• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    許氏平鲉(Sebastes schlegelii)DAZ基因家族的鑒定及表達(dá)分析

    2022-11-04 10:58:40孫敏敏宋偉豪劉心田
    海洋湖沼通報(bào) 2022年5期
    關(guān)鍵詞:許氏配子生殖細(xì)胞

    孫敏敏,宋偉豪,吳 鵬,劉心田,齊 潔*

    (1.中國海洋大學(xué)海洋生物遺傳學(xué)與育種教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 青島266003;2.中國海洋大學(xué)三亞海洋研究院海南省熱帶水產(chǎn)種質(zhì)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,海南 三亞 572000;3.威海市漁業(yè)推廣站,山東 威海 264400)

    引 言

    兩性配子發(fā)生包括生殖干細(xì)胞有絲分裂、增殖和減數(shù)分裂以及減數(shù)分裂后精子發(fā)生等多個(gè)過程[1-2]。DAZ基因家族為這些過程在分子水平上的進(jìn)化保守性提供了為數(shù)不多的證據(jù),在脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物的雄性和雌性配子的產(chǎn)生中起著重要的作用[3-4]。DAZ家族由基因Daz、Dazl和Boule組成,它們都編碼RNA結(jié)合蛋白,其中包含一個(gè)保守的RNA識(shí)別基序(RRM)和一個(gè)或多個(gè)重復(fù)的DAZ基序[5]。Boule作為這個(gè)家族最古老的成員從原始的基底后生動(dòng)物到脊椎動(dòng)物都一直存在[3,6],而Dazl從Boule進(jìn)化而來,它從硬骨魚到人都一直存在[7]。Daz只存在于高等靈長(zhǎng)類動(dòng)物中,位于Y染色體上,其序列包含七個(gè)DAZ結(jié)構(gòu)域重復(fù)[8-9]。Dazl和Boule位于常染色體上[4,10],它們與Daz基因共同編碼RNA結(jié)合蛋白,在生殖細(xì)胞中特異表達(dá),參與調(diào)控生殖細(xì)胞的發(fā)育和分化[5,11]。

    DAZ基因家族通過調(diào)控 mRNA的翻譯過程影響生殖細(xì)胞的發(fā)育分化并且這些蛋白質(zhì)功能的喪失會(huì)導(dǎo)致雄性和雌性不育。Dazl和Boule是配子發(fā)生過程中不可缺少的調(diào)節(jié)因子[12-13]。小鼠中Dazl基因的缺失造成生殖細(xì)胞和配子的缺失,證實(shí)Dazl對(duì)于生殖細(xì)胞的分化是至關(guān)重要的[14]。在秀麗線蟲中Boule突變體導(dǎo)致卵子發(fā)生障礙[15]。研究發(fā)現(xiàn)小鼠通過Dazl結(jié)合Vasa同源基因(Mvh)的3 '-UTR刺激翻譯,Mvh是一種對(duì)雄性配子形成至關(guān)重要的基因,并發(fā)現(xiàn)Dazl缺失小鼠的生殖細(xì)胞中Mvh蛋白水平降低,說明Dazl介導(dǎo)的Mvh翻譯調(diào)控對(duì)哺乳動(dòng)物精子形成至關(guān)重要[16]。果蠅突變體缺失Boule使得Twine(一種cdc25型磷酸酶)失活,阻止其進(jìn)入減數(shù)分裂[17]。研究表明Dazl和Boule基因不僅能直接調(diào)控生殖細(xì)胞發(fā)育分化,而且能影響其它生殖細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)。在原始生殖細(xì)胞(PGCs)的起源、遷移、分化及配子發(fā)生研究中,DAZ基因家族作為標(biāo)記基因參與生殖質(zhì)mRNA的翻譯。

    非洲爪蟾中母體DazlmRNA的特異性缺失,導(dǎo)致PGCs嚴(yán)重缺乏且PGC遷移出現(xiàn)障礙,不能從腹側(cè)遷移到背側(cè)內(nèi)胚層,也不能到達(dá)背側(cè)腸系膜。Dazl能夠作為一種RNA結(jié)合蛋白,調(diào)節(jié)介導(dǎo)PGCs遷移的因子的翻譯或表達(dá)[11]。

    研究人員已經(jīng)在斑馬魚[18]、銀鯽[19]、青鳉、羅非魚[20]、虹鱒[21-22]、尖吻鱸[23]和牙鲆[24]等魚類中對(duì)DAZ家族基因進(jìn)行了克隆并分析了其表達(dá)模式,大多數(shù)硬骨魚類Dazl和Boule均僅存在于性腺中,兩者在配子發(fā)生時(shí)表現(xiàn)出階段特異性的表達(dá)。青鳉[25-26]中關(guān)于Boule和Dazl的RNA表達(dá)模式的研究表明Boule和Dazl在有絲分裂和減數(shù)分裂生殖細(xì)胞中均有雙性表達(dá)的現(xiàn)象。虹鱒[21-22]中,Dazl不僅表現(xiàn)在雌、雄配子發(fā)生的有絲分裂和減數(shù)分裂階段中發(fā)揮作用,還能階段特異性亞細(xì)胞定位到巴爾比亞尼體,而Boule沒有定位到巴爾比亞尼體。Boule和Dazl是尖吻鱸成體中的生殖細(xì)胞標(biāo)記物[23],其在時(shí)空表達(dá)和亞細(xì)胞分布方面存在明顯差異。Boule和Dazl的兩性生殖細(xì)胞特異性表達(dá)在魚類中一直比較保守。DAZ家族基因的表達(dá)與其在生殖系發(fā)育不同階段的具體作用密切相關(guān),故對(duì)DAZ家族基因在低等和高等脊椎動(dòng)物中的表達(dá)比較進(jìn)行分析,將為研究配子發(fā)生和生殖細(xì)胞分化的分子機(jī)制提供材料。

