12周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)絕經(jīng)女性血管內(nèi)皮功能和內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響

陳曉可，何 輝*，王文榮

截至2020年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)（《中國心血管健康與疾病報(bào)告2020》編寫組，2021），我國心血管疾病死亡率居于首位，嚴(yán)重影響大眾的健康，預(yù)防心血管疾病的發(fā)生、探究其發(fā)病機(jī)制是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)（Joseph et al.，2017）。長期的血管內(nèi)皮功能失調(diào)可誘發(fā)多種心血管疾病，如動(dòng)脈粥樣硬化（Ross，1993）、高血壓（Cardillo et al.，1998）、冠心?。◤堚x華，2002）等，逆轉(zhuǎn)失調(diào)的血管內(nèi)皮功能是心血管疾病防治的新趨勢(shì)。血管內(nèi)皮細(xì)胞不僅發(fā)揮著重要的屏障作用，同時(shí)可合成和釋放多種內(nèi)皮衍生的血管活性因子，對(duì)血管的正常生理活動(dòng)具有重要調(diào)節(jié)作用（邱雅慧，2007）。成熟的血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞為內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cells，EPCs），是一類具有游走特性且能定向增殖分化為成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞（劉雋煒等，2001）。研究表明，EPCs在維持內(nèi)皮功能、血管發(fā)生、血管形成過程中起著重要作用（Conraads et al.，2013；Obi et al.，2014）。冠心?。╓att et al.，2016）、增齡（Sandri et al.，2011）、高血脂（Müller-Ehmsen et al.，2008）等多種心血管疾病危險(xiǎn)因素會(huì)導(dǎo)致機(jī)體外周循環(huán)EPCs水平下降和功能受損，促進(jìn)EPCs動(dòng)員和血管的再內(nèi)皮化已成為防治心血管疾病的最佳途徑。

血流剪切力升高等血流動(dòng)力學(xué)的改善可以提高內(nèi)皮依賴性血流介導(dǎo)的血管舒張功能（endothelium-dependent flow-mediated dilatation，F(xiàn)MD）（Ramos et al.，2016），同時(shí)外周循環(huán)EPCs數(shù)量的增加加速了受損內(nèi)皮血管的修復(fù)和再內(nèi)皮化過程，從而改善血管內(nèi)皮功能。前人研究認(rèn)為，運(yùn)動(dòng)可以促進(jìn)心血管疾病人群骨髓中EPCs動(dòng)員，增加外周循環(huán)EPCs數(shù)量（Cesari et al.，2013），但也有研究表明，中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)或高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)都沒有使EPCs具有顯著性差異變化（Rakobowchuk et al.，2012）。因此，運(yùn)動(dòng)是否能增加外周血液中EPCs基礎(chǔ)水平尚存在爭(zhēng)議，且針對(duì)長期有氧運(yùn)動(dòng)是否能提高女性增齡所導(dǎo)致的EPCs水平和功能下降的在體實(shí)驗(yàn)研究還需進(jìn)一步探索?；诖?，通過對(duì)靜坐少動(dòng)健康絕經(jīng)女性給予12周的有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)，探究長期有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)人體FMD的影響以及對(duì)外周循環(huán)EPCs數(shù)量和功能的影響，并探討FMD與EPCs變化的關(guān)系。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取靜坐少動(dòng)健康絕經(jīng)女性30名為研究對(duì)象，使用計(jì)算機(jī)隨機(jī)分配為兩組，即運(yùn)動(dòng)組（exercise group，EG）和對(duì)照組（control group，CG）各15人。受試者納入標(biāo)準(zhǔn)：1）采用美國GE彩超儀篩選無頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊者；2）所有受試者進(jìn)行病史詢問，確認(rèn)無心血管疾病、糖尿病、高血壓、高血脂、惡性腫瘤、感染或炎癥性疾病等，避免疾病參與影響血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，減小無關(guān)變量的影響；3）3個(gè)月內(nèi)無服用心血管疾病相關(guān)藥物；4）干預(yù)前受試者需通過《體能活動(dòng)適應(yīng)能力問卷》的檢查；5）所有受試者進(jìn)行詳細(xì)的體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查。

實(shí)驗(yàn)前所有受試者（表1）充分了解本實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)干預(yù)流程，自愿參加本實(shí)驗(yàn)，并簽署知情同意書。研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

