鹽角草提取物對(duì)綿羊生長(zhǎng)性能及血清生化指標(biāo)的影響

梁見弟 阿不夏合滿·穆巴拉克 秦榮艷 陳翔宇 趙 晨 王樂樂 張志軍 王承敏 王文奇*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830052；2.新疆畜牧科學(xué)院飼料研究所，烏魯木齊 830011；3.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，石河子 832000)

鹽生植物鹽角草(SalicorniaeuropaeaL.)又名“歐洲海蓬子”，是世界上最耐鹽的陸生植物之一[1]。鹽角草含有豐富的黃酮、生物堿、甾體、萜類等生物活性作物質(zhì)，具有抗腫瘤、抗病毒、抗炎、抗菌、抗氧化、提高免疫等作用[2-4]。有研究顯示，鹽角草干草直接飼喂綿羊，可提高機(jī)體抗氧化能力[5]。飼喂5%鹽角草粉能使大鼠血清瘦素含量明顯降低，同時(shí)對(duì)脂代謝有一定的改善作用[6]。鹽角草在植物提取物開發(fā)利用方面的潛在價(jià)值，受到了科研工作者的廣泛關(guān)注。有研究顯示，鹽角草提取物能夠有效提高小鼠機(jī)體的抗氧化能力，顯著降低小鼠肝臟重量、肝臟甘油三酯(TG)含量、血清瘦素和胰島素含量以及關(guān)鍵脂質(zhì)合成代謝基因相對(duì)表達(dá)量[7-8]。鹽角草水提取物作為一種新型的食鹽替代品，能有效預(yù)防高鹽所致肥胖小鼠非酒精性脂肪肝病的加重，起到保護(hù)肝臟健康的作用，能有效控制高鹽攝入引起心腦血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[9-10]。鹽角草甲醇提取物則有較好的抗氧化和抗癌活性，1 000 mg/mL鹽角草甲醇提取物對(duì)肝癌細(xì)胞毒性抑制率可達(dá)80%[11]。鹽角草脂質(zhì)提取物對(duì)鎘誘導(dǎo)的紅細(xì)胞損傷具有保護(hù)潛力[12]。鹽角草提取物可以安全替代抗生素，提升家禽肉品的安全性，并對(duì)肉品產(chǎn)生積極影響：鹽角草提取物可以通過降低腹部脂肪率來改變?nèi)庾须u胴體品質(zhì)[13]。然而，鹽角草提取物對(duì)畜禽生長(zhǎng)性能及血清生化指標(biāo)的影響鮮有報(bào)道。因此，本研究以阿勒泰綿羊?yàn)檠芯繉?duì)象，通過在飼糧中添加不同水平的鹽角草提取物，探究其對(duì)綿羊生長(zhǎng)性能及血清生化指標(biāo)的影響，為鹽角草提取物在綿羊生產(chǎn)中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

鹽角草提取物由河南宜新生物科技有限公司提供，經(jīng)水提、濃縮、噴霧干燥而制。經(jīng)測(cè)定，鹽角草提取物中鈉、鉀等礦物質(zhì)元素含量在11%以上，并且含有豐富的植物活性物質(zhì)。圖1為鹽角草提取物活性物質(zhì)多峰檢測(cè)圖，顯示了樣品中檢測(cè)到的物質(zhì)，不同顏色的每個(gè)峰代表1種被檢測(cè)到的植物活性物質(zhì)；共鑒定出543種植物活性物質(zhì)，分為59個(gè)不同類型；峰值前6類不同類型植物活性物質(zhì)中包括17種有機(jī)氧化合物、24種脂肪酰類、47種酚類、22種氨基酸及其衍生物、8種芳香類化合物、72種生物堿。

