饑餓脅迫對日本蟳抗氧化酶活性和細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

丁愛俠

饑餓脅迫對日本蟳抗氧化酶活性和細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

丁愛俠

（寧波大學(xué) 土木與環(huán)境工程學(xué)院, 浙江 寧波 315211）

日本蟳()隸屬于梭子蟹科、蟳屬, 浙江俗稱“石蟹”“石奇角”和“石蜞螃”, 在日本、朝鮮、馬來西亞等國家廣泛分布, 國內(nèi)渤海、黃海、東海、南海等海域也有分布. 因其營養(yǎng)價值高、肉味鮮美, 深受消費(fèi)者喜愛, 具有較高的經(jīng)濟(jì)價值[1-2]. 然而, 近年來海洋日本蟳產(chǎn)量越來越少, 人工增養(yǎng)殖、人工放流逐漸成為餐桌上日本蟳的主要來源. 因此, 日本蟳基礎(chǔ)生物學(xué)的研究成為日本蟳增養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化發(fā)展以及人工放流規(guī)模擴(kuò)大的重要理論支撐.

自然放流環(huán)境、養(yǎng)殖環(huán)境以及運(yùn)輸過程中的水生生物很容易受到饑餓的脅迫, 體內(nèi)免疫系統(tǒng)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生改變, 對各種病原生物的抵抗力降低, 從而導(dǎo)致疾病暴發(fā). 國內(nèi)外學(xué)者先后研究了饑餓脅迫對藍(lán)鰓魚、克氏原螯蝦、羅非魚、刀鱭、團(tuán)頭魴、猛蝦蛄等水生動物抗氧化酶活性和器官組織結(jié)構(gòu)的影響[3-8]. 但是, 國內(nèi)外關(guān)于環(huán)境脅迫對于日本蟳免疫系統(tǒng)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能影響的研究成果相對較少, 尚未見到饑餓脅迫對日本蟳組織細(xì)胞和酶活性影響的相關(guān)報(bào)道.

本研究選擇超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和過氧化氫酶(catalase, CAT)作為研究指標(biāo), 通過試驗(yàn)探討日本蟳在饑餓脅迫下體內(nèi)抗氧化酶活性的變化, 分析日本蟳生理調(diào)節(jié)機(jī)制. 同時運(yùn)用組織學(xué)試驗(yàn)方法, 對日本蟳鰓、肌肉、肝胰腺、心臟的細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行拍照, 觀察16d饑餓脅迫后細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化, 為加強(qiáng)日本蟳健康養(yǎng)殖調(diào)控、改進(jìn)活體運(yùn)輸技術(shù)以及豐富日本蟳生態(tài)學(xué)理論研究提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)支撐.

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

日本蟳購自寧波象山碼頭, 共200只, 雌雄各半, 規(guī)格整齊((6.8～7.2)cm×(4.6～5.3)cm). 日本蟳購入后放入生態(tài)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)暫養(yǎng), 試驗(yàn)所用海水為鄞州育苗場經(jīng)沉淀和過濾后的清潔海水, 鹽度2.0%, 水溫10℃, 自然光照, 連續(xù)充氣. 暫養(yǎng)期間每日2次投喂新鮮貝類, 并仔細(xì)觀察, 淘汰缺少活力的個體, 暫養(yǎng)7d后開始饑餓脅迫試驗(yàn).

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

饑餓脅迫試驗(yàn)養(yǎng)殖條件、養(yǎng)殖方法同暫養(yǎng), 本試驗(yàn)設(shè)2個對照組和2個饑餓組, 每組隨機(jī)放入30只預(yù)先挑選出來的體態(tài)正常、健康、活力強(qiáng)的個體, 雌雄各半. 對照組正常投喂新鮮貝類, 饑餓組不投餌. 16d后終止試驗(yàn).

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 抗氧化酶活性的測定

對照組和饑餓組每4d取樣1次, 每次取2～3只, 迅速置于冰盤內(nèi)活體解剖, 分別取出鰓、肝胰腺、心臟和肌肉, 用生理鹽水沖洗后放入-70℃冰箱備用. 測定時準(zhǔn)確稱量0.1g組織樣品, 加入0.5mL磷酸鹽緩沖液(pH=7.0), 放入玻璃勻漿器, 在冰浴條件下勻漿5min, 然后放入冷凍離心機(jī)內(nèi)以14000r·min-1的速度離心25min, 取上清液用于酶活性測定.

