超微加味丹參飲對氯化鈷誘導損傷的大鼠冠狀動脈血管內皮細胞的影響

米熱阿依·木太力甫，克徳爾阿依·木太力甫，米爾斯曼古力·米吉提

（1.喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院，新疆 喀什 844000；2.喀什地區(qū)食品藥品檢驗所，新疆 喀什 844000）

血管內皮細胞是覆于血管、淋巴管內腔表面的單層扁平鱗狀上皮，具有吞噬異物、細菌、壞死組織等功能，還可參與調節(jié)血管張力、抗血小板凝集、抗血栓、調節(jié)機體免疫等生理活動[1]。近年來的研究[2-3]認為，血管內皮功能障礙是導致動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）、冠狀動脈心臟病（coronary heart disease，CHD）、缺血性腦卒中（ischemic stroke，IS）等心腦血管疾病的誘因之一，且血管內皮功能障礙存在于此類疾病發(fā)生發(fā)展的整個進程中。因此，改善血管內皮功能已成為防治心腦血管疾病的研究熱點。加味丹參飲由丹參、檀香、赤芍、川芎、紅花、當歸、生地黃組成，具有活血化瘀、行氣止痛之功效，是治療冠心病-胸痹心痛心血瘀阻證的經典名方[4]。然而，其對心律失常、心力衰竭、冠心病等心血管疾病的治療作用是否與改善血管內皮功能有關，目前鮮有報道。因此，本研究通過氯化鈷（cobalt chloride，CoCl2）誘導形成大鼠冠狀動脈內皮細胞損傷模型，觀察超微加味丹參飲對血管內皮細胞的保護作用及對單核細胞趨化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein，MCP-1）和血管內皮細胞鈣黏蛋白（vascular endothelial cadherin，VE-cadherin）表達的影響。

1 材料

1.1 實驗動物 8周齡SPF級SD雄性大鼠25只，體質量為（200±20）g，購自南京市青龍山動物繁殖場，動物生產許可證號：SCXK（蘇）2020-0609。常規(guī)飼養(yǎng)于新疆鼎舉動物技術有限公司動物實驗中心，室溫（24±3）℃，濕度40%～65%，同籠飼養(yǎng)，自然通風，自由攝食飲水，晝夜明暗交替時間12 h/12 h。本研究獲得喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院實驗動物管理和使用委員會（institutional animal care and use committee，IACUC）批準通過，倫理審批號：2020-0325，遵循3R原則。

1.2 藥物與試劑 丹參（批號：181108-1）、檀香（批號：171129-1）、赤芍（批號：170325-1）、川芎（批號：180910-1）、紅花（批號：180809-1）、當歸（批號：170508-1）、生地黃（批號：180623-1）中藥飲片均購自江蘇省醫(yī)藥有限公司，經檢驗均符合2020年版《中華人民共和國藥典》的質量標準；氯化鈷（CoCl2）（批號：449766）、Ⅱ型膠原蛋白酶（批號：9301）、鼠尾膠原蛋白（批號：1093）均購自美國Sigma公司；內皮細胞培養(yǎng)基（endothelial cell medium，ECM）（批號：0025）購自美國ScienceCell公司；胰蛋白酶（批號：1720856）、MTT（批號：180512）均購自Gibco公司；BCA蛋白檢測試劑盒（批號：P0011）購自日本TAKARA公司；抗B-細胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）兔多克隆抗體（批號：PAB13118）、兔抗Bcl-2相關X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）多克隆抗體（批號：LZ-R3414）、兔抗活化型半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白水解酶-3（cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-3，cleaved Caspase-3）多克隆抗體、抗β-肌動蛋白（β-actin）兔多克隆抗體（批號：GH0813）均購自美國Cell Technology公司；MCP-1酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒（批號：GOY-SJH074）、VE-cadherin ELISA試劑盒（批號：CK-E10028）均購自美國TSZ公司；Trizol試劑（批號：15596-026）、逆轉錄試劑盒（批號：E22064）均購自Invitrogen公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒（批號：A001-3）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）試劑盒（批號：A003-1-1）、活性氧（reactive oxygen species，ROS）試劑盒（批號：A012）均購自南京建成生物工程有限公司。

