糞便S100A12，鈣衛(wèi)蛋白和乳鐵蛋白對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者疾病活動(dòng)度和黏膜愈合評(píng)估價(jià)值分析

楊思賢，慕奕彤，牛福玉（營口市中心醫(yī)院消化內(nèi)科，遼寧營口 115003）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是炎癥性腸病的常見類型，目前臨床尚缺乏有效根治的治療方法，患者病情常在緩解和復(fù)發(fā)之間交替發(fā)作，準(zhǔn)確評(píng)估患者的病情對(duì)于臨床治療方案的確定有重要的指導(dǎo)作用[1]。在過去臨床主要根據(jù)疾病活動(dòng)度來評(píng)估UC患者的病情以及治療效果，但近年來臨床越來越重視患者的黏膜愈合情況，相關(guān)研究顯示[2]，黏膜愈合與降低復(fù)發(fā)率、減少住院治療以及手術(shù)治療密切相關(guān)，目前臨床緩解和黏膜愈合已成為輕、中度患者臨床治療的主要終點(diǎn)[3]。腸鏡檢查是評(píng)估UC患者病情的金標(biāo)準(zhǔn)，但其作為一種侵入性檢查會(huì)給患者帶來較大的痛苦，僅適合作為診斷手段，不適宜頻繁地實(shí)時(shí)評(píng)估患者的腸黏膜病變情況。S100A12是近年來發(fā)現(xiàn)的一種UC生物標(biāo)志物，

李慕然等[4]人的研究發(fā)現(xiàn)，血清S100A12的表達(dá)水平與UC患者的病情密切相關(guān)，然而S100A12與黏膜愈合的關(guān)系尚不清楚。鈣衛(wèi)蛋白（fecal calprotectin，F(xiàn)C）和 乳鐵蛋白（lactoferrin，LF）均是常見的UC糞便生物標(biāo)志物，可較好地反映患者的疾病活動(dòng)度[5-6]，但尚缺乏二者與UC患者黏膜愈合的研究。本研究旨在探討糞便中S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度和黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值，以期為臨床采用無創(chuàng)方法評(píng)估患者病情提供參考，現(xiàn)作如下報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2018年9月～2020年7月期間營口市中心醫(yī)院收治的UC患者125例，其中男性72例，女性53例，年齡22～63(41.32±10.35)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(2018年,北京)》中關(guān)于UC的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；②年齡18～70歲；③患者及其家屬對(duì)本次研究內(nèi)容知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期患有急性感染性胃腸疾病或上消化道糜爛、潰瘍者；②并發(fā)有惡性腫瘤者；③并發(fā)有自身免疫性疾病、除UC以外的炎癥性疾病者；④并發(fā)有腸麻痹、巨結(jié)腸等嚴(yán)重并發(fā)癥；⑤妊娠或準(zhǔn)備妊娠、哺乳期婦女。本次研究已通過我院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.2 儀器與試劑 S100A12，F(xiàn)C和LF試劑盒（英國Abcam公司）；酶標(biāo)儀（美國BIO-RAD伯樂680）。

1.3 方法 采用UC鏡下嚴(yán)重程度指數(shù)（UCEIS評(píng)分）進(jìn)行分組，UCEIS評(píng)分分別從出血情況、血管紋理、糜爛和潰瘍對(duì)受累腸段進(jìn)行評(píng)估，以病變最嚴(yán)重部位處評(píng)分總和作為最終的UCEIS評(píng)分，該評(píng)分滿分為8分，得分越高代表病情越嚴(yán)重。若UCEIS評(píng)分為0～1分，則納入到緩解組（72例）；UCEIS評(píng)分為2～8分，則納入到活動(dòng)組（53例）。緩解組再根據(jù)黏膜情況進(jìn)行分組，若腸鏡下未見明顯異常（UCEIS評(píng)分=0分），則納入到黏膜愈合組（34例），若腸鏡下可見炎癥細(xì)胞浸潤（UCEIS評(píng)分=1分），則納入到黏膜病變組（38例）?；颊哂谀c鏡檢查前1 天留取晨起第1次糞便標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測糞便中的S100A12，F(xiàn)C和LF水平，嚴(yán)格遵循試劑盒說明書內(nèi)容進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS22.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料經(jīng)檢驗(yàn)均符合正態(tài)分布，以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）的形式表示，采用t檢驗(yàn)。采用Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析。采用受試者操作特征曲線（receiver operating characteristic curves，ROC）分析糞便S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度和黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 緩解組和活動(dòng)組的糞便S100A12，F(xiàn)C，LF水平比較 活動(dòng)組的糞便S100A12（1.21±0.36μg/g），F(xiàn)C（326.38±153.54μg/g）和LF（288.62±164.84μg/g）水平均明顯高于緩解組（0.75±0.24μg/g, 138.52±63.28μg/g, 103.25±45.63μg/g），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.566，9.367，8.600，均P＜0.05）。

