高脂血癥患者腸道菌群宏觀分布與血清血脂水平的相關(guān)性研究*

鐘超，楊培，李根秀（興國縣人民醫(yī)院急診科，江西 興國 342400）

高脂血癥多由脂代謝異常所致，多表現(xiàn)為血漿內(nèi)甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）水平異常升高。高脂血癥早期無典型癥狀，多數(shù)患者于體檢或其他疾病診斷時發(fā)現(xiàn)，若不及時治療，血脂持續(xù)異?？杉铀賱用}粥樣硬化進(jìn)程，增加心腦血管疾病發(fā)生風(fēng)險［1-2］。目前臨床已將高血脂作為冠心病、腦卒中等疾病發(fā)生的獨(dú)立危險因素，故在高脂血癥確診后多及時予以飲食控制、降脂治療等綜合治療，以避免長時間血脂代謝異常造成的危害。腸道菌群具有重要生理功能，可參與食物攝取、物質(zhì)代謝、黏膜屏障形成、保護(hù)宿主等，且腸道菌群代謝產(chǎn)生的短鏈脂肪酸可為腸上皮細(xì)胞提供良好營養(yǎng)，以便于上皮細(xì)胞生長及分化［3］。近年來臨床深入研究發(fā)現(xiàn)，脂代謝異常會促使腸道菌群分布發(fā)生一定變化，涉及乳桿菌、擬桿菌、雙歧桿菌等多種菌群，補(bǔ)充腸道益生菌或可成為輔助治療高脂血癥的重要手段［4-5］。但國內(nèi)對于高脂血癥患者腸道菌群與血脂水平的相關(guān)性研究尚不多見，其具體變化還需進(jìn)一步深入研究。鑒于此，本研究旨在分析高脂血癥患者腸道菌群分布與血脂水平的相關(guān)性，明確腸道菌群在疾病發(fā)生中的作用。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年1 月至2021 年12 月于我院就治的高脂血癥患者100 例設(shè)為觀察組，選取同期非高脂血癥患者100 例作為對照組。觀察組中男65 例、女35 例；年齡30～58（43.58±4.14）歲；體質(zhì)量指數(shù)19～28（24.58±2.14）kg/m2；文化程度：20 例大專及以上，43 例高中，37 例初中及以下。對照組中男61 例、女39 例；年齡31～59（43.62±4.18）歲；體質(zhì)量指數(shù)19～28（24.63±2.18）kg/m2；文化程度：21 例大專及以上，45 例高中，34 例初中及以下。兩組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、文化程度等一般資料比較，無顯著差異（P＞0.05），具有可比性，本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《中國成人血脂異常防治指南（2016 年修訂版）》［6］中高脂血癥診斷，TC≥6.22mmol/L，低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）≥4.14 mmol/L，TG≥2.26 mmol/L；（2）精神狀態(tài)正常；（3）患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并糖尿病等代謝性疾??；（2）肝腎衰竭；（3）近期接受過降脂、益生菌治療等；（4）妊娠期或哺乳期；（5）繼發(fā)性高脂血癥。

1.3 方法 所有入選研究對象均清晨采集3 ml 空腹血，以3 500r/min 速度離心處理，獲得血清后進(jìn)行檢測，以全自動生化分析儀檢測TC、LDL-C、TG 水平變化。收集所有研究對象糞便標(biāo)本，分裝于-80℃環(huán)境內(nèi)保存?zhèn)溆?，所有糞便標(biāo)本均使用QIAamp DNA Stool Mini Kit（QIAGEN）提取0.3 g 糞便細(xì)菌基因組DNA，均嚴(yán)格按照試劑盒要求操作，提取而出的糞便總DNA 均置于-20℃環(huán)境內(nèi)備用。定量PCR 檢測：選取雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、擬桿菌屬、腸球菌屬、腸桿菌科細(xì)菌及糞桿菌作為優(yōu)勢菌檢查，細(xì)菌定量分析引物參考表1。采用熒光染料法于定量PCR 檢測儀ABI 7900HT Fast 上操作，均采用自帶系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，所有反應(yīng)均行3 復(fù)孔檢測，設(shè)立空白對照組，最后依據(jù)測定樣本Ct 值，參考標(biāo)準(zhǔn)曲線測定待測樣品靶基因起始拷貝數(shù)。

表1 定量PCR 檢測腸道優(yōu)勢菌引物

1.4 臨床觀察指標(biāo)（1）腸道優(yōu)勢菌群定量檢測變化：比較高脂血癥、非高脂血癥患者腸道優(yōu)勢菌群定量檢測情況。（2）血脂水平：比較高脂血癥、非高脂血癥患者TC、LDL-C、TG 水平變化。（3）腸道優(yōu)勢菌群與血脂水平相關(guān)性：采用Pearson 相關(guān)性分析腸道優(yōu)勢菌群與血脂水平的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行處理。計量資料采用（）表示，行t 檢驗(yàn)；計數(shù)資料采用例（百分率）表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腸道優(yōu)勢菌群定量檢測變化比較 觀察組雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、糞桿菌定量低于對照組，腸桿菌科細(xì)菌、腸球菌屬定量高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩組擬桿菌屬定量相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組腸道優(yōu)勢菌群定量檢測變化對比（，CFU/g）

表2 兩組腸道優(yōu)勢菌群定量檢測變化對比（，CFU/g）

2.2 兩組血脂水平比較 觀察組TC、LDL-C、TG 水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組血脂水平比較（，mmol/L）

