Kisspeptin在妊娠期相關(guān)疾病中的研究進展

郝穎新

有學(xué)者1996年在美國賓夕法尼亞州的好時（Hershey），發(fā)現(xiàn)Kisspeptin及其編碼基因KISS1[1]。學(xué)者們早期對Kisspeptin的研究主要在惡性腫瘤領(lǐng)域，發(fā)現(xiàn)其為惡性黑色素瘤等多種惡性腫瘤的人類轉(zhuǎn)移抑制因子，KISS1的名字亦來源于此，KISS1中的術(shù)語“SS”表示“抑制序列”。Cao Y等[2]發(fā)現(xiàn)Kisspeptin的結(jié)合受體為一種孤兒G蛋白耦聯(lián)受體GPR-54（又稱KISS1R）。越來越多的研究也表明，Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)在人體多種組織和器官中表達，其可在青春期發(fā)動、促性腺激素分泌、排卵和男性精子成熟等生理活動中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[1-2]。特別是Kisspeptin/GPR54在母胎界面的表達，直接參與生理妊娠過程[1-3]。這表明，循環(huán)Kisspeptin具有成為妊娠相關(guān)疾病的生物學(xué)標(biāo)志物的潛力。

1 Kisspeptin及其受體的簡介

Kisspeptin是由位于1號染色體長臂上的KISS1基因編碼的多肽，該多肽被稱為前體Kisspeptin，包含145個氨基酸，該前體Kisspeptin不穩(wěn)定且無生物活性，然后在細胞內(nèi)裂解后形成4種生物活性肽，由于結(jié)構(gòu)的相似性和源自前肽的共同來源，因此用“Kisspeptins”描述這一肽家族[1]。根據(jù)氨基酸數(shù)量的不同，Kisspeptins分為Kisspeptin-10、Kisspeptin-13、Kisspeptin-14、Kisspeptin-54， 這 些 生 物活性肽具有共同的C末端區(qū)域，其中包含Arg-Phe-NH29（RF-NH2）序列，這是與其受體結(jié)合并激活的重要區(qū)域，Kisspeptin-54是KISS1基因編碼的主要產(chǎn)物，Kisspeptin-54可以進一步裂解成Kisspeptin-14、Kisspeptin-13、Kisspeptin-10[4]。GPR54受體是一種7次跨膜的G蛋白耦聯(lián)受體，是細胞外信號向細胞內(nèi)傳遞的重要媒介，其屬于Gq/11蛋白相關(guān)受體的亞組，先后在鼠及人的大腦中發(fā)現(xiàn)，人類的GPR54受體的同源基因被克隆，并被認為是KISS1基因編碼的多肽受體。在命名方面，GPR54受體有不同的名稱，包括KISS1R、AXOR12、GPR54、CPPB1、hOT7T175和HH8等，因為不同的研究小組都獨立地發(fā)現(xiàn)了它的存在或?qū)λM行了研究[1]。

GPR54受到Kisspeptins的刺激后，磷酸化的Gq/11蛋白激活磷脂酶（phospholipase C，PLC），導(dǎo)致各種第二信使的激活或形成，包括三磷酸肌醇（inositol-triphosphate，IP3）、二酰甘油（diacylglycerol，DAG）和蛋白激酶 C（protein kinase C，PKC），這些物質(zhì)不斷積累，進而改變細胞質(zhì)內(nèi)Ca2+濃度，改變滲透性[1，5]。同時PKC的激活也可以促進細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2，ERK1/2）的磷酸化，從而發(fā)揮信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用[5]。總之，Kisspeptin與其受體結(jié)合后可能通過PLC-PKC-Ca2+、PLC-PKC-ERK1/2信號傳導(dǎo)等途徑發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)[1，5]。