圖1 鹽角草提取物活性物質(zhì)多峰檢測(cè)圖

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理

選擇3.5月齡、體重[(32.52±2.83) kg]相近、體況良好的阿勒泰公羊60只，隨機(jī)分為4組(每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只羊)，分別飼喂基礎(chǔ)飼糧(對(duì)照組)、基礎(chǔ)飼糧+0.2%鹽角草提取物(0.2%組)、基礎(chǔ)飼糧+0.4%鹽角草提取物(0.4%組)、基礎(chǔ)飼糧+0.6%鹽角草提取物(0.6%組)?；A(chǔ)飼糧參照《肉用綿羊日營養(yǎng)需要量》(DB65/T 4244—2019)，其組成及營養(yǎng)水平見表1。各組按基礎(chǔ)飼糧和鹽角草提取物添加水平，制成全混合顆粒飼料，保障羊只采食均勻和完全。整個(gè)試驗(yàn)期56 d，其中預(yù)試期11 d，正試期45 d。試驗(yàn)羊每天09:00和18:00各飼喂1次(飼喂量各1/2)，自由采食，自由飲水。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)性能

于正試期第1、15、30、45天早上空腹稱重，計(jì)算平均日增重(ADG)、干物質(zhì)采食量(DMI)和料重比(F/G)。

1.3.2 血清生化指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組選取6只羊，空腹頸靜脈采血5 mL，血液靜置2 h后用離心機(jī)3 000 r/min離心15 min，吸取上清液分裝于1.5 mL離心管內(nèi)，置于-20 ℃冰箱保存。血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素(UREA)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(GLU)、TG、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、補(bǔ)體3(C3)、補(bǔ)體4(C4)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)活性及總抗氧化能力(T-AOC)采用比色法分析，血清白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、干擾素-γ(IFN-γ)含量采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法分析，所有血清生化指標(biāo)均委托北京華英生物技術(shù)研究所進(jìn)行測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P>0.05表示差異不顯著，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 鹽角草提取物對(duì)綿羊生長(zhǎng)性能的影響

如表2所示，各組之間第1、15、30、45天體重差異不顯著(P>0.05)，0.4%組第45天體重最高。各組之間第1～15天、第31～45天和第1～45天平均日增重和干物質(zhì)采食量差異不顯著(P>0.05)。0.6%組第16～30天平均日增重極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，顯著高于0.2%組(P<0.05)，與0.4%組差異不顯著(P>0.05)。0.4%組第16～30天干物質(zhì)采食量顯著低于對(duì)照組和0.6%組(P<0.05)，與0.2%組差異不顯著(P<0.05)。對(duì)照組第1～15天料重比極顯著低于0.6%組(P<0.01)，與0.2%、0.4%組差異不顯著(P>0.05)；0.6%組第16～30天料重比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，與0.2%、0.4%組差異不顯著(P>0.05)；0.4%組第31～45天、第1～45天料重比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，與0.2%、0.6%組差異不顯著(P>0.05)。

表2 鹽角草提取物對(duì)綿羊生長(zhǎng)性能的影響

2.2 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清生化指標(biāo)的影響

2.2.1 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清蛋白質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

如表3所示，各組之間血清ALB、UREA含量差異不顯著(P>0.05)；其中，0.6%組血清ALB含量最高，0.2%組最低；對(duì)照組血清UREA含量最高，0.6%組最低。0.6%組血清TP含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，與0.2%、0.4%組差異不顯著(P>0.05)。0.4%、0.6%組血清GLB含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，與0.2%組差異不顯著(P>0.05)；0.2%組血清GLB含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表3 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清蛋白質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

2.2.2 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清能量代謝指標(biāo)的影響

如表4所示，各組之間血清TC、HDL、LDL含量差異不顯著(P>0.05)；其中，對(duì)照組血清TC含量最高，0.4%組最低；0.6%組血清HDL含量最高，對(duì)照組最低；對(duì)照組血清LDL含量最高，0.6%組最低。0.4%組血清TG含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，與0.2%、0.6%組差異不顯著(P>0.05)。對(duì)照組血清GLU含量極顯著高于0.4%、0.6%組(P<0.01)，顯著高于0.2%組(P<0.05)，0.2%、0.4%、0.6%組之間差異不顯著(P>0.05)。