    許氏平鲉(Sebastesschlegelii)為卵胎生的巖礁性魚類,是一種重要的海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)魚類和增養(yǎng)殖優(yōu)良品種。由于其卵胎生繁殖方式,人工繁殖尚未實(shí)現(xiàn)。因此,對(duì)重要的生殖細(xì)胞標(biāo)記基因Dazl和Boule進(jìn)行研究,對(duì)了解許氏平鲉的性別分化和發(fā)育機(jī)制具有重要意義。在本研究中,我們通過對(duì)Daz基因家族進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析、進(jìn)化分析及表達(dá)分析,為進(jìn)一步研究Dazl和Boule在許氏平鲉生殖發(fā)育機(jī)制和兩性配子發(fā)生過程中的調(diào)控作用提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物來源與取樣

    本研究中所用的1齡半許氏平鲉成魚來源于威海銀澤生物科技股份有限公司。對(duì)許氏平鲉進(jìn)行麻醉后斷椎處理,取6條健康許氏平鲉成魚(3條雄魚和3條雌魚)的10個(gè)組織(心、肝、脾、腎、腦、腸、鰓、肌肉、精巢、卵巢),立即冷凍于液氮中,-80 ℃保存,用于RNA提取。并各取一塊肌肉組織保存于95%乙醇中,用作DNA提取。我們收集了不同發(fā)育階段(交尾前、交尾后和受精前)的雌性卵巢和不同發(fā)育階段(1細(xì)胞期、32細(xì)胞期、囊胚期、原腸胚期、體節(jié)期和孵化期)的胚胎,液氮速凍并保存在-80 ℃,用于RNA提取。

    1.2 總RNA提取、cDNA合成及基因組DNA的提取

    許氏平鲉各組織及胚胎總RNA由TRIzol法(Invitrogen)提取,使用DNase I和RNA clean試劑盒去除RNA中的DNA和蛋白質(zhì),通過分光光度計(jì)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA的質(zhì)量。cDNA由逆轉(zhuǎn)錄酶M-MLV試劑盒(TaKaRa)合成,使用許氏平鲉β-actin作為引物進(jìn)行PCR檢測(cè)反轉(zhuǎn)錄效果,并置于-80 ℃保存。

    采用酚-氯仿的方法提取許氏平鲉基因組DNA,用分光光度計(jì)檢測(cè)DNA的濃度,使用電泳檢DNA的質(zhì)量。

    1.3 Boule和Dazl氨基酸多重序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析

    從NCBI和Ensembl網(wǎng)站下載其它物種的Boule和Dazl氨基酸序列,同許氏平鲉的Boule和Dazl氨基酸序列用Genedoc軟件進(jìn)行氨基酸多序列比對(duì)。利用 MEGA7.0 的鄰接法(Neighbor-Joining,NJ)進(jìn)行聚類分析構(gòu)建進(jìn)化樹,各物種Boule和Dazl氨基酸序列的 Gene Bank 數(shù)據(jù)庫注冊(cè)序列號(hào)如下:

    斑點(diǎn)雀鱔Lepisosteus_oculatus_Boule:XP_015213794.1;虹鱒Oncorhynchus_mykiss_Boule:ADW41783.1;雞Gallus_gallus_Boule:XP_015144979.1;尖吻鱸Lates_calcarifer_Boule:KC992312.1;密西西比鱷Alligator_mississippiensis_Boule:XP_014449905.1;青鳉Oryzias_latipes_Boule:KC992312.1;人Homo_sapiens_Boule:NP_932074.1;鼠Mus_musculus_Boule:AAK69026.2;海龜Chelonia_mydas_Boule:XP_007072013.1;斑馬魚Danio_rerio_Dazl:NP_571599.1;半滑舌鰨Cynoglossus_semilaevis_Dazl:AGG69476.1;人Homo_sapiens_Dazl:NP_001177740.1;斑點(diǎn)雀鱔Lepisosteus_oculatus_Dazl:XP_015212852.1;大黃魚Larimichthys_crocea_Dazl:KAE8282148.1;非洲爪蟾Xenopus_laevis_Dazl:NP_001081772.1;海龜Chelonia_mydas_Dazl:XP_007053304.1;虹鱒Oncorhynchus_mykiss_Dazl:NP_001233268.1;雞Gallus_gallus_Dazl:NP_989549.1;尖吻鱸Lates_calcarifer_Dazl:ABB76649.1;孔雀魚Poecilia_reticulata_Dazl:XP_008419892.1;青鳉Oryzias_latipes_Dazl:NP_001098269.1;鼠Mus_musculus_Dazl-8:NP_001264792.1;鼠Mus_musculus_Dazl-FL:NP_034151.3;牙鲆Paralichthys_olivaceus_DazlⅠ:AKE14490.1;牙鲆Paralichthys_olivaceus_DazlⅡ:AKE14491.1;人Homo_sapiens_Daz:AAB02393.1。