在過去的幾十年里，很多研究證明了Kisspeptins及其受體GPR54在神經(jīng)內(nèi)分泌-生殖軸中的生理作用。Kisspeptin神經(jīng)元位于下丘腦的兩個區(qū)域內(nèi)，即前腹側(cè)室周核（anteroventral periventricular nucleus，AVPV）和弓狀核（arcuate nucleus，ARC），它們分別負責(zé)介導(dǎo)雌激素對GnRH/促性腺激素分泌的正反饋和負反饋作用，Kisspeptin主要在GnRH神經(jīng)元上游起作用，將性激素的反饋作用和代謝信號傳遞給生殖軸，實現(xiàn)對女性生殖功能的調(diào)節(jié)[6-7]。到目前為止，Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)在女性生殖領(lǐng)域有重要意義，Kisspeptin在女性下丘腦性閉經(jīng)、多囊卵巢綜合征、女性不孕癥等疾病及輔助生殖領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用[6-8]。

同時，人們通過對哺乳動物胎盤的研究發(fā)現(xiàn)Kisspeptin在母胎界面的表達，并且發(fā)現(xiàn)在妊娠女性血漿中Kisspeptin的激增現(xiàn)象[1，3]。通過動物實驗和進一步的臨床研究發(fā)現(xiàn)，Kisspeptin/GPR54信號傳導(dǎo)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)胎盤滋養(yǎng)細胞的入侵、胚胎植入等過程中發(fā)揮作用，因此，Kisspeptin在生理妊娠和妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展中都有重要的意義，有望成為相關(guān)疾病的生物學(xué)標(biāo)志物[1-3]。

2 Kisspeptin在生理妊娠中的作用

2.1 Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)在胎盤形成中的調(diào)節(jié)

人類胎盤是一個高度專業(yè)化的器官，它構(gòu)成了母親和胎兒之間的接口，為胎兒提供營養(yǎng)，并排泄胎兒的廢物。胎盤將代謝產(chǎn)物釋放到母體和胎兒的循環(huán)中。此外，胎盤還有多種妊娠調(diào)節(jié)功能，包括代謝、胎兒生長、分娩和其他與妊娠有關(guān)的功能[1]。絨毛膜外滋養(yǎng)層細胞（extravillous trophoblast cells，EVTs）以遷移的方式完成對孕婦子宮的侵襲，這是保證胎盤和胎兒血液供應(yīng)以及妊娠成功的重要條件[9]。EVTs通過其分泌的基質(zhì)金屬蛋白酶（matrixmetalloproteinase，MMP）來降解宿主組織細胞外基質(zhì)從而侵入子宮間質(zhì)[9]，MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-10、MMP-14編碼基因表達可以被Kisspeptin進行下調(diào)，同時金屬蛋白酶組織抑制劑（tissue inhibitorsof metalloproteinases，TIMP）-1和 TIMP-3的編碼基因表達可以被Kisspeptin上調(diào)，這些調(diào)節(jié)都可以抑制EVTs的侵襲[3]。EVTs侵入子宮間質(zhì)后，侵襲血管內(nèi)滋養(yǎng)細胞[10]，血管內(nèi)皮生長因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGF-A）是一種重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，能夠刺激血管發(fā)生和血管生成。已有研究證實其參與子宮螺旋動脈重塑過程，關(guān)于Kisspeptin的研究發(fā)現(xiàn)其有下調(diào)VEGF-A的編碼基因表達的作用，這可能是Kisspeptin調(diào)節(jié)子宮螺旋動脈重塑的機制之一[3]。另外，Kisspeptin還可以通過增加EVT對Ⅰ型膠原蛋白（人類胎盤的主要成分）的黏附性來抑制其遷移[1]。綜上，Kisspeptin抑制EVT遷移的機制，保證了胎盤形成過程中的平衡，對母體子宮螺旋動脈的侵襲和重塑有重要的調(diào)節(jié)作用。

2.2 Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)在胚胎植入中的調(diào)節(jié)