2.2 黏膜愈合組和黏膜病變組的糞便S100A12，F(xiàn)C，LF水平比較 黏膜病變組的糞便S100A12（0.99±0.29μg/g），F(xiàn)C（188.94±70.94μg/g）和LF（142.31±63.21μg/g）水平均明顯高于黏膜愈合組（0.48±0.21μg/g，82.17±33.61μg/g，59.56±20.52μg/g），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.458，8.005,7.295，均P＜0.05）。

2.3 UC患者的糞便S100A12，F(xiàn)C和LF水平與UCEIS評(píng)分的相關(guān)性 經(jīng)Pearson分析顯示，UC患者的糞便S100A12，F(xiàn)C和LF水平與UCEIS評(píng)分均呈正相關(guān)（r=0.426，0.438，0.417，均P＜0.05）。

2.4 糞便S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值 見表1，圖1。以活動(dòng)組患者的數(shù)據(jù)為陽性樣本，以緩解組患者的數(shù)據(jù)為陰性樣本，采用ROC分析糞便S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值。結(jié)果顯示，糞便FC，LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值較高，曲線下面積均在0.8以上，而S100A12的評(píng)估價(jià)值稍低，曲線下面積為0.792。三者聯(lián)合應(yīng)用可進(jìn)一步提高對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值，曲線下面積可提升至0.895，敏感度和特異度分別為88.70%，90.28%。

表1 糞便S100A12，F(xiàn)C，LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值

圖1 糞便S100A12，F(xiàn)C，LF對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值

2.5 糞便S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值 見表2，圖2。以黏膜愈合組患者的數(shù)據(jù)為陽性樣本，以黏膜病變組患者的數(shù)據(jù)為陰性樣本，采用ROC分析糞便S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值。結(jié)果顯示，糞便S100A12，F(xiàn)C對(duì)UC患者黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值較高，曲線下面積均在0.8以上，而LF的評(píng)估價(jià)值稍低，曲線下面積為0.765。三者聯(lián)合應(yīng)用可進(jìn)一步提高對(duì)UC患者黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值，曲線下面積可提升至0.890，敏感度和特異度分別為91.18%，86.84%。

表2 糞便S100A12，F(xiàn)C，LF對(duì)UC患者黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值

圖2 糞便S100A12，F(xiàn)C，LF對(duì)UC患者黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值

