梅花草提取物對(duì)幽門(mén)螺桿菌小鼠胃黏膜定植的影響及其機(jī)制

金 昭,王儒帥,王朝陽(yáng),何占彪,田復(fù)明,王睿君

（1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院影像診斷科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050；3.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科 內(nèi)蒙古自治區(qū)神經(jīng)系統(tǒng)疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050）

在我國(guó)，幽門(mén)螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）感染率始終居高不下，其為引發(fā)慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌和胃黏膜淋巴瘤的主要原因。Hp為Ⅰ類致癌因子，與多種消化道疾病有密切關(guān)聯(lián)，同時(shí)其致病機(jī)理復(fù)雜而多樣，其感染引發(fā)胃黏膜病變的機(jī)制主要包括Hp的黏附定植、毒力因子的釋放和引發(fā)免疫炎癥反應(yīng)［1-3］。蒙藥梅花草（Parnassia palustris Linn）（烏力地格）系虎耳草科梅花屬植物梅花草的干燥花朵，為蒙古族歷代和民間常用的特色蒙藥，其味甘、苦，無(wú)明顯毒性，具有破痞去滯、抑協(xié)日（清熱解毒）等功效。目前，關(guān)于梅花草對(duì)Hp作用的相關(guān)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究探討梅花草作為一種潛在應(yīng)用于Hp根除和胃黏膜保護(hù)的蒙藥在體內(nèi)外的抑菌消炎和黏膜保護(hù)作用，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、菌株、藥物、主要試劑和儀器117只6周齡雄性昆明小鼠，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（京）2017-0033。Hp菌株（Hp SS1）由北京大學(xué)第一醫(yī)院消化內(nèi)科實(shí)驗(yàn)室保存并惠贈(zèng)。梅花草采集于內(nèi)蒙古自治區(qū)赤峰市賽汗烏拉地區(qū)，采集后將整株藥品置于室內(nèi)自然陰干。經(jīng)內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院蒙藥鑒定教研室伊麗娜教授鑒定為虎耳草科梅花草屬植物梅花草，委托內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院制劑室處理制備用于實(shí)驗(yàn)。

Hp抗 體（MA5-36068）（美 國(guó)Invitrogen公司），白細(xì)胞介素2（interleukin-2，IL-2）（北京達(dá)科為生物技術(shù)股份有限公司），白細(xì)胞介素8（interleukin-8，IL-8）（上海烜雅生物科技有限公司），腫 瘤 壞 死 因 子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）（英國(guó)Abcam公司），雷貝拉唑鈉腸溶片［衛(wèi)材（中國(guó)）藥業(yè)有限公司，規(guī)格10 mg×7粒］、克拉霉素片（上海雅培制藥有限公司，規(guī)格250 mg×8粒），阿莫西林膠囊（珠海聯(lián)邦制藥公司，規(guī)格500 mg×48粒），膠體果膠鉍膠囊（山西安特生物制藥有限公司，規(guī)格100 mg×48粒），尿素酶（上海惠泰醫(yī)療科技公司），RNA prep pure Cell/Bacteria Kit（北京天根生化科技有限公司），cDNA合成試劑盒（SYBR@primeScriptTMRTPCR Kit）（上海愛(ài)必信生物科技有限公司），HE染色試劑盒（C0105S）（上海碧云天生物技術(shù)有限公司），免疫組織化學(xué)試劑盒（深圳達(dá)盟生物科技有限公司）。

透射電鏡（Tecnai G2 20 S-TWIN）（美國(guó)FEI公司），ZN-1000A高速萬(wàn)能粉碎機(jī)（中南制藥機(jī)械廠），Bruker AVAIVCEm-500型核磁共振波譜儀（北京布魯克科技有限公司），液相色譜儀（LC-20A）（日本島津公司），超純水機(jī)（GYJ1/2-40L-S）（重慶華創(chuàng)責(zé)任有限公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國(guó)Heidolph公司），電熱套（98-1B型）（天津市秦斯特儀器有限公司），超聲波清洗器（KQ-100型）（江蘇省昆山市超聲儀器有限公司），循環(huán)水式多用真空泵（SHZ-DⅢ）（鄭州長(zhǎng)城儀器有限公司），1 100高效液相色譜議（美國(guó)Agilent公司），電子分析天平（AB135-S）（瑞士梅特勒托利多公司），SG1200H超聲波清洗器（上海冠特超聲儀器廠），DL-1溶劑過(guò)濾器（天津市東康科技有限公司）。