表4 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清能量代謝指標(biāo)的影響

2.2.3 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清酶指標(biāo)的影響

如表5所示，各組之間血清AST、ALP活性差異不顯著(P>0.05)；其中，0.6%組血清AST活性最高，對(duì)照組最低；對(duì)照組血清ALP活性最高，0.4%組最低。0.6%、0.4%組血清ALT活性極顯著低于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)。0.6%組血清LDH活性極顯著高于其他各組(P<0.01)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。

表5 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清酶指標(biāo)的影響

2.2.4 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清免疫指標(biāo)的影響

如表6所示，各組之間血清IgM、C3、C4含量差異不顯著(P>0.05)；其中，0.6%組血清IgM含量最高，0.4%組最低；0.6%組血清C3含量最高，對(duì)照組最低。0.6%組血清IgG含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，與0.2%、0.4%組差異不顯著(P>0.05)。0.4%、0.6%組血清IgA含量極顯著高于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)。0.4%、0.6%組血清IL-2含量極顯著低于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)，0.6%組極顯著低于0.4%組(P<0.01)，0.2%組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。0.6%組血清IL-6含量極顯著低于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)，與0.4%組差異不顯著(P>0.05)；0.4%、0.2%組血清IL-6含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，0.4%組顯著低于0.2%組(P<0.05)。0.6%組血清IL-10含量極顯著高于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)，與0.4%組差異不顯著(P>0.05)；0.2%、0.4%組血清IL-10含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，0.4%組極顯著高于0.2%組(P<0.01)。0.4%、0.6%組血清IFN-γ含量極顯著低于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)，0.6%組顯著低于0.4%組(P<0.05)。

表6 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清免疫指標(biāo)的影響

2.2.5 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

如表7所示，0.2%、0.4%和0.6%組血清SOD活性極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，0.2%、0.4%和0.6%組之間差異極顯著(P<0.01)。0.6%組血清T-AOC極顯著高于其他各組(P<0.01)，0.2%、0.4%組極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。0.4%和0.6%組血清GSH-Px活性極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)；0.6%組血清GSH-Px活性顯著高于0.2%組(P<0.05)，與0.4%組差異不顯著(P>0.05)；0.2%組血清GSH-Px活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。0.6%組血清MDA含量極顯著低于對(duì)照組和0.2%組(P<0.01)，與0.4%組差異不顯著(P>0.05)；0.4%組血清MDA含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，顯著低于0.2%組(P<0.05)；0.2%組血清MDA含量與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。

表7 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 鹽角草提取物對(duì)綿羊生長(zhǎng)性能的影響

平均日采食量、平均日增重、料重比等均是反映反芻動(dòng)物生長(zhǎng)性能的主要指標(biāo)。Sarker等[14]研究表明，飼糧中添加0.5%、1.0%鹽角草粉對(duì)肉雞的體增重、料重比均沒有顯著影響。Kim等[15]用酶處理獲得的鹽角草植物提取物飼喂大鼠，大鼠的體重指數(shù)和料重比與對(duì)照組相比無顯著差異。Jiao等[13]在肉雞飲水中添加不同水平的鹽角草提取物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組肉雞增重明顯提高，飼料系數(shù)明顯降低。Pea等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加以干草為原料的鹽角草有利于山羊羔羊的生長(zhǎng)和提高母羊的產(chǎn)奶量。本試驗(yàn)中，飼糧中添加鹽角草提取物可改善綿羊平均日增重，降低料重比，以0.4%組效果較好。

3.2 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)不僅與動(dòng)物機(jī)體免疫功能、組織器官功能等有關(guān)，也與機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝、抗氧化能力等有密切聯(lián)系，因此血清生化指標(biāo)可以直接或間接反映動(dòng)物的生長(zhǎng)性能[17]。

3.2.1 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清蛋白質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

