牡丹皮化學(xué)成分、藥理作用及其質(zhì)量標志物（Q-Marker）的預(yù)測分析

張樹蓉，趙宏蘇, 2，佟沫儒，熊俊偉，王 雪，巫夢瑩，翟宏焱，吳德玲, 2, 4，張 村，張 偉, 2, 4*

牡丹皮化學(xué)成分、藥理作用及其質(zhì)量標志物（Q-Marker）的預(yù)測分析

張樹蓉1，趙宏蘇1, 2，佟沫儒1，熊俊偉1，王 雪1，巫夢瑩1，翟宏焱3，吳德玲1, 2, 4，張 村5，張 偉1, 2, 4*

1. 安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230012 2. 中藥飲片制造新技術(shù)安徽省重點實驗室，安徽 合肥 230012 3. 安徽省食品藥品檢驗研究院，安徽 合肥 230012 4. 國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評價重點實驗室，安徽 合肥 230051 5. 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所，北京 100700

牡丹皮首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有清熱涼血、活血化瘀的功效，是臨床常用的清熱涼血藥，其化學(xué)成分主要包括苯乙酮類、萜類及其苷類、有機酸類以及其他類成分，具有抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能、保護心血管等作用。通過分析牡丹皮植物親緣學(xué)、化學(xué)成分特有性證據(jù)、化學(xué)成分可測性等的關(guān)系，對牡丹皮的質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）進行分析，并預(yù)測丹皮酚、芍藥苷、沒食子酸、苯甲酰芍藥苷、苯甲酰氧化芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、牡丹皮苷C、苯甲酸等可作為其Q-Markers，以期為牡丹皮質(zhì)量評價體系的建立提供參考。

牡丹皮；質(zhì)量標志物；丹皮酚；芍藥苷；沒食子酸；苯甲酰芍藥苷；苯甲酰氧化芍藥苷；氧化芍藥苷；1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖；丹皮酚原苷；丹皮酚新苷；牡丹皮苷C；苯甲酸

牡丹皮來源于毛茛科植物牡丹Andr的干燥根皮，載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性微寒，味辛、苦，歸心、肝、腎經(jīng)[1]，具有清熱涼血、活血化瘀的功效，臨床常用于治療熱入營血、溫毒發(fā)斑、吐血衄血、夜熱早涼、無汗骨蒸、經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲傷痛、癰腫瘡毒?！睹t(yī)別錄》記載牡丹皮“生巴郡及漢中”，目前牡丹皮藥材主要分布于安徽銅陵、亳州及山東菏澤、重慶墊江、四川中江等地，其中安徽銅陵鳳凰山所產(chǎn)的質(zhì)量最佳，稱為鳳丹皮[2]。

牡丹皮的質(zhì)量與生長合成、采收加工、飲片炮制、制劑成型均密切相關(guān)，但現(xiàn)行的質(zhì)量標準評價方法多以丹皮酚為單一成分指標，不利于對牡丹皮的質(zhì)量整體評價，因此建立全面的質(zhì)量標準體系尤為重要。中藥質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）由專屬的、與臨床療效相關(guān)的、可被檢測的化學(xué)成分組成，與中藥功能屬性等相關(guān)，能提高中藥質(zhì)量一致性、可控性[3]。因此，本文對牡丹皮化學(xué)成分、藥理作用的研究進展進行綜述，并根據(jù)中藥Q-Marker特有性、有效性、可測性、傳遞性和中醫(yī)藥理論關(guān)聯(lián)性的五原則對牡丹皮的Q-Marker進行預(yù)測，以期為牡丹皮質(zhì)量評價提供思路。

1 化學(xué)成分

牡丹皮中含有多種化學(xué)成分，主要有苯乙酮類、萜類及其苷類、有機酸類以及其他類成分，其中苯乙酮類、萜類及其苷類含量較高，是牡丹皮的主要活性成分。

1.1 苯乙酮類

以丹皮酚為代表的苯乙酮類化合物是牡丹皮中主要的化學(xué)物質(zhì)，除丹皮酚外，還包括丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、suffruticoside A等。根據(jù)化合物連接糖基的不同，苯乙酮類化合物可分為A、B、C 3類，母核結(jié)構(gòu)見圖1，具體信息見表1。