    1.4 Boule和Dazl基因表達(dá)分析

    將許氏平鲉不同組織、不同發(fā)育階段卵子、以及胚胎發(fā)育時(shí)期的轉(zhuǎn)錄組TPM數(shù)據(jù)歸一化后用pheatmap程序進(jìn)行熱圖繪制,紅色越深表示表達(dá)量越高,藍(lán)色越深表示表達(dá)量越低。

    2 結(jié)果

    2.1 許氏平鲉Dazl和Boule基因結(jié)構(gòu)分析

    根據(jù)許氏平鲉基因組和轉(zhuǎn)錄組序列,tBlastx獲得Dazl和Boule的cDNA序列且Dazl和Boule含有分別有兩種mRNA存在于許氏平鲉性腺轉(zhuǎn)錄本,BouleⅠ,BouleⅡ以及DazlⅠ,DazlⅡ。兩種轉(zhuǎn)錄本可能來自同一個(gè)拷貝基因,在轉(zhuǎn)錄和mRNA成熟過程中,BouleⅠ保留了10個(gè)外顯子,而BouleⅡ由于在第一個(gè)外顯子處缺失一部分序列,產(chǎn)生11個(gè)外顯子。DazlⅠ保留了8個(gè)外顯子,而DazlⅡ缺失外顯子7,它們是可變剪接的產(chǎn)物。BouleⅠ,BouleⅡ以及DazlⅠ,DazlⅡ在序列的其它部分并沒有差異,也沒有轉(zhuǎn)錄時(shí)遺留的內(nèi)含子序列,表明BouleⅠ,BouleⅡ以及DazlⅠ,DazlⅡ可能都有各自的蛋白產(chǎn)物且具有一定的生理功能。

    圖1 Dazl和Boule基因之間的比對(duì)。Dazl和Boule各存在兩種剪接型。外顯子由黃色方框表示,內(nèi)含子由實(shí)線表示。

    2.2 許氏平鲉Dazl和Boule氨基酸的多重序列比對(duì)

    許氏平鲉BouleⅠ,BouleⅡ的cDNA長(zhǎng)度分別為1 032 bp和1 008 bp,分別編碼了343和335個(gè)氨基酸,DazlⅠ,DazlⅡcDNA序列開放閱讀框分別為654 bp和603 bp,分別編碼217和200個(gè)氨基酸。且Dazl和Boule都包含一個(gè) RNA 識(shí)別域(RRM)和一個(gè) DAZ 結(jié)構(gòu)域(圖2)。通過多物種Dazl和Boule的氨基酸序列比對(duì)(圖2),各物種在RRM序列區(qū)域有較高的保守性,其它區(qū)域保守性較低。在Dazl中RRM區(qū)域中非硬骨魚和硬骨魚存在差異的氨基酸,將硬骨魚和其它物種分開(圖2A)。Boule和Dazl基因?qū)儆谕换蚣易?,然而它們編碼的蛋白序列卻相差很大。許氏平鲉中Boule 與Dazl之間的同源性是較低的,在 RNA 識(shí)別結(jié)構(gòu)域和 DAZ 重復(fù)區(qū)其同源性稍高,分別為 50%和30%。

    圖2 許氏平鲉Dazl和Boule與其它物種氨基酸的序列比對(duì)

    2.3 許氏平鲉Dazl和Boule系統(tǒng)進(jìn)化分析

    利用來自不同物種的Dazl和Boule的氨基酸序列,通過MEGA 7.0程序構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,進(jìn)化樹主要分為兩個(gè)簇,分別為Dazl和Boule(圖3)。許氏平鲉的Dazl首先與其它硬骨魚的Dazl聚合在一起,然后與四足動(dòng)物,鳥類或哺乳動(dòng)物的Dazl聚集成一支。多重序列比對(duì)顯示許氏平鲉Dazl先與尖吻鱸、大黃魚、孔雀魚聚集,后與斑馬魚等聚集,最后與青鳉聚為一支。氨基酸序列比對(duì)顯示其與尖吻鱸序列最為相近,相似性達(dá)89.4%,與青鳉較遠(yuǎn),相似度達(dá)73.3%。而許氏平鲉Boule先與尖吻鱸、青鳉聚集,后與斑點(diǎn)雀鱔、虹鱒及哺乳動(dòng)物聚為一支。氨基酸序列比對(duì)顯示其與尖吻鱸序列最為相近,相似性達(dá)73.6%,與斑點(diǎn)雀鱔較遠(yuǎn),僅有30.2%。而Boule作為Daz基因家族最古老的基因,進(jìn)化較為特殊,斑點(diǎn)雀鱔及虹鱒魚先和哺乳動(dòng)物聚為一支再與許氏平鲉等其它硬骨魚聚為一支。結(jié)果表明,許氏平鲉Dazl和Boule較為保守,與哺乳動(dòng)物親緣關(guān)系較遠(yuǎn),與其它硬骨魚親緣關(guān)系較近。