1.2 梅花草提取物制備梅花草水提物：稱取30 g干燥梅花草，打粉機(jī)粉碎后，注入200 mL去離子水，于95℃水浴中浸提1 h后過(guò)濾，過(guò)濾后60℃減壓濃縮并量取濃縮液。濃縮液在75℃烘箱中烘干備用，作為梅花草水提物，水提物使用0.22 μm濾器除菌，備用。梅花草乙醇提取物：采用95%乙醇對(duì)梅花草加熱回流提取時(shí)，梅花草與乙醇的料液比為30 g∶150 mL，加熱溫度為95℃，每次提取4 h，共提取3次，合并3次所得的提取液為梅花草乙醇提取物。將上述梅花草乙醇提取物于噴霧干燥塔內(nèi)干燥，噴霧干燥塔進(jìn)風(fēng)溫度為120℃～150℃，出 風(fēng) 溫 度 為90℃～95℃，霧 化 頻 率為220～300 Hz，加料頻率為4.0～6.5 Hz，引風(fēng)頻率為20～50 Hz，可較好保留梅花草固有的芳香物質(zhì)和熱敏活性成分。梅花草提取物：梅花草乙醇提取物與梅花草水提物等質(zhì)量混合，用于后期實(shí)驗(yàn)。

1.3 Hp菌株培養(yǎng)采用微需氧培養(yǎng)法，氣體達(dá)到微需氧條件（85%氮?dú)猓?0%二氧化碳，5%氧氣）。Hp SS1菌株接種于含7%馬血清固體平板上，每100 mL固體Hp培養(yǎng)基中添加1 mL微生物添加劑，37℃恒溫培養(yǎng)48 h，經(jīng)快速尿素酶試驗(yàn)（rapid urease test，RUT）、涂片革蘭染色和觸酶鑒定為陽(yáng)性后，于上述條件下傳代增菌，接種至腦心浸液中，比濁法調(diào)整菌懸濁液濃度為4麥?zhǔn)蠞岫?，?2×108CFU·mL－1，所得菌株濃度為本研究灌胃所用的實(shí)驗(yàn)濃度。

1.4 瓊脂稀釋法測(cè)定最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC）采用瓊脂稀釋法測(cè)定梅花草提取物的MIC。刮取培養(yǎng)48～72 h的Hp接種于液體培養(yǎng)基中，采用無(wú)菌生理鹽水將其稀釋至1.5×108CFU·mL－1。滴加200 μL菌液于培養(yǎng)基表面，涂布棒均勻接種于含有不同濃度（1.25、2.50、5.00、10.00，20.00和40.00 g·L－1）梅花草提取物的平板上，37℃微需氧培養(yǎng)72 h后觀察，以未檢測(cè)出Hp生長(zhǎng)的最低藥物濃度為MIC。MIC測(cè)定根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果。

1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）法檢測(cè)Hp定植黏附相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平采用純水溶解梅花草水提物至終濃度為20 g·L－1。將培養(yǎng)的Hp菌液用PBS緩沖液重懸至1×107CFU·mL－1，取0.1 mL Hp PBS混懸液加入配好的梅花草溶液中，37℃震蕩微氧孵育24 h，離心棄上清，采用PBS緩沖液沖洗3次后，采用RNA prep pure Cell/Bacteria Kit分離總RNA。cDNA合成按試劑盒操作說(shuō)明。引物序 列 見(jiàn) 表1。PCR反 應(yīng) 體 系：cDNA 2 μL，UltraSYBR mixture 25 μL，10 μmol·L－1上 下 游 引物各1 μL，以去離子水補(bǔ)足至50 μL。反應(yīng)條件：95℃、10 min；95℃、10 s，60℃、1 min，40個(gè)循環(huán)。采用2－△△Ct法計(jì)算目的基因mRNA表達(dá)水平。

表1 Hp定植相關(guān)基因引物序列Tab.1 Primer sequences of genes related to Hp colonization

1.6 小鼠體內(nèi)Hp定植模型設(shè)計(jì)和干預(yù)93只小鼠用于造模，隔1 d灌胃1次，灌胃前禁食12 h，禁水0.5 h，以200 μL濃度為12×108CFU·mL－1Hp活菌，共灌胃6次；生理鹽水組12只，等量滅菌生理鹽水灌胃，隔1 d灌胃1次，每次200 μL，共灌胃6次；空白對(duì)照組12只，自然飼養(yǎng)，無(wú)任何干預(yù)。