1.3 主要儀器 CJ-2F型超凈工作臺（北京東聯哈爾儀器制造有限公司）；Heracell 240i型細胞培養(yǎng)箱（Thermo Fisher Scientific）；ALLEGRA 25R型低溫離心機（美國Beckman公司）；Tecnaig2 Spirit型高倍顯微鏡（尼康儀器有限公司）；318C型全自動酶聯免疫分析儀（美國BioTek公司）；Lambda 35型紫外分光光度儀（美國Perkin Elmar公司）。

2 方法

2.1 藥物配制 超微加味丹參飲按以下方法制備：取丹參20 g，檀香6 g，赤芍10 g，川芎6 g，紅花6 g，當歸6 g，生地黃12 g，置于攪拌機中，通入120～180 ℃食品級蒸汽攪拌滅菌30 min，轉移至粉碎機中進行粗粉碎，得到藥材粗粉，將粗粉混合物置于棒磨機中再次粉碎，將所得細粉通過風送專用雙向氣流篩分機過200～400目篩，即得0.75 μm以下細粉末，加1 L蒸餾水浸泡1 h后，煎煮回流提取約2 h，過濾去渣，將濾液置于水浴上濃縮至相當于生藥含量1 g/mL，保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 含藥血清的制備 取20只大鼠采用隨機數字表法分為空白血清組、超微加味丹參飲高劑量組、超微加味丹參飲中劑量組、超微加味丹參飲低劑量組，每組5只。超微加味丹參飲高、中、低劑量組參考人與動物給藥劑量換算法（大鼠劑量=成人常用量×人鼠換算系數0.018/大鼠體質量，其中按成人常用量86 g，大鼠體質量200 g進行換算），分別給予24、16、8 g/kg的超微加味丹參飲藥物溶液，1次/d，連續(xù)給藥7 d。于末次灌胃1 h后行腹主動脈采血（采血前12 h禁食，不禁水）6 mL，在室溫下靜置2 h后，以3 000 r/min離心10 min，取上清液，56 ℃滅活30 min，用0.22 μm濾膜過濾除菌，分裝，在-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆??？瞻籽褰M大鼠給予等體積的蒸餾水進行灌胃，其他處理同前。

2.3 大鼠冠狀動脈內皮細胞的培養(yǎng) 頸椎脫臼處死剩余5只大鼠，碘伏局部消毒后，逐層打開胸腔，斷開肋骨，暴露冠狀動脈，分離結締組織后切取冠狀動脈主干，置于無菌PBS溶液中漂洗去除附壁血細胞，將冠狀動脈內膜外翻并剪成1～2 mm寬的環(huán)狀，平鋪于培養(yǎng)瓶中，于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中靜置1 h，加入內皮細胞專用培養(yǎng)基，置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每2～3 d更換一次培養(yǎng)基，待細胞生長致密單層后，用胰蛋白酶消化傳代，當傳至3～5代時即可用于后續(xù)實驗。采用倒置顯微鏡觀察內皮細胞的形態(tài)。

2.4 內皮細胞損傷模型的建立[5]取對數生長期的大鼠冠狀動脈內皮細胞，經胰蛋白酶和EDTA消化后，采用DMEM培養(yǎng)基制備成密度為1×105個/mL的細胞懸液，將細胞懸液種植于96孔培養(yǎng)板，每孔100 μL，于細胞培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24 h使其貼壁，換用不含血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h，加入濃度為700 mmol/L的CoCl2培養(yǎng)24 h，誘導形成內皮細胞損傷模型。

