布氏錐蟲的蛋白質(zhì)翻譯后修飾研究進(jìn)展

李丹陽，張乃文，關(guān)天東，姜 寧

(沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，遼寧沈陽 110866)

布氏錐蟲(Trypanosomabrucei)屬于真核單細(xì)胞原生寄生生物，分為布氏錐蟲岡比亞種(T.bruceigambiense)、布氏錐蟲羅德西亞亞種(T.bruceirhodesiense)以及布氏錐蟲指名亞種(T.bruceibrucei)，前2種主要感染人類，引起人的非洲睡眠病；第3種主要感染動(dòng)物，引起動(dòng)物的那加納病。布氏錐蟲屬于錐體科錐體屬，傳播媒介是采采蠅，屬舌蠅屬。采采蠅通過叮咬吸食體內(nèi)有布氏錐蟲的人類和動(dòng)物，將錐蟲傳遞給新的宿主[1]。感染非洲錐蟲后，患者大部分都會(huì)出現(xiàn)嗜睡、昏迷的癥狀。癥狀通常分為兩個(gè)階段：第一階段為血液淋巴期，在此期間錐蟲寄生繁殖于患者的血液和淋巴液等處，引起血管、淋巴管的周圍炎癥，患者出現(xiàn)精神疲憊、體溫升高、肌肉疼痛、淋巴結(jié)腫大以及貧血等臨床癥狀；第二階段為腦膜炎期，此時(shí)布氏錐蟲已入侵中樞神經(jīng)系統(tǒng)?；颊邔?huì)出現(xiàn)一些神經(jīng)癥狀，比如頭暈頭痛、昏沉欲睡、四肢痙攣等等。如不及時(shí)的進(jìn)行救助和治療，患者將持續(xù)嗜睡昏迷，最終導(dǎo)致身體衰竭，最終死亡[2]。但現(xiàn)有藥物都具有很強(qiáng)的副作用，具有腎毒性和神經(jīng)毒性等，因此尋找新型藥物靶標(biāo)迫在眉睫。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,PTMs)作為布氏錐蟲各項(xiàng)功能的重要調(diào)節(jié)步驟，在其生活史中不可或缺。研究布氏錐蟲蛋白質(zhì)PTMs的種類、對(duì)蟲體的調(diào)控機(jī)制以及修飾的關(guān)鍵位點(diǎn)，可以此為突破口，推進(jìn)以布氏錐蟲為病原的人畜共患疾病的藥物靶點(diǎn)研究和藥物研制，對(duì)現(xiàn)有的抗錐蟲藥物具有十分重要的意義。

1 布氏錐蟲的蛋白質(zhì)翻譯后修飾

許多寄生原蟲擁有復(fù)雜的生活史，在其生活史中，通過相關(guān)的基因表達(dá)調(diào)控，從而改變形態(tài)學(xué)和生理學(xué)的特征。在動(dòng)基體寄生蟲中，尤其是錐蟲，缺乏轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，主要依賴多順反子進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，所以導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄能力有很大程度的受限，但可以通過蛋白質(zhì)翻譯和翻譯后修飾進(jìn)行相關(guān)的調(diào)節(jié)[3]。翻譯后修飾發(fā)生于蛋白質(zhì)生物合成的較后步驟，是指在蛋白質(zhì)合成后所發(fā)生的共價(jià)的、由酶驅(qū)動(dòng)的蛋白質(zhì)修飾?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)有300多個(gè)不同種的PTMs，包括磷酸化、乙?；⒓谆?、泛素化和泛素樣修飾等。PTMs對(duì)于生物體有著廣泛的功能，增加其蛋白質(zhì)組的復(fù)雜性，改變相關(guān)蛋白質(zhì)的定位，促進(jìn)或阻止蛋白質(zhì)之間的相互作用，激活或失活相關(guān)蛋白質(zhì)，同時(shí)還可對(duì)相關(guān)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行細(xì)微地調(diào)整。許多PTMs是可逆的反應(yīng)，可根據(jù)生物體的細(xì)胞周期階段和定位進(jìn)行調(diào)節(jié)，發(fā)生于蛋白質(zhì)生命周期的任何時(shí)刻，這些PTMs的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)是由專門的酶催化。在布氏錐蟲中，基因表達(dá)的調(diào)節(jié)元件RNA結(jié)合蛋白均經(jīng)歷了廣泛的PTMs。布氏錐蟲與伊氏錐蟲親緣關(guān)系很近，這兩種錐蟲在基因組上非常相似，均缺乏存在于多順反子單位中的RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子和基因[4]，但形態(tài)和生活史卻截然不同，它們之間的差異主要在于各自的蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)以及PTMs的動(dòng)態(tài)變化的不同[5]。修飾之后的蛋白質(zhì)在各個(gè)細(xì)胞器中分布廣泛，參與了錐蟲的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、翻譯、RNA處理、轉(zhuǎn)運(yùn)和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換等重要的生物學(xué)過程。