SOD活性測定采用氮藍(lán)四唑光化學(xué)反應(yīng)法[9]. 3mL反應(yīng)液中含50mmol·L-1磷酸緩沖液(pH=7.8) 1.5mL, 130mmol·L-1甲硫氨酸(met)溶液0.3mL, 0.75mmol·L-1氯化硝基四氮唑蘭(NBT)溶液0.3mL, 0.1mmol·L-1EDTA-Na2液0.3mL和組織上清液0.1 mL, 最后加0.02mmol·L-1核黃素0.3mL. 置于4000lx日光下進(jìn)行光化學(xué)反應(yīng), 反應(yīng)溫度20℃, 30min后用黑暗終止反應(yīng), 并立即使用DR5000分光光度計(jì)(哈希, 美國)在560nm的波長下測吸光度. 一個SOD活力單位定義為能引起反應(yīng)初速度(指不加酶時)半抑制時的酶用量. CAT活性測定采用紫外吸收法. 3mL反應(yīng)液中含0.2mol·L-1磷酸緩沖液(pH=7.0) 1.5mL, 組織上清液0.2mL和0.1mol·L-1H2O20.3mL. 混合后即于240nm的波長下測吸光度, 然后置于25℃水浴中反應(yīng)5min, 再置于240nm下測定吸光度. 根據(jù)前后吸光度的差值計(jì)算CAT活性, 以1min內(nèi)吸光度減少0.1的酶量為1個酶活單位. 每組樣品各設(shè)置4個平行.

1.3.2 電鏡觀察

對解剖獲得的鰓、肌肉、肝胰腺和心臟組織迅速用2.5％戊二醛和1％鋨酸雙固定, 梯度乙醇脫水, Epon812環(huán)氧樹脂包埋, 以LKB-3型超薄切片機(jī)(LKB, 瑞典)切片, 醋酸鈾和檸檬酸鉛雙染色, 用H-700型透射電鏡(日立, 日本)觀察并攝影.

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析酶活性數(shù)據(jù), 采用均值Duncan法進(jìn)行差異性比較, 顯著水平設(shè)為<0.05.

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 饑餓脅迫對日本SOD和CAT活性的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明兩種抗氧化酶在日本蟳體內(nèi)的分布具有組織差異性. SOD酶的活性大小順序?yàn)? 心臟>鰓>肌肉>肝胰腺, CAT活性為肝胰腺>心臟>鰓>肌肉. 兩種酶在饑餓脅迫下表現(xiàn)出不同的應(yīng)激反應(yīng).

饑餓脅迫對日本蟳SOD活性的影響見表1. 鰓組織中SOD活性在饑餓脅迫第4d開始增加, 第8d顯著降低, 第12d又快速升高, 并在試驗(yàn)結(jié)束前保持一個穩(wěn)定的高水平. 肝胰腺組織中SOD活性在饑餓脅迫的前8d內(nèi)較對照組有輕微的下降, 第12d突然升高, 并達(dá)到峰值后穩(wěn)定至試驗(yàn)結(jié)束. 心臟和肌肉組織中SOD活性總體受到饑餓脅迫的影響相對較小, 其中心臟組織中SOD活性在饑餓脅迫下呈現(xiàn)比較明顯的刺激作用, 肌肉組織中SOD活性在第4d表現(xiàn)出輕微的抑制作用, 從第8d開始到結(jié)束一直維持在刺激狀態(tài). 總體看來, 饑餓脅迫會讓日本蟳機(jī)體內(nèi)SOD活性表現(xiàn)出一定的刺激效應(yīng), 并且在第12d達(dá)到峰值.

表1 饑餓脅迫對日本SOD活性的影響

注: 數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差, 不同上標(biāo)字母表示同一組織中存在顯著性差異(<0.05). 下表同.