2.5 分組與給藥 實驗共設對照組、模型組、超微加味丹參飲高劑量組、超微加味丹參飲中劑量組、超微加味丹參飲低劑量組，每組各設置6個復孔。對照組為正常大鼠冠狀動脈內皮細胞，模型組和超微加味丹參飲組為CoCl2誘導的內皮細胞損傷模型，超微加味丹參飲高、中、低劑量組分別用“2.2”項下制備的不同劑量含藥血清替換培養(yǎng)基，孵育24 h。模型組和對照組給予等體積空白血清。

2.6 內皮細胞生存率檢測 采用MTT比色法檢測冠狀動脈內皮細胞的生存率，待對照組、模型組、超微加味丹參飲高劑量組、超微加味丹參飲中劑量組、超微加味丹參飲低劑量組同步孵育24 h后，取出樣本，每孔加入濃度為5 μg/mL的MTT溶液20 μL，孵育4 h，吸棄上清液，加入100 μL DMSO溶解結晶，震蕩10 min，于490 nm下測定各孔的吸光度值（OD）。

2.7 氧化應激指標的檢測 將各組內皮細胞孵育24 h后，以RIPA細胞裂解液裂解，在冰浴下超聲破碎細胞，低溫離心，取上清液，采用黃嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，XOD）法檢測其中SOD的活性，以熒光酶標儀檢測其中ROS的含量，以硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid，TBA）法檢測其中MDA的含量，所有操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。

2.8 Western blotting法檢測凋亡相關蛋白的表達 將各組內皮細胞孵育24 h后，加入200 μL RIPA裂解液裂解細胞，采用BCA法測定總蛋白，取40 μg總蛋白，上樣，12%十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠（sodium dodecyl sulfate- polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）電泳90 min后轉膜，以5%TBST脫脂奶粉封閉，加一抗，4 ℃孵育過夜，TBST漂洗3次，加二抗，37 ℃振蕩孵育90 min，于室溫下將PVDF膜置于ECL混合液中振蕩溫育，加入ECL發(fā)光液，應用Image Lab軟件分析計算各組細胞中Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3蛋白的相對表達量。

2.9 ELISA法檢測細胞中MCP-1和VE-cadherin的表達 采用ELISA檢測各組細胞中MCP-1和VE-cadherin蛋白的表達情況，所有操作均嚴格按照試劑盒說明書進行，于490 nm下測定OD值。

2.10 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以“均數±標準差”（±s）表示，多組比較采用單因素方差分析，兩組比較采用SNK法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 內皮細胞形態(tài)學觀察 采用倒置顯微鏡觀察內皮細胞的形態(tài)，原代細胞在培養(yǎng)5～7 d后可見少量多角形或短梭形的游離內皮細胞；培養(yǎng)至12～13 d時，遷移出的細胞呈現片狀，約70%單層融合，分布不均。大鼠冠狀動脈內皮細胞在傳代后2 h開始貼壁生長，24 h后約90%細胞貼壁；48 h后可見細胞呈現梭形或鵝卵石形，單層互不重疊，邊界清晰，胞漿豐富，核清晰；3 d后可見細胞呈小片狀集落生長，細胞生長速度增快；5 d后細胞生長融合成片，排列緊密，部分可見典型的“鋪路石”狀單層排列；培養(yǎng)至7～8代后，可見細胞分化，分泌物增多，呈現老化狀態(tài)，細胞純度＞95%。（見圖1）

圖1 原代大鼠冠狀動脈內皮細胞 （×100）

3.2 各組內皮細胞生存率 與對照組比較，模型組內皮細胞生存率明顯降低（P＜0.05）；與模型組比較，超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞生存率均明顯升高（P＜0.05），且超微加味丹參飲高劑量組內皮細胞生存率＞超微加味丹參飲中劑量組內皮細胞生存率＞超微加味丹參飲低劑量組內皮細胞生存率，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（見圖2）