圖1 牡丹皮中苯乙酮類化合物的母核結(jié)構(gòu)

表1 牡丹皮中以苯乙酮為母核的化合物

Table 1 Compounds with acetophenone as parent nucleus from Moutan Cortex

編號化合物名稱取代基母核文獻 1丹皮酚R1＝H，R2＝OCH3，R3＝OHA4 22,5-dihydroxy-4-methoxylacetophenoneR1＝OH，R2＝OCH3，R3＝OHA4 32,5-dihydroxy-4-methylacetophenoneR1＝OH，R2＝CH3，R3＝OHA4 42-乙酰基-5-甲氧苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷R1＝H，R2＝OCH3，R3＝β-D-gluA5 5mudanoside CR1＝O-glu，R2＝OCH3，R3＝OHA5 6對羥基苯乙酮R1＝R3＝H，R2＝OHA6 74-甲氧基-3-羥基苯乙酮R1＝OH，R2＝OCH3，R3＝HA7 8suffruticoside AR1＝H，R2＝galloylB8 9suffruticoside BR1＝galloyl，R2＝HB8 10丹皮酚新苷R1＝H，R2＝HB9 11丹皮酚原苷R1＝R2＝R3＝HC8 12suffruticoside CR1＝R2＝H，R3＝galloylC8 13suffruticoside DR1＝R3＝H，R2＝galloylC8 14suffruticoside ER1＝β-D-glu，R2＝R3＝HC8

glu-葡萄糖 galloyl-沒食子?；?/p>

glu-glucose galloyl-galloyl

1.2 萜類及其苷類

萜類化合物是牡丹皮中含量較高的一類化合物，其中單萜主要為具有籠狀結(jié)構(gòu)的蒎烷型，三萜則有齊墩果烷型、何帕烷型、環(huán)阿爾廷烷型和降三萜類等。

1.2.1 單萜及其苷類 單萜及其苷類是牡丹皮中含量較高的一類成分，其大多是芍藥苷元或其類似物與糖縮合而成，目前從牡丹皮中分離得到的單萜（15～70）有56種，母核結(jié)構(gòu)（D～F）及其他化合物（61～70）見圖2，具體信息見表2。

圖2 牡丹皮中單萜及其苷類成分的母核結(jié)構(gòu)和化合物61～70的化學(xué)結(jié)構(gòu)

表2 牡丹皮中單萜及其苷類成分

Table 2 Monoterpenes and their glycosides from Moutan Cortex

編號化合物名稱取代基母核文獻 15芍藥苷R＝H，R1＝Ph，R2＝H，R3＝HD10 16氧化芍藥苷R＝H，R1＝Bz，R2＝H，R3＝HD10 17苯甲酰芍藥苷R＝H，R1＝Ph，R2＝Ph，R3＝HD10 18苯甲酰氧化芍藥苷R＝H，R1＝Bz，R2＝Ph，R3＝HD10 19沒食子酰芍藥苷R＝H，R1＝Ph，R2＝glu，R3＝HD 6 20沒食子酰氧化芍藥苷R＝H，R1＝Bz，R2＝glu，R3＝HD11 21mudanpioside AR＝H，R1＝Ph，R2＝MB，R3＝HD10 22mudanpioside BR＝H，R1＝Bz，R2＝MB，R3＝HD10 23mudanpioside CR＝H，R1＝Ph，R2＝Bz，R3＝HD10 24mudanpioside DR＝H，R1＝MB，R2＝H，R3＝HD10 25mudanpioside ER＝H，R1＝Va，R2＝H，R3＝HD10 26mudanpioside JR＝H，R1＝Ph，R2＝Va，R3＝HD 6 27paeonidanin AR＝Ph，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝PhE 9 284-O-butylpaeoniflorinR＝n-Bu，R1＝Ph，R2＝Bz，R3＝HD 9 296′-O-vanillyloxypaeoniflorinR＝H，R1＝Bz，R2＝Va，R3＝HD11 30oxypaeoniflorin sulfonateR＝SO2，R1＝Bz，R2＝H，R3＝HD12 31paeoniflorin BR＝H，R1＝Ph，R2＝Ph，R3＝gluD12 329-epi-oxypaeonidaninR＝Bz，R1＝OCH3，R2＝H，R3＝HE12 339-O-butyloxypaeonidaninR＝Bz，R1＝H，R2＝Bu，R3＝HE12 349-O-butylpaeonidaninR＝Ph，R1＝H，R2＝Bu，R3＝HE12