1.1 布氏錐蟲常見的蛋白質(zhì)修飾

1.1.1 磷酸化修飾 蛋白質(zhì)磷酸化對(duì)于細(xì)胞功能是一個(gè)主要的調(diào)節(jié)機(jī)制，通過無凝膠、基于磷酸肽富集的蛋白質(zhì)組學(xué)方法分析發(fā)現(xiàn)大量布氏錐蟲的磷酸化位點(diǎn)，包括在血流型(bloodstream form,BSF)布氏錐蟲細(xì)胞質(zhì)蛋白一小部分的絲氨酸、蘇氨酸以及酪氨酸的磷酸化位點(diǎn)?；?52個(gè)特異的磷酸肽和1024個(gè)磷酸化位點(diǎn)，識(shí)別了491種磷酸蛋白質(zhì)。真核生物的蛋白質(zhì)激酶催化的磷酸化反應(yīng)，在真核細(xì)胞中是最需要研究的翻譯后修飾，因?yàn)榱姿峄{(diào)節(jié)幾乎存在于所有的細(xì)胞過程。在這491種蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)絲氨酸和蘇氨酸殘基都發(fā)生磷酸化，但基因組中缺乏保守的酪氨酸激酶，可是存在一些磷酸化的酪氨酸殘基[6]。在182種蛋白質(zhì)激酶種，布氏錐蟲的激酶補(bǔ)體比其他細(xì)胞或寄生蟲多了一倍以上，表明可逆的蛋白質(zhì)磷酸化所產(chǎn)生的細(xì)胞信號(hào)已經(jīng)演變成了一種精密且主導(dǎo)的成分[7]。

酪氨酸磷酸化在生物體中是一個(gè)相對(duì)富集的翻譯后修飾，但其缺乏酪氨酸激酶。應(yīng)用磷酸酪氨酸特異性蛋白質(zhì)組學(xué)方法從原環(huán)型(procyclic form,PCF)布氏錐蟲全細(xì)胞提取物中鑒定了 34 種含磷酸酪氨酸的蛋白質(zhì)，用抗磷酸酪氨酸抗體的免疫熒光顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)，有細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)(基體和鞭毛)和寄生蟲核仁相關(guān)的酪氨酸磷酸化蛋白濃度的存在。也證實(shí)了酪氨酸磷酸化蛋白的這種定位支持信號(hào)分子的功能受其在布氏錐蟲中的精確定位的觀點(diǎn)。同時(shí)通過免疫熒光顯微鏡對(duì)布氏錐蟲兩個(gè)生命周期階段酪氨酸磷酸化蛋白定位進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)攜帶這種翻譯后修飾的蛋白質(zhì)都集中于細(xì)胞骨架上，特別是軸絲和鞭毛基體。之前也有一項(xiàng)對(duì)綠藻萊茵衣藻的研究表明，酪氨酸磷酸化的糖原合酶激酶3(glycogen synthase 3 kinase,GSK3)活性形式在鞭毛中富集[8]。萊茵衣藻 GSK3 的 RNA 干擾導(dǎo)致細(xì)胞沒有鞭毛，這表明 GSK3 在鞭毛的組成和維持中發(fā)揮作用，并且酪氨酸磷酸化蛋白與鞭毛和基體相關(guān)[9]。