饑餓脅迫對日本蟳CAT活性的影響見表2. 鰓中CAT活性在試驗(yàn)期間的波動較小, 且整體表現(xiàn)出輕微的抑制作用. 肝胰腺中CAT活性對饑餓的反應(yīng)比較敏感, 試驗(yàn)第4d出現(xiàn)明顯的抑制作用, 酶活性只有對照組的40%, 第8d開始快速增加達(dá)到峰值, 12d恢復(fù)并接近對照組的水平, 第16d酶活性略有回升. 饑餓脅迫第4d肌肉CAT酶活性出現(xiàn)明顯的應(yīng)激反應(yīng), 升高到對照組的2倍, 其余時間基本保持在對照組水平. 饑餓對心臟CAT活性影響相對較小, 16d內(nèi)基本維持在對照組水平.

表2 饑餓脅迫對日本CAT活性的影響

2.2 饑餓脅迫對日本組織超微結(jié)構(gòu)的影響

如圖1所示, 對照組日本蟳鰓絲管壁比較厚, 由上皮細(xì)胞構(gòu)成, 外層為角質(zhì)層; 細(xì)胞質(zhì)中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體都十分豐富; 細(xì)胞核規(guī)則, 核膜清楚, 異染色質(zhì)豐富、染色深. 饑餓脅迫組日本蟳鰓絲的管壁輕微變薄; 部分鰓絲出現(xiàn)輕微腫脹; 線粒體部分解體, 但仍有一部分比較完整, 內(nèi)嵴水腫、解體, 并有空泡化現(xiàn)象出現(xiàn); 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞核都比較完整.

(a) 對照組鰓絲細(xì)胞(×2000); (b) 饑餓組鰓絲細(xì)胞(×2000); (c) 對照組鰓絲管壁角質(zhì)層(×8000); (d) 饑餓組角質(zhì)層(×25000); (e) 對照組線粒體及內(nèi)嵴(×15000); (f) 饑餓組線粒體(×20000); (g) 對照組細(xì)胞核及核膜(×4000); (h) 饑餓組細(xì)胞核及核膜(×6000); (i) 對照組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(×15000); (j) 饑餓組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(×20000). M: 線粒體; Cr: 線粒體內(nèi)嵴; NM: 細(xì)胞核核膜; N: 細(xì)胞核; ER: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng).

如圖2所示, 對照組日本蟳肝胰腺肝管微絨毛豐富、排列致密; 線粒體靠近微絨毛區(qū)分布, 內(nèi)嵴發(fā)達(dá); 細(xì)胞質(zhì)中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)十分豐富, 滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈環(huán)狀排列; 細(xì)胞核規(guī)則, 結(jié)構(gòu)完整, 核膜清晰; 脂肪滴電子密度均勻. 饑餓組日本蟳肝胰腺細(xì)胞器溶解得比較多, 空泡化比較嚴(yán)重. 部分肝管的微絨毛出現(xiàn)退化現(xiàn)象, 排列不致密, 不規(guī)則, 部分缺失; 線粒體比較豐富、完整, 結(jié)構(gòu)清楚; 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)數(shù)量仍然豐富, 但部分內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)水腫、擴(kuò)張, 嵴有輕微破壞; 細(xì)胞核不規(guī)則, 染色質(zhì)減少、空泡化; 脂肪滴邊緣出現(xiàn)裂紋.

(a) 對照組肝管微絨毛(×8000); (b) 饑餓組肝管微絨毛(×10000); (c) 對照組線粒體(×10000); (d) 饑餓組線粒體(×10000); (e)對照組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(×3000); (f) 饑餓組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(×3000); (g) 對照組細(xì)胞核及核膜(×6000); (h) 饑餓組細(xì)胞核及核膜(×4000); (i) 對照組脂肪滴(×2500); (j) 饑餓組脂肪滴(×3000). Mv: 肝管微絨毛; M: 線粒體; ER: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng); NM: 細(xì)胞核核膜; N: 細(xì)胞核; Li: 脂肪滴.

如圖3所示, 對照組日本蟳心臟心肌細(xì)胞排列規(guī)則、致密, 明暗帶清晰; 線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富, 結(jié)構(gòu)完整; 細(xì)胞核規(guī)則, 核膜清晰、完整, 異染色質(zhì)豐富, 染色較深; 核糖體豐富. 16d饑餓脅迫后日本蟳心臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)輕微的變化. 肌原纖維排列有些疏松, 明暗帶模糊; 線粒體部分解體, 空泡增多, 線粒體內(nèi)嵴腫脹, 排列不規(guī)則, 有溶解現(xiàn)象; 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張, 空泡增多, 其他細(xì)胞器基本無變化.