續(xù)表2

編號化合物名稱取代基母核文獻 354-O-butyloxypaeoniflorinR＝Bu，R1＝Bz，R2＝H，R3＝HD12 364-O-methyloxypaeoniflorinR＝OCH3，R1＝Bz，R2＝H，R3＝HD12 374-O-methylgalloyloxypaeoniflorinR＝OCH3，R1＝Bz，R2＝glu，R3＝HD12 384-O-methylpaeoniflorinR＝OCH3，R1＝Ph，R2＝H，R3＝HD12 39oxypaeonidaninR＝Bz，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝HE12 40paeonidaninR＝Ph，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝HE12 414-O-methyl-moudanpioside-CR＝OCH3，R1＝Ph，R2＝Bz，R3＝HD13 424-O-methylbenzoyloxypaeoniflorinR＝OCH3，R1＝Bz，R2＝Ph，R3＝HD13 43paeonidanin CR＝Bz，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝PhE13 44p-hydroxylbenzoyl-paeonidaninR＝Ph，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝BzE13 45paeoniside AR＝H，R1＝Ph，R2＝Ph，R3＝HD14 46paeoniside BR＝H，R1＝Ph，R2＝glu，R3＝HD14 476′-O-benzoyl-4″-hydroxy-3″-methoxy-paeoniflorinR＝H，R1＝Va，R2＝Ph，R3＝HD15 486′-O-benzoylalbiflorinR＝H，R1＝Bz，R2＝PhF15 49β-gentiobiosyl-paeoniflorinR＝H，R1＝Ph，R2＝glu，R3＝HD16 50suffrupaeoniflorin AR＝H，R1＝Bz，R2＝Ph，R3＝gluD16 51suffrupaeoniflorin BR＝H，R1＝MB，R2＝Ph，R3＝HD16 524-O-methylsuffrupaeoniflorin BR＝H，R1＝MB，R2＝MB，R3＝HD16 53suffrupaeonidanin DR＝Ph，R1＝OCH3，R2＝H，R3＝PhE16 54suffrupaeonidanin ER＝MB，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝PhE16 55suffrupaeonidanin FR＝Ph，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝MBE16 564″-hydroxy-4″′-O-methyl-benzoylpaeonidaninR＝Bz，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝MBE17 574″-hydroxy-4″′-hydroxy-benzoylpaeonidaninR＝Bz，R1＝H，R2＝OCH3，R3＝BzE17 58paeonivayinR＝H，R1＝Ph，R2＝PhF18 59mudanpioside HR＝H，R1＝Bz，R2＝Bz，R3＝HD19 60mudanpioside IR＝H，R1＝H，R2＝Ph，R3＝HD19 61mudanpioside G 19 62mudanpioside F 10 63isopaeonisuffral 19 64paeonisuffral 4 653-O-methypaeonisuffral 4 66paeonisuffrone 8 675-hydroxy-3S-hydroxymethyl-6-methyl-2,3-dihydrobenzofuran 9 686-methoxypaeoniflorigenone 9 69paeoniflorigenone 9 704-thujone-7-hydroxyl-8-O-β-D-glucopyranoside 17

Ph-苯基 Bz-苯甲?；?MB-2-巰基苯并咪唑 Va-醋酸乙烯酯-Bu-正丁基

Ph-phenyl Bz-benzoyl MB-2-mercapto benzimidazole Va-vinyl acetate-Bu--butyl

1.2.2 三萜類 牡丹皮中三萜類成分含量較少，主要包括常春藤皂苷元（71）[20]、齊墩果酸（72）[21]、白樺脂酸（73）[21]、mudanpinoic acid A（74）[21]、30-norhederagenin（75）[10]、熊果酸（76）[16]，具體化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖3。

1.3 有機酸類

牡丹皮中還包括苯甲酸（77）[22]、對羥基苯甲酸（78）[22]、沒食子酸（79）[23]、咖啡酸（80）[24]、1,3,6--三沒食子酰葡萄糖（81）[25]、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖（82）[25]等，具體化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖4。

圖3 牡丹皮中三萜類成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)