表1 受試者基本信息Table 1 Basic Information of Subjects

1.2 研究方法

1.2.1 有氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練干預(yù)方案

根據(jù)美國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)推薦的活動(dòng)強(qiáng)度，界定干預(yù)強(qiáng)度為HR=[（HRmax-HRrest）×40%]＋HRrest。干預(yù)方案為：EG進(jìn)行電動(dòng)跑臺(tái)勻速慢跑干預(yù)，共12周，每周5天，每天50 min，周末休息。每次運(yùn)動(dòng)前進(jìn)行10 min的熱身準(zhǔn)備活動(dòng)，訓(xùn)練后有10 min的身體拉伸放松，以避免不必要的身體損傷。正式干預(yù)前，EG所有受試者進(jìn)行為期5天的適應(yīng)性訓(xùn)練（表2），適應(yīng)性訓(xùn)練時(shí)期，由測(cè)試者指導(dǎo)完成。適應(yīng)性訓(xùn)練和正式干預(yù)運(yùn)動(dòng)均使用小米手環(huán)4對(duì)受試者心率進(jìn)行監(jiān)控。CG不進(jìn)行運(yùn)動(dòng)干預(yù)。

表2 受試者適應(yīng)性訓(xùn)練方案Table 2 Adaptive Training Program for Subjects

正式干預(yù)過程（圖1）中，測(cè)試者定期監(jiān)督和電話回訪，以保證干預(yù)方案的落實(shí)。使用主觀體力感覺等級(jí)表（rating of perceived exertion，RPE）幫助受試者在干預(yù)過程中自我評(píng)價(jià)運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度，RPE的監(jiān)控范圍為11～13。

圖1 有氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練干預(yù)流程示意圖Figure 1.Schematic Diagram of Intervention Process of Aerobic Exercise Training

1.2.2 基礎(chǔ)指標(biāo)測(cè)試

分別在運(yùn)動(dòng)干預(yù)前和運(yùn)動(dòng)干預(yù)第4、8、12周的清晨測(cè)試受試者以下指標(biāo)：1）用Inbody 720體成分儀測(cè)試身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）；2）使用水銀血壓計(jì)測(cè)試受試者收縮壓（systolic pressure，SBP）和舒張壓（diastolic pressure，DBP），同時(shí)測(cè)試心率（heart rate，HR）；3）血脂測(cè)試：要求受試者提前12 h禁食，早上定時(shí)抽取空腹靜脈血30 ml，靜脈血采集后2 h內(nèi)3 000 rpm離心分離血清，測(cè)試指標(biāo)包括總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）。各指標(biāo)測(cè)試所需血樣均在運(yùn)動(dòng)后48 h采取。

1.2.3 頸動(dòng)脈局部血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè)

采用美國GE vivid 7彩超儀測(cè)試清晨安靜時(shí)頸動(dòng)脈收縮期峰值血流速度（peak systolic velocity，PSV）、血管內(nèi)徑（NJ）后代入公式計(jì)算血流剪切力（wall shear stress，WSS），公式為：τ=4ηV/D，其中，τ為血流剪切力/（dynes·cm-2），η為血液黏滯度/（mPa·s-1），V為頸動(dòng)脈最大血流速度/（cm·s-1），D為舒張期血管內(nèi)徑/cm，計(jì)算時(shí)取血液黏滯度η=4 mPa.s（Malek et al.，1999）。同時(shí)測(cè)試血管搏動(dòng)指數(shù)（pulsatility index，PI）和阻力指數(shù)（resistive index，RI）。

1.2.4 血管內(nèi)皮功能測(cè)試

使用血管內(nèi)皮功能檢測(cè)儀（日本，UNEX EF）測(cè)試肱動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性血流介導(dǎo)的內(nèi)皮舒張功能，統(tǒng)一測(cè)量右側(cè)手臂。測(cè)量基礎(chǔ)管徑后，袖帶加壓5 min后釋放，反射性血流增加產(chǎn)生的血流切應(yīng)力作用于血管壁，通過測(cè)量血管內(nèi)徑的變化率推測(cè)血管內(nèi)皮功能。要求受試者在測(cè)試前禁食4 h，12 h前禁止煙、酒、咖啡因或抗氧化性藥物，于安靜、溫度舒適的房間內(nèi)休息至少10 min后測(cè)試。