胚胎植入是一個復(fù)雜且可調(diào)節(jié)的過程，從囊胚附著于子宮上皮開始，逐步侵入下面的基質(zhì)細胞，胚胎植入涉及三個不同的步驟：附著、黏附和侵入[10]。動物實驗發(fā)現(xiàn)，在小鼠子宮內(nèi)膜組織中，Kisspeptin可以在妊娠的第4天引發(fā)子宮內(nèi)p38和ERK1/2的磷酸化，而且在某種小干擾RNA減弱KISS1基因的表達時，基質(zhì)細胞蛻膜化的進展被明顯阻止[1]。有研究表明，Kisspeptin可以增加小鼠囊胚對膠原蛋白的黏附，這可能是由于MMP（特別是MMP-2和MMP-9）表達減少造成的，這一機制可能是通過ERK1/2和蛋白激酶C信號通路的調(diào)節(jié)來實現(xiàn)的[3]。這些研究表明，囊胚和子宮內(nèi)膜均受到Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，從而影響胚胎植入的過程。胚胎植入過程還受到雌二醇（estradiol，E2）和孕酮（progesterone，P）的嚴格調(diào)節(jié)，其中雌激素受體α起到調(diào)節(jié)平衡的作用。在一項小鼠模型的研究中，在植入的分子調(diào)控中，GPR54受體可以負向調(diào)節(jié)雌激素受體α的作用，這在妊娠早期具有重要作用[11]。白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）在妊娠早期由子宮分泌，被認為啟動了胚胎附著和基質(zhì)細胞蛻變，這對于妊娠早期胚胎植入至關(guān)重要。動物實驗中敲除KISS1基因的小鼠，LIF表達減少，表明Kisspeptin影響胚胎植入過程的機制也可能通過上調(diào)LIF水平來實現(xiàn)[1，3]。在人類試驗中發(fā)現(xiàn)，與正常妊娠相比，多次移植失敗的育齡女性Kisspeptin、GPR54和LIF的表達均減少，這說明Kisspeptin/GPR54可能參與人類胚胎植入過程[5]。

2.3 Kisspeptin的循環(huán)水平變化

滋養(yǎng)細胞分泌Kisspeptin的過程在妊娠早期胚胎植入時就已經(jīng)開始，已有的研究也證實，與非妊娠女性相比，妊娠女性血漿中的Kisspeptin濃度在妊娠過程中急劇增加[3]。然而，有一個有趣的現(xiàn)象，KISS1基因在胎盤的表達似乎與循環(huán)中Kisspeptin的水平不一致，在早期胎盤和足月胎盤的研究中，二者的表達水平或者沒有明顯差異，或者在早期胎盤中表達水平更高[1]。這些研究說明，KISS1基因在胎盤中的表達水平和循環(huán)血漿中的Kisspeptin水平存在差異[1，3]。可能原因是，循環(huán)中Kisspeptin的急劇增加是伴隨著胎盤總質(zhì)量的增加和整個妊娠期滋養(yǎng)層細胞總數(shù)的增加而發(fā)生的[1]。

還需要注意的是，Kisspeptins是一系列多肽，包括 Kisspeptin-54、Kisspeptin-14、Kisspeptin-13和Kisspeptin-10。這些研究似乎只檢測到血漿中的一種Kisspeptin肽，而且不能排除這些研究中使用的抗體與其他RF酰胺相關(guān)肽（RF amide relatedpeptides，RFRP）交叉反應(yīng)的可能性[1]。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，由KISS1基因編碼剪切的Kisspeptin的多種生理亞型已經(jīng)從胎盤滋養(yǎng)層中分離出來，妊娠期間外周血循環(huán)中主要的Kisspeptin異構(gòu)體被認為是Kisspeptin-54[4]。然而，在體外實驗中，在滋養(yǎng)細胞表達的生理水平的GPR54受體中，顯示只有Kisspeptin-10通過與其受體GPR54的結(jié)合增加了細胞內(nèi)Ca2+水平。在到達外周血循環(huán)之前，可能是Kisspeptin-54剪切后形成的Kisspeptin-10在細胞水平上起作用。因此，進一步分析特定Kisspeptin異構(gòu)體的數(shù)據(jù)也將是有意義的[3]。

Hu KL等[1]的研究中，為了排除與其他RFRP交叉反應(yīng)的可能性，使用了更為特異和敏感的抗體來檢測血漿中的Kisspeptin，其研究表明血漿Kisspeptin水平與孕周具有明顯相關(guān)性。最新的研究對血漿Kisspeptin水平在整個孕期的變化與妊娠期相關(guān)疾病進行了探討，如流產(chǎn)、胎兒生長受限（fetal growth restriction，F(xiàn)GR）、妊娠期高血壓疾病、子癇前期、妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）等，進一步證明了Kisspeptin在整個妊娠期的水平變化，有望成為預(yù)測妊娠期相關(guān)疾病的標(biāo)志物[12]。

