離子色譜-抑制電導(dǎo)檢測(cè)法測(cè)定羧甲淀粉鈉中氯化鈉的含量

王雪云 亓恒芹 薛 雯 韓 勇* 趙新靜 王 冉

羧甲淀粉鈉又名羧甲基淀粉和羧甲基淀粉醚，是淀粉羧甲基醚的鈉鹽，是一種重要的藥用輔料。它是由玉米淀粉或馬鈴薯淀粉與氯乙酸在乙醇溶液中發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，再用氯乙酸鈉對(duì)交聯(lián)淀粉進(jìn)行羧甲基化處理，最后用檸檬酸進(jìn)行中和而制得[1]。

氯化鈉是合成羧甲淀粉鈉的主要副產(chǎn)物，《中華人民共和國(guó)藥典》2020版（四部）[2]采用銀量法測(cè)定氯化鈉含量，由于容量法專屬性不強(qiáng)，其他離子可能消耗Ag+，例如NO2-等離子。筆者利用離子色譜法分析羧甲淀粉鈉中的氯化鈉含量，消除其他陰離子的干擾，目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試藥與試劑 氯化鈉對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100376-202104，100.0%），18批羧甲淀粉鈉藥用輔料（分別產(chǎn)自安徽山河藥用輔料股份有限公司、曲阜市藥用輔料有限公司、山東六佳藥用輔料股份有限公司、湖南爾康制藥股份有限公司、湖州展望藥業(yè)有限公司、湖南九典制藥股份有限公司），氫氧化鉀（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，色譜純），蒸餾水（默克公司，質(zhì)譜級(jí)）。

1.1.2 儀器 ICS-2100型離子色譜儀（賽默飛世爾科技有限公司），ICS-2100型電導(dǎo)檢測(cè)器（賽默飛世爾科技有限公司），A120S型電子天平（德國(guó)沙多利斯有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性[3-10]Dionex IonPax AS19陰離子交換色譜柱（250 mm×4 mm）；以淋洗液發(fā)生器產(chǎn)生的20 mmol/L氫氧化鉀溶液作為流動(dòng)相；流速1.0 ml/min；進(jìn)樣體積25 μl；檢測(cè)方式為抑制電導(dǎo)檢測(cè)；Chromeleon色譜工作站；理論塔板數(shù)按氯離子計(jì)算大于4 000，與相鄰色譜峰分離度大于2.0。

1.2.2 溶液的配制

1.2.2.1 對(duì)照品溶液 精密稱定氯化鈉對(duì)照品0.101 0 g，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備溶液。精密量取對(duì)照品貯備溶液1、2、3、5、10、15和20 ml，分別置100 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

1.2.2.2 供試品溶液 精密稱定羧甲淀粉鈉輔料0.2 g，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

1.2.3 專屬性試驗(yàn) 分別取“1.2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液、供試品溶液和溶劑，按照“1.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。

1.2.4 檢出限與定量限 用水逐級(jí)稀釋“1.2.2.1”項(xiàng)下氯化鈉對(duì)照品貯備溶液，按照“1.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。當(dāng)信噪比約為3∶1時(shí)的濃度即為檢出限，當(dāng)信噪比約為10∶1時(shí)的濃度即為定量限。

1.2.5 線性關(guān)系考察 分別取“1.2.2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液，按照“1.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。

1.2.6 精密度試驗(yàn) 取同一批號(hào)供試品溶液，按照“1.2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。

1.2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取羧甲淀粉鈉輔料（批號(hào)210207）約0.2 g，共6份，分別置100 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按照“1.2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。

1.2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，按照“1.2.1”項(xiàng)下條件分別在0、2、4、6、8、20、24 h進(jìn)樣，記錄色譜圖。

1.2.9 回收率試驗(yàn) 取已知含量的樣品（批號(hào)210207）約0.1 g，共9份，置100 ml量瓶中，分別精密加入對(duì)照品溶液（濃度為4.020 mg/ml）0.8、1.0、1.2 ml，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液，每個(gè)濃度配制3份，按照“1.2.1”項(xiàng)下條件分別進(jìn)樣，記錄色譜圖。

2 結(jié)果

2.1 專屬性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明：對(duì)照品溶液中氯離子峰的保留時(shí)間為6.6 min，供試品溶液中氯離子峰與相鄰的雜質(zhì)峰的分離度符合要求，溶劑無干擾。見圖1。

圖1 專屬性試驗(yàn)離子色譜

2.2 檢出限與定量限結(jié)果

試驗(yàn)表明：氯化鈉檢出限為0.014 μg/ml，信噪比約為3.8。氯化鈉定量限為0.037 μg/ml，信噪比為10.9（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）=1.74%，n=6）。

2.3 線性關(guān)系考察結(jié)果

以濃度C（μg/ml）為橫坐標(biāo)，以峰面積A為縱坐標(biāo)，得回歸方程為：Y=5.177 0X+0.173 5，r=0.999 9（n=7），結(jié)果表明氯化鈉在10.10～202.00 μg/ml濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度成良好線性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn)結(jié)果

主成分峰面積的RSD為0.3%（n=6），表明精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

主成分峰面積的RSD為1.5%（n=7），表明供試品溶液室溫放置24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 回收率試驗(yàn)結(jié)果

回收率在98.01%～100.25%，平均回收率為99.54%，RSD為0.73%（n=9）。見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

2.7 含量測(cè)定結(jié)果

按外標(biāo)法計(jì)算氯化鈉百分含量，離子色譜法檢測(cè)結(jié)果比銀量法的檢測(cè)結(jié)果低2.4%～4.9%。見表2。

表2 羧甲淀粉鈉中氯化鈉含量結(jié)果(%,n=2)

3 討論

采用銀量法測(cè)定羧甲淀粉鈉中氯化鈉含量時(shí)，羧甲淀粉鈉中的其他陰離子也會(huì)消耗Ag+，例如等離子，導(dǎo)致方法準(zhǔn)確度低，測(cè)定結(jié)果偏高。而本文建立的離子色譜法測(cè)定羧甲淀粉鈉中氯化鈉含量，通過對(duì)18批不同廠家的羧甲淀粉鈉進(jìn)行測(cè)定表明該方法準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)便，專屬性好，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)比對(duì)，離子色譜法檢測(cè)結(jié)果比銀量法的檢測(cè)結(jié)果低2.4%～4.9%。該方法適用于精確控制藥用輔料羧甲淀粉鈉中氯化鈉雜質(zhì)，從而更好地監(jiān)控羧甲淀粉鈉合成中副反應(yīng)比例。