多發(fā)性骨髓瘤患者血清微小RNA-424、可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體、c-kit受體蛋白檢測(cè)及臨床意義

杜娟英，薛海鯨

(寶雞市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 寶雞 721008)

多發(fā)性骨髓瘤是一種由骨髓中漿細(xì)胞惡性增殖引起的疾病，高發(fā)于中老年人，預(yù)后情況存在明顯的個(gè)體差異性[1]。其病因及發(fā)病機(jī)制目前均不十分清楚，臨床癥狀多樣，缺乏特異性，均不利于此病的及時(shí)診治。與此同時(shí)，多發(fā)性骨髓瘤的治療方法較多，若能準(zhǔn)確地評(píng)估病情，根據(jù)患者的臨床病理特征予以靶向性強(qiáng)的治療，有望在增加患者臨床獲益上取得顯著進(jìn)展?，F(xiàn)階段，臨床急需尋找與多發(fā)性骨髓瘤密切相關(guān)的血清標(biāo)志物，用于評(píng)估病情和指導(dǎo)診治。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究[2-3]表明，骨髓中漿細(xì)胞在多發(fā)性骨髓瘤發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，定量分析漿細(xì)胞表面和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)抗原的表達(dá)情況被認(rèn)為是評(píng)估多發(fā)性骨髓瘤病情的重要依據(jù)。微小RNA-424(microRNA-424，miR-424)、可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(Soluble receptor for advanced glycation endproducts，sRAGE)和c-kit受體蛋白(CD117)均是研究較多的漿細(xì)胞表面標(biāo)記物，上述指標(biāo)的異常表達(dá)可能預(yù)示著多發(fā)性骨髓瘤的病情嚴(yán)重，預(yù)后較差[4-5]。然而，血清miR-424、sRAGE和CD117水平與多發(fā)性骨髓瘤生物學(xué)行為的關(guān)系如何，還有待明確。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平進(jìn)行相關(guān)分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院自2020年1月至2022年6月收治的多發(fā)性骨髓瘤患者125例為觀察組，其中男性65例，女性60例；年齡28～75歲，平均(61.23±4.87)歲；體重指數(shù)21～28 kg/m2，平均(22.99±1.57)kg/m2。另選一般資料與觀察組相匹配的體檢健康者125例為對(duì)照組，其中男性63例，女性62例；年齡20～70歲，平均(59.86±4.91)歲；體重指數(shù)21～28 kg/m2，平均(22.15±1.48)kg/m2。兩組性別、年齡、體重指數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～80歲；觀察組患者符合多發(fā)性骨髓瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)照組入選者經(jīng)體檢結(jié)果正常；入組前未接受放化療和內(nèi)分泌治療；知悉研究?jī)?nèi)容，自愿參與研究，并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重的心、肝等重要臟器功能不全及自身免疫性疾病者；患有其他癌癥者；因其他疾病引起腎損傷者；近期服用可能影響血清miR-424、sRAGE、CD117水平的藥物者。本研究已通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批。

1.2 檢測(cè)方法 所有受試者在入組48 h內(nèi)且在治療前，于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集肘靜脈血15 ml，放置在抗凝管中，離心后提取血清，用于實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢查。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)血清miR-424，以2-ΔΔCt法計(jì)算miR-424相對(duì)表達(dá)量。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清sRAGE、CD117水平，試劑盒分別購(gòu)自南京森貝伽生物科技有限公司(批號(hào)：SBJ-H1620)和上海梵態(tài)生物科技有限公司(批號(hào)： FT-D25007)。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組血清miR-424、sRAGE、CD117水平，觀察不同臨床分期及免疫分型多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平的差異性。根據(jù)觀察組患者是否合并腎損傷，分為腎損傷組和非腎損傷組，以患者確診時(shí)血肌酐>177 μmol/L作為診斷腎損傷的依據(jù)[6]，比較兩組血清miR-424、sRAGE、CD117水平，并采用多因素Logistic回歸分析血清miR-424、sRAGE、CD117與患者發(fā)生腎損傷的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1 觀察組與對(duì)照組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見(jiàn)表1。觀察組血清miR-424、CD117水平高于對(duì)照組，sRAGE水平低于對(duì)照組(均P<0.05)。

