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    響應面法優(yōu)化仙人掌果色素提取工藝研究

    2022-11-18 07:41:40趙旭東夏良躍蔣變玲
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2022年19期
    關鍵詞:面法色素光度

    趙旭東,夏良躍,蔣變玲

    (宿州學院生物與食品工程學院,安徽宿州 234000)

    仙人掌為多年生常綠肉質(zhì)灌木狀植物[1]。其果實中含有豐富天然色素及多糖、黃酮、蛋白質(zhì)、維生素和果膠等[2]。研究表明,仙人掌果具有抗氧化、降“三高”等功效,可提高人體免疫力[3]。

    但由于天然色素提取效率低、成本較高,目前多數(shù)食品加工仍采用合成色素。仙人掌果中的色素含量多,如果能夠加工利用,所帶來的經(jīng)濟效益將會十分可觀[4]。如何高效提取仙人掌果色素,就顯得尤為重要。

    通過響應面法優(yōu)化試驗研究醇法提取仙人掌果色素最佳工藝,較為高效地提取仙人掌果色素,可以進一步為仙人掌果色素的研究提供幫助。

    1 材料與方法

    1.1 儀器與設備

    電熱恒溫水浴鍋,冠森生物科技有限公司產(chǎn)品;pH 計,南京卓瑪機電有限公司產(chǎn)品;紫外可見分光光度計,青島聚創(chuàng)環(huán)?;鶊F有限公司產(chǎn)品。

    1.2 材料與試劑

    新鮮的綠皮紅心仙人掌果,購自海南三亞;70%乙醇;鹽酸。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 提取仙人掌果紅色素

    (1)試驗流程。第1 步:選取新鮮無腐爛變質(zhì)的仙人掌果去除表面毛刺,洗凈后晾干備用。第2 步:去皮去籽。第3 步:放入研缽中搗碎,得到果漿。第4 步:將處理后的果肉倒入100 mL 錐形瓶中,加入70%乙醇,并在恒溫水浴中加熱。第5 步:待提取液冷卻之后,以轉速3 000 r/min 離心,得到上清液。第6 步:取上清液,使用70%乙醇定容至25 mL,于波長530 nm 處測定其吸光度[5-6]。

    1.3.2 單因素試驗

    (1)料液比的選定。將處理后的果漿分別裝入5 個100 mL 的錐形瓶中,固定pH 值為5,溫度50 ℃,時間60 min,分別考查不同料液比(1∶10,1∶15,1∶20,1∶25,1∶30)對仙人掌果色素提取的影響。

    (2)提取溫度的選定。固定料液比為1∶20,pH 值為5,提取時間60 min,分別考查不同溫度(20,30,40,50,60 ℃)對仙人掌果色素提取的影響。

    (3)pH 值的選定。固定料液比為1∶20,溫度50 ℃,時間60 min,分別考查不同pH 值(2,3,4,5,6)對仙人掌果色素提取的影響。

    (4)提取時間的選定。固定料液比為1∶20,pH 值為5,50 ℃條件下分別考查不同提取時間(30,40,50,60,70 min)對仙人掌果色素提取的影響。

    1.3.3 響應面優(yōu)化試驗

    在單因素試驗基礎上,選取對仙人掌果色素提取量影響較大的3 個因素進行響應面優(yōu)化試驗。

    響應面試驗設計見表1。

    表1 響應面試驗設計

    1.3.4 數(shù)據(jù)處理

    使用Excel 2010 和Design Expert 8.0 等對所得數(shù)據(jù)進行整理和分析。

    2 結果與分析

    2.1 單因素試驗結果分析

    2.1.1 料液比的選定

    料液比對仙人掌果色素提取的影響見圖1。

    圖1 料液比對仙人掌果色素提取的影響

    由圖1 可知,料液比為1∶10 和1∶15 時,隨著加入的乙醇的體積增加,吸光度先上升,可能是由于乙醇體積在適當范圍內(nèi)增大,加強了色素的提取能力。料液比為1∶15 時,吸光度達到最大,此時的提取能力最強,而隨著溶劑體積的繼續(xù)增大,吸光度逐漸下降,可能是由于仙人掌果漿遠少于乙醇,降低其溶出能力[7]。因此選取料液比1∶10,1∶15,1∶20 進行響應面法優(yōu)化。

