聚乙二醇沉淀法篩查巨泌乳素血癥1例報(bào)道

戴 悅， 盧 培， 熊仲波， 衛(wèi)曉青， 徐旻一， 殷蓓琦， 王 蕾

（上海市第八人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200235）

高泌乳素血癥（hyperprolactinemia，HPRL）和泌乳素瘤均可通過(guò)血清泌乳素水平診斷。HPRL指在無(wú)妊娠或產(chǎn)后哺乳的情況下，泌乳素>20 μg/L（420 mIU/L），且持續(xù)升高。泌乳素在血清中有多種異構(gòu)形式，如具有生物學(xué)活性的單體泌乳素、無(wú)生物學(xué)活性的二聚體、生物學(xué)活性較低的四聚體，以及單體泌乳素與免疫球蛋白形成的聚合物，即巨泌乳素。有研究發(fā)現(xiàn)，少數(shù)HPRL是由巨泌乳素血癥（macroprolactinemia，MPRL）引起的[1]。巨泌乳素在體內(nèi)無(wú)生物活性[2]，但會(huì)導(dǎo)致儀器將其誤檢為泌乳素[3]，出現(xiàn)泌乳素假性升高，從而被誤診為HPRL。凝膠色譜層析（gel filtration chromatography，GFC）法是檢測(cè)巨泌乳素的金標(biāo)準(zhǔn)，但耗時(shí)且成本高，不適合臨床常規(guī)篩查。采用聚乙二醇（polyethyleneglycol，PEG）沉淀法篩查巨泌乳素更為經(jīng)濟(jì)、易行[4]。本研究報(bào)道1例由巨泌乳素引起的泌乳素假性升高病例。

1 病例資料

1.1 一般情況

患者，女，16歲，因“體質(zhì)量增加2年，停經(jīng)6個(gè)月”就診。患者身高170 cm，體質(zhì)量94 kg，體質(zhì)量指數(shù)為32.52 kg/m2。頸部有黑棘皮，上肢內(nèi)側(cè)及腹部紫紋。有乳房發(fā)育，雙側(cè)對(duì)稱(chēng)，有第二性征發(fā)育，但未觸發(fā)泌乳癥狀。門(mén)診診斷為多囊卵巢綜合征可能。為了進(jìn)一步明確病因，收入內(nèi)分泌科住院治療。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果及影像學(xué)檢查結(jié)果

β-人絨毛膜促性腺激素<1.2 mIU/mL，卵泡刺激素6.39 mIU/mL，黃體生成素4.84 mIU/mL，泌乳素2 192.70 mIU/L，雌二醇246 pmol/L，孕酮0.4 nmol/L，睪酮2.66 nmol/L。B超示脂肪肝，子宮、卵巢未見(jiàn)異常；增強(qiáng)磁共振成像示垂體未見(jiàn)明顯異常。

因患者泌乳素顯著升高，進(jìn)一步行甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)與溴隱亭抑制試驗(yàn)。甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)結(jié)果：0 min時(shí)測(cè)得泌乳素為2 321.57 mIU/L，30、60、90、120和180 min時(shí)測(cè)得泌乳素均>4 200 mIU/L。溴隱亭抑制試驗(yàn)結(jié)果：抑制前測(cè)得泌乳素為2 754.46 mIU/L，抑制后泌乳素為1 380.21 mIU/L。由于該患者甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果超出線(xiàn)性范圍，與臨床溝通后，認(rèn)為泌乳素檢測(cè)結(jié)果與該患者的臨床表現(xiàn)（腦垂體無(wú)異常、無(wú)泌乳癥狀）不符，懷疑患者血清中存在巨泌乳素。隨即采用PEG沉淀法篩查巨泌乳素。

2 PEG沉淀法篩查巨泌乳素

2.1 儀器和試劑

ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀（美國(guó)雅培公司）及配套試劑。將12.5 g PEG6000溶于50 mL 0.9%NaCl溶液中，配制成250 g/L PEG6000溶液。

2.2 方法

將200 μL患者血清和200 μL PEG6000溶液置于離心管（P管）中混勻；將200 μL患者血清和200 μL 0.9%NaCl溶液置于離心管中混勻（D管）。將2個(gè)試管同時(shí)用1 500×g離心10 min后取上清液上機(jī)檢測(cè)，進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。記錄P管和D管的泌乳素檢測(cè)結(jié)果，根據(jù)文獻(xiàn)[3]計(jì)算回收率，回收率（%）=（P管/D管）×100%。若回收率≤40%，判定為MPRL，報(bào)告PEG處理后的泌乳素結(jié)果（由于血清樣本在操作中已被PEG 1倍稀釋?zhuān)虼藢?shí)際泌乳素結(jié)果=P管泌乳素檢測(cè)值×2）；若回收率為40%～60%，則判定疑似MPRL，需要進(jìn)一步確認(rèn)或臨床隨訪；若回收率≥60%，則判定為真性HPRL，報(bào)告PEG沉淀前的泌乳素檢測(cè)結(jié)果。