Urbaniak MD通過BSF和PCF布氏錐蟲的全局定量磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究，使用每個(gè)生命周期階段的細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記，識(shí)別了9314個(gè)以前未識(shí)別的磷酸化位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)磷酸化的變化與蛋白質(zhì)豐度的變化呈負(fù)相關(guān)，磷酸化化學(xué)計(jì)量在生命周期階段之間保持不變。蛋白質(zhì)豐度主要保持不變，但磷酸化化學(xué)計(jì)量變化顯著，同一蛋白質(zhì)上的不同磷酸化位點(diǎn)顯示出廣泛變化。這些數(shù)據(jù)表明，差異磷酸化廣泛存在于PCF和BSF之間，并且對(duì)蛋白質(zhì)組的變化具有顯著的復(fù)雜性。布氏錐蟲生命周期階段之間蛋白質(zhì)磷酸化狀態(tài)的變化也為蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)增加了顯著的復(fù)雜性[10]。

1.1.2 乙?；揎?賴氨酸乙?；前l(fā)生在該殘基的Nε-氨基鏈上添加一個(gè)乙?；鶊F(tuán)，消除了其正電荷。在Ariely的試驗(yàn)中，通過免疫印跡和蛋白質(zhì)沉淀等方法，分析BSF和PCF布氏錐蟲中不同的乙酰化特征。研究發(fā)現(xiàn)，與主要能量來源是糖酵解的血流型布氏錐蟲比起來，糖酵解酶在昆蟲中發(fā)育并利用氧化磷酸化來獲得能量的PCF布氏錐蟲的乙?；潭雀遊11]。

試驗(yàn)還研究了乙?；欠裾{(diào)節(jié)布氏錐蟲果糖-1,6-二磷酸醛縮酶，發(fā)現(xiàn)在沒有葡萄糖的情況下培養(yǎng)的PCF寄生蟲中醛縮酶活性降低，并通過體外去乙酰作用部分恢復(fù)；在富含葡萄糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的PCF蛋白提取物的乙酰化導(dǎo)致醛縮酶活性降低。此外，與在葡萄糖存在下培養(yǎng)的那些蟲體相比，沒有葡萄糖的情況下培養(yǎng)的PCF中的醛縮酶乙?；礁摺榱诉M(jìn)一步證實(shí)乙?；淖饔?，在重組布氏錐蟲醛縮酶的催化位點(diǎn)附近，賴氨酸殘基被谷氨酰胺取代。這些谷氨酰胺，尤其是K157，作為醛縮酶活性的關(guān)鍵性殘基，抑制了醛縮酶的活性，改變了靜電表面電位，降低了底物的結(jié)合能力并改變了酶的催化結(jié)構(gòu)。試驗(yàn)證實(shí)了乙?；谡{(diào)節(jié)布氏錐蟲糖酵解途徑中的酶活性中的作用，以及對(duì)寄生蟲代謝的重要性[11]。

組蛋白乙?；虷2A變體似乎存在于幾乎所有含有組蛋白的生物體中，并且在調(diào)節(jié)RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄方面具有高度保守的作用。Kraus等研究通過定量質(zhì)譜法發(fā)現(xiàn)，布氏錐蟲蛋白轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)-核小體高度乙?；瑫r(shí)H4和H2A.Z被HAT2和HAT1乙?；?。HAT2的消耗導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)相關(guān)H4乙?；浇档?，影響了H2A.Z沉積和轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)。相比之下，HAT1的消耗導(dǎo)致H2A.Z和H2B.V乙?；浇档?，對(duì)H2A.Z沉積的影響很小，但使得轉(zhuǎn)錄水平有很大降低[12]，表明H4或H2A.Z乙酰化修飾在H2A.Z沉積和RNA轉(zhuǎn)錄起到不同作用。