    圖3 許氏平鲉和其它脊椎動(dòng)物DAZ基因家族的系統(tǒng)發(fā)育分析

    2.4 許氏平鲉Dazl和Boule基因在成魚各組織、胚胎發(fā)育不同時(shí)期表達(dá)量分析

    根據(jù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,許氏平鲉Dazl和Boule在成魚各組織中的表達(dá)水平呈現(xiàn)相同的表達(dá)模式。Dazl和Boule均只在性腺中特異性表達(dá),其它組織中沒有表達(dá)(圖4A)。此外許氏平鲉Dazl和Boule在性腺表現(xiàn)為雌雄兩態(tài)表達(dá)模式,許氏平鲉Dazl在卵巢表達(dá)水平較精巢高,Boule與Dazl不同,精巢中的表達(dá)量明顯高于卵巢。根據(jù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析可知Boule與Dazl在配子發(fā)生表達(dá)模式相似,均在交配前、交配后和受精前階段較高,而在胚胎發(fā)育的時(shí)期幾乎沒有表達(dá)(圖4B),表明Boule與Dazl可能對(duì)于早期生殖細(xì)胞發(fā)育有重要作用,是配子生成的重要調(diào)控因子。

    圖4 通過轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析許氏平鲉Dazl和Boule基因的表達(dá)模式

    3 討論

    本研究鑒定了DAZ基因家族,該家族包括三個(gè)基因:Daz[27],Dazl[28-29]及Boule基因[30-31]。Daz基因缺失可出現(xiàn)少精子癥或無精子癥,從而導(dǎo)致雄性不育,是原始生殖細(xì)胞發(fā)育和生殖細(xì)胞分化成熟所必需的[32-33]。Dazl基因的無義突變可引起雌、雄雙性不育,導(dǎo)致原始生殖細(xì)胞的缺失從而影響生殖細(xì)胞的發(fā)育[11,20]。Boule基因作為DAZ 家族重要的一員,是精子發(fā)生過程中調(diào)控減數(shù)分裂的關(guān)鍵因子[26]。Boule在減數(shù)分裂前后表達(dá),功能較為有限。DAZ蛋白在體內(nèi)外均與RNA結(jié)合,可能參與了mRNA表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。由于Daz基因僅存在于舊大陸猴和類人猿的 Y 染色體中[34-35],故許氏平鲉中該家族僅包括Dazl和Boule。許氏平鲉Dazl和Boule具有DAZ 家族蛋白保守的 RNA 識(shí)別域和 DAZ 結(jié)構(gòu)域[36];DAZ結(jié)構(gòu)域可能與蛋白質(zhì)交互作用有關(guān)[37],缺失RRM對(duì)其與DAZAPs(deleted in Azoospermia(Daz)-Associated Protein1)的結(jié)合影響不大,而DAZ結(jié)構(gòu)域的缺失則大大減少了其結(jié)合[38]。研究表明,Daz和Dazl主要通過DAZ結(jié)構(gòu)域與DAZAP1/DAZAP2結(jié)合[39]。DAZAP1 是與Daz相互作用的反式作用因子,對(duì)mRNA的降解和沉默起關(guān)鍵作用,DAZAP1的磷酸化能破壞其與生殖細(xì)胞特異性蛋白Daz的相互作用[40]。

    之前研究確定了小鼠中Dazl有兩個(gè)剪接型(Dazl_Δ8和Dazl_FL),在成年小鼠精卵巢和多能細(xì)胞中表達(dá)。我們發(fā)現(xiàn),Dazl8號(hào)外顯子的選擇性剪接導(dǎo)致缺失17個(gè)氨基酸,而其余蛋白結(jié)構(gòu)相對(duì)于Dazl_FL是完整的[41]。亞細(xì)胞定位研究顯示Dazl_Δ8類似于Dazl_FL蛋白質(zhì)的定位模式。與生殖細(xì)胞的翻譯刺激功能相比,Dazl亞型(Dazl_FL和Dazl_Δ8)功能分析證實(shí)了Dazl亞型均可在胚胎干細(xì)胞中具有翻譯抑制作用。Dazl同源基因里類似的mRNA的可變剪接只發(fā)現(xiàn)于牙鲆[42],缺失的8號(hào)外顯子并不位于重要的RRM結(jié)構(gòu)域,對(duì)Dazl功能影響不大,基本的RNA識(shí)別功能仍然保留,DazlⅠ和DazlⅡ表達(dá)模式相似,且從Dazl靶mRNA預(yù)測(cè)兩種蛋白的功能發(fā)現(xiàn)沒有僅受一種Dazl蛋白調(diào)控的mRNA,表明這兩種蛋白沒有明顯的功能差異。而Boule還未發(fā)現(xiàn)有可變剪接的存在。在本研究中許氏平鲉Dazl和Boule均存在兩種可變剪接,從氨基酸序列完整性看BouleⅠ,BouleⅡ以及DazlⅠ,DazlⅡ很可能都有其對(duì)應(yīng)的蛋白產(chǎn)物。此外,可變剪接均存在于重要的結(jié)構(gòu)域之外,對(duì)Dazl和Boule基本功能可能影響不大。但是可變剪接存在的意義可能在于出現(xiàn)新的功能。由于其基因序列不同,空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化相應(yīng)功能也會(huì)有所改變,新剪接型的蛋白產(chǎn)物或許即可保留原基因應(yīng)行使的大部分功能,又發(fā)展出不同于基因完整型的新功能,需要進(jìn)一步研究證實(shí)[43-44]。