在接種Hp 4周后，隨機(jī)處死3只小鼠，行RUT快速判斷Hp的感染情況，分析整體感染率；將剩余90只感染小鼠分為6組，分別為Hp組、三聯(lián)組、四聯(lián)組、梅花草組、三聯(lián)+梅花草組和四聯(lián)+梅花草組，每組15只。藥物干預(yù)參照臨床標(biāo)準(zhǔn)和成人與昆明小鼠體質(zhì)量換算，包括雷貝拉唑0.02 mg·d－1、阿 莫 西 林1 mg·d－1和 克 拉 霉 素0.5 mg·d－1的三聯(lián)療法和四聯(lián)療法（外加膠體果膠鉍0.3 mg·d－1），梅花草提取物灌胃20 mg·d－1，每天禁食禁水12 h后灌胃給藥200 μL，給藥后30 min給水進(jìn)食。連續(xù)灌胃5 d。停藥后第2天，對(duì)小鼠實(shí)施安樂(lè)死，留取血清和胃組織進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測(cè)各組小鼠血清中IL-2、IL-8和TNF-α水平。

Hp感染率檢測(cè)：對(duì)小鼠連續(xù)灌胃Hp 5 d，感染4周后，隨機(jī)選取3只，采用頸椎脫位法處死，解剖小鼠，沿幽門(mén)-賁門(mén)線由胃大彎側(cè)將胃剪開(kāi)，參照桐城會(huì)議共識(shí)［4］，均為Hp陽(yáng)性，計(jì)算Hp感染率。Hp感染率=HP檢測(cè)陽(yáng)性小鼠數(shù)/處死小鼠數(shù)×100%。感染率＞85%即可滿足實(shí)驗(yàn)要求。

Hp根除率檢測(cè)：在上述藥物治療后的第2天，各組處死3只小鼠，檢測(cè)感染情況，計(jì)算Hp根除率。Hp根除率=（Hp組感染率－治療組感染率）/Hp組感染率×100%。

1.7 透射電鏡觀察各組小鼠胃黏膜上皮組織超微結(jié)構(gòu)將各組小鼠胃黏膜組織于2.5%磷酸鹽緩沖液-戊二醛（pH=7.4）和4℃預(yù)冷的1%四氧化鋨固定后迅速嵌入環(huán)氧樹(shù)脂中，制備超薄切片，乙酸鈾酰和檸檬酸鉛染色，采用透射電鏡觀察小鼠胃黏膜上皮超微結(jié)構(gòu)。

1.8 HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察各組小鼠胃黏膜組織病理形態(tài)表現(xiàn)及Hp感染情況按照HE染色試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察各組小鼠胃黏膜組織病理形態(tài)表現(xiàn)。Hp免疫組織化學(xué)染色采用En vision法，Hp菌體陽(yáng)性著色為黃色。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組小鼠Hp定植黏附相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平和小鼠血清中炎癥因子水平均符合正態(tài)分布且方差齊，以±s表示，多組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間樣本均數(shù)兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；Hp感染率和Hp根除率以百分率（%）表示，組間比較采用Fisher精確檢驗(yàn)法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 梅花草的MIC瓊脂稀釋法測(cè)定MIC結(jié)果顯示：于10和20 g·L－1梅花草含藥平板中均未檢測(cè)出Hp，即10 g·L－1為梅花草的MIC值。

2.2 Hp中定植黏附相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平與Hp組比較，梅花草組Hp中Bab A、Cag A和Vac A mRNA表達(dá)水平降低（P＜0.05或P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表2 Hp定植黏附相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平Tab.2 Expression levels of Hp colonization-and adhesionrelated gene mRNA (n=15，±s）

表2 Hp定植黏附相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平Tab.2 Expression levels of Hp colonization-and adhesionrelated gene mRNA (n=15，±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs Hp group.

Group Hp Parnassia palustris Linn Bab A 15.6±0.61 5.93±2.21*Cag A 35.2±2.46 8.50±3.65**Vac A 22.4±0.92 8.14±3.37**

2.3 2組小鼠胃黏膜大體表現(xiàn)和免疫組織化學(xué)染色情況大體觀察，Hp組小鼠可見(jiàn)部分胃黏膜糜爛和潰瘍，出血和充血明顯，見(jiàn)圖1A；梅花草組小鼠胃黏膜表面光滑，未見(jiàn)糜爛、出血和潰瘍，胃體和胃竇部腺體完整，無(wú)萎縮及上皮瘤內(nèi)變，見(jiàn)圖1B。免疫組織化學(xué)染色，Hp組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞表面定植Hp，為棕褐點(diǎn)棒狀或桿狀顆粒；梅花草組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞表面無(wú)Hp定植，Hp感染為陰性。見(jiàn)圖1C和D。

圖1 2組小鼠胃黏膜大體和組織病理形態(tài)表現(xiàn)Fig.1 Gross morphology and pathomorphology of gastric mucosa tissue of mice in two groups