2.3 PEG沉淀法檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)PEG處理后，甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)與溴隱亭抑制試驗(yàn)各時(shí)間點(diǎn)垂體泌乳素的回收率均≤40%，見(jiàn)表1。經(jīng)PEG處理后甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)結(jié)果：0、30、60、90、120和180 min的泌乳素濃度水平分別為174.08、2 261.46、1 884.52、1 439.94、1 177.72和877.68 mIU/L。經(jīng)PEG處理后溴隱亭抑制試驗(yàn)結(jié)果：抑制前泌乳素為263.28 mIU/L，抑制后泌乳素為25.20 mIU/L。

表1 PEG處理后甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)與溴隱亭抑制試驗(yàn)的泌乳素回收率

3 討論

閉經(jīng)是泌乳素瘤的常見(jiàn)癥狀。當(dāng)患者血清泌乳素明顯升高時(shí)應(yīng)先排除垂體瘤[5]。本例患者增強(qiáng)磁共振成像檢查腦垂體未見(jiàn)明顯異常。但增強(qiáng)磁共振成像難以判斷垂體≤1.0 cm的微小腺瘤，為了鑒別本例患者的HPRL是否由垂體泌乳素瘤導(dǎo)致，本研究進(jìn)行了甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)和溴隱亭抑制試驗(yàn)。通過(guò)2種藥物的不同作用，刺激或抑制泌乳素的分泌，根據(jù)泌乳素分泌的動(dòng)態(tài)變化，判斷垂體功能。本例患者甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)結(jié)果顯示，血清泌乳素水平顯著升高，且不隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低，這與患者臨床表現(xiàn)（腦垂體無(wú)異常、無(wú)泌乳癥狀）不符，因此懷疑患者血清中存在巨泌乳素。本例患者血清樣本采用PEG處理后的檢測(cè)結(jié)果顯示，甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)各時(shí)間點(diǎn)泌乳素回收率均≤40%，表明血循環(huán)中有超過(guò)60%的泌乳素為巨泌乳素；且該患者泌乳素基礎(chǔ)值（甲氧氯普胺興奮試驗(yàn)0 min值）處于正常水平（<420 mIU/L），且甲氧氯普胺興奮性刺激呈正常反應(yīng)，分泌峰值超過(guò)基礎(chǔ)值的3倍，溴隱亭抑制性刺激后泌乳素值下降超過(guò)50%，說(shuō)明垂體功能正常，可以排除垂體泌乳素瘤。最終本例患者根據(jù)肥胖、閉經(jīng)、黑棘皮病表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果確診為多囊卵巢綜合征、MPRL。

QUINN等[6]發(fā)現(xiàn)，有25%的泌乳素升高患者存在MPRL，真性HPRL和MPRL不能根據(jù)臨床表現(xiàn)進(jìn)行鑒別。本實(shí)驗(yàn)室與臨床溝通后，在日常檢測(cè)中，對(duì)泌乳素>1 000 mIU/L的臨床樣本均采用PEG沉淀法復(fù)查。李波[7]采用PEG沉淀法篩查泌乳素升高樣本，發(fā)現(xiàn)巨泌乳素約占18%；陳允等[8]采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及PEG沉淀法篩查出的巨泌乳素所占比例為32.5%。上海市第八人民醫(yī)院近一年來(lái)HPRL臨床樣本中約有20%存在MPRL。需要注意的是，對(duì)于MPRL和真性HPRL同時(shí)存在的患者來(lái)說(shuō)，僅依靠回收率判斷并不準(zhǔn)確，如能建立PEG沉淀后健康人群的泌乳素參考區(qū)間，將可以提供更有價(jià)值的參考信息。

綜上所述，PEG沉淀法不僅可以篩查出MPRL，還有助于區(qū)分泌乳素水平升高是由垂體瘤引起的還是由其他原因引起的，可以鑒別出假陽(yáng)性病例。臨床實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)臨床需求合理開(kāi)展PEG沉淀法篩查試驗(yàn)，主動(dòng)做好結(jié)果分析，以發(fā)出更有參考價(jià)值的檢驗(yàn)報(bào)告。