圖2 各組內皮細胞生存率比較 （±s，n=6）

3.3 各組內皮細胞中SOD活性及MDA、ROS含量比較 與對照組比較，模型組內皮細胞中SOD活性明顯降低（P＜0.05），MDA、ROS含量均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞中SOD活性均明顯升高（P＜0.05），MDA、ROS含量均明顯降低（P＜0.05），且超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞中SOD活性及MDA、ROS含量比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（見表1）

表1 各組內皮細胞中SOD 活性及MDA、ROS 含量比較（±s，n=6）

表1 各組內皮細胞中SOD 活性及MDA、ROS 含量比較（±s，n=6）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與超微加味丹參飲高劑量組比較，cP＜0.05；與超微加味丹參飲中劑量組比較，dP＜0.05

組別SOD（U/mg）MDA（nmol/mg） ROS（RFU/μg）對照組2.89±0.56模型組0.82±0.12a超微加味丹參飲高劑量組2.17±0.15ab超微加味丹參飲中劑量組1.79±0.21abc超微加味丹參飲低劑量組1.33±0.13abcd F 45.68227.90648.481 P 0.0000.0000.000 1.03±0.17 5.04±1.14a 1.73±0.55ab 2.63±0.62abc 3.66±0.83abcd 1.03±0.15 3.32±0.32a 1.38±0.33ab 1.88±0.37abc 2.55±0.39abcd

3.4 各組內皮細胞中凋亡相關蛋白相對表達量比較 與對照組比較，模型組內皮細胞中Bcl-2蛋白相對表達量明顯降低（P＜0.05），Bax和cleaved Caspase-3蛋白相對表達量均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞中Bcl-2蛋白相對表達量均明顯升高（P＜0.05），Bax和cleaved Caspase-3蛋白相對表達量均明顯降低（P＜0.05），且超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞中Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3蛋白相對表達量比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（見表2、圖3）

表2 各組內皮細胞中Bcl-2、Bax 和cleaved Caspase-3 蛋白相對表達量比較 （±s，n=6）

表2 各組內皮細胞中Bcl-2、Bax 和cleaved Caspase-3 蛋白相對表達量比較 （±s，n=6）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與超微加味丹參飲高劑量組比較，cP＜0.05；與超微加味丹參飲中劑量組比較，dP＜0.05

組別Bcl-2Baxcleaved Caspase-3對照組0.78±0.130.47±0.050.19±0.08模型組0.11±0.05a0.79±0.12a0.64±0.13a超微加味丹參飲高劑量組0.68±0.12ab0.21±0.05ab0.21±0.08ab超微加味丹參飲中劑量組0.53±0.09abc 0.43±0.08abc0.40±0.08abc超微加味丹參飲低劑量組0.40±0.11abcd 0.68±0.09abcd0.55±0.11abcd F 63.25791.02816.382 P 0.0000.0000.000

圖3 各組內皮細胞中Bcl-2、Bax 和cleavedCaspase-3 蛋白表達Western blotting 圖

3.5 各組內皮細胞MCP-1和VE-cadherin表達水平比較 與對照組比較，模型組內皮細胞MCP-1和VE-cadherin表達水平均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞MCP-1和VE-cadherin表達水平均明顯降低（P＜0.05），且超微加味丹參飲高、中、低劑量組內皮細胞MCP-1和VE-cadherin比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（見表3）

表3 各組內皮細胞MCP-1 和VE-cadherin 表達水平比較（±s，n=6）

表3 各組內皮細胞MCP-1 和VE-cadherin 表達水平比較（±s，n=6）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與超微加味丹參飲高劑量組比較，cP＜0.05；與超微加味丹參飲中劑量組比較，dP＜0.05

組別MCP-1（pg/mL） VE-cadherin（μg/mL）對照組203.38±23.16模型組413.23±36.96a超微加味丹參飲高劑量組243.86±25.15ab超微加味丹參飲中劑量組279.45±26.54abc超微加味丹參飲低劑量組357.54±31.85abcd F 51.2022.303 P 0.0000.000 2.23±0.21 6.89±1.13a 3.01±0.41ab 3.83±0.78abc 5.12±1.02abcd