    多重氨基酸序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化樹顯示,硬骨魚Dazl和Boule與其它脊椎動(dòng)物有較大區(qū)別。RRM中數(shù)個(gè)氨基酸的改變及Dazl后端氨基酸序列數(shù)目可將硬骨魚和其它高等脊椎動(dòng)物區(qū)分開。許氏平鲉的Dazl和Boule分別與其它硬骨魚同源基因聚類為一支,說明了許氏平鲉的Dazl和Boule在進(jìn)化上相對(duì)保守,也反映了不同物種Dazl和Boule在的兩性配子發(fā)生過程中及生殖發(fā)育調(diào)控機(jī)制具有重要的作用[45-46]。

    Dazl和Boule基因的表達(dá)模式存在明顯差異。在大多數(shù)已報(bào)道的哺乳動(dòng)物中,Dazl基因只在兩性生殖細(xì)胞中特異表達(dá)[47]。青鳉中Dazl在胚胎發(fā)生過程中始終存在,而在成魚組織中,DazlmRNA及其蛋白的表達(dá)僅位于精巢和卵巢的生殖細(xì)胞中[25]。在精巢中,DazlmRNA在減數(shù)分裂前期較低,在減數(shù)分裂期較豐富,但在減數(shù)分裂后期缺失,在卵巢中,DazlmRNA在整個(gè)卵子發(fā)生過程中持續(xù)存在。大西洋鮭魚Dazl在性腺中被檢測(cè)到,在卵母細(xì)胞和隨后的胚胎發(fā)育也檢測(cè)到[48]。牙鲆Dazl同樣特異性的表達(dá)于精卵巢,且在胚胎發(fā)育的各時(shí)期也有檢測(cè)到其表達(dá)[18],此外斑馬魚[32]、羅非魚[20]、虹鱒[21]等硬骨魚類Dazl均在兩性生殖細(xì)胞中特異表達(dá)。在迄今為止所研究的各種生物中,Boule表現(xiàn)出明顯的變異表達(dá)模式。哺乳動(dòng)物[46]及果蠅[49]的Boule僅在雄性生殖細(xì)胞中表達(dá),而秀麗線蟲[44]僅在雌性中表達(dá)。對(duì)于硬骨魚類中的研究顯示,羅非魚Boule基因表現(xiàn)出雙性生殖系特異性表達(dá),并且在兩性配子發(fā)生時(shí)表現(xiàn)出階段特異性的表達(dá)。虹鱒的Boule在雌雄性腺中均有表達(dá)且在精巢中表達(dá)量高,卵巢中表達(dá)量低[36],在配子發(fā)生過程中Boule在雄性配子形成中出現(xiàn)在有絲分裂和減數(shù)分裂,而在雌性中表現(xiàn)出減數(shù)分裂特異性[21]。青鳉中Boule在兩性生殖細(xì)胞中都有表達(dá),而精子形成的表達(dá)模式與Dazl不同,在精子形成的減數(shù)分裂前期和減數(shù)分裂期均有表達(dá),在卵子發(fā)生過程中與Dazl表達(dá)模式相似。本研究通過轉(zhuǎn)錄組分析得到許氏平鲉成魚各組織及不同胚胎時(shí)期生殖基因Boule和Dazl的mRNA表達(dá)模式。我們發(fā)現(xiàn),許氏平鲉的這兩個(gè)基因都在兩性性腺中特異性表達(dá),其中Boule在精巢表達(dá)水平明顯高于卵巢而Dazl在卵巢表達(dá)明顯高于精巢。兩者只在不同發(fā)育階段卵子表達(dá),而在胚胎發(fā)育時(shí)期表達(dá)量幾乎檢測(cè)不到。通過對(duì)不同生物的研究,證實(shí)了DAZ家族基因在性腺發(fā)育不同階段的表達(dá)模式與其保守的特異性作用,而這種表達(dá)模式依賴于性腺和配子發(fā)生的階段。本研究結(jié)果為許氏平鲉生殖和發(fā)育研究提供了重要的參考依據(jù)。

    4 結(jié)論

    在本研究中,我們主要進(jìn)行了許氏平鲉DAZ基因家族的成員鑒定及轉(zhuǎn)錄組表達(dá)分析。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)許氏平鲉DAZ基因家族包含兩個(gè)成員:Dazl和Boule,分別有兩個(gè)轉(zhuǎn)錄本。通過多重序列比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育分析,得到Dazl和Boule含有兩個(gè)與其他硬骨魚高度保守的功能結(jié)構(gòu)域——DAZ結(jié)構(gòu)域和RRM結(jié)構(gòu)域。通過轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,Dazl和Boule在許氏平鲉各組織中的表達(dá)模式相似,只在性腺中表達(dá)且存在性別二態(tài)現(xiàn)象。不同卵子發(fā)育階段和胚胎期的表達(dá)分析表明,Dazl和Boule主要在配子發(fā)生期起作用。推測(cè)許氏平鲉Dazl和Boule影響生殖細(xì)胞的發(fā)育分化,是配子發(fā)生不可缺少的調(diào)控因子,為進(jìn)一步研究Dazl和Boule在許氏平鲉性別分化和性腺發(fā)育中的作用提供參考。