表1 觀察組與對(duì)照組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.2 不同臨床分期多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見(jiàn)表2。不同臨床分期多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。其中，Ⅲ期患者血清miR-424、CD117水平均高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，sRAGE水平低于Ⅰ期和Ⅱ期患者(均P<0.05)。

表2 不同臨床分期多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.3 不同免疫分型多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見(jiàn)表3。不同免疫分型多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。其中，IgG型患者血清miR-424、CD117水平高于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者，sRAGE水平低于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者(均P<0.05)。

表3 不同免疫分型多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.4 腎損傷組與非腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較 見(jiàn)表4。在125例多發(fā)性骨髓瘤患者中，發(fā)生腎損傷42例。腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平高于非腎損傷組(均P<0.05)。

表4 腎損傷組與非腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較

2.5 血清miR-424、sRAGE、CD117與腎損傷關(guān)系的多因素分析 見(jiàn)表5。以腎損傷為因變量，以miR-424、sRAGE、CD117為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，血清miR-424、sRAGE、CD117是多發(fā)性骨髓瘤患者發(fā)生腎損傷的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素(均P<0.05)。

表5 血清miR-424、sRAGE、CD117與腎損傷關(guān)系多因素Logistic回歸分析

3 討 論

多發(fā)性骨髓瘤是一種相對(duì)常見(jiàn)的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，可導(dǎo)致一系列組織器官損傷，預(yù)后情況差異較大[7]。在臨床上，針對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的治療方法較多，但缺乏特別有效的治療藥物，而準(zhǔn)確地評(píng)估病情，及時(shí)予以有效治療，是確保治療效果的重要策略。對(duì)于病情嚴(yán)重且復(fù)雜的多發(fā)性骨髓瘤患者而言，發(fā)生腎損傷的風(fēng)險(xiǎn)較大，是影響患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。若能有效預(yù)測(cè)腎損傷發(fā)生，將可能是及時(shí)進(jìn)行透析治療以保護(hù)腎功能的重要依據(jù)。研究[8-9]表明，多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平均存在明顯變化，在患者出現(xiàn)典型癥狀前即出現(xiàn)表達(dá)異常。由此推測(cè)，血清miR-424、sRAGE、CD117水平與多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)。miR-424是一種能夠調(diào)控骨髓中漿細(xì)胞增殖、分化和發(fā)育的非編碼RNA，其表達(dá)明顯上調(diào)與骨髓中漿細(xì)胞惡性增殖有關(guān)[10]。sRAGE是RAGE的抑制性配體，具有抗氧化、抗炎和拮抗腫瘤發(fā)生的作用[11]。CD117是一種由原癌基因編碼的因子，其異常高水平表達(dá)可持續(xù)作用于骨髓中漿細(xì)胞，促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤發(fā)生[12]。在本研究中，觀察組血清miR-424、CD117水平均高于對(duì)照組，sRAGE水平低于對(duì)照組，與侯艷軍等[13]研究結(jié)果相似，提示多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平均異常升高，sRAGE水平異常降低。究其原因，可能miR-424、sRAGE、CD117的表達(dá)水平與多發(fā)性骨髓瘤的病情演變密切相關(guān)。