1.1.3 泛素化修飾 翻譯后修飾還包括泛素化以及泛素樣修飾物[13]，泛素樣修飾物可以對(duì)許多細(xì)胞進(jìn)行調(diào)節(jié)，包括細(xì)胞周期、轉(zhuǎn)錄、應(yīng)激、DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、核轉(zhuǎn)運(yùn)和自噬等過程[14]。Ubl家族有神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)8(neural precursor cell-expressed developmentally downregulated 8,NEDD8)、小泛素相關(guān)修飾物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)、泛素折疊修飾物1、泛素相關(guān)修飾物1、自噬相關(guān)蛋白8和自噬相關(guān)蛋白12、干擾素刺激基因 15和人類白細(xì)胞抗原-F 相鄰轉(zhuǎn)錄物 10。其中SUMO已經(jīng)在鞭毛原生寄生蟲中得到廣泛的研究，尤其是布氏錐蟲和克氏錐蟲[15]。

在布氏錐蟲中，基于45種蛋白質(zhì)已鑒定出53個(gè)SUMO的受體位點(diǎn)[16]。使PCF布氏錐蟲增殖前的SUMO沉默會(huì)導(dǎo)致蟲體生長抑制、G2/M期有絲分裂停滯及無法正確分離染色體的情況。BSF布氏錐蟲中SUMO的敲除導(dǎo)致了多核細(xì)胞的生長停止和積累。雖然其他的生物在染色體分離依賴DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的SUMO化修飾，但還沒有證據(jù)證明布氏錐蟲相關(guān)同源物受SUMO調(diào)節(jié)。而在缺乏SUMO的BSF布氏錐蟲中，布氏錐蟲拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的著絲粒定位切割活性卻保持完整，這解釋了為什么核分裂仍在這些突變體中進(jìn)行。這些數(shù)據(jù)表明 SUMO 在布氏錐蟲的整個(gè)生活史中具有不同的底物和功能。

在直徑約為2 μm的布氏錐蟲表面，覆有一層厚度為12 nm～15 nm的VSG (variant surface glycoproteins,VSG)，占錐蟲總蛋白的10%[17]，寄生蟲自發(fā)地轉(zhuǎn)換其VSG，這個(gè)過程稱為抗原變異，目的是逃避宿主免疫反應(yīng)，這也是錐蟲病在非洲流行多年的原因之一。布氏錐蟲VSG的表達(dá)和功能也受多種泛素化途徑的控制。布氏錐蟲SUMO共軛物在細(xì)胞核中的富集，是VSG表達(dá)位點(diǎn)(VSG expression site,VSG-ES)所獨(dú)有的，涉及到VSG-ES啟動(dòng)子上游的染色質(zhì)區(qū)域。TbSIZ1/PIAS1被鑒定為SUMO E3連接酶，它介導(dǎo)TbSUMO與VSG-ES染色質(zhì)的結(jié)合，通過集合RNA聚合酶Ⅰ導(dǎo)致其轉(zhuǎn)錄激活[18]。

布氏錐蟲NEDD8可以在整個(gè)細(xì)胞質(zhì)中找到，但它卻在細(xì)胞核和鞭毛中富集。在NEDD8缺失的布氏錐蟲中，出現(xiàn)了鞭毛脫離和有絲分裂缺陷的現(xiàn)象，同時(shí)出現(xiàn)有絲分裂和有絲分裂后細(xì)胞中DNA的異常重新復(fù)制。研究結(jié)果表明，這種Ubl對(duì)錐蟲細(xì)胞核和鞭毛具有重要的作用，并且調(diào)節(jié)了布氏錐蟲的細(xì)胞周期進(jìn)程[19]。

2 布氏錐蟲組蛋白翻譯后修飾

與其他的真核生物不同，錐蟲在其組蛋白中保留了一個(gè)保守的特征——組蛋白及其翻譯后修飾高度保守。組蛋白的PTMs對(duì)布氏錐蟲有較大的影響，可能會(huì)導(dǎo)致其細(xì)胞或器官的活動(dòng)發(fā)生有關(guān)變化，錐蟲中組蛋白PTMs的多樣性揭示了在組蛋白功能調(diào)節(jié)中的動(dòng)態(tài)作用。組蛋白上氨基酸的甲基化、磷酸化以及乙?；舫霈F(xiàn)改變，將會(huì)導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞的周期進(jìn)程發(fā)生變化。