    猜你喜歡
    許氏配子生殖細(xì)胞
    獨(dú)立遺傳規(guī)律在群體中的應(yīng)用
    水溫變化對(duì)近海網(wǎng)箱養(yǎng)殖中許氏平鲉攝食及生長(zhǎng)的影響
    顱內(nèi)生殖細(xì)胞瘤放療的研究進(jìn)展
    顱內(nèi)生殖細(xì)胞瘤診斷方法研究進(jìn)展
    名醫(yī)妙用單方治好胃下垂
    利用“配子法”建構(gòu)計(jì)算種群基因頻率的數(shù)學(xué)模型
    原發(fā)性顱內(nèi)生殖細(xì)胞腫瘤全基因組甲基化分析提示生殖細(xì)胞瘤為原始生殖細(xì)胞起源
    動(dòng)脈粥樣硬化靶向適配子的親和力篩選
    許氏平鲉早期異速生長(zhǎng)模式的研究
    干細(xì)胞向女性生殖細(xì)胞分化的研究進(jìn)展
    寂寞人妻少妇视频99o| 黄片小视频在线播放| 国产精品免费视频内射| 高清欧美精品videossex| 黄片播放在线免费| 国产视频首页在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 久久久久久久久免费视频了| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美精品av麻豆av| 国产精品女同一区二区软件| 国产视频首页在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 日日撸夜夜添| 日韩大片免费观看网站| 777米奇影视久久| 多毛熟女@视频| av网站在线播放免费| 国产男女内射视频| 中文字幕最新亚洲高清| 青青草视频在线视频观看| 久久久久久久精品精品| 国产成人a∨麻豆精品| 一区二区三区乱码不卡18| 老司机影院成人| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美成人午夜精品| 亚洲av综合色区一区| 999久久久国产精品视频| 久久精品国产a三级三级三级| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 只有这里有精品99| 69精品国产乱码久久久| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 99热网站在线观看| 高清av免费在线| 国产人伦9x9x在线观看 | 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 男女啪啪激烈高潮av片| 国产极品天堂在线| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产国语露脸激情在线看| 女人精品久久久久毛片| 高清av免费在线| 9色porny在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 一级毛片我不卡| 丝袜脚勾引网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 美女中出高潮动态图| 人妻 亚洲 视频| 国产午夜精品一二区理论片| 伦精品一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲av中文av极速乱| 91aial.com中文字幕在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 9色porny在线观看| 丝袜美足系列| av女优亚洲男人天堂| 免费黄色在线免费观看| 久久久精品区二区三区| 中文字幕制服av| 一级爰片在线观看| 蜜桃在线观看..| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 老鸭窝网址在线观看| 国产一区二区三区av在线| 精品一区二区免费观看| 夫妻午夜视频| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 色播在线永久视频| 一区二区三区四区激情视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲三区欧美一区| 国产乱人偷精品视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 99香蕉大伊视频| 少妇的丰满在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 日日爽夜夜爽网站| 国产片特级美女逼逼视频| 国产精品蜜桃在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲第一av免费看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 日韩人妻精品一区2区三区| 最黄视频免费看| 久久久国产一区二区| 午夜福利视频精品| 国产 精品1| 97在线人人人人妻| 免费看不卡的av| 老女人水多毛片| 国产男女内射视频| xxxhd国产人妻xxx| 中文字幕精品免费在线观看视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 99久久人妻综合| 国产精品二区激情视频| 永久免费av网站大全| 亚洲一区二区三区欧美精品| 五月伊人婷婷丁香| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| www.自偷自拍.com| 97人妻天天添夜夜摸| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美日韩精品成人综合77777| 中文字幕制服av| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 亚洲综合色网址| 天美传媒精品一区二区| 我要看黄色一级片免费的| 啦啦啦啦在线视频资源| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲精品美女久久av网站| 久久99一区二区三区| 最黄视频免费看| 中文字幕最新亚洲高清| 日韩免费高清中文字幕av| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 老女人水多毛片| 老汉色av国产亚洲站长工具| 一级片免费观看大全| 男女下面插进去视频免费观看| 成人手机av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久热这里只有精品99| 欧美精品高潮呻吟av久久| 春色校园在线视频观看| 欧美成人午夜精品| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 丰满迷人的少妇在线观看| 精品国产国语对白av| www日本在线高清视频| 成人国语在线视频| 两个人看的免费小视频| 亚洲四区av| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲精品乱久久久久久| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 视频在线观看一区二区三区| 男女啪啪激烈高潮av片| 免费人妻精品一区二区三区视频| 人人妻人人澡人人看| 中文字幕人妻熟女乱码| 欧美97在线视频| 两个人免费观看高清视频| 亚洲男人天堂网一区| 女人久久www免费人成看片| 欧美激情高清一区二区三区 | 寂寞人妻少妇视频99o| 久久这里只有精品19| 国产综合精华液| 黄色视频在线播放观看不卡| 丁香六月天网| 欧美激情极品国产一区二区三区| 2022亚洲国产成人精品| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲情色 制服丝袜| av电影中文网址| 免费黄网站久久成人精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产片特级美女逼逼视频| 在线观看人妻少妇| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲一区二区三区欧美精品| 高清av免费在线| av电影中文网址| 成年av动漫网址| 不卡视频在线观看欧美| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久久国产一区二区| 婷婷色综合www| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美日韩亚洲高清精品| av电影中文网址| 