SMAD4突變的A2780細(xì)胞在卡鉑處理后, EMT標(biāo)記物的上調(diào)，對(duì)卡鉑的耐藥性增加，釋放外泌體使A2780受體細(xì)胞的耐藥性增加了1.7倍[22]。同樣，順鉑(DDP)耐藥的肺癌細(xì)胞分泌的外泌體中miR-100-5p顯著降低，可能通過調(diào)控mTOR信號(hào)通路使其他肺癌細(xì)胞對(duì)DDP產(chǎn)生耐藥性[23]。另外，藥物敏感細(xì)胞通過吸收來自耐藥細(xì)胞的外泌體而產(chǎn)生耐藥性。研究[24]發(fā)現(xiàn)，將阿霉素敏感的受體細(xì)胞暴露于含GSTP1的外泌體中，可以誘導(dǎo)敏感細(xì)胞達(dá)到耐藥表型，并且GSTP1-siRNA處理的阿霉素耐藥細(xì)胞凋亡率較高，對(duì)阿霉素耐藥率較低。此外，腫瘤微環(huán)境中的外泌體也可誘導(dǎo)癌細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。例如, 2018年, BINENBAUM Y等[25]發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞源性的外泌體在體內(nèi)和體外均顯著降低了胰腺癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱的敏感性。最近，GAO Y等[26]通過單細(xì)胞RNA測(cè)序發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAF)亞群CD63+ CAFs, 可以分泌富含miR-22的外泌體, miR-22結(jié)合其靶目標(biāo)ERα和磷酸酶與張力蛋白同源物(PTEN), 使ERα和PTEN表達(dá)下調(diào)，從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞他莫昔芬耐藥性。

3 外泌體作為腫瘤診斷和預(yù)后的生物標(biāo)志物

外泌體在腫瘤中異常表達(dá)，有作為腫瘤特異性標(biāo)記物的潛力。不僅如此，外泌體中含有多種蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子，其特殊的雙分子層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)可以使其內(nèi)的分子不容易被降解，而且外泌體可以在血液、尿液、唾液和腦脊液等體液中檢測(cè)到，因此，外泌體是腫瘤診斷和預(yù)后標(biāo)志物的一個(gè)理想選擇。

3.1 微小核糖核酸(miRNA)

研究發(fā)現(xiàn)，miRNA在細(xì)胞分化、增殖、死亡和成熟等細(xì)胞過程的調(diào)控中起重要作用[27]。近年來，許多研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞可以分泌外泌體，并認(rèn)為外泌體中的miRNA可能是一種有效的生物標(biāo)志物。例如，檢測(cè)了血清miRNA在胰腺癌患者、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀黏液性腫瘤(IPMN)患者和非腫瘤患者血清外泌體中的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)血清外泌體中的miR-191、miR-21和miR-451a在胰腺癌患者和IPMN患者中的表達(dá)顯著高于非腫瘤患者，提示3種血清外泌體中的miRNA的水平可作為胰腺癌和IPMN的早期診斷和進(jìn)展標(biāo)記物[28]。同樣，通過分析原代結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480和高轉(zhuǎn)移性細(xì)胞系SW620分泌的外泌體miRNA的表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)從SW620培養(yǎng)上清純化的外泌體中有25個(gè)miRNAs上調(diào), 5個(gè)miRNAs下調(diào)，而且循環(huán)外泌體miR-17-5p和miR-92a-3p的高表達(dá)水平與結(jié)腸癌患者的病理分期和分級(jí)顯著相關(guān)，提示外泌體miR-17-5p和miR-92a-3p可以作為監(jiān)測(cè)結(jié)腸癌患者的預(yù)后標(biāo)志物[29]。在卵巢癌的研究中發(fā)現(xiàn)，與健康女性相比，卵巢癌患者血漿外泌體中的miR-21、miR-100、miR-200b和miR-320顯著富集，此外，外泌體miR-200b水平與腫瘤標(biāo)志物CA125和患者總生存率相關(guān)，并影響著細(xì)胞增殖和凋亡[30], 提示外泌體中的miRNA可以作為卵巢癌患者診斷和預(yù)后的生物標(biāo)志物。同樣，小非編碼RNA miR-128-3p的異常表達(dá)已被證明是腫瘤發(fā)生和癌癥發(fā)展的關(guān)鍵調(diào)控因子，轉(zhuǎn)染miR-128-3p的人正常結(jié)直腸黏膜(FHC)細(xì)胞有效地將miR-128-3p包裝成分泌的外泌體，提高體外和體內(nèi)CRC細(xì)胞中奧沙利鉑的應(yīng)答; 通過上調(diào)了E-cadherin水平，來抑制奧沙利鉑誘導(dǎo)的EMT; 也通過抑制藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體MRP5的表達(dá)來減少奧沙利鉑的外排，提示miR-128-3p在奧沙利鉑化療耐藥過程中可能是一個(gè)有效的診斷和預(yù)后標(biāo)志物[31]。