圖4 牡丹皮中有機酸類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)

1.4 其他類

武子敬等[26]采用同時蒸餾萃取法對牡丹皮中揮發(fā)油成分進行提取，并采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）進行鑒別分析，共分離鑒定出18個化合物（83～100），具體化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖5。趙運霞等[27]采用GC-MS對不同產(chǎn)地牡丹皮中揮發(fā)油成分進行測定，結(jié)果顯示不同產(chǎn)地均含有丹皮酚、油酸。此外，牡丹皮中還含有(+)-兒茶素（101）、槲皮素（102）、山柰酚（103）[22]等黃酮類化合物，具體化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖6。

2 藥理作用

牡丹皮的傳統(tǒng)功效為清熱涼血、活血化瘀，現(xiàn)代藥理研究亦表明牡丹皮具有抗炎、解熱、抗血小板聚集、抗血栓形成、改善血液流變性、抗腫瘤等與傳統(tǒng)功效相對應(yīng)的藥理作用。

圖5 牡丹皮中揮發(fā)油成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)

圖6 牡丹中部分黃酮類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)

2.1 抗炎

研究表明，丹皮酚是牡丹皮中發(fā)揮抗炎作用的主要成分。巫冠中等[28]研究表明丹皮酚對由角叉菜、蛋清、甲醛、組胺、5-羥色胺和緩激肽致大鼠足腫脹、二甲苯性小鼠耳廓腫脹和內(nèi)毒素所致腹腔毛細血管通透性升高，均有明顯抑制作用。Fu等[29]采用牡丹皮對由脂多糖誘導(dǎo)的肺炎損傷SD模型大鼠進行治療，能使白細胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）等多種細胞因子明顯降低，同時使白細胞浸潤、肺泡蛋白滲出量也減輕，這表明牡丹皮能抑制炎癥反應(yīng)和凝血反應(yīng)，可明顯防治急性肺損傷。Yun等[30]在體外運用反轉(zhuǎn)錄聚合酶，發(fā)現(xiàn)丹皮酚通過下調(diào)42個炎癥相關(guān)基因的表達發(fā)揮抗炎作用。

劉玲等[31]研究表明芍藥苷可降低脂多糖誘導(dǎo)的急性炎性腦損傷小鼠血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和IL-1β含量，降低腦組織中髓過氧化物酶、一氧化氮合成酶活性及一氧化氮含量和、和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，）mRNA表達，可使腦組織中核轉(zhuǎn)錄因子磷酸化蛋白表達減少。沒食子酸對蛋清、右旋糖酐、5-羥色胺誘發(fā)急性炎癥及甲醛所引起的慢性炎癥均有顯著抗炎作用，且沒食子酸治療指數(shù)明顯高于水楊酸鈉[32]。研究表明牡丹皮的其他有效成分也有抗炎活性，如去甲丹皮酚（亦稱雷瑣苯乙酮）是丹皮酚的結(jié)構(gòu)類似物，其衍生物對二甲苯所致小鼠耳腫脹炎癥有抑制作用[33]。

2.2 解熱

蔣舜媛等[34]研究發(fā)現(xiàn)，牡丹皮10～40 g/kg能使內(nèi)毒素、酵母和2,4-二硝基酚所致的發(fā)熱消退。牡丹皮中丹皮酚亦具有解熱作用，能降低小鼠正常體溫，正常小鼠ip丹皮酚200 mg/kg，30 min后可使體溫平均降低2.9 ℃，同時丹皮酚對口服傷寒、副傷寒菌苗引起的小鼠發(fā)熱也有解熱作用[35]。

2.3 對血液系統(tǒng)的影響

現(xiàn)代藥理研究表明，牡丹皮中丹皮酚等通過抑制血小板聚集、抗調(diào)理素以及穩(wěn)定紅細胞膜等抑制血栓的形成。

2.3.1 抗血小板聚集 林碧璇[36]研究表明牡丹皮水提取物能抑制從花生烯酸AA至前列腺素H2的環(huán)氧化酶反應(yīng)。家兔iv丹皮酚50 mg/kg，能抑制凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集，當質(zhì)量濃度為50、100、200 μg/mL時在體外能產(chǎn)生同樣的抑制作用，使血小板內(nèi)環(huán)磷酸腺苷含量升高，并能抑制凝血酶誘導(dǎo)的大鼠血小板5-羥色胺的釋放，呈量效關(guān)系。另外，丹皮酚、苯甲酰芍藥苷、苯甲酰氧化芍藥苷對內(nèi)毒素、膠原、二磷酸腺苷誘導(dǎo)的大鼠和人的血小板聚集也有抑制作用。