欧美中文综合在线视频| 视频区图区小说| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲国产欧美网| 91久久精品国产一区二区三区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 婷婷色综合大香蕉| 欧美xxⅹ黑人| 丝袜脚勾引网站| 国产成人免费无遮挡视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 捣出白浆h1v1| 夫妻性生交免费视频一级片| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产麻豆69| 国产精品女同一区二区软件| 一二三四中文在线观看免费高清| 精品国产乱码久久久久久小说| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 精品国产国语对白av| 久热久热在线精品观看| 人妻系列 视频| 国产又爽黄色视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲美女黄色视频免费看| 欧美精品av麻豆av| 最近2019中文字幕mv第一页| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 一级a爱视频在线免费观看| 欧美97在线视频| 一级片免费观看大全| 18在线观看网站| 欧美另类一区| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久久精品免费免费高清| 一级片免费观看大全| 亚洲综合色网址| 久久久久精品性色| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 麻豆av在线久日| 91在线精品国自产拍蜜月| 老熟女久久久| 国产成人精品婷婷| 老司机亚洲免费影院| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 热99久久久久精品小说推荐| 中文欧美无线码| 久久97久久精品| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产男女内射视频| 国产精品免费视频内射| 国产一区二区三区综合在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 一本久久精品| 久久人人97超碰香蕉20202| 成人免费观看视频高清| 国产97色在线日韩免费| av国产久精品久网站免费入址| 如何舔出高潮| 久久国产精品大桥未久av| 久久这里只有精品19| av国产精品久久久久影院| 如何舔出高潮| 国产欧美亚洲国产| 赤兔流量卡办理| 免费黄网站久久成人精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| xxx大片免费视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲av男天堂| 色播在线永久视频| 丁香六月天网| 国产精品不卡视频一区二区| 街头女战士在线观看网站| 国产精品一区二区在线不卡| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 亚洲经典国产精华液单| 人体艺术视频欧美日本| 夫妻午夜视频| 性色av一级| 亚洲国产精品999| 亚洲第一区二区三区不卡| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日韩av不卡免费在线播放| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 高清不卡的av网站| 午夜精品国产一区二区电影| 美女午夜性视频免费| 久久精品久久久久久久性| 两个人免费观看高清视频| 在线观看免费视频网站a站| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 波野结衣二区三区在线| 亚洲精品国产av蜜桃| 成人午夜精彩视频在线观看| 日韩人妻精品一区2区三区| 日日撸夜夜添| 亚洲人成电影观看| 9色porny在线观看| www.自偷自拍.com| 亚洲人成77777在线视频| 少妇人妻久久综合中文| 久久97久久精品| 成年av动漫网址| 深夜精品福利| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 十八禁网站网址无遮挡| 波多野结衣一区麻豆| 久久热在线av| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产av精品麻豆| 午夜激情久久久久久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 免费大片黄手机在线观看| 精品一区二区免费观看| 高清不卡的av网站| 丝袜喷水一区| 久久久久久久久久久久大奶| 国产精品 欧美亚洲| 少妇熟女欧美另类| 国产在线视频一区二区| 国产成人免费观看mmmm| av女优亚洲男人天堂| 90打野战视频偷拍视频| 黄色毛片三级朝国网站| 成年人免费黄色播放视频| 精品一区在线观看国产| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美精品国产亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 最新中文字幕久久久久| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产黄频视频在线观看| 亚洲三区欧美一区| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 女性被躁到高潮视频| 亚洲成人av在线免费| 最近中文字幕高清免费大全6| kizo精华| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲三级黄色毛片| av福利片在线| 久久久久久久国产电影| 观看av在线不卡| 在线免费观看不下载黄p国产| 男女下面插进去视频免费观看| 婷婷色综合www| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 一本色道久久久久久精品综合| 超碰成人久久| 成人影院久久| 人妻少妇偷人精品九色| 精品视频人人做人人爽| 18在线观看网站| 午夜免费鲁丝| 亚洲国产精品国产精品| 欧美xxⅹ黑人| 欧美少妇被猛烈插入视频| 婷婷成人精品国产| 18禁观看日本| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲人成77777在线视频| 一本久久精品| 日韩电影二区| 亚洲欧美成人精品一区二区| 男女免费视频国产| 亚洲情色 制服丝袜| 丝袜喷水一区| 日本色播在线视频| 国产片特级美女逼逼视频| 99re6热这里在线精品视频| 中国三级夫妇交换| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美精品人与动牲交sv欧美| av电影中文网址| 国产精品.久久久| 多毛熟女@视频| 伊人久久国产一区二区| av在线观看视频网站免费| 亚洲国产精品一区三区| 精品人妻在线不人妻| 精品久久久久久电影网| 天堂俺去俺来也www色官网| 成人毛片a级毛片在线播放| 午夜日韩欧美国产| 成年动漫av网址| 人人妻人人澡人人看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 女人久久www免费人成看片| 国产精品欧美亚洲77777| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 只有这里有精品99| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久久久精品人妻al黑| 夫妻午夜视频| 91成人精品电影| 免费观看a级毛片全部| a 毛片基地| 黑丝袜美女国产一区| 欧美国产精品一级二级三级| 免费看av在线观看网站| 午夜福利在线免费观看网站| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 18禁观看日本| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 久久人人爽人人片av| 色网站视频免费| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 