3 Kisspeptin在妊娠期相關(guān)疾病中的應(yīng)用

3.1 Kisspeptin在預(yù)測早期流產(chǎn)中的應(yīng)用

流產(chǎn)是妊娠期間常見的并發(fā)癥，β-人絨毛膜促性腺激素（β-hunman chorionic gonadotropin，β-hCG）是目前使用最為廣泛的預(yù)測流產(chǎn)的生物學(xué)標(biāo)志物之一。整個妊娠期間Kisspeptin類似于β-人絨毛膜促性腺激素（β-hCG），可以分泌到外周血循環(huán)中。

早期的臨床研究發(fā)現(xiàn)，與非妊娠女性相比，妊娠女性血漿中的Kisspeptin濃度在妊娠前3個月迅速增加，到第3個月甚至可以達到妊娠1個月時的7 000倍以上[3]。越來越多的研究表明，Kisspeptin濃度隨著妊娠進展呈正相關(guān)改變，而且在流產(chǎn)孕婦中水平顯著降低，提示Kisspeptin有可能作為流產(chǎn)的生物學(xué)標(biāo)志物[1]。一項對流產(chǎn)患者的胎盤和胎膜組織的免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，自然流產(chǎn)患者的KISS1表達水平顯著降低，進一步說明KISS1及其編碼產(chǎn)物Kisspeptin在植入和妊娠維持中起到了重要作用[13]。最新的一項研究顯示，流產(chǎn)孕婦血漿樣本經(jīng)校正的Kisspeptin和β-hCG水平分別比健康孕婦低79%和70%，Kisspeptin和β-hCG兩種標(biāo)志物聯(lián)合用于診斷妊娠早期流產(chǎn)的受試者工作曲線（receiver operating curve，ROC）下面積為 0.916（95%CI0.886～0.946），在孕周≥8周的孕婦中，Kisspeptin的診斷性能則優(yōu)于β-hCG，聯(lián)合Kisspeptin、β-hCG和孕周的預(yù)測流產(chǎn)模型診斷準確率為83%～87%[14]。另外一項Meta分析顯示了相似的結(jié)論，該分析納入了5項研究，包含3項臨床薈萃分析，顯示在妊娠6周后測量血漿Kisspeptin的曲線下面積（area under curve，AUC）為 0.902（0.866，0.937），在敏感性方面，Kisspeptin的 AUC=0.881（0.855～ 0.906），β-hCG的AUC=0.834（0.785～0.883）[15]。因此，Kisspeptin在區(qū)分妊娠6周后流產(chǎn)和正常妊娠方面具有與β-hCG相當(dāng)甚至更高的準確性。綜上，通過不斷深入地研究，特別是與β-hCG的聯(lián)合應(yīng)用，Kisspeptin越來越顯示出作為妊娠早期流產(chǎn)的生物學(xué)標(biāo)志物的優(yōu)勢[13-15]。

3.2 Kisspeptin在預(yù)測子癇前期中的應(yīng)用

子癇前期（pre-eclampsia，PE）是一種嚴重的產(chǎn)科并發(fā)癥，發(fā)病機制尚未完全清楚，可能與血管功能障礙相關(guān)，但更可能的是滋養(yǎng)層異常侵襲導(dǎo)致螺旋動脈異常重塑，從而導(dǎo)致胎盤功能受損的結(jié)果[10]。