2.3.2 抗血栓 血栓形成與血管內(nèi)膜損傷、血小板功能及凝血系統(tǒng)被激活有關(guān)[37]。因此防止血液凝固或抑制血小板聚集則可以預(yù)防血栓的形成。許超千等[38]采用動靜脈旁路血栓模型的方法，發(fā)現(xiàn)丹皮酚與芍藥苷配伍能顯著降低大鼠實驗性動脈血栓的濕/干質(zhì)量，表明丹皮酚與芍藥苷配伍對血小板黏附、聚集所形成的血栓具有一定的抑制作用。

2.3.3 對血細胞的影響 紅細胞的變形性是紅細胞生理功能的一個重要生物物理特性指標。它既可以決定血液黏度，又是決定體內(nèi)紅細胞壽命和微循環(huán)灌注的重要因素。李薇等[39]研究發(fā)現(xiàn)丹皮酚可以通過降低全血表觀黏度，使紅細胞壓積降低，同時降低紅細胞聚集性和血小板黏附性，使紅細胞的變形能力顯著增強，從而影響血液流變學(xué)指標。郭平等[40]研究發(fā)現(xiàn)芍藥苷能顯著升高放射線致血虛證小鼠外周血白細胞數(shù)量和骨髓粒細胞-巨噬細胞集落形成單位、爆裂型紅細胞集落形成單位、紅細胞集落形成單位、混合集落形成單位數(shù)量，上調(diào)骨髓紅細胞生成素和粒細胞集落刺激因子基因表達，其中骨髓紅細胞生成素和粒細胞集落刺激因子基因的表達，是芍藥苷升高放射致血虛證小鼠外周血白細胞數(shù)量、促進各種造血祖細胞增殖的機制之一。

綜上，牡丹皮具有抗血小板凝集作用，能夠抗血栓形成，與牡丹皮的活血化瘀作用密切相關(guān)。牡丹皮中所含的丹皮酚、苯甲酰芍藥苷和苯甲酰氧化芍藥苷能夠抑制血小板凝集，而丹皮酚、芍藥苷和氧化芍藥苷有抗調(diào)理素的作用，苯甲酰氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷能夠阻斷纖維蛋白溶酶原活性及抗纖維蛋白溶解。通過各活性成分的協(xié)同作用，牡丹皮能有效地拮抗體內(nèi)血栓形成，且很少出現(xiàn)出血的不良反應(yīng)[41-42]。

3 Q-Marker預(yù)測分析

Q-Marker是存在于中藥材和中藥產(chǎn)品（如中藥飲片、中藥煎劑、中藥提取物、中成藥制劑）中專屬的、與臨床療效相關(guān)的、可被監(jiān)測的化學(xué)成分，Q-Marker的核心內(nèi)容基于特有性、可測性、有效性、傳遞性和中醫(yī)藥理論關(guān)聯(lián)性的“五要素”，既反映了與有效性、安全性的關(guān)聯(lián)關(guān)系，又體現(xiàn)了中藥成分的專屬性、差異性特征[43-44]。Q-Marker的提出有利于中藥全程質(zhì)量控制及其溯源，有利于提高中藥質(zhì)量一致性、可控性。因此，為了完善對牡丹皮的質(zhì)量評價，根據(jù)Q-Marker的概念結(jié)合文獻調(diào)研，對牡丹皮進行Q-Marker的預(yù)測分析，為建立牡丹皮更加科學(xué)的質(zhì)量控制方法提供參考。