1.2.5 流式細(xì)胞儀測(cè)定外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞水平

作用在卷筒上的循環(huán)動(dòng)態(tài)載荷如圖15所示，由于該載荷譜的平均應(yīng)力不等于零，一般需要將該載荷譜轉(zhuǎn)換為對(duì)稱循環(huán)(使其平均應(yīng)力等于零)，這樣便可以利用標(biāo)準(zhǔn)試樣的S-N曲線預(yù)測(cè)卷筒結(jié)構(gòu)的疲勞壽命。而Goodman曲線為簡(jiǎn)單的直線形式，且其計(jì)算結(jié)果偏于保守，所以本文采用Goodman來修正具有不同平均載荷的載荷譜[15]，交變載荷修正公式為:

采取受試者于運(yùn)動(dòng)后約48 h的外周靜脈血30 mL，取100 uL全血細(xì)胞轉(zhuǎn)移至流式管中，加入抗體CD34、CD309、CD133各20 uL避光孵育20 min，加入紅細(xì)胞裂解液，室溫裂解8 min，以適量磷酸緩沖鹽溶液（phosphatebuffered saline，PBS）重懸細(xì)胞至單細(xì)胞懸液，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)并分析數(shù)據(jù)。

1.2.6 內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖能力檢測(cè)

取外周靜脈血5 mL/管，共6管，利用密度梯度離心法分離出單核細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基-2（endothelial basal medium-2，EBM2）（含20%FBS），并于37 ℃培養(yǎng)箱中孵育，3天后棄未貼壁細(xì)胞，給予完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)至第7天后，用2.5 g/L胰酶消化貼壁細(xì)胞約3 min，此期間輕輕吹打，使細(xì)胞懸浮。此后離心，棄上清后重懸于內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基（endothelial cell growth medium-2，EGM-2），接種到96孔板，放入培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)12 h后，在酶標(biāo)儀下于波長450 nm處測(cè)光密度（optical density，OD）（Dzau et al.，2005）。

1.2.7 內(nèi)皮祖細(xì)胞遷移能力檢測(cè)

用2.5 g/L胰酶消化貼壁細(xì)胞，重懸于EGM-2培養(yǎng)基，加入Transwell小室上室，將小室置于24孔培養(yǎng)板中，在下室中加入500 uL含血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）（100 ng/mL）的培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h后，輕輕刮去濾膜上面的未遷移細(xì)胞，4%多聚甲醛固定10 min，使用4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（4’，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI），溶液染色，于多波長激光共聚焦顯微鏡下鑒定DAPI染色陽性細(xì)胞，即遷移的EPCs，計(jì)數(shù)遷移細(xì)胞。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 23統(tǒng)計(jì)軟件處理。所有連續(xù)變量數(shù)據(jù)做正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（M±SD）表示，不符合正態(tài)分布用中位數(shù)和四分位數(shù)間距來描述。通過正態(tài)分布檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用重復(fù)測(cè)量方差分析，不符合正態(tài)分布則采用非參數(shù)檢驗(yàn)。同一時(shí)間點(diǎn)的組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。運(yùn)動(dòng)干預(yù)前后差異采用配對(duì)t檢驗(yàn)。變量之間的相關(guān)關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 12周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)絕經(jīng)女性基礎(chǔ)指標(biāo)的影響

對(duì)絕經(jīng)女性進(jìn)行12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)，每4周測(cè)試各組受試者的基礎(chǔ)指標(biāo)，包括BMI、血壓、心率和血脂4項(xiàng)指標(biāo)（表3），結(jié)果顯示，第12周對(duì)照組收縮壓顯著高于基礎(chǔ)值，其原因可能是受季節(jié)因素影響（蘇海，2009；Iwahori et al.，2018），運(yùn)動(dòng)組干預(yù)后的血壓相對(duì)于干預(yù)前未見顯著差異，雖然可能同樣受到季節(jié)性血壓升高的影響，但由于運(yùn)動(dòng)可以降低血壓（B?rjesson et al.，2016），綜合兩種因素使得運(yùn)動(dòng)組血壓升高不顯著。其他各指標(biāo)組間無顯著差異，干預(yù)前后無顯著差異。

表3 12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)基礎(chǔ)指標(biāo)變化Table 3 Changes of Basic Indexes during 12 Weeks ofAerobic Exercise Intervention

2.2 12周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)絕經(jīng)女性FMD和血流動(dòng)力學(xué)的影響