血清TP由血清ALB和GLB組成，三者的含量可反映機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況。血清TP參與機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸，與組織蛋白質(zhì)合成等有密切聯(lián)系，其含量的升高與肝臟的蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng)有關(guān)，與動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育和飼料報(bào)酬呈正相關(guān)[18-20]。血清ALB對(duì)于維持機(jī)體內(nèi)代謝物質(zhì)運(yùn)輸具有重要作用，具有維持血漿滲透壓的恒定等功能[21]。血清GLB即免疫球蛋白，與機(jī)體抗病能力密切相關(guān)。Taghipour等[5]用鹽角草部分替代苜蓿干草飼喂綿羊，其血清ALB含量無明顯變化，這與本研究結(jié)果相似。血清UREA含量是反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀態(tài)的主要指標(biāo)[22]，其含量與瘤胃氨態(tài)氮含量高度相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，鹽角草部分替代苜蓿干草后，綿羊血清UREA含量降低[5]。本試驗(yàn)中，各組之間血清UREA含量雖然差異不顯著，但隨著鹽角草提取物添加水平的升高，綿羊血清UREA含量有降低的趨勢(shì)。

3.2.2 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清能量代謝指標(biāo)的影響

血清TC、TG、HDL和LDL含量可以反映動(dòng)物機(jī)體的脂類代謝情況。血清TG為脂肪代謝的產(chǎn)物，一定程度上可以反映機(jī)體脂肪消化吸收狀況，其含量越低，表明機(jī)體脂肪利用率越高[23]。作為載脂蛋白的HDL與LDL主要參與血液中膽固醇的運(yùn)輸與血脂的代謝，HDL可以將脂類由外周轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟，并將其分解代謝，故HDL被認(rèn)為是有益膽固醇；LDL轉(zhuǎn)運(yùn)血液中的膽固醇，可以將脂類由肝臟向外周轉(zhuǎn)運(yùn)，故LDL被認(rèn)為是有害膽固醇[24-26]。高朝煜等[27]研究表明，血清TC、TG和LDL含量的增加可以引起機(jī)體血脂異常，同時(shí)也是引起腹部肥胖的主要因素。Pichiah等[8]研究顯示，草本植物是類黃銅的豐富來源，植物中的黃酮類化合物負(fù)責(zé)抗肥胖和肝臟脂質(zhì)降低作用，給飼喂高脂飼糧的小鼠補(bǔ)充鹽角草能顯著影響肝臟重量、肝臟TG含量等以及關(guān)鍵脂質(zhì)合成代謝基因的表達(dá)。在本試驗(yàn)中，0.2%、0.4%、0.6%組血清TC、TG和LDL含量均低于對(duì)照組，說明鹽角草提取物對(duì)綿羊脂代謝方面有較好的改善作用，可能與鹽角草提取物中含有的黃酮類化合物有關(guān)。

3.2.3 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清酶指標(biāo)的影響

ALT常作為肝臟生理功能的重要指標(biāo)，通常存在于細(xì)胞內(nèi)，在血清中的活性較低，而在心臟和肝臟的活性最高[28]。當(dāng)組織細(xì)胞受損時(shí)，大量的ALT逸入血液，造成血清ALT活性明顯升高，因此，血清ALT活性過高則表明肝臟功能有可能受損；此外，ALT還參與了肝臟、腎臟等組織中進(jìn)行的聯(lián)合脫氨基作用，在非必需氨基酸和蛋白質(zhì)的分解過程中，起著重要的中介作用[29-30]。LDH是主要參與細(xì)胞液中糖酵解的一種酶，參與機(jī)體內(nèi)部能量代謝，不僅可作為診斷應(yīng)激的一種指標(biāo)，也與動(dòng)物機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育有關(guān)[31-32]。ALP是消化代謝的相關(guān)酶，其活性與動(dòng)物生長(zhǎng)性能呈正相關(guān)。劉明麗[33]研究發(fā)現(xiàn)，血清ALP活性可以在一定程度上預(yù)測(cè)驢的骨骼發(fā)育狀況。本試驗(yàn)中，飼糧中添加0.6%的鹽角草提取物可極顯著降低血清ALT活性，極顯著提高血清LDH活性，說明添加鹽角草提取物對(duì)綿羊肝臟的正常生理及機(jī)體代謝并未造成不良影響。