除了VSG表達(dá)外，錐蟲中的幾個(gè)生物過程也涉及了組蛋白PTMs。已有研究發(fā)現(xiàn)H3K76二甲基化和三甲基化以及相關(guān)的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶DOT1A和DOT1B。組蛋白的甲基化在錐蟲DNA復(fù)制和細(xì)胞周期的進(jìn)程中發(fā)揮作用，并且觀察到H3K76的缺失會(huì)導(dǎo)致布氏錐蟲的細(xì)胞周期缺陷[20]。進(jìn)一步的研究表明，在DNA沒有完成合成的情況下，DOT1A的消耗會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞進(jìn)行核分裂，而DOT1A的過度表達(dá)會(huì)與持續(xù)合成的DNA相結(jié)合，從而導(dǎo)致非整倍性[21]，布氏錐蟲組蛋白去乙酰化酶SIR2相關(guān)蛋白的過度表達(dá)導(dǎo)致對(duì)DNA損傷劑的敏感性增加。

在動(dòng)基體目中，布氏錐蟲也是唯一有DNA甲基化修飾的物種[22]。與其他真核生物相似，布氏錐蟲的核小體也都是由核心組蛋白H2A、H2B、H3、H4以及對(duì)應(yīng)的變體組成，但進(jìn)行序列比對(duì)時(shí)，布氏錐蟲與高等真核生物組蛋白相比，C端相對(duì)保守，N端差異較大，尤其是H2A和H2B。H2A的C端有過度乙酰化的趨勢(shì)，H2A、H2B和H4的N端處的丙氨酸存在單甲基化位點(diǎn)。

3 錐蟲PTMs與相關(guān)功能聯(lián)系

3.1 蛋白質(zhì)PTMs與錐蟲的運(yùn)動(dòng)適應(yīng)性

鞭毛蛋白PTM組的變異可以反映出寄生蟲之間運(yùn)動(dòng)能力的差異。錐蟲鞭毛包含一個(gè)典型的9+2微管軸絲，旁鞭毛桿沿著該軸絲運(yùn)行[23]。軸絲從基底體發(fā)出，并通過鞭毛附著區(qū)與細(xì)胞膜橫向連接。伊氏錐蟲鞭毛每個(gè)部分的大多數(shù)蛋白質(zhì)在伊氏錐蟲中被高度修飾或完全修飾，進(jìn)而也解釋了為什么與布氏錐蟲相比，伊氏錐蟲在受限的環(huán)境中具有更靈活的外觀和更強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)適應(yīng)性[24]。內(nèi)臂動(dòng)力蛋白(IAD5-1,Tb927.7.920)在伊氏錐蟲中高度表達(dá)，敲除后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞運(yùn)動(dòng)缺陷。IAD5-1的K1,134在布氏錐蟲中被乙?；?，在伊氏錐蟲中則被2-羥基異丁酰化。

3.2 蛋白質(zhì)PTMs與錐蟲的能量代謝和特異性氧化還原

糖酵解途徑是錐蟲主要的能量代謝途徑[25]，其中參與的酶大部分都有多重修飾，其中8個(gè)PTMs在糖酵解途徑中顯著富集。在伊氏錐蟲和布氏錐蟲糖酵解的過程中最普遍的是發(fā)生在3種限速酶上的乙酰化和 2-羥基異丁?；?。此外，還觀察到許多 PTMs出現(xiàn)在酶的關(guān)鍵殘基處。例如，1,6-二磷酸果糖醛縮酶的K117可以被6種類型的PTM修飾，烯醇化酶的N338被N-糖基化。