2.4 各組小鼠Hp感染率和根除率RUT檢測(cè)結(jié)果顯示：與Hp組比較，梅花草組小鼠Hp感染率降低（P＜0.05）；與Hp組比較，三聯(lián)組和四聯(lián)組小鼠Hp感染率也均有不同程度的降低（P＜0.05）。梅花草組小鼠Hp根除率與三聯(lián)組或四聯(lián)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與三聯(lián)組比較，三聯(lián)+梅花草組小鼠Hp根除率升高（P＜0.01）；與四聯(lián)組比較，四聯(lián)+梅花草組小鼠Hp根除率升高（P＜0.01）。見(jiàn)表3。

表3 各組小鼠胃黏膜的RUT結(jié)果Tab.3 Results of RUT of gastric mucosa of mice in various groups (n=3，η/%）

2.5 各組小鼠胃黏膜組織病理形態(tài)表現(xiàn)和超微結(jié)構(gòu)空白對(duì)照組小鼠胃黏膜結(jié)構(gòu)清晰。Hp組可見(jiàn)小鼠胃黏膜脫落、糜爛，黏膜層變薄，結(jié)構(gòu)不完整，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。三聯(lián)組和四聯(lián)組小鼠胃黏膜組織病理變化有一定改善。梅花草組小鼠胃黏膜組織厚度增加，三聯(lián)+梅花草組和四聯(lián)+梅花草組小鼠胃黏膜組織厚度明顯增加。見(jiàn)圖2。

圖2 各組小鼠胃黏膜組織病理形態(tài)表現(xiàn)（HE，×200）Fig.2 Pathomorphology of gastric mucosa tissue of mice in various groups（HE,×200）

透射電鏡觀察：空白對(duì)照組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞中線粒體結(jié)構(gòu)完整，內(nèi)嵴清晰；Hp組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞中線粒體結(jié)構(gòu)破裂，內(nèi)嵴紊亂；三聯(lián)組和四聯(lián)組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞中線粒體結(jié)構(gòu)在一定程度上修復(fù)，梅花草組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞中線粒體結(jié)構(gòu)得到改善，三聯(lián)+梅花草組和四聯(lián)+梅花組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞中線粒體功能得到有效保護(hù)。見(jiàn)圖3?？瞻讓?duì)照組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞微絨毛排列整齊，結(jié)構(gòu)較長(zhǎng)；Hp組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞微絨毛斷裂且消失；三聯(lián)組和四聯(lián)組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞微絨毛損傷均不同程度恢復(fù)；梅花草組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞微絨毛結(jié)構(gòu)恢復(fù)較好，三聯(lián)+梅花草組和四聯(lián)+梅花組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞微絨毛結(jié)構(gòu)整體較好。見(jiàn)圖4。

圖3 各組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞中線粒體結(jié)構(gòu)（×10 000）Fig.3 Mitochondrial structures of gastric mucosal epithelial cells of mice in various groups（×10 000）

圖4 各組小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞微絨毛結(jié)構(gòu)(×10 000)Fig.4 Microvilli structures of gastric mucosal epithelial cells of mice in various groups（×10 000）

2.6 各組小鼠血清中炎癥因子水平與空白對(duì)照組和生理鹽水組比較，Hp組小鼠血清中IL-2水平降低（P＜0.01），IL-8和TNF-α水平均升高（P＜0.01）；與Hp組比較，三聯(lián)組、四聯(lián)組、梅花草組、三聯(lián)+梅花草組和四聯(lián)+梅花草組小鼠血清中IL-2水平均升高（P＜0.05），IL-8和TNF-α水平降低（P＜0.05或P＜0.01）；與三聯(lián)組和四聯(lián)組比較，三聯(lián)+梅花草組和四聯(lián)+梅花草組小鼠血清中TNF-α水平明顯降低（P＜0.01）。見(jiàn)表4。

表4 各組小鼠血清中炎癥因子水平Tab.4 Levels of inflammatory factors in serum of mice in various groups [x±s，ρB/（ng·L-1）］

3 討 論

目前臨床治療Hp感染的方法為四聯(lián)療法，包括質(zhì)子泵抑制劑加2種抗生素（如克拉霉素和阿莫西林）與膠體果膠鉍組合。近年來(lái)隨著Hp對(duì)抗生素的耐藥率不斷升高，Hp根除率在不斷降低。單純通過(guò)增加抗生素劑量和延長(zhǎng)療程的方法已逐漸暴露出瓶頸，尋求一種安全、高效的抗Hp新藥，已成為現(xiàn)在臨床亟待解決的問(wèn)題［5-7］。