3.2 蛋白

外泌體攜帶一個(gè)具有調(diào)節(jié)受體細(xì)胞各種功能特性的效應(yīng)蛋白組。在2014年發(fā)表的一項(xiàng)研究中，使用基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)對(duì)從4個(gè)上皮性卵巢癌細(xì)胞系(OVCAR3, OVCAR433, OVCAR5, SKOV3)來源的外泌體進(jìn)行了分析，將其與公共數(shù)據(jù)庫(Exocarta)和最新發(fā)表的NCI 60蛋白質(zhì)組進(jìn)行系統(tǒng)比較，發(fā)現(xiàn)富集了豐富的與信號(hào)生物學(xué)和生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)相關(guān)的蛋白質(zhì)組類別[32]。同樣, LIANG B等[33]檢測(cè)了2種來自卵巢癌細(xì)胞系(OVCAR-3和IGROV1)的高純度外泌體的蛋白譜，發(fā)現(xiàn)從2個(gè)卵巢癌細(xì)胞系中鑒定了2 230個(gè)外泌體蛋白，其中，同時(shí)存在于2個(gè)外泌體中有1 017個(gè)蛋白，包括所有主要的外泌體蛋白標(biāo)志物，其中ExoCarta數(shù)據(jù)庫中未報(bào)道的蛋白有380個(gè)。這些研究結(jié)果表明，卵巢癌來源的外泌體也攜帶與腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移相關(guān)的組織特異性蛋白，可能在卵巢癌進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，并為血液蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物提供了一個(gè)潛在的來源。TRIM家族是一類具有E3泛素連接酶活性的蛋白, TRIM3是TRIM家族成員之一，目前主要認(rèn)為TRIM3是一種候選腫瘤抑制基因，可以抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲與轉(zhuǎn)移，與腫瘤的臨床分期及預(yù)后關(guān)系密切。研究[34]發(fā)現(xiàn)，外泌體介導(dǎo)的TRIM3蛋白遞送可抑制胃癌的體內(nèi)外生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，提示外泌體TRIM3可能作為胃癌診斷的生物標(biāo)志物。

3.3 環(huán)狀RNA(circRNA)

circRNA是一類具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA分子，沒有5′, 帽子結(jié)構(gòu)和3′, poly結(jié)構(gòu)，主要位于細(xì)胞質(zhì)或儲(chǔ)存于外泌體中，不受RNA外切酶影響，表達(dá)更穩(wěn)定且不易降解，在多種真核生物內(nèi)廣泛存在[35]。復(fù)旦大學(xué)腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所的何祥火教授通過對(duì)外泌體的環(huán)狀RNA進(jìn)行測(cè)序，首次證明了外泌體中存在大量circRNA, 將外泌體、circRNA與腫瘤成功聯(lián)系到一起，開創(chuàng)性提出了外泌體的circRNA可以作為腫瘤診斷的生物標(biāo)志物的結(jié)論，為腫瘤診斷提供了新的發(fā)展方向[36]。最近，研究[37]檢測(cè)了正常卵巢和卵巢癌組織中circRNA的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)外泌體circWHSC1可轉(zhuǎn)移到腹膜間皮細(xì)胞，促進(jìn)腹膜播散，誘導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)移。最近，來自南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院束永前課題組的研究發(fā)現(xiàn)，胃癌患者手術(shù)治療后外泌體circSHKBP1水平顯著降低，上調(diào)circSHKBP1的外泌體促進(jìn)共培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)。進(jìn)一步研究其機(jī)制, circSHKBP1海綿化miR-582-3p增加HUR的表達(dá)，增強(qiáng)VEGF mRNA的穩(wěn)定性，增強(qiáng)血管生成，誘導(dǎo)腫瘤發(fā)展[38]。