(a) 對照組中的肌原纖維(×8000); (b) 饑餓組肌原纖維(×15000); (c) 對照組線粒體及內(nèi)嵴(×12000); (d) 饑餓組線粒體(×12000); (e) 對照組細(xì)胞核及核膜(×8000); (f) 饑餓組細(xì)胞核及核膜(×8000); (g) 對照組核糖體(×6000); (h) 饑餓組核糖體(×6000). My: 肌原纖維; M: 線粒體; Cr: 線粒體內(nèi)嵴; NM: 細(xì)胞核核膜; N: 細(xì)胞核; R: 核糖體.

如圖4所示, 對照組中肌原纖維致密, 排列規(guī)則, 明暗帶清晰; 線粒體豐富, 為橢圓形, 內(nèi)嵴發(fā)達(dá), 分布均勻, 間質(zhì)濃密; 細(xì)胞核規(guī)則, 核膜完整. 肌肉細(xì)胞在16d饑餓脅迫后除了細(xì)胞核染色質(zhì)固縮外, 其他細(xì)胞器無明顯的變化.

(a) 對照組肌原纖維(×10000); (b) 饑餓組肌原纖維(×10000); (c) 對照組線粒體(×7500); (d) 饑餓組線粒體(×12000); (e) 對照組細(xì)胞核及核膜(×15000); (f) 饑餓組細(xì)胞核及核膜(×8000). My: 肌原纖維; M: 線粒體; NM: 細(xì)胞核核膜; N: 細(xì)胞核.

3 討論

3.1 饑餓脅迫下日本抗氧化酶的反應(yīng)

學(xué)者前期研究表明抗氧化酶與生物機(jī)體的健康狀況、免疫保護(hù)、環(huán)境應(yīng)激等因素有關(guān), 與生物抵抗環(huán)境脅迫密切相關(guān), 既可以用來指示生物機(jī)體的非特異性免疫能力, 也可以用來作為環(huán)境脅迫檢測的重要指標(biāo)之一[10-11]. 水生生物在受到饑餓或其他環(huán)境因素脅迫時, 大量活性氧就會在細(xì)胞內(nèi)累積, 活性氧在對抗外界脅迫的同時也會對細(xì)胞造成一定的傷害. 包括SOD、CAT在內(nèi)的抗氧化酶體系可以降低自由基反應(yīng). SOD可以催化生物體內(nèi)超氧陰離子(O2ˉ), 使之發(fā)生歧化反應(yīng)生成過氧化氫(H2O2)和分子氧(O2), CAT能還原H2O2轉(zhuǎn)化為水和氧, 兩者聯(lián)合作用在動態(tài)平衡中抵御自由基的損傷[12-14]. 由此可見, SOD和CAT在應(yīng)對環(huán)境脅迫時起主導(dǎo)作用, 通過酶活性來調(diào)節(jié)代謝水平、能量分配和能源物質(zhì)消耗以維持機(jī)體的正常生理活動[8].

本試驗(yàn)也證明饑餓脅迫下日本蟳4種組織中SOD和CAT參與了機(jī)體的生理調(diào)節(jié), 而且不同組織中兩種酶反應(yīng)規(guī)律有所不同, 體現(xiàn)出細(xì)胞受到饑餓脅迫的破壞程度不同. 鰓的反應(yīng)最快, 第4d兩種酶就出現(xiàn)了較大的刺激和抑制效應(yīng), 肝胰腺中SOD在第12d才表現(xiàn)出強(qiáng)烈的刺激效應(yīng). 試驗(yàn)結(jié)束時鰓和肝胰腺中兩種酶都沒有恢復(fù)到對照組水平, 說明是饑餓脅迫的重要靶器官. 原因可能是鰓具有呼吸、排泄、調(diào)節(jié)滲透壓等多種功能, 肝胰腺則是日本蟳營養(yǎng)消化吸收的場所, 對營養(yǎng)和能量的需求非常高, 所以對饑餓脅迫比較敏感[15]. 而心臟和肌肉不具有吸收和代謝功能, 所以兩種酶變化程度不大.