運(yùn)動(dòng)組PSV隨運(yùn)動(dòng)周期增加呈逐漸增加趨勢(shì)，PI和RI逐漸降低，干預(yù)前后比較均有顯著差異。運(yùn)動(dòng)組WSS于第4、8、12周相較于干預(yù)前均顯著增加，第8周時(shí)運(yùn)動(dòng)組WSS顯著高于對(duì)照組，12周干預(yù)后運(yùn)動(dòng)組PSV顯著高于對(duì)照組，12周干預(yù)后運(yùn)動(dòng)組PI、RI均顯著低于對(duì)照組?？赡苁苎魉俣鹊挠绊?，運(yùn)動(dòng)組RI基線值較高于對(duì)照組（表4）。

表4 12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)FMD和血流動(dòng)力學(xué)的變化Table 4 Changes of Vascular Endothelial Function and Hemodynamics during 12 Weeks of Aerobic Exercise

2.3 12周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)絕經(jīng)女性循環(huán)EPCs數(shù)量的影響

12周運(yùn)動(dòng)干預(yù)期間，分別對(duì)對(duì)照組和運(yùn)動(dòng)組每4周取血樣1次，檢測(cè)受試者循環(huán)EPCs數(shù)量，監(jiān)控其數(shù)量變化，結(jié)果顯示（表5），運(yùn)動(dòng)組EPCs含量隨運(yùn)動(dòng)周期增加均呈逐漸增加趨勢(shì)（圖2），第12周時(shí)顯著高于干預(yù)前。對(duì)照組在干預(yù)期間無顯著變化。組間比較，第8和12周運(yùn)動(dòng)組EPCs數(shù)量均分別顯著高于對(duì)照組第8和12周。

圖2 12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)EPCs數(shù)量變化Figure 2.Changes in the Number of EPCs during 12 Weeks of Aerobic Exercise Intervention

表5 12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)循環(huán)EPCs數(shù)量的變化Table 5 Changes in the Number of Circulating EPCs during 12 Weeks of Aerobic Exercise Intervention

2.4 12周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)EPCs增殖和遷移的影響

于12周運(yùn)動(dòng)干預(yù)前和干預(yù)后對(duì)運(yùn)動(dòng)組EPCs增殖和遷移能力進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示（表6），12周干預(yù)后運(yùn)動(dòng)組EPCs吸光值顯著增加（圖3），表明相同條件下其增殖能力提高；運(yùn)用Transwell小室計(jì)數(shù)其遷移個(gè)數(shù)（圖4），在共聚焦顯微鏡下鑒定DAPI染色陽性細(xì)胞，即遷移EPCs（圖5），結(jié)果表明，干預(yù)后EPCs遷移能力顯著提高。

表6 12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)前后EPCs增殖和遷移能力的變化Table 6 Changes in Proliferation and Migration Function of EPCs after 12 Weeks of Aerobic Exercise Intervention

圖3 12周干預(yù)前后運(yùn)動(dòng)組EPCs增殖變化Figure 3.Changes of Proliferation of EPCs in Exercise Group after 12 Weeks Intervention

圖4 12周干預(yù)前后運(yùn)動(dòng)組EPCs遷移變化Figure 4.Changes of Migration of EPCs in Exercise Group after 12 Weeks Intervention

圖5 干預(yù)前后運(yùn)動(dòng)組EPCs遷移圖片F(xiàn)igure 5.Migration of EPCs in the Exercise Group before and after Intervention

2.5 FMD變化量與EPCs數(shù)量變化量的相關(guān)分析

通過Pearson相關(guān)分析對(duì)FMD的改變量和循環(huán)EPCs水平的改變量進(jìn)行相關(guān)分析（圖6），兩者未見顯著的相關(guān)性（r=0.198，P=0.498）。

圖6 FMD變化量與EPCs變化量相關(guān)分析圖Figure 6.Correlation Analysis Diagram between the Changes of Numbers of FMD and EPCs

3 討論

通過對(duì)絕經(jīng)婦女進(jìn)行12周的中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)，發(fā)現(xiàn)12周有氧運(yùn)動(dòng)可以改善絕經(jīng)婦女FMD，增加血流剪切力，改善血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，增加外周循環(huán)EPCs基礎(chǔ)水平，并提高其增殖和遷移能力，從而提高機(jī)體血管內(nèi)皮修復(fù)和再生能力，改善血管內(nèi)皮功能。