早期一項回顧性病例研究發(fā)現(xiàn)，與無合并癥的孕婦相比，發(fā)展為PE的孕婦孕中期（16～20周）Kisspeptin水平顯著降低[1]。隨后該研究組的1項納入體質(zhì)量因素的前瞻性研究發(fā)現(xiàn)PE孕婦以及肥胖孕婦中，外周血循環(huán)中的Kisspeptin水平降低[3]。Hu KL等[1]進一步研究發(fā)現(xiàn)，合并PE的孕婦中，胎盤Kisspeptin表達較高，外周血循環(huán)中的Kisspeptin水平較低，這說明胎盤Kisspeptin的表達與血漿中不一致。近期的2項研究有與之相似的結(jié)論，妊娠合并糖尿病被認為是子癇前期的高危因素，Kapustin RV等[16]的研究對這一類孕婦的胎盤組織進行免疫組化分析，發(fā)現(xiàn)合并糖尿病的孕婦Kisspeptin和GPR54水平在胎盤組織中較高，這可能在胎盤形成過程中起到調(diào)節(jié)作用，進而導(dǎo)致PE的發(fā)生。Fang L等[17]的研究發(fā)現(xiàn)，在PE孕婦中，由表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）介導(dǎo)的ID3蛋白的表達下調(diào)，導(dǎo)致胎盤KISS1的高表達。這些結(jié)果表明KISS1可能作為一種局部因子，以自分泌或旁分泌的方式調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細胞的侵襲，這揭示了PE發(fā)展的可能潛在機制，而外周血循環(huán)中Kisspeptin水平的降低是由于胎盤功能障礙所引起的變化[3]。近期的一項納入7項臨床薈萃的研究表明，PE孕婦與對照組相比，外周血循環(huán)中的Kisspeptin的水平更低，同時孕婦體質(zhì)量指數(shù)、舒張壓和收縮壓更高，新生兒分娩孕周和出生體質(zhì)量更低[18]。另一項臨床研究中，雖然沒有發(fā)現(xiàn)血漿Kisspeptin與子癇前期的嚴重程度有明顯關(guān)系，但研究者認為PE孕婦的合并癥可能對血漿Kisspeptin水平產(chǎn)生不同的影響[12]。因此，人們對于Kisspeptin和PE的相關(guān)性臨床研究越來越多地考慮納入并發(fā)癥、體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）等影響因素。進一步的深入研究也顯示，與正常血壓孕婦相比，PE孕婦外周血循環(huán)中Kisspeptin-10水平在孕中期（20～27周）和孕晚期（28～40周）較低，外周血循環(huán)中的Kisspeptin-10水平在診斷PE時有著較高的靈敏度和特異性，孕中期最佳截斷值為1.98 ng/mL，孕晚期最佳截斷值為2.18 ng/mL[19]。因此，檢測孕婦血漿Kisspeptin水平可能是一種有效的篩查方法。

3.3 Kisspeptin在預(yù)測妊娠期糖尿病中的應(yīng)用

GDM是產(chǎn)科常見的并發(fā)癥之一。正常妊娠狀態(tài)下，孕婦母體通過減少對葡萄糖的利用，以此保證對胎兒的葡萄糖供給，從而導(dǎo)致孕婦的生理性胰島素抵抗，這是一種多激素調(diào)節(jié)下的代謝適應(yīng)性變化，其中垂體激素、胎盤分泌的多種激素（如雌激素、孕激素、人胎盤催乳素等）和胰腺分泌的多種激素（如胰島素、胰高血糖素等）都發(fā)揮重要作用，當(dāng)孕婦胰島素抵抗加重，超過胰島β細胞的代償能力時，GDM就有發(fā)生的可能性[20]。