3 討論

UC發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，至今尚未能完全闡明，目前還屬于難治愈性疾病，準(zhǔn)確的評(píng)估患者的病情有助于臨床治療方案的制定，利于改善患者的預(yù)后[8]。黏膜愈合是炎癥性腸病國際組織在2007年提出的概念，定義為腸道黏膜所有可視化部分無易碎性、出血、糜爛和潰瘍[9]，近年來臨床試驗(yàn)研究表明[10]，黏膜愈合是一項(xiàng)可靠的治療目標(biāo)，因此準(zhǔn)確地評(píng)估UC患者的黏膜愈合情況具有重要的臨床價(jià)值。近年來有大量與UC相關(guān)的生物標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)，部分血清炎癥標(biāo)志物雖可在一定程度上反映UC患者的病情，但其表達(dá)水平易受到全身炎癥狀態(tài)的影響，特異度及靈敏度較差。糞便生物標(biāo)志物是目前評(píng)估UC患者病情的重要指標(biāo)，由于糞便與腸道黏膜直接接觸，受其他因素的影響較小，因此可較好地反映腸道黏膜炎癥狀況[11-12]，因此本研究著重分析了糞便生物標(biāo)志物與UC患者黏膜愈合的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示，活動(dòng)組的糞便S100A12，F(xiàn)C和LF水平均明顯高于緩解組，黏膜病變組的糞便S100A12，F(xiàn)C和LF水平明顯高于黏膜愈合組，且糞便S100A12，F(xiàn)C和LF水平與UCEIS評(píng)分均呈正相關(guān)，這提示三種糞便生物標(biāo)志物均與UC患者的疾病活動(dòng)度以及黏膜愈合情況存在一定的關(guān)系。S100A12是S100蛋白家族成員之一，是一種促炎性反應(yīng)的鈣結(jié)合蛋白，可參與機(jī)體的免疫防御以及炎癥反應(yīng)[13]。S100A12主要由粒細(xì)胞分泌，主要表達(dá)于中性粒細(xì)胞中，在UC發(fā)生、發(fā)展的過程中，中性粒細(xì)胞異常活化，且腸黏膜中有大量中性粒細(xì)胞的聚集，這導(dǎo)致S100A12分泌增加[14]。HEIDA等[15]人的研究發(fā)現(xiàn)，初診的炎癥性腸病患兒以及青少年炎癥性腸病患者的糞便S100A12的表達(dá)水平高于健康人群，還有相關(guān)研究顯示[14]，糞便S100A12在UC，克羅恩病、腸易激綜合征中均呈異常高表達(dá)，但在UC中的表達(dá)水平最高。FC，LF均是臨床常見的UC生物標(biāo)志物，F(xiàn)C是由兩個(gè)異源鈣結(jié)合蛋白組成的二聚體，亦屬于S100蛋白家族，其主要來源于中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，在腸黏膜出現(xiàn)炎癥浸潤時(shí)會(huì)大量分泌[16-17]。LF屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白家族，在炎癥狀態(tài)下巨噬細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞均可分泌LF，因此其在UC患者血清及糞便中均呈高表達(dá)[18-19]。我國2018版的《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見》也建議將FC，LF作為診斷UC的輔助性指標(biāo)[7]。

本研究采用ROC分析發(fā)現(xiàn)，糞便S100A12，F(xiàn)C和LF對(duì)UC患者的疾病活動(dòng)度以及黏膜愈合均有一定的評(píng)估價(jià)值，但單一指標(biāo)檢測各有優(yōu)缺點(diǎn)，如糞便S100A12，F(xiàn)C和LF評(píng)估患者疾病活動(dòng)度時(shí)特異度均很高，但敏感度很低，而糞便S100A12在評(píng)估患者黏膜愈合情況時(shí)敏感度較佳，但特異度又不理想。迄今尚無一種生物標(biāo)志物可代替?zhèn)鹘y(tǒng)的內(nèi)鏡檢查和病理檢查，在此情形下，多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用成為一種有效的補(bǔ)充手段。本研究結(jié)果顯示，糞便S100A12，F(xiàn)C和LF聯(lián)合應(yīng)用可有效提高對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度和黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值。本研究尚且存在些許不足之處，首選選取的病例數(shù)較少，尤其是黏膜愈合組的例數(shù)只有34例，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)一定的偏倚。另一方面未能選取初診UC病例進(jìn)行研究，部分納入研究的UC患者病程較長，有長時(shí)間的用藥史，可能會(huì)對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。這些不足之處將在后續(xù)的研究中加以改進(jìn)。

綜上所述，糞便S100A12，F(xiàn)C和LF聯(lián)合應(yīng)用對(duì)UC患者疾病活動(dòng)度和黏膜愈合的評(píng)估價(jià)值較高，臨床可通過檢測患者糞便S100A12，F(xiàn)C和LF的表達(dá)情況對(duì)患者的病情進(jìn)行有效的評(píng)估，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。