長期運(yùn)動(dòng)使FMD升高的原因可能是若干一次性急性運(yùn)動(dòng)帶來的累積效應(yīng)。有研究表明，一次急性運(yùn)動(dòng)可快速動(dòng)員大量的EPCs，原因可能是急性大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)使機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生大量的強(qiáng)氧化物質(zhì)，并損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，因此機(jī)體在運(yùn)動(dòng)時(shí)需要?jiǎng)訂T大量的內(nèi)皮祖細(xì)胞以代償和修復(fù)血管內(nèi)皮受損部位（Rehman et al.，2004），在長期多次修復(fù)的過程中逐漸改善FMD。一次性急性運(yùn)動(dòng)過程中，機(jī)體循環(huán)EPCs快速增加，且隨運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間的延長而增加（M?bius-Winkler et al.，2009），在運(yùn)動(dòng)后恢復(fù)期，運(yùn)動(dòng)時(shí)動(dòng)員的EPCs在不斷修復(fù)血管轉(zhuǎn)為成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞的過程中循環(huán)數(shù)量不斷減少，運(yùn)動(dòng)停止后的24～48 h內(nèi)可逐漸恢復(fù)至基礎(chǔ)水平（M?bius-Winkler et al.，2009）。因此，一次性急性運(yùn)動(dòng)雖然可使循環(huán)EPCs水平迅速增加，但卻不能維持較長時(shí)間，在運(yùn)動(dòng)停止后又逐漸下降至原有水平。

本研究顯示，有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)12周后機(jī)體循環(huán)EPCs水平才出現(xiàn)顯著增加，結(jié)合前人研究表明（Cesari et al.，2009；Craenenbroeck et al.，2010），EPCs數(shù)量的改變具有時(shí)間積累效應(yīng)，有氧運(yùn)動(dòng)需達(dá)到一定的持續(xù)時(shí)間才能顯著提升外周循環(huán)EPCs的基礎(chǔ)水平。Rakobowchuk等（2012）的研究發(fā)現(xiàn)，中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)或高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)都沒有使EPCs具有顯著性差異變化，其研究中運(yùn)動(dòng)干預(yù)只持續(xù)了6周時(shí)間，干預(yù)時(shí)間短可能是EPCs數(shù)量沒有顯著改變的原因。在其他研究中存在由于時(shí)間短使EPCs數(shù)量沒有升高的相似結(jié)果，Cesari等（2009）對(duì)接受過心臟手術(shù)（心臟瓣膜置換術(shù)或者冠狀動(dòng)脈搭橋）的患者進(jìn)行僅2周有氧運(yùn)動(dòng)后，未發(fā)現(xiàn)EPCs數(shù)量增加，與之相似的是，Craenenbroeck等（2010）證實(shí)了對(duì)于慢性心功能衰竭患者，1次短期運(yùn)動(dòng)并未引起EPCs水平改變，卻在經(jīng)過6個(gè)月有氧運(yùn)動(dòng)后顯著增加。有研究認(rèn)為，對(duì)于患有心血管疾病的人群，運(yùn)動(dòng)刺激更容易使其循環(huán)EPCs數(shù)量增加（Cesari et al.，2013；Watt et al.，2016），且隨著運(yùn)動(dòng)周期增加，EPCs數(shù)量增加幅度更大，運(yùn)動(dòng)總量、基礎(chǔ)運(yùn)動(dòng)量及運(yùn)動(dòng)總時(shí)間與CD34＋/KDR＋細(xì)胞數(shù)量均呈明顯正相關(guān)（Kruger et al.，2014），運(yùn)動(dòng)干預(yù)后循環(huán)EPCs數(shù)量的增加幅度甚至大于3倍初始值（Steiner et al.，2005）。綜上所述，短期運(yùn)動(dòng)不能使機(jī)體循環(huán)EPCs基礎(chǔ)水平發(fā)生顯著變化，結(jié)合本研究可以看出，中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)至少需12周才可顯著提升EPCs數(shù)量。