    2.1.2 提取溫度的選定

    提取溫度對仙人掌果色素提取的影響見圖2。

    圖2 提取溫度對仙人掌果色素提取的影響

    由圖2 可知,隨著溫度的上升,吸光度逐漸增大。可能是由于溫度的升高,加強了色素的溶出能力,當溫度達到40 ℃時,此時吸光度最大,提取能力最強。溫度繼續(xù)上升,吸光度逐漸下降,由于隨著溫度的不斷升高,過高的溫度造成了色素的分解[8]。故選取溫度為30,40,50 ℃進行響應面法優(yōu)化。

    2.1.3 pH 值的選定

    pH 值對仙人掌果色素提取的影響見圖3。

    圖3 pH 值對仙人掌果色素提取的影響

    由圖3 可知,隨著pH 值的增大,吸光度不斷增大,當pH 值高于4,吸光度開始下降,可能是由于pH 值增大,破壞了仙人掌果色素的天然結構[11]。因此選取pH 值為3,4,5 進行響應面法優(yōu)化。

    2.1.4 提取時間的選定

    提取時間對仙人掌果色素提取的影響見圖4。

    圖4 提取時間對仙人掌果色素提取的影響

    由圖4 可知,60 min 以內(nèi),隨著提取時間的延長,吸光度逐漸上升,可能是適當時間內(nèi),提取時間的延長使得反應更加充分。提取時間高于60 min,吸光度迅速下降,過長的提取時間使天然色素被氧化[2]。相比較于其他因素,提取時間的長短對色素提取量的影響不明顯,故選取60 min 用于后續(xù)試驗。

    2.2 響應面試驗結果與分析

    2.2.1 響應面試驗結果

    以單因素試驗結果為基本依據(jù),以吸光度為響應值,進行響應面優(yōu)化試驗。

    響應面試驗設計及結果見表2。

    表2 響應面試驗設計及結果

    對表2 中的試驗數(shù)據(jù)進行擬合,得方程:

    2.2.2 方差分析

    仙人掌果色素提取響應面方差分析見表3。

    表3 仙人掌果色素提取響應面方差分析

    由表3 可知,試驗設計模型p<0.01,差異極顯著,表明吸光度與3 個變量之間有良好的一致性,且失擬項p=0.050 2>0.05,不顯著,說明該方程具有實際意義,能夠?qū)嶋H情況進行充分反映。由F 值可知,對試驗指標影響從大到小依次為提取溫度、料液比、pH 值。

    2.2.3 響應面分析

    pH 值和提取溫度對仙人掌果色素提取影響見圖5,料液比和pH 值對仙人掌果色素提取影響見圖6,料液比和提取溫度對仙人掌果色素提取影響見圖7。

    圖5 pH 值和提取溫度對仙人掌果色素提取影響

    圖6 料液比和pH 值對仙人掌果色素提取影響

    圖7 料液比和提取溫度對仙人掌果色素提取影響

    響應面曲面圖中曲線坡度如果變化越大,則表明該因素對色素提取的影響越大,曲線坡度變化較小,那么該因素的影響就較小[9],由圖5~圖7 可知,提取溫度的響應面坡度變化較為明顯,表明響應值對溫度的變化更加敏銳,而料液比和pH 值的響應面坡度變化相比較與提取溫度不明顯,說明影響較小。

    2.2.4 驗證試驗

    利用Design Expert 8.0 軟件進行分析,得出仙人掌果提取最佳工藝為提取溫度40.72 ℃,pH 值4.08,料液比1∶15.34,在此條件下得出的吸光度預測值為0.896 616,為方便試驗,優(yōu)化數(shù)據(jù)為提取溫度40 ℃,pH 值4,料液比1∶15。在此條件下重復試驗3 次,分別得到吸光度為0.887,0.901,0.895,得平均值為0.894,所得試驗數(shù)據(jù)與理論值相近,故試驗結果可靠。

    3 結論

    通過以上試驗可知,醇法提取仙人掌果色素的最優(yōu)提取工藝為料液比1∶15,pH 值4,溫度40 ℃條件下提取60 min。此時的仙人掌果色素的提取量最大,明顯優(yōu)化了仙人掌色素的提取工藝,避免了不必要的浪費,提高了經(jīng)濟效益,且操作簡單便捷,為使用天然色素的開發(fā)提供理論依據(jù)。

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