作為早期分支的真核生物，錐蟲已經(jīng)以一種獨(dú)特的基于色氨硫酮的硫醇氧化還原體系的方式進(jìn)化[26]。色氨硫酮還原酶被認(rèn)為是抗錐蟲病藥物的靶點(diǎn)，可將色氨硫酮二硫化物再循環(huán)回二氫色氨硫酮，并且錐蟲毒素(TXN)催化電子從二氫色氨硫酮轉(zhuǎn)移到不同的蛋白質(zhì)靶標(biāo)，這些靶標(biāo)通常涉及多種功能，例如細(xì)胞增殖和抗氧化防御的能力。已發(fā)現(xiàn)多個(gè)與TryS相關(guān)的PTM，TryR和TXN以及TXN1和TXN2在布氏錐蟲中的表達(dá)高于伊氏錐蟲。

3.3 蛋白質(zhì)PTMs與布氏錐蟲VSG

布氏錐蟲VSG的表達(dá)和功能也受多種泛素化途徑的控制，已鑒定了491個(gè)布氏錐蟲蛋白質(zhì)上的1204個(gè)磷酸化位點(diǎn)，并使用抗磷酸酪氨酸抗體鑒定了PCF布氏錐蟲中的34個(gè)磷酸化酪氨酸位點(diǎn)。另一項(xiàng)研究報(bào)告了布氏錐蟲階段特定的磷酸化變化，并表明差異磷酸化在PCF布氏錐蟲和BSF布氏錐蟲之間普遍存在。在最近的實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到PCF布氏錐蟲的210種蛋白質(zhì)中有288個(gè)賴氨酸乙酰化位點(diǎn)，在BSF的285種蛋白質(zhì)中檢測(cè)到380個(gè)位點(diǎn)，尤其是大多數(shù)賴氨酸乙?；?K-ac) 蛋白在代謝過程中富集，表明它們對(duì)寄主的寄生蟲適應(yīng)至關(guān)重要[27]。這些檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步解釋了錐蟲生長的調(diào)控機(jī)制以及錐蟲病的發(fā)病機(jī)制，說明參與蛋白質(zhì)修飾和去修飾的分子是生物制藥發(fā)展的重要目標(biāo)。

4 展望

布氏錐蟲缺乏轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，生活史中主要依靠蛋白質(zhì)翻譯和翻譯后修飾對(duì)細(xì)胞功能進(jìn)行相關(guān)調(diào)節(jié)，研究不同種類的修飾對(duì)布氏錐蟲功能的影響是有必要的。目前已對(duì)蛋白PTMs進(jìn)行了廣泛的分類，但關(guān)于其功能意義的研究還有大部分空白需要填補(bǔ)。錐蟲表觀遺傳學(xué)的研究在近幾年有廣泛擴(kuò)大的趨勢(shì)，尤其是組蛋白的翻譯后修飾，作為錐蟲遺傳信息的第二媒介，起到調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的作用。理解蛋白質(zhì)各種修飾的功能意義以及調(diào)控機(jī)制，有利于對(duì)錐蟲相關(guān)生理功能以及針對(duì)其生物藥物靶點(diǎn)的研究奠定理論基礎(chǔ)。

為了研究各種修飾的功能和意義，可以通過敲除相關(guān)變體以及高分辨率質(zhì)譜等方法進(jìn)行研究和檢測(cè)，分析修飾對(duì)蟲體功能、表型等的影響。同時(shí)還可對(duì)不同種類的錐蟲樣本進(jìn)行定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析、免疫印跡、免疫沉淀等試驗(yàn)，分析相關(guān)修飾位點(diǎn)和修飾特征，繪制PTM組學(xué)圖譜，通過研究不同修飾所造成的相關(guān)影響，進(jìn)而推斷這些修飾進(jìn)行了何種的調(diào)節(jié)以及何種程度的調(diào)節(jié)，以便深入推進(jìn)對(duì)支持布氏錐蟲生活史和過程的生物學(xué)機(jī)制的了解、錐蟲重要藥物靶點(diǎn)的研究以及抗錐蟲藥物的研發(fā)。