3.1 基于植物親緣學(xué)及化學(xué)成分特有性證據(jù)的Q-Marker預(yù)測分析

牡丹皮原植物為木本植物牡丹，按照植物親緣學(xué)屬于芍藥科（Paeoniaceae）芍藥屬L.植物。芍藥科系單屬科，由毛茛科（Ranunculaceae）芍藥屬獨立而來。芍藥屬約35種，劃分為3個組，即牡丹組、北美芍藥組和芍藥組。其中北美芍藥組僅2種，分布在北美西部；芍藥組是該屬最大的組，為草本類型，包括25種，主要分布在亞歐大陸；牡丹組為木本類型，包括8個種，6個亞種，分布在我國西南和西北一帶[45-46]，藥用牡丹主要分布在安徽、四川、甘肅、湖南、湖北、陜西、山東、貴州等地。牡丹皮中含有多種化學(xué)成分，包括苯乙酮類、萜類及其苷類、黃酮類、有機酸類等，其中苯乙酮類和萜類及其苷類含量較高，苯乙酮類包括丹皮酚、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、suffruticosides A～E等，萜類及其苷類主要包括芍藥苷、氧化芍藥苷、牡丹皮苷C、苯甲酰氧化芍藥苷等[14]。

苯乙酮類和單萜苷類是牡丹皮中主要的活性成分，王志強[47]研究發(fā)現(xiàn)丹皮酚在除牡丹以外的芍藥屬植物中含量較少，而且苯甲酰氧化芍藥苷在芍藥屬中系牡丹皮的特有成分。研究表明丹皮酚可能的生物合成途徑為莽草酸途徑，由莽草酸途經(jīng)生成的苯丙氨酸，經(jīng)由桂皮酸途徑失去側(cè)鏈碳合成丹皮酚。丹皮酚的生物合成途徑見圖7。

綜上所述，由植物親緣學(xué)可知，苯甲酰氧化芍藥苷、丹皮酚可作為牡丹皮Q-Marker，根據(jù)牡丹皮化學(xué)成分特有性分析結(jié)果可知，苯乙酮類成分丹皮酚原苷、丹皮酚新苷，萜及其苷類成分氧化芍藥苷、牡丹皮苷C等可作為Q-Marker的篩選參考。

圖7 丹皮酚的生物合成途徑

3.2 基于質(zhì)量傳遞與溯源的Q-Marker預(yù)測分析

中藥中的化學(xué)成分是中藥發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，其在中藥中的含量可以反映中藥質(zhì)量。中藥來源眾多，成分復(fù)雜，且經(jīng)歷藥材采收加工、飲片炮制、制劑成型工藝等復(fù)雜的藥物制備過程，藥物傳輸及體內(nèi)過程也具有多組分交互作用的特點[48]。因此，中藥質(zhì)量控制應(yīng)關(guān)注中藥生長合成、采收加工、飲片炮制、制劑成型、入血成分的全過程。

中藥Q-Marker首先要系統(tǒng)地辨識中藥形成過程中各環(huán)節(jié)化學(xué)物質(zhì)組及傳遞變化的規(guī)律，為中藥全程質(zhì)量控制提供方法和參考[49]。中藥生長過程中其化學(xué)成分也是不斷變化的。范俊安等[50]采用高效液相色譜法（HPLC）對3～7年生牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷2種有效成分含量進行測定，結(jié)果表明2種成分含量均有顯著變化，兩者含量在3～5年生中均呈上升趨勢，且5年生所含有效成分含量最高，6～7年生樣品丹皮酚含量下降，芍藥苷含量基本不變。夏成凱等[51]采用HPLC法測定了山東、山西、安徽銅陵等不同產(chǎn)地4年生牡丹皮中13種化學(xué)成分的含量，其中各產(chǎn)地均以丹皮酚、芍藥苷含量最高，其次是1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖、氧化芍藥苷、苯甲酸、沒食子酸等成分含量相對較高。黃綺韻等[52]采用HPLC法對牡丹皮炭中沒食子酸、5-羥甲基糠醛、兒茶素、丹皮酚4種成分進行含量測定，結(jié)果表明沒食子酸和5-羥甲基糠醛的含量隨著炮制程度的加深先升高后降低；兒茶素和丹皮酚的含量則是隨著炮制程度的加深呈不同程度的下降。樊曉荃等[53]采用超高效液相色譜法結(jié)合四極桿飛行時間質(zhì)譜法技術(shù)（UPLC-Q-TOF/MS）對六味地黃苷糖片中的化學(xué)成分進行快速辨識，共鑒定和推測出71個化合物，31個來自牡丹皮，其中單萜類成分主要是牡丹皮中的芍藥苷、氧化芍藥苷等。潘堅揚[54]采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）對雙丹方的入血成分進行分析，共鑒定出16個入血成分，包括13個原型成分和1個代謝產(chǎn)物，主要包括芍藥苷、丹皮酚、沒食子酸等?；谀档てどL過程分析可知，牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷隨生長年限增長有較大變化，根據(jù)其加工炮制、制劑及其入血成分可知，除丹皮酚、芍藥苷外，1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖、氧化芍藥苷、苯甲酸、沒食子酸等成分在牡丹皮生長-入血全過程有重要影響。綜上所述，牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖、氧化芍藥苷、沒食子酸等成分，可以作為篩選Q-Marker的重要參考。