免费黄色在线免费观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 女性被躁到高潮视频| 国产精品二区激情视频| 亚洲精品乱久久久久久| 青春草国产在线视频| 久久久欧美国产精品| 永久免费av网站大全| 成人手机av| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲一码二码三码区别大吗| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美 日韩 精品 国产| 国产亚洲精品第一综合不卡| 美女午夜性视频免费| 亚洲欧美一区二区三区久久| 日本欧美国产在线视频| 妹子高潮喷水视频| 伦精品一区二区三区| 伦理电影大哥的女人| 九九爱精品视频在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 看十八女毛片水多多多| 日本色播在线视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 99久国产av精品国产电影| 婷婷色综合www| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 热99国产精品久久久久久7| 成年女人在线观看亚洲视频| 日韩制服骚丝袜av| 香蕉精品网在线| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产老妇伦熟女老妇高清| 老司机影院毛片| 国精品久久久久久国模美| 国产精品不卡视频一区二区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| av在线老鸭窝| 精品一区二区免费观看| 中文字幕亚洲精品专区| 大香蕉久久成人网| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产福利在线免费观看视频| 亚洲综合精品二区| 亚洲经典国产精华液单| 国产av国产精品国产| 亚洲,欧美,日韩| 男女国产视频网站| 丝袜在线中文字幕| 丝袜人妻中文字幕| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲,欧美,日韩| 国产视频首页在线观看| 成年动漫av网址| 在线观看三级黄色| 老女人水多毛片| 日韩制服骚丝袜av| 男人舔女人的私密视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产成人精品婷婷| 国产深夜福利视频在线观看| 日本色播在线视频| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 咕卡用的链子| 女人久久www免费人成看片| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 自线自在国产av| 一区在线观看完整版| 亚洲精品在线美女| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 高清欧美精品videossex| 精品酒店卫生间| 午夜免费鲁丝| 欧美黄色片欧美黄色片| av一本久久久久| h视频一区二区三区| 国产成人91sexporn| 自线自在国产av| 最黄视频免费看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 男人爽女人下面视频在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产免费视频播放在线视频| 成年人免费黄色播放视频| 色视频在线一区二区三区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 有码 亚洲区| 午夜影院在线不卡| 七月丁香在线播放| 亚洲伊人色综图| 久久久久精品久久久久真实原创| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日韩av在线免费看完整版不卡| 免费黄网站久久成人精品| 免费人妻精品一区二区三区视频| 一边亲一边摸免费视频| 久久热在线av| 在线观看一区二区三区激情| 成人国产麻豆网| 一级片'在线观看视频| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日韩 亚洲 欧美在线| av网站免费在线观看视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 99久国产av精品国产电影| 成年美女黄网站色视频大全免费| 咕卡用的链子| 精品国产露脸久久av麻豆| 久久午夜福利片| 久久久国产精品麻豆| 热re99久久国产66热| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品久久久久久av不卡| 九草在线视频观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久鲁丝午夜福利片| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲精品美女久久av网站| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲久久久国产精品| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产又色又爽无遮挡免| 国产精品欧美亚洲77777| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 在线观看国产h片| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产亚洲最大av| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 在线精品无人区一区二区三| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产成人精品福利久久| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 深夜精品福利| 中文字幕av电影在线播放| 久久女婷五月综合色啪小说| 一本久久精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 三级国产精品片| 波多野结衣一区麻豆| 国产深夜福利视频在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 男人添女人高潮全过程视频| 中文字幕最新亚洲高清| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 丝袜美足系列| 永久网站在线| 久久精品夜色国产| 街头女战士在线观看网站| 午夜精品国产一区二区电影| 精品一区二区免费观看| 国产色婷婷99| 精品一区在线观看国产| 不卡视频在线观看欧美| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲欧美精品自产自拍| 免费黄色在线免费观看| 免费观看a级毛片全部| 伊人久久国产一区二区| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久久久久人人人人人| 精品一区二区免费观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 久久久久人妻精品一区果冻| 美女高潮到喷水免费观看| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲精品自拍成人| 中文字幕制服av| 少妇的丰满在线观看| 赤兔流量卡办理| 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| a级毛片黄视频| 久久99精品国语久久久| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲av男天堂| 午夜福利一区二区在线看| xxxhd国产人妻xxx| 国产精品av久久久久免费| 美女国产高潮福利片在线看| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产精品免费大片| 亚洲精品美女久久av网站| 最近手机中文字幕大全| 婷婷色麻豆天堂久久| 欧美成人午夜免费资源| 久久久国产一区二区| 在线精品无人区一区二区三| 人妻人人澡人人爽人人|