在非妊娠人群中的研究發(fā)現(xiàn)，Kisspeptin間接通過性腺激素和（或）直接通過大腦、胰腺和棕色脂肪組織中的GPR54受體發(fā)揮其代謝調(diào)節(jié)作用[1]。有介入性人體研究表明，外周血循環(huán)中Kisspeptin水平與胰島素分泌和胰島素抵抗存在關(guān)聯(lián)，可能在調(diào)節(jié)葡萄糖穩(wěn)態(tài)中具有作用[21]。在GDM孕婦中的研究發(fā)現(xiàn)，Kisspeptin及其受體在胰腺中表達，并且Kisspeptin能增強人和動物胰島中葡萄糖刺激的胰島素分泌，這表明Kisspeptin可能介導(dǎo)葡萄糖刺激胰島素分泌的機制[22]。近期的一項包含人類試驗和動物實驗的研究發(fā)現(xiàn)，在孕婦的隊列研究中，涉及91例妊娠26～34周的孕婦，GDM孕婦與非GDM孕婦相比，血漿中Kisspeptin水平較低，同時該研究組進行的動物實驗發(fā)現(xiàn)，對妊娠小鼠的內(nèi)源性Kisspeptin進行藥理學(xué)阻斷會導(dǎo)致其葡萄糖穩(wěn)態(tài)受損，對β細胞特異性GPR54受體敲除的小鼠在妊娠期間表現(xiàn)出葡萄糖不耐受，這些數(shù)據(jù)表明Kisspeptin可能在增加胰腺β細胞數(shù)量和增強功能方面發(fā)揮作用[23]。因此，胎盤分泌Kisspeptin減少，則可能導(dǎo)致Kisspeptin依賴性胰島β細胞受損，這也可能是孕婦GDM發(fā)生、發(fā)展的一個因素。Musa E等[22]研究發(fā)現(xiàn)，GDM患者胎盤Kisspeptin和GPR54表達較高，外周血循環(huán)中Kisspeptin低表達，并且評估了Kisspeptin在胰島素分泌、抵抗和食欲調(diào)節(jié)中的作用。通過以上研究，Kisspeptin刺激的胰島β細胞的分泌，可能是對抗母體外周胰島素抵抗的一種代償機制，當(dāng)Kisspeptin/GPR54信號傳導(dǎo)失敗時，就可能出現(xiàn)葡萄糖不耐受。雖然妊娠女性中Kisspeptin調(diào)節(jié)胰腺β細胞功能的機制還需要深入研究，但是Kisspeptin對GDM的預(yù)測作用仍值得期待[22-24]。

4 結(jié)語

本文總結(jié)了Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)在胚胎植入和妊娠早期的調(diào)節(jié)作用，以及外周血循環(huán)中Kisspeptin的水平在流產(chǎn)、PE和GDM等妊娠期相關(guān)疾病中的研究進展。在預(yù)測流產(chǎn)方面，血漿Kisspeptin作為診斷宮內(nèi)妊娠患者流產(chǎn)的潛在生物學(xué)標(biāo)志物，其與β-hCG的組合相比單獨的任何一種檢測都提供了更高的診斷準確性[13-15]，而且，血漿Kisspeptin結(jié)合臨床其他指標(biāo)，可以進一步對流產(chǎn)風(fēng)險進行分層，個別研究對異位妊娠也進行了初步探索，但與目前常用的β-hCG聯(lián)合妊娠早期超聲檢查相比并無優(yōu)勢[14]。PE孕婦中外周血循環(huán)Kisspeptin水平的降低，得到越來越多的研究支持[16-19]。但是PE孕婦常常合并肥胖或者其他合并癥，循環(huán)Kisspeptin水平可能會受此影響而發(fā)生變化，所以筆者需要更多的前瞻性研究來證實Kisspeptin在PE中的診斷作用[12]。Kisspeptin在調(diào)節(jié)代謝和葡萄糖刺激胰島素分泌中的作用，可能是導(dǎo)致GDM孕婦外周血循環(huán)中Kisspeptin水平與非GDM孕婦相比有所降低的原因。因此，Kisspeptin可作為預(yù)測GDM的生物學(xué)標(biāo)志物之一[22-24]。

盡管孕婦中存在一些干擾因素，如并發(fā)癥、肥胖等，會對外周血循環(huán)中的Kisspeptin水平產(chǎn)生影響，但是，Kisspeptin是妊娠期胎盤分泌的重要物質(zhì)，胎盤發(fā)育異常或功能障礙引發(fā)的妊娠相關(guān)疾病，會導(dǎo)致外周血循環(huán)中Kisspeptin水平異常改變，因此檢測外周血循環(huán)中Kisspeptin水平有可能預(yù)測妊娠期相關(guān)疾病的發(fā)生，該指標(biāo)有望成為預(yù)測妊娠期相關(guān)疾病的生物學(xué)標(biāo)志物。