3.3 基于質(zhì)量評價的牡丹皮Q-Marker預(yù)測分析

化學(xué)成分可測性是建立質(zhì)量評價的必要條件。《中國藥典》2020年版規(guī)定了牡丹皮中丹皮酚的含量測定方法和限定要求。伍淳操等[55]采用HPLC法對墊江牡丹皮中丹皮酚和芍藥苷進行含量測定；范旭航等[56]利用UPLC對不同產(chǎn)地牡丹皮不同部位的沒食子酸、芍藥苷、苯甲酸、苯甲酰氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷和丹皮酚含量進行測定；王美慧等[57]利用聲光可調(diào)-近紅外光譜技術(shù)測定牡丹皮中丹皮酚的含量，進而評價牡丹皮質(zhì)量；陳菲菲等[58]利用UPLC-TQ-MS技術(shù)對牡丹皮藥材中丹皮酚、沒食子酸、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖等18個化學(xué)成分的含量進行測定分析。

綜合分析，牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷、苯甲酸、苯甲酰芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖與牡丹皮有效性密切相關(guān)，作為主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，且能夠利用HPLC等方法進行含量測定，可作為牡丹皮Q-Marker進行篩選。

3.4 基于藥效活性的牡丹皮Q-Marker預(yù)測分析

中藥質(zhì)量與中藥中有效成分密切相關(guān)，因此，化學(xué)成分有效性是質(zhì)量控制的重要部分[59]。按照Q-Marker的定義與要求，可從中藥的藥性和藥效2個方面與化學(xué)成分有效性進行相關(guān)性分析，以確定Q-Marker。

中藥的藥性和藥效是中藥的特有屬性，也是中藥治療疾病的客觀依據(jù)。中藥性味歸經(jīng)與組方配伍密切相關(guān)?！吨袊幍洹?020年版[1]記載牡丹皮味苦、辛，性微寒，歸心、肝、腎經(jīng)。現(xiàn)代研究表明寒涼藥多有苦味，而中藥清熱功效主要來源于苦味，牡丹皮性微寒，味苦，這與其清熱涼血功效相適應(yīng)；辛味藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)以揮發(fā)油、苷類、萜類等成分為主[60-62]。通過以上分析，牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷、氧化芍藥苷等可作為其Q-Marker選擇的重要參考依據(jù)。

中藥的傳統(tǒng)功效是現(xiàn)代研究與臨床用藥的基礎(chǔ)，可作為Q-Marker確定的依據(jù)之一?！吨袊幍洹?020年版記載牡丹皮具有清熱涼血、活血化瘀的作用，屬于清熱涼血類中藥，用于熱入營血、溫毒發(fā)斑、吐血衄血、夜熱早涼、無汗骨蒸、經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲傷痛、癰腫瘡毒。以丹皮酚為代表的苯乙酮類具有解熱、抗炎、抑制血小板聚集等作用，以芍藥苷為代表的單萜及其苷類具有抗菌、抗血栓等作用[41-42]。這2類化合物與牡丹皮傳統(tǒng)功效一致，是其清熱涼血、活血化瘀的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，也是牡丹皮Q-Marker篩選重要依據(jù)。

綜上所述，牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、苯甲酰芍藥苷、氧化芍藥苷等可作為Q-Marker的參考指標。