此外, 同一組織中SOD和CAT活性受脅迫時的反應(yīng)并不同步, 或許存在互補(bǔ)作用, 這和許星鴻等[16]的研究結(jié)果一致. 一方面是因?yàn)镾OD和CAT是一個動態(tài)的保護(hù)系統(tǒng), 兩種酶互相配合, 共同抵御外界的侵害. 例如肝胰腺CAT活力降低的時候, SOD活力卻顯著升高. 另外一方面也可能是因?yàn)椴煌M織承擔(dān)的生理功能不同, 饑餓脅迫所攻擊的靶細(xì)胞不同.

3.2 饑餓脅迫對日本細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

細(xì)胞結(jié)構(gòu)是動物生理功能的單位, 結(jié)構(gòu)的損傷必將導(dǎo)致功能的變化, 功能異常又可能加速結(jié)構(gòu)的損傷. 試驗(yàn)表明16d饑餓脅迫下日本蟳鰓細(xì)胞、肝胰腺細(xì)胞和心臟細(xì)胞的細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)有不同的變化; 肌肉細(xì)胞和對照組比較除了細(xì)胞核染色質(zhì)固縮外基本無變化; 心臟細(xì)胞中線粒體和肌原纖維是脅迫的主要靶部位, 其他細(xì)胞器基本無變化.

4 結(jié)論

日本蟳具有一定的抵御饑餓脅迫的能力, 但這種能力是有限的. 組織細(xì)胞酶活性的大小是環(huán)境脅迫作用和保護(hù)酶系統(tǒng)自身防御共同作用的結(jié)果[22]. 在饑餓脅迫下的日本蟳可以通過調(diào)節(jié)抗氧化酶的水平來增強(qiáng)其清除活性氧的能力, 從而減輕外界脅迫的傷害, 但脅迫加強(qiáng)會導(dǎo)致日本蟳細(xì)胞代謝失調(diào)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞. 傳統(tǒng)水產(chǎn)養(yǎng)殖主要依靠抗生素和化學(xué)藥物進(jìn)行病害防治, 不僅會污染水環(huán)境, 還會通過食物鏈影響人類健康. 可以考慮通過短期饑餓脅迫以及在餌料中添加小球藻等方法來激發(fā)日本蟳的抗氧化能力, 減少病蟲害的大規(guī)模發(fā)生[23-24].

[1] 吳常文, 王志錚, 王偉洪, 等. 舟山近海日本蟳生物學(xué)、資源分布以及開發(fā)利用[J]. 浙江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào), 1998(1):13-18.

[2] 俞存根, 宋海棠, 姚光展. 東海日本蟳的數(shù)量分布和生物學(xué)特性[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 14(1):40-45.

[3] Hossain A M, Datta H M. Food deprivation induces differential changes in contents and microstructures of digestive tract and appendages in bluegill fish,[J]. Comparative Biochemistry and physiologypart A: physiology, 1991, 100(3):769-772.

[5] 盧俊姣, 劉淑蘭, 翟少偉. 饑餓脅迫對羅非魚肝胰臟抗氧化能力的影響[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào), 2013, 29(35):75-79.

[6] 金鑫, 徐鋼春, 杜富寬, 等. 饑餓脅迫對刀鱭形體、體成分及血液生化指標(biāo)的影響[J]. 動物學(xué)雜志, 2014, 49(6):897-903.

[7] 王東東, 吳成賓, 鄭國棟, 等. 饑餓脅迫對團(tuán)頭魴鰓組織結(jié)構(gòu)及Na+/K+-ATP酶、抗氧化酶的影響[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2019, 28(5):765-771.

[8] 趙旺, 溫為庚, 譚春明, 等. 饑餓脅迫對猛蝦蛄不同組織免疫酶活性的影響[J]. 中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2021, 60(4):26-33.

[9] Beauchamp C, Fridovich I. Superoxide dismutase: Improved assays and an assay applicable to acrylamide gels[J]. Analytical Biochemistry, 1971, 44(1):276-287.

[10] 江水恒, 王丹麗, 鄒秀, 等. 不同階段三疣梭子蟹保護(hù)酶及消化酶活性研究[J]. 河北漁業(yè), 2012(4):9-12.

[11] Zhang H X, Pan L Q, Miao J J, et al. Effects of mercuric chloride on antioxidant system and DNA integrity of the crab[J]. Journal of Ocean University of China, 2009, 8(4):416-424.

[12] 丁金強(qiáng), 劉萍, 李健, 等. 不同地理群體日本蟳非特異性免疫及抗氧化酶活力的比較[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào), 2013, 37(2):275-280.

