野生鹿科動物染色體研究進展報告

●孫麗敏 邢秀梅（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所 吉林 長春 130112）

1 野生梅花鹿染色體研究進展

梅花鹿東北亞種（拉丁學(xué)名為Cervus nippon dybowskii，下文均以CND予以表述）是國內(nèi)鹿科動物中最廣為人知的一個品種，目前，對CND細胞核組成部分的研究遠多于其他鹿科動物。經(jīng)研究顯示，目前CND種群數(shù)量約為900 只，我國在1978年將CND列為一級保護動物，所以對CND資源的保護迫在眉睫。通過大量的實踐研究，我國目前已培育出了新的梅花鹿品種，不過因為很多養(yǎng)殖場對梅花鹿的育種與選種存在一定的片面性，所以在繁育新品時存在一定的盲目性，引入了很多品種之外的基因，進而影響了品系的純度，且影響了整個鹿群的質(zhì)量[1]。

20 世紀70年代初期，我國就開始著手梅花鹿細胞核組成部分的研究。近年我們研究了野生梅花鹿細胞核組成部分的G、C染帶，經(jīng)對9 只CND482個細胞的分析，確認CND細胞核組成部分數(shù)量為2n=66；在此基礎(chǔ)上經(jīng)C染帶對細胞核組成部分異染色質(zhì)的分布進行了研究。經(jīng)對9 只CND的186 個帶有銀染核仁組成區(qū)進行Ag-NORS染色法分析，結(jié)果表明，有95%的細胞有4 條細胞核組成部分出現(xiàn)Ag-NORS[2]。通過此次研究可認為，東北野生馬鹿與CND是鹿屬中兩個不同的物種，因為東北野生馬鹿細胞核組成部分數(shù)目通常為68 條，而CND細胞核組成部分數(shù)目通常為66 條。而東北野生馬鹿和CND雜交，結(jié)果顯示，不論正交亦或反交，F(xiàn)1 代都具有較強的可育性，這和驢馬雜交造成子代無繁育力的情況為負相關(guān)性。不過經(jīng)對CND與東北馬鹿種間雜交F1代能育性的細胞核組成部分細胞遺傳學(xué)基礎(chǔ)的研究顯示，東北野生馬鹿與CND的細胞核組成部分具有一定的同源性，差異僅涉及一個羅伯遜易位，睪丸組織切片顯示F1 代生殖腺生長發(fā)育無異常，由此可證，東北野生馬鹿與CND間隔離機制不完善，進而東北野生馬鹿與CND均屬一個孟德爾群體[3]。

通過限制酶Hae3 與Hind3 對CND中期細胞核組成部分予以顯帶研究，結(jié)果顯示二者可使CND中期細胞核組成部分顯示出G樣帶與C樣帶，由此可證，CND12 對細胞核組成部分與兩條性細胞核組成部分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在上述酶處理過程中具有顯著的異質(zhì)性[4]。在此基礎(chǔ)上對CND的C帶與高分辨G帶予以分析，可繪制出CND高分辨G帶模式圖，結(jié)果表明，在亞種水平上，CND具有C帶多態(tài)性。近年來我們對CND的R帶予以綜合性研究，得到了CND的R分帶帶型，CND單套細胞核組成部分共顯帶400條；而一些學(xué)者對CND的N帶進行了分析，細胞核組成部分主要在著絲點區(qū)域顯帶，5、13、16、26、32 號常細胞核組成部分的著絲粒區(qū)域出現(xiàn)Ag-NORS、陽性帶，X細胞核組成部分臂出現(xiàn)深染區(qū)，Y細胞核組成部分整體深染，證明CND具有N帶多態(tài)性。

2 其他鹿科動物的細胞核組成部分研究

我們對鹿科各種核型及C、G帶帶型，對鹿科各屬、種的核型以及帶型予以對比分析，對其細胞核組成部分進化有了一定的認知。在研究中對4 只雄性中亞馬鹿實施了細胞核組成部分組型分析及C、G帶研究，結(jié)果表明，細胞核組成部分數(shù)目有多態(tài)現(xiàn)象(2n=66,67)[5]。

經(jīng)對毛冠鹿的細胞核組成部分組型進行研究，結(jié)果顯示毛冠鹿中存在細胞核組成部分數(shù)的多態(tài)現(xiàn)象，因為其細胞核組成部分總臂數(shù)均為52 定值，所以由此推算，其多態(tài)性是因為羅伯遜易位所致。經(jīng)大量鹿科動物細胞核組成部分的研究，我們發(fā)現(xiàn)，鹿科動物細胞核組成部分進化2n數(shù)均呈現(xiàn)出從少至多的規(guī)律，亞科間細胞核組成部分差異主要體現(xiàn)于X細胞核組成部分，鹿亞科的細胞核組成部分差異除了空齒鹿亞科外主要由羅伯遜斷裂所造成。

近年來我國其他學(xué)者對梅花鹿、水鹿與其雜交F1 代細胞核組成部分組型進行對比，在雄性F1 代核型中發(fā)現(xiàn)了不配對的細胞核組成部分；中科院動物研究所的相關(guān)學(xué)者們研究了赤麂云南亞種的細胞核組成部分核型，進一步明確了其細胞核組成部分數(shù)目為2n=32[6]。

3 總結(jié)

綜上所述，梅花鹿東北亞種是國內(nèi)鹿科動物中最廣為人知的一個品種，目前，對CND細胞核組成部分的研究遠多于其他鹿科動物。經(jīng)研究顯示，目前CND種群數(shù)量急劇減少，所以對CND資源的保護迫在眉睫。我們對鹿科各種的核型及C、G帶帶型，對鹿科各屬、種的核型以及帶型予以對比分析，對其細胞核組成部分進化有了一定的認知。CND12 對細胞核組成部分與兩條性細胞核組成部分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在上述酶處理過程中具有顯著的異質(zhì)性。在此基礎(chǔ)上對CND的C帶與高分辨G帶予以分析，可繪制出CND高分辨G帶模式圖，結(jié)果表明，在亞種水平上，CND具有C帶多態(tài)性。近年來我們對CND的R帶予以綜合性研究，得到了CND的R分帶帶型，CND單套細胞核組成部分共顯帶400 條。東北野生馬鹿和CND雜交，結(jié)果顯示，不論正交亦或反交，F(xiàn)1 代都具有較強的可育性，且東北野生馬鹿與CND間隔離機制不完善，進而東北野生馬鹿與CND同屬一個孟德爾群體。細胞核組成部分由脫氧核糖核酸及蛋白質(zhì)構(gòu)成，熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展使得細胞遺傳學(xué)與分子遺傳學(xué)有機的結(jié)合在一起，進而使細胞核組成部分研究在基因定位、細胞遺傳學(xué)圖構(gòu)建等領(lǐng)域起到積極的作用，同時對野生鹿科動物染色體的研究具有現(xiàn)實意義。