長期運(yùn)動(dòng)可改善機(jī)體循環(huán)EPCs的功能。絕經(jīng)女性由于增齡和絕經(jīng)等因素使機(jī)體產(chǎn)生的一氧化氮（nitric oxide，NO）含量降低（Wu et al.，2019），而NO是誘導(dǎo)機(jī)體動(dòng)員EPCs歸巢的重要誘導(dǎo)因子（Cubbon et al.，2010），從而使絕經(jīng)婦女循環(huán)EPCs含量減少和功能受損（黃振華等，2018）。本研究顯示，長期中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)可提高增齡絕經(jīng)女性循環(huán)EPCs水平，同時(shí)改善其增殖和遷移能力，與本研究相似的是，Sandri等（2011）的研究發(fā)現(xiàn)，通過適當(dāng)提高有氧訓(xùn)練的強(qiáng)度，僅4周運(yùn)動(dòng)干預(yù)即可提高患有慢性心力衰竭人群的循環(huán)EPCs水平，提高EPCs遷移能力。在相同的運(yùn)動(dòng)時(shí)間和運(yùn)動(dòng)量的條件下，80%O2max的高強(qiáng)度間歇訓(xùn)練比60%O2max的中等強(qiáng)度持續(xù)性訓(xùn)練更容易提升EPCs水平，同時(shí)對(duì)EPCs功能的改善更為顯著（Tsai et al.，2016）。本實(shí)驗(yàn)未分析對(duì)照組EPCs的增值和遷移能力，但以往研究表明，EPCs數(shù)量和功能隨著年齡的衰老而下降（Rauscher et al.，2003；Sandri et al.，2015），因此，運(yùn)動(dòng)組經(jīng)12周有氧運(yùn)動(dòng)后其循環(huán)EPCs功能的改善應(yīng)是運(yùn)動(dòng)的結(jié)果，可排除年齡使其功能增加的可能性。

不同人群各自所對(duì)應(yīng)的循環(huán)EPCs基礎(chǔ)值的正常范圍尚待確定。由于循環(huán)EPCs的特異性表面標(biāo)志目前尚缺乏統(tǒng)一的意見，常用的鑒定方法是根據(jù)其細(xì)胞表面表達(dá)的標(biāo)記物，如 VEGFR-2、AC133、CXCR4、CD34等以及造血干細(xì)胞標(biāo)志物（Lin－）的缺失（劉雋煒等，2011）。本研究所采用的EPCs特異性標(biāo)志蛋白為CD34、CD309和CD133，在以往的研究中，不同的研究使用了不同的標(biāo)志性蛋白來識(shí)別和定量循環(huán)EPCs的絕對(duì)數(shù)量（Hirschi et al.，2008），因此關(guān)于不同年齡階段或不同性別對(duì)應(yīng)的循環(huán)EPCs基礎(chǔ)值的正常范圍還有待確定，同時(shí)絕經(jīng)所帶來的一系列變化如雌性激素的降低等因素是否會(huì)影響循環(huán)EPCs的正常水平和其功能，以及運(yùn)動(dòng)刺激機(jī)體動(dòng)員EPCs修復(fù)血管內(nèi)皮的機(jī)制等問題還需進(jìn)一步研究。

本研究中FMD與EPCs的改變無顯著相關(guān)，Luk等（2012）的研究中也發(fā)現(xiàn)FMD的增高與EPCs的變化無明顯相關(guān)關(guān)系，推測(cè)其原因可能是FMD不僅受EPCs變化的影響，同時(shí)還受其他多種變化因素的影響。在本研究中，受試者基礎(chǔ)指標(biāo)無顯著變化，而FMD卻顯著增加，排除基礎(chǔ)指標(biāo)變化的影響，本研究發(fā)現(xiàn)，WSS等血流動(dòng)力學(xué)多個(gè)指標(biāo)均有所改善，這些指標(biāo)的改善都會(huì)影響FMD（Obi et al.，2014），且FMD的變化還與hsCRP和leptin等（Flo et al.，2016）多種因子的改變具有一定的關(guān)系，這些因素的影響都可能是導(dǎo)致FMD與EPCs無顯著相關(guān)的原因，同時(shí)干預(yù)前后FMD和EPCs變異性大，個(gè)體間變化具較大差異，Rakobowchuk等（2012）對(duì)健康受試者進(jìn)行6周高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)干預(yù)后也發(fā)現(xiàn)受試者循環(huán)EPCs數(shù)量變異性較大。

4 結(jié)論

12周中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)可以改善絕經(jīng)女性FMD，改善血流動(dòng)力學(xué)各指標(biāo)，血流剪切力變化較血管內(nèi)皮功能敏感。外周循環(huán)EPCs基礎(chǔ)水平需至少12周的中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)才能使其顯著提高并維持在一定水平，12周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)可提高EPCs增殖和遷移能力。提示，對(duì)于具有一定運(yùn)動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)的絕經(jīng)女性甚至包括其他中老年人群，通過長期低風(fēng)險(xiǎn)的中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)可改善因增齡導(dǎo)致的EPCs數(shù)量和功能降低的現(xiàn)象，以此修復(fù)和改善中老年人群血管內(nèi)皮功能。