[13] Legras S, Mouneyrac C, Amiard J C, et al. Changes in metallothionein concentrations in response to variation in natural factors (salinity, sex, weight) and metal contamination in crabs from a metal-rich estuary[J]. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 2000, 246(2):259-279.

[14] Mouneyrac C, Amiard-Triquet C, Amiard J C, et al. Comparison of metallothionein concentrations and tissue distribution of trace metals in crabs () from a metal-rich estuary, in and out of the reproductive season[J]. Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology, 2001, 129(3):193-209.

[15] 鄭志仁, 王炳森, 蔣學(xué)之, 等. 環(huán)境病理學(xué)[M]. 濟(jì)南: 山東科學(xué)技術(shù)出版社, 1991.

[16] 許星鴻, 張雁秋, 閻斌倫, 等. 氨氮脅迫對日本蟳免疫生理指標(biāo)及器官結(jié)構(gòu)的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào), 2014, 34(14):3885-3894.

[17] 王永生. 饑餓(限食)和重喂對三種不同適鹽性魚類形態(tài)形狀和肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[D]. 汕頭: 汕頭大學(xué), 2002.

[18] 殷帥文, 林學(xué)群, 陳潔輝. 饑餓和再恢復(fù)投喂對鯔魚肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[J]. 井岡山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2011, 32(3):60-64.

[19] 張升利, 梁擁軍, 孫向軍, 等. 饑餓對星斑川鰈消化器官形態(tài)結(jié)構(gòu)和組織學(xué)的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2012, 19(3):445-452.

[20] Weis P. Hepatic ultrastructure in two species of normal, fasted and gravid teleost fishes[J]. The American Journal of Anatomy, 1972, 133(3):317-331.

[22] 肖澤恒, 甘甜, 秦鐘, 等. 饑餓脅迫對福壽螺生長、抗氧化系統(tǒng)及生化物質(zhì)的影響[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)(中英文), 2022, 30(6):1036-1044.

[23] 王洪斌, 金學(xué)萍, 肖龍海, 等. 富硒海洋小球藻對三疣梭子蟹血清中部分免疫活性酶的影響[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué), 2016, 55(14):3687-3689.

[24] 王家新, 蘇宏, 王衛(wèi)兵, 等. 海水小球藻粗多糖對日本蟳免疫相關(guān)酶活性的影響[J]. 水產(chǎn)科學(xué), 2021, 40(6): 917-921.

Effects of starvation stress on the activities of antioxidant enzymes and cell ultrastructure of

DING Aixia

( School of Civil and Environmental Engineering, Ningbo University, Ningbo 315211, China )

Using the transmission electron microscopy and spectrophotometry, the current study was designed to investigate the effect of the starvation stress on the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and the ultrastructure of 4 tissues (gill, hepatopancreas, heart and muscle) in. The results indicated that SOD and CAT activities inexhibited high tissue specificity. The order of SOD activity distributed in different tissues from high to low was heart, gill, muscle and hepatopancreas. The order of CAT activity was hepatopancreas, heart, gill and muscle. SOD and CAT activities have been changed , following the introduction of the starvation stress. SOD holistically showed a significant stimulating effect within 16 days. CAT in gill was alleviated and CAT in hepatopancreas showed initial decrease and subsequent increase. The ultrastructure of four tissue cells were significantly altered under the starvation stress. Swelling gill filament, thinning cuticle and partially dissolved mitochondria was evident in Gill cells. Decreased microvilli, mitochondrion partly disintegrated, expanded endoplasmic reticulum and a few irregular nuclei was found in hepatopancreas cells. Mitochondria in heart cells was partially dissolved and myofibrils were swelled. Chromatin of muscle cells were pagans. It is concluded thatitself has limited defense ability against starvation stress.

; starvation; antioxidant enzyme; ultrastructure

2022?03?04.

寧波大學(xué)學(xué)報(bào)（理工版）網(wǎng)址: http://journallg.nbu.edu.cn/

丁愛俠（1974－）, 女, 江蘇連云港人, 高級實(shí)驗(yàn)師, 主要研究方向: 海洋環(huán)境生態(tài). Email: dingaixia@nbu.edu.cn

S917

A

1001-5132（2022）04-0001-08

（責(zé)任編輯 韓 超）