在多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，骨髓中漿細(xì)胞的惡化增殖始終是促使病情進(jìn)展、影響療效的重要原因。從本研究結(jié)果可知，miR-424、sRAGE、CD117均可能是影響多發(fā)性骨髓瘤病情的關(guān)鍵因子。黃垚等[14]研究表明，miR-424和CD117能夠促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的惡性增殖、轉(zhuǎn)移甚至耐藥，兩者血清表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移活力密切相關(guān)。有研究[15]顯示，sRAGE是RAGE修飾后的產(chǎn)物，可以阻斷RAGE與其配體的結(jié)合，從而影響其促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的功能。研究[16]顯示，隨著多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)展，患者血清sRAGE水平不斷降低。本研究中，不同臨床分期多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中Ⅲ期患者血清miR-424、CD117水平均高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，sRAGE水平低于Ⅰ期和Ⅱ期患者，提示血清miR-424、sRAGE、CD117水平與多發(fā)性骨髓瘤的病情進(jìn)展密切相關(guān)。究其原因，miR-424和CD117參與骨髓內(nèi)漿細(xì)胞惡性增生，而sRAGE能夠抑制骨髓內(nèi)漿細(xì)胞的增殖，減緩多發(fā)性骨髓瘤的進(jìn)展?；诒狙芯拷Y(jié)果，我們有理由認(rèn)為，若多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424和CD117水平均持續(xù)升高且sRAGE水平持續(xù)降低時(shí)，應(yīng)警惕骨髓內(nèi)漿細(xì)胞惡性增生能力不斷增強(qiáng)，病情處于進(jìn)展中[17]。與此同時(shí)，本研究發(fā)現(xiàn)，IgG型患者血清miR-424、CD117水平均高于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者，sRAGE水平均低于IgA型、輕鏈型和非分泌型患者，提示血清miR-424、sRAGE、CD117與患者的免疫特征有關(guān)，為多發(fā)性骨髓瘤的免疫分型提供重要依據(jù)。

腎損傷是多發(fā)性骨髓瘤的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，早期癥狀缺乏特異性，常規(guī)檢測(cè)方法難以在早期準(zhǔn)確地判斷患者是否發(fā)生腎損傷[18]。在臨床實(shí)踐中，部分多發(fā)性骨髓瘤患者因未能及時(shí)檢出腎損傷而錯(cuò)過(guò)最佳的診治時(shí)機(jī)，影響預(yù)后。本研究初步發(fā)現(xiàn)了血清miR-424、CD117水平與多發(fā)性骨髓瘤的侵襲性和髓外浸潤(rùn)密切相關(guān)，而sRAGE的缺失可能加劇骨髓瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和播散，而miR-424、sRAGE、CD117是否與多發(fā)性骨髓瘤患者發(fā)生腎損傷有關(guān)，則有待明確。因此，我們推測(cè)，多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平持續(xù)升高和sRAGE水平持續(xù)降低時(shí)，患者的病情不斷惡化，更容易發(fā)生腎損傷。許德英等[19]研究認(rèn)為，多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平可以反映腫瘤負(fù)荷及病情進(jìn)展程度，兩者水平升高預(yù)示著腫瘤細(xì)胞的侵襲和增殖能力均增強(qiáng)，產(chǎn)生更多的游離輕鏈導(dǎo)致腎損傷。也有研究[20]顯示，血清sRAGE水平與多發(fā)性骨髓瘤的腫瘤負(fù)荷呈負(fù)性關(guān)鍵，能夠反映腎損傷程度。從本研究結(jié)果可知，腎損傷組血清miR-424、sRAGE、CD117水平均高于非腎損傷組，與此同時(shí)，經(jīng)多因素Logistic回歸分析，血清miR-424、sRAGE、CD117均是多發(fā)性骨髓瘤患者發(fā)生腎損傷的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，提示檢測(cè)多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、sRAGE、CD117水平有助于評(píng)估患者發(fā)生腎損傷的風(fēng)險(xiǎn)，與時(shí)杰等[21]研究結(jié)果相似。出現(xiàn)上述結(jié)果的原因，考慮在于miR-424和CD117參與多發(fā)性骨髓瘤的病情進(jìn)展，增加腫瘤負(fù)荷，而sRAGE能夠抑制異常免疫球蛋白生成，保護(hù)腎功能。

綜上所述，多發(fā)性骨髓瘤患者血清miR-424、CD117水平均異常升高，sRAGE水平異常降低，三者與臨床分期、免疫分型及腎損傷密切相關(guān)。本研究創(chuàng)新之處在于揭示了血清miR-424、sRAGE、CD117水平與多發(fā)性骨髓瘤具有密切的關(guān)系，為尋找此病的治療方案提供了新靶點(diǎn)。當(dāng)然，本研究也存在不足之處，如樣本量不多，采取單中心研究，缺乏隨訪數(shù)據(jù)，有待日后擴(kuò)大研究規(guī)模，深入分析miR-424、sRAGE、CD117在多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病機(jī)制中的作用及與患者預(yù)后的關(guān)系，為此病的診治提供高級(jí)別證據(jù)支持。