梅花草在蒙醫(yī)臨床實(shí)踐中用于治療肝血痞、間熱痞、內(nèi)熱痞、脈痞、腸協(xié)日痞和臟腑協(xié)日癥，在臨床上治療黃疸型肝炎、咽喉炎、腮腺炎、脈管炎和肺結(jié)核等。目前開(kāi)展了梅花草提取物在多種實(shí)體瘤中的抗腫瘤效果評(píng)估［8-10］，采用常規(guī)柱色譜法由梅花草的抗腫瘤活性成分-二氯甲烷和乙酸乙酯萃取物中分離得到11個(gè)單體化合物，如槲皮素、綠原酸、山奈酚、金絲桃苷、沒(méi)食子酸和山奈酚-3-O-β-云香糖苷［10］。上述成分均有不同程度抗炎、抗氧化、抗腫瘤和抗病原微生物的作用，也為梅花草提取物抗Hp的治療新途經(jīng)提供了理論依據(jù)［11-14］。但其在抗菌消炎和胃黏膜保護(hù)中的作用尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。

中西醫(yī)結(jié)合抑制Hp感染的模式在臨床中可使患者受益最大化。Hp感染作為病因，基本等同于中醫(yī)學(xué)理論中的“火邪”和“熱邪”的概念。有研究［15-16］顯示：脾胃濕熱證的Hp感染患者與Hp陰性患者比較，其胃黏膜損傷程度明顯加重。脾胃濕熱證的人群由于濕熱邪交阻于中焦，病邪難以祛除，正氣日漸虛弱，久而久之滋生蟲(chóng)邪，該病理過(guò)程類似于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中Hp定植和侵襲。Hp感染首先通過(guò)表達(dá)Bab A等外膜蛋白黏附于胃黏膜細(xì)胞上，通過(guò)表達(dá)Vac A和Cag A等蛋白誘發(fā)炎癥和細(xì)胞損傷，進(jìn)而增加胃黏膜通透性，利于其遷移。Bab A是Hp外膜蛋白基因，可特異性結(jié)合宿主細(xì)胞受體，賦予Hp持久定植能力；高毒力Hp菌株參與Cag A轉(zhuǎn)運(yùn)和宿主的炎癥反應(yīng)。Vac A能夠破壞細(xì)胞內(nèi)吞作用，抑制免疫細(xì)胞，導(dǎo)致免疫耐受和慢性感染。脾胃濕熱作為病理基礎(chǔ)，易于Hp感染，又可作為病理因素，進(jìn)一步加劇胃黏膜的炎癥反應(yīng)，因此在治療中注重除濕清熱的中醫(yī)思路，以觀察具有清熱除濕作用的梅花草對(duì)于Hp體內(nèi)和體外的治療效果。

Hp可誘發(fā)多種胃部疾病，其機(jī)制可能與Hp產(chǎn)生多種酶、破壞黏膜結(jié)構(gòu)、分泌毒素和損傷免疫等有關(guān)。臨床常采用鉍劑四聯(lián)對(duì)Hp感染者進(jìn)行治療，但近年來(lái)隨著Hp耐藥性增加，療效逐漸降低?，F(xiàn)階段聯(lián)合中醫(yī)治療可提高療效，如傳統(tǒng)三聯(lián)或四聯(lián)聯(lián)用荊花胃康、半夏瀉心湯和香砂六君子湯等，均呈現(xiàn)了一定的組合優(yōu)勢(shì)［17-20］。本研究結(jié)果顯示：梅花草可協(xié)同Hp根除和具有保護(hù)胃黏膜的作用，歸結(jié)為清熱解毒之效，可有效提高Hp的根除率。證實(shí)梅花草提取物可在體內(nèi)外有效抑制Hp生長(zhǎng)、定植和侵襲能力，保護(hù)和修復(fù)胃黏膜，降低Hp感染后IL-8和TNF-α水平，保護(hù)胃黏膜亞細(xì)胞器結(jié)構(gòu)的完整性，如線粒體和微絨毛結(jié)構(gòu)，當(dāng)聯(lián)合三聯(lián)或四聯(lián)時(shí)，Hp根除和胃黏膜修復(fù)效果更佳。

綜上所述，梅花草提取物可以作為抗Hp治療的候選藥物，配合傳統(tǒng)三聯(lián)或四聯(lián)療法，可提高Hp根除效果，同時(shí)有效改善胃黏膜的炎癥狀態(tài)，促進(jìn)黏膜修復(fù)，具有潛在的臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用價(jià)值。