4 外泌體的臨床應(yīng)用

4.1 靶向治療

靶向殺滅腫瘤細(xì)胞是一個(gè)精準(zhǔn)而高效的治療方法，醫(yī)學(xué)研究就是為了找出腫瘤的特異性靶點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)治療，減少治療過程對(duì)正常細(xì)胞的毒副作用。外泌體是一種天然的納米生物載體，具有穩(wěn)定性、膜滲透性，甚至可以穿過血腦屏障。因?yàn)橥饷隗w“識(shí)別”特定的細(xì)胞，通過外泌體傳遞治療藥物比其他生物載體，如脂質(zhì)體，有更好的療效和更少的脫靶效應(yīng)。因此，外泌體可有效運(yùn)輸和轉(zhuǎn)移，如藥物、miRNA、小干擾RNA (siRNA)、短發(fā)夾的傳遞和轉(zhuǎn)移RNA (shRNAs)和其他在外泌體中保持穩(wěn)定的化合物工具，用于治療癌癥和其他疾病[39]。一些提高外泌體腫瘤細(xì)胞靶向特異性和被腫瘤吸收的策略已被報(bào)道，例如卵泡刺激素受體-β(FSHβ)在人體中的分布比較有限，多集中于生殖系統(tǒng)，在其他器官組織中幾乎未見分布，大多數(shù)卵巢癌組織表達(dá)FSHβ, 且表達(dá)水平高于正常的卵巢組織，是比較理想的卵巢癌腫瘤治療的靶目標(biāo)。岳艷等[40]通過基因重組技術(shù)，將FSHβ修飾到人胚胎腎細(xì)胞293(HEK293)細(xì)胞的外泌體上，通過其表面的特異性表達(dá)分子(ICAM-1、CA86、HLA-DR)誘導(dǎo)外周血T淋巴細(xì)胞的增殖作用，從而激發(fā)起抗腫瘤效應(yīng)，其中負(fù)載Ex/FSHβ的樹突狀細(xì)胞能夠誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞對(duì)卵巢癌細(xì)胞產(chǎn)生較強(qiáng)的誘導(dǎo)殺傷作用，為臨床以外泌體為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療提供了一定的理論基礎(chǔ)。2017年，根據(jù)來自美國(guó)德克薩斯大學(xué)安德森癌癥中心的Kalluri團(tuán)隊(duì)的研究，對(duì)外泌體進(jìn)行基因操控可能提供了一種新的胰腺癌治療方法。KRAS的突變是胰腺癌的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因素，他們從人成纖維細(xì)胞培養(yǎng)的上清液中純化了CD47+外泌體，然后引入靶向癌基因KRASG12D的siRNA或短發(fā)夾RNA (shRNA), 這種外泌體被稱為iExosomes。iExosomes能夠靶向KRASG12D基因，并且CD47對(duì)其有增強(qiáng)作用，在多個(gè)胰腺癌小鼠模型中，用iExosomes治療可以抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，并顯著提高總生存率[41]。除此之外，外泌體可以與傳統(tǒng)的病毒載體結(jié)合使用，形成一種功能更強(qiáng)的基因治療工具，例如利用外泌體包裹腺相關(guān)病毒載體可用于特異性轉(zhuǎn)染神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞，可能成為目前沒有有效治療方法的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如多發(fā)性硬化癥(MS)、脊髓性肌肉萎縮(SMA)或肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(ALS)的基因治療的首選工具[42]。

4.2 抗癌疫苗

外泌體可以傳遞或呈現(xiàn)腫瘤來源的抗原，激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞，比如樹突狀細(xì)胞(DC)衍生的外泌體疫苗。DC來源的外泌體表達(dá)MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ分子并可以誘導(dǎo)抗腫瘤免疫，與DC疫苗被抗原特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞快速淘汰相比, DC來源的外泌體疫苗壽命相對(duì)較長(zhǎng)，因此被認(rèn)為是DC疫苗的替代品。DC衍生的外泌體疫苗已經(jīng)在幾個(gè)Ⅰ期臨床試驗(yàn)中進(jìn)行了測(cè)試。例如，2005年有研究團(tuán)隊(duì)檢測(cè)了載有MAGE腫瘤抗原的自體樹突狀細(xì)胞衍生外泌體(DEX)在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者中的安全性、可行性和有效性, DEX治療在晚期NSCLC患者中耐受性良好[43]。后來，在另一項(xiàng)Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，結(jié)腸癌患者腹水源性外泌體(Aex)作為疫苗注射到患者體內(nèi)，經(jīng)粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)處理后，產(chǎn)生了腫瘤特異性抗腫瘤細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)反應(yīng)，說明Aex聯(lián)合GM-CSF的免疫治療是可行和安全的[44]。

綜上所述，近幾十年來對(duì)外泌體的研究，探討了外泌體在不同生理和病理?xiàng)l件下的功能，基于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)?zāi)Ｐ?，大量證據(jù)支持外泌體在腫瘤治療中的應(yīng)用。盡管只有少數(shù)外泌體用于癌癥治療的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中，但外泌體作為腫瘤治療的新平臺(tái)和腫瘤生物標(biāo)志物的應(yīng)用是有希望的，這就需要未來對(duì)外泌體作用機(jī)制進(jìn)行深入了解，將有助于外泌體在臨床上的應(yīng)用，使患者受益。