3.2.4 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清免疫指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體在受到抗原刺激后由漿細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，可與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。免疫球蛋含量升高與機(jī)體免疫能力增強(qiáng)有關(guān)，免疫球蛋含量下降與機(jī)體免疫能力抑制有關(guān)[34-36]。有研究顯示，IgG具有激活補(bǔ)體、中和毒素的作用；動(dòng)物感染初期首先產(chǎn)生的IgM具有溶解消除病原體的作用；IgA是阻礙病原體入侵動(dòng)物機(jī)體的第1道防線，具有阻止微生物在呼吸道上皮附著、抑制病毒增殖等作用[37-39]。本試驗(yàn)中，飼糧中添加鹽角草提取物可在不同程度地提高綿羊血清IgA和IgG含量，提高綿羊機(jī)體免疫性能。

細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激誘導(dǎo)而合成、分泌的活性因子，可以作為細(xì)胞間的信號(hào)傳遞分子并調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[40]。由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的細(xì)胞因子——白細(xì)胞介素，在機(jī)體炎癥反應(yīng)中起著非常重要的作用[41-43]。本試驗(yàn)中，隨著飼糧中鹽角草提取物添加水平的升高，綿羊血清中促炎因子IL-2、IL-6含量降低，抗炎因子IL-10含量升高，表明鹽角草提取物可能通過影響綿羊細(xì)胞因子調(diào)控機(jī)體免疫系統(tǒng)，提高綿羊機(jī)體的免疫機(jī)能，這或許與鹽角草提取物中富含酚類、生物堿等營養(yǎng)素有關(guān)。

3.2.5 鹽角草提取物對(duì)綿羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

在正常生理?xiàng)l件下，動(dòng)物機(jī)體自由基類高活性分子的生成和清除維持在穩(wěn)態(tài)水平。當(dāng)自由基的生成超過機(jī)體的清除能力時(shí)，容易造成炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，并產(chǎn)生大量氧化中間產(chǎn)物，發(fā)生氧化還原平衡的紊亂[44-45]。機(jī)體主要的抗氧化酶SOD能夠清除體內(nèi)的超氧陰離子，其含量的變化能比較準(zhǔn)確地反映機(jī)體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)的情況。T-AOC是衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標(biāo)，是體內(nèi)酶性和非酶性抗氧化物的總體水平。GSH-Px可特異催化谷胱甘肽(GSH)對(duì)脂質(zhì)過氧化物的還原反應(yīng)；MDA是脂質(zhì)過氧化最終產(chǎn)物之一，能引起細(xì)胞代謝及功能的障礙，其含量越低說明機(jī)體抗氧化效果越好[46-47]。Rhee等[48]研究發(fā)現(xiàn)幾種鹽角草屬植物均有抗氧化活性，包括鹽角草、印度海蓬子等，并且這幾種鹽生植物均含有酚類化合物。Zheng等[49]研究發(fā)現(xiàn)，茶多酚可通過多種機(jī)制獲得抗氧化能力。Zhang等[9]研究發(fā)現(xiàn)，給SD大鼠飼喂鹽角草提取物，可使大鼠血清SOD活性升高，血清MDA含量降低。Kim等[10]研究顯示，鹽角草提取物作為一種食鹽替代品，可提高機(jī)體抗氧化能力，防止高鹽攝入對(duì)腎臟和肝臟造成的損害，有效避免高血壓的發(fā)生。本試驗(yàn)中，隨著鹽角草提取物添加水平的升高，綿羊血清SOD、GSH-Px活性和T-AOC升高，而血清MDA含量降低，說明添加鹽角草提取物可提高綿羊機(jī)體抗氧化能力，這可能與鹽角草提取物富含酚類等營養(yǎng)成分有關(guān)。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加鹽角草提取物有助于改善綿羊生長(zhǎng)速度，降低料重比，提高機(jī)體免疫性能和抗氧化能力，以飼糧中添加0.4%的鹽角草提取物效果較好。