4 討論

加味丹參飲由《時方歌括》中活血化瘀、行氣止痛的中藥名方丹參飲化裁而得。方中丹參苦微寒，歸心、肝經，專入血分，內達臟腑而化瘀滯，外利關節(jié)而通脈絡，具有活血、行氣、止痛之功效，重用為君藥；檀香辛溫芳香，入脾、胃、肺經，為“理氣要藥”，善入氣分，行氣化滯，散寒止痛，為臣藥；赤芍、川芎、紅花活血祛瘀、行氣止痛，同時可加強當歸、生地黃扶正，養(yǎng)血活血通經之功效；諸藥配合，共奏行氣活血、通絡止痛、祛瘀生新之效[6]。現代藥理學研究[7-8]表明，丹參、檀香、赤芍、川芎、紅花和當歸均具有抗炎、抗氧化、抑制血小板聚集、抗血栓、抗動脈粥樣硬化的作用，并可改善微循環(huán)、擴張冠脈血管、增加冠脈血流量、抗心肌損傷、保護血管內皮細胞。目前該方已廣泛用于冠心病、心絞痛、心肌梗死、動脈粥樣硬化、腦血栓等心腦血管疾病的治療。

以往研究多探討加味丹參飲對冠心病血管內皮細胞的影響[10]，中藥超微飲片是指通過超微粉體技術將傳統(tǒng)中藥飲片粉碎至1～75 μm的超微粉，既保留了中藥材固有的生物活性物質基礎，又可大大增加藥材的比表面積，加快有效成分的溶出和吸收，可使臨床用量減少至傳統(tǒng)中藥飲片的1/3，提高生物利用度、節(jié)約藥材，具有廣泛的應用前景[9]。目前超微加味丹參飲對冠心病血管內皮細胞的研究較少，故研究對此進行了分析。CoCl2為常見的化學性缺氧模擬劑，Co2+離子可通過置換細胞內脯氨酸羥化酶輔因子中的Fe2+離子，阻斷低氧誘導因子-1α（hypoxia-inducing factor-1α, HIF-1α）的降解，可誘導內皮細胞、心肌細胞、PC12細胞和N9小膠質細胞等多種細胞缺氧損傷，是建立細胞缺氧損傷模型的理想藥劑，具有高穩(wěn)定性和高重復性的優(yōu)點[11-12]。

近年來在對心血管疾病發(fā)病機制的研究中，多數學者均支持內皮損傷學說[13-15]。血管內皮細胞在諸如炎癥因子、脂質浸潤、血管痙攣等生理或病理因素的刺激下，細胞膜信號轉導系統(tǒng)被激活，相關凋亡調控因子繼而被啟動，從而導致內皮細胞的凋亡。因此，保護內皮細胞功能和減少其凋亡可能成為治療心血管疾病的新靶點。本研究應用CoCl2誘導形成大鼠冠狀動脈內皮細胞損傷模型，觀察不同劑量的超微加味丹參飲對內皮細胞的保護作用，結果顯示：高、中、低劑量的超微加味丹參飲均可顯著提高內皮細胞的生存率，改善凋亡相關蛋白Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3的相對表達，且3組之間存在量效關系，即隨著超微加味丹參飲劑量的增大，對內皮細胞的保護作用越顯著。吳若霞等[16]研究發(fā)現，加味丹參飲可有效提高缺氧損傷心肌細胞的存活率，減少其凋亡，從而對心肌細胞起到良好的保護作用。仇衛(wèi)峰等[9]的研究表明，加味丹參飲對CHD所致內皮損傷的血管具有良好的保護作用，藥物干預后血流速率加快，炎癥因子表達降低，受損的內皮細胞形態(tài)得到顯著的改善。