表3 兩組血脂水平比較（，mmol/L）

2.3 腸道優(yōu)勢菌群與血脂水平相關(guān)性分析 雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、糞桿菌與TC、LDL-C、TG 呈明顯負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；腸桿菌科細(xì)菌、腸球菌屬與TC、LDL-C、TG 呈明顯正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 腸道優(yōu)勢菌群與血脂水平相關(guān)性

3 討論

高脂血癥病因復(fù)雜，臨床認(rèn)為在遺傳傾向基礎(chǔ)上，一旦攝入過多脂肪或脂蛋白合成、代謝異常，均可促使血脂代謝異常，表現(xiàn)為TC、LDL-C、TG 異常升高。而高脂血癥為心腦血管疾病獨(dú)立危險因素，長期處于高血脂狀態(tài)可促使大量脂質(zhì)沉積于動脈管壁，加速粥樣斑塊形成，使得動脈管腔不斷狹窄，甚至發(fā)生阻塞，造成管腔內(nèi)血液流速減慢，導(dǎo)致相應(yīng)部位發(fā)生缺血性損傷［7-8］。高脂血癥還可誘發(fā)血管內(nèi)皮細(xì)胞損害、平滑肌細(xì)胞異常增殖等一系列病理變化，增加心腦血管疾病發(fā)生風(fēng)險，臨床需充分重視高脂血癥的治療。但隨著臨床對高脂血癥發(fā)生機(jī)制的進(jìn)一步探索發(fā)現(xiàn)，常規(guī)治療方法在高脂血癥治療中存在一定局限性，還需探索新的治療方式。

腸道作為人體最大淋巴器官，其內(nèi)存在上千種微生物，且微生物間存在復(fù)雜的相互作用關(guān)系，從而與宿主進(jìn)行良好共生。臨床發(fā)現(xiàn)腸道菌群紊亂與多種疾病存在密切關(guān)系，且與高脂血癥的發(fā)生相關(guān)。當(dāng)腸道菌群紊亂后可引起腸源性內(nèi)毒素血癥，而腸源性內(nèi)毒素血癥誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可參與高脂血癥發(fā)生及發(fā)展［9-10］。但臨床關(guān)于腸道菌群與血脂水平間的相關(guān)性研究較少，還需臨床進(jìn)一步明確其相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示，觀察組雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、糞桿菌定量低于對照組，腸桿菌科細(xì)菌、腸球菌屬定量高于對照組（P＜0.05）；兩組擬桿菌屬定量相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組TC、LDL-C、TG 水平高于對照組（P＜0.05）；雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、糞桿菌與TC、LDL-C、TG 呈明顯負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；腸桿菌科細(xì)菌、腸球菌屬與TC、LDL-C、TG 呈明顯正相關(guān)（P＜0.05）。提示高脂血癥患者腸道菌群存在不同程度紊亂現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、糞桿菌下降，腸桿菌科細(xì)菌、腸球菌屬升高，且腸道菌群變化與血脂水平存在顯著相關(guān)性。其原因?yàn)槟c道菌群在長時短鏈脂肪酸、促進(jìn)膽固醇降解、影響膽汁循環(huán)等方面具有重要作用，能夠參與血脂在血與肝臟的重分布，達(dá)到降低膽固醇目的。同時，腸道內(nèi)部分菌群能夠生產(chǎn)膽固醇氧化酶，使得膽固醇生成膽固醇酮，最后被降解為糞固醇等隨糞便排出體外，且雙歧桿菌、乳桿菌等能發(fā)酵腸道內(nèi)殘余的多糖及淀粉，促使更多的短鏈脂肪酸生成。而短鏈脂肪酸內(nèi)丙酸可對肝臟內(nèi)脂肪及脂肪酸合成進(jìn)行抑制，進(jìn)而有效調(diào)節(jié)脂代謝。雙歧桿菌、乳桿菌等能夠產(chǎn)生膽汁酸水解酶，對脂類進(jìn)行良好溶解，膽汁酸還可結(jié)合膽固醇生成膽汁酸鹽，進(jìn)而加快水相內(nèi)膽固醇溶解，增加膽汁酸合成，使得血液內(nèi)更多的膽固醇被轉(zhuǎn)化，以達(dá)到降脂目的［11-12］。由此可見，高脂血癥患者體內(nèi)腸道優(yōu)勢菌分布與血脂水平存在明顯相關(guān)性，血脂水平高則雙歧桿菌、乳桿菌等下降?？紤]高血脂會破壞腸道正常菌群代謝及生長，而腸道菌群紊亂又可加重脂代謝紊亂，形成惡性循環(huán)，臨床通過補(bǔ)充雙歧桿菌、乳桿菌等優(yōu)勢菌數(shù)量則能夠糾正腸道微生態(tài)失衡狀態(tài)，從而對肝臟膽固醇合成等進(jìn)行影響，從而在一定程度上防治高脂血癥。而腸桿菌科細(xì)胞屬于革蘭氏陰性菌，其水平升高或與體內(nèi)存在內(nèi)毒素血癥有關(guān)。腸球菌屬升高原因尚未能夠完全明確，考慮可能與宿主差異及個體間差異有關(guān)，后續(xù)還需進(jìn)一步開展大樣本、多中心的研究，進(jìn)一步明確腸道菌群分布與血脂水平的相關(guān)性。

綜上所述，高脂血癥患者腸道菌群明顯存在失衡現(xiàn)象，腸道優(yōu)勢菌群分布出現(xiàn)顯著變化，且其分布與血脂水平存在相關(guān)性，臨床或可通過重建腸道微生態(tài)輔助治療高脂血癥，為更好的控制血脂水平提供重要參考。