4 結(jié)語

牡丹皮是清熱涼血的要藥，牡丹皮中苯乙酮類、萜類及其苷類、有機酸類是其主要活性成分，而揮發(fā)油類、黃酮類以及無機元素也是其重要成分。牡丹皮作為大宗常用藥材，藥用歷史悠久，常與白芍、熟地、當歸、紅花等配伍治療溫熱病、痛經(jīng)以及跌打損傷等，近年來隨著對牡丹皮研究的深入，牡丹皮的臨床應(yīng)用范圍也不斷被拓展，常用于治療高血壓、急性軟組織損傷等疾病，這與牡丹皮清熱涼血、活血化瘀的功效相一致。由于牡丹皮成分復(fù)雜，牡丹皮作為單味藥材使用時的研究仍存在諸多問題，如牡丹皮入血成分及體內(nèi)代謝物的相關(guān)研究較少；牡丹皮的研究大多基于丹皮酚、芍藥苷，而其他成分研究較少；牡丹皮“清熱涼血、活血化瘀”傳統(tǒng)功效的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)缺乏進一步挖掘；同時，市場上牡丹皮質(zhì)量良莠不齊，而其質(zhì)量控制多以丹皮酚單一成分為主，使得牡丹皮的質(zhì)量評價并不全面，因此，建立以Q-Marker為準則的質(zhì)量評價體系有重大意義?；趧⒉⒃菏刻岢龅摹癚-Marker”概念，本文結(jié)合中藥Q-Marker“五原則”，從植物親緣學(xué)、質(zhì)量傳遞與溯源、化學(xué)成分有效性、化學(xué)成分可測性等方面對牡丹皮Q-Marker的選擇進行了論述，推測牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷、沒食子酸、苯甲酰芍藥苷、苯甲酰氧化芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、牡丹皮苷C、苯甲酸等化合物可作為其Q-Marker，為后續(xù)牡丹皮建立質(zhì)量評價體系提供參考和思路。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents, pharmacological effects ofand predictive analysis on its quality marker (Q-Marker)

ZHANG Shu-rong1, ZHAO Hong-su1, 2, TONG Mo-ru1, XIONG Jun-wei1, WANG Xue1, WU Meng-ying1, ZHAI Hong-yan3, WU De-ling1, 2, 4, ZHANG Cun5, ZHANG Wei1, 2, 4

1. College of Pharmacy, Anhui University of Chinese Medicine, Hefei 230012, China 2. Anhui Province Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Decoction Pieces of New Manufacturing Technology, Hefei 230012, China 3. Anhui Institute for Food and Drug Control, Hefei 230012, China 4. NMPA Key Laboratory for Quality Research and Evaluation of Traditional Chinese Medicine, Hefei 230051, China 5. Institute of Chinese Materia Medica China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China

Mudanpi () was first recorded in “”. It has the effects of clearing heat and cooling blood, promoting blood circulation and removing blood stasis. It is a commonly used clinical medicine for clearing heat and cooling blood. Its chemical components mainly include acetophenones, terpenes and their glycosides, organic acids and other components, which have anti-inflammatory, immune function, and cardiovascular protection effects. By analyzing the relationship between plant genetics, chemical composition specificity evidence, chemical composition measurability, etc., the quality markers (Q-Markers) ofwere analyzed from various aspects, and the prediction of paeonol, paeoniflorin, gallic acid, benzoylpaeoniflorin, benzoyloxypaeoniflorin, oxypaeoniflorin, 1,2,3,4,6--pentagalloylglucose, paeonolide, apiopaeonoside, mudanpioside C, benzoic acid etc. can be used as its Q-Markers, in order to provide a reference for the establishment of quality evaluation system of.

; quality marker; paeonol; paeoniflorin; gallic acid; benzoylpaeoniflorin; benzoyloxypaeoniflorin; oxypaeoniflorin; 1,2,3,4,6--pentagalloylglucose; paeonolide; apiopaeonoside; mudanpioside C; benzoic acid

R282.710.5

A

0253 - 2670(2022)16 - 5215 - 10

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.16.031

2022-03-24

國家重點研發(fā)計劃中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究專項（2018YFC1707004）；安徽省藥品監(jiān)督管理局藥品監(jiān)管科技創(chuàng)新項目（AHYJ-KJ-202102）

張樹蓉，碩士研究生，研究方向為中藥化學(xué)。E-mail: zhangshurong030@163.com

張 偉，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向為中藥加工炮制及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。E-mail: zhangwei@ahtcm.edu.cn

[責任編輯 崔艷麗]