氧化應激指標可反映細胞的損傷程度，當血管內皮細胞發(fā)生缺血缺氧損傷時，ROS的表達水平升高，從而導致糖類、脂類、核酸及結構蛋白等的氧化性損傷[17]；SOD為機體內重要的氧自由基清除劑，可借助于抗氧化和抗自由基功能而有效抵御氧自由基對機體的損傷，對減少機體的氧化應激損傷至關重要[18]；MDA是機體氧化反應的產物之一，其表達水平可體現體內氧自由基的水平，進而反映機體氧化應激的損傷程度[19]。本研究中，高、中、低劑量的超微加味丹參飲可顯著改善內皮細胞的氧化應激狀態(tài)，且隨著劑量的增大，其改善效果越明顯，提示超微加味丹參飲可對抗細胞的氧化應激損傷，增強對氧自由基的清除能力，增加SOD的活性并減少MDA的產生，從而發(fā)揮對內皮細胞的保護作用。

血管內皮細胞鈣黏蛋白（vascular endothelial cadherin，VE-cadherin）是鈣黏素家族中的重要一員。MCP-1為趨化因子超家族中的一員，是一種重要的促炎性細胞因子，在機體發(fā)生炎癥反應時由單核細胞、巨噬細胞、血管內皮細胞等分泌產生，且對單核/巨噬細胞具有特異性趨化激活作用，與動脈粥樣硬化、類風濕關節(jié)炎、急性冠狀動脈綜合征等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關[20]。在內皮功能損傷的早期，MCP-1可促進單核細胞、巨噬細胞及T淋巴細胞等細胞在受損的血管內皮部位聚集、滲透，轉變成巨噬細胞，進而吞噬脂質并形成泡沫，導致損傷的進一步加重[21]。VE-cadherin是鈣黏素家族的重要一員，主要分布于各類上皮細胞，是血管內皮細胞之間黏附連接的關鍵分子，可調節(jié)血管內皮細胞極性、促進內皮細胞形態(tài)的變化、提高血管通透性，對維持內皮細胞的正常生理功能具有至關重要的作用[22-23]。當血管內皮損傷后，VE-cadherin會釋放入血，導致患者血清VE-cadherin的升高。李世英等[24]的研究表明，MCP-1和VE-cadherin與內皮細胞功能密切相關，其表達水平與腦梗死及頸動脈粥樣硬化的病情嚴重程度呈正相關。周曉艷等[25]的研究表明，MCP-1和VEcadherin分別具有趨化和黏附的功能，可加強炎癥因子對內皮細胞的損傷，進一步加重腦梗死及動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，且急性前循環(huán)腦梗死及動脈粥樣硬化患者的MCP-1和VE-cadherin的表達水平高于健康人群；該指標可反映患者的病情及臨床類型。本研究結果同樣顯示，CoCl2誘導缺氧損傷的冠狀動脈內皮細胞MCP-1和VE-cadherin的表達水平顯著高于對照組，而經超微加味丹參飲干預后，其表達水平顯著降低。目前，國內外對于加味丹參飲對MCP-1和VE-cadherin的表達研究甚少，主要研究集中在血清炎癥因子，如IL-6及TNF-α的表達方面[26]。本研究探究了MCP-1和VE-cadherin的表達，主要是為機制的探究進行鋪墊。本研究結果提示超微加味丹參飲可顯著改善內皮細胞損傷，可能對心血管疾病具有一定的防治作用。此外，本研究僅選擇了單一性別的雄性大鼠，主要是由于雄性大鼠對急性毒物（藥物）耐受性強，對慢性毒物更敏感[27]，此外也排除了雌性大鼠發(fā)育、生育對實驗的干擾。

綜上，超微加味丹參飲對CoCl2誘導損傷的大鼠冠狀動脈內皮細胞具有良好的保護作用，可有效提高內皮細胞的存活率，改善凋亡相關蛋白的表達和氧化應激狀態(tài)，降低MCP-1和VE-cadherin的表達。然而本實驗并未研究其具體作用靶點，后續(xù)研究仍需對其分子機制進一步的深入研究。