復(fù)方苦參注射液通過(guò)保護(hù)線(xiàn)粒體防治大鼠急性放射性皮炎的研究

許文婧，馬玥詩(shī)，王佩，馬理海，汪宇宏，楊志祥，程俊，高麗萍

（重慶市中醫(yī)院，重慶 400021）

放射療法（簡(jiǎn)稱(chēng)放療）是治療惡性腫瘤最重要的三大手段之一，據(jù)國(guó)內(nèi)外統(tǒng)計(jì)，約有2/3 的腫瘤患者在病程不同階段出于不同目的的需要進(jìn)行放射治療［1］。放射性皮炎作為放射療法最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，有報(bào)道稱(chēng)其發(fā)病率約為87%，其中3 級(jí)以上的嚴(yán)重皮炎約占10%～15%［2］。放射性皮炎可使患者皮膚紅腫、疼痛、滲液和并發(fā)感染，甚至發(fā)生潰瘍和壞死，給患者造成較嚴(yán)重的身心負(fù)擔(dān)，降低患者生存質(zhì)量。對(duì)于如乳腺癌、外陰癌、頭頸部腫瘤、肛管癌部位的腫瘤等，放射性皮炎一般較重，甚至?xí)?dǎo)致放療計(jì)劃中斷、延期甚至終止，使療效大受影響。因此，放射性皮炎的預(yù)防和治療，一直困擾著廣大放療工作者。

當(dāng)前西醫(yī)的應(yīng)對(duì)策略是通過(guò)優(yōu)化放療計(jì)劃盡可能減輕放射性皮炎，并以藥物治療為主的綜合治療策略。目前所用治療藥物主要是激素類(lèi)軟膏、含超氧化物歧化酶的放療防護(hù)膏、復(fù)方維生素B12混合液、高分子材料軟膏、生長(zhǎng)因子類(lèi)軟膏等，有一定局限性［3］。根據(jù)中醫(yī)學(xué)觀點(diǎn)，放射線(xiàn)其性屬熱邪，在其治療腫瘤的同時(shí)，會(huì)造成熱毒壅盛、熱入營(yíng)血，外發(fā)于肌膚則見(jiàn)紅斑；火毒郁結(jié)于肌膚、皮膚熱盛而肉腐，則見(jiàn)脫屑或潰瘍；血失濡潤(rùn)、熱蘊(yùn)毒結(jié)，瘀阻經(jīng)絡(luò)，熱邪傷陰，而至灼痛或瘙癢［4］，因此中醫(yī)治療本病以“清熱解毒”為要，清熱解毒類(lèi)中藥如蘆薈、黃芩、黃連、黃柏和苦參等已經(jīng)在治療方面獲得不錯(cuò)的療效［5］。復(fù)方苦參注射液以其“清熱利濕、涼血解毒、散結(jié)止痛”的功效，已在抗腫瘤、放化療增敏以及減輕腫瘤放化療副反應(yīng)方面取得較好的臨床效果［6］；但是當(dāng)前研究多以臨床觀察為主，缺乏更加深入的基礎(chǔ)研究。因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察比較復(fù)方苦參注射液對(duì)放射性皮炎模型大鼠的療效，進(jìn)一步探討其在放射性皮炎反應(yīng)中的治療作用和機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

7～8 周齡SD 雌性大鼠［湖南斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，許可證號(hào)：SCXK（湘）2019－0004］，共30 只，體質(zhì)量180～200 g，喂養(yǎng)于重慶市中醫(yī)院SPF 級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，環(huán)境溫度25 ℃，濕度50%～55%，以純化水和大鼠滅菌專(zhuān)用飼料（江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司）飼養(yǎng)。

1.2 主要試劑與儀器

復(fù)方苦參注射液（山西振東制藥股份有限公司，批號(hào)：Z14021230）；Gluta 電鏡固定液、線(xiàn)粒體提取試劑盒SM0020（北京索萊寶科技有限公司）；大鼠白介素－6（IL－6）、腫瘤壞死因子－α（TNF－α）ELISA 試劑盒（北京四正柏生物科技有限公司）；延胡索酸、順烏頭酸酶試劑盒，大鼠8－羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8－OHDG）ELISA 試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）。

直線(xiàn)加速器（醫(yī)科達(dá)Synergy）；轉(zhuǎn)輪式切片機(jī)（徠卡－2016，德國(guó)）；JT－12S 自動(dòng)組織脫水機(jī)（武漢俊杰電子有限公司）；BMJ－A 型包埋機(jī)（常州郊區(qū)中威電子儀器廠(chǎng)）；RS36型全自動(dòng)染色機(jī)（常州派斯杰醫(yī)療設(shè)備有限公司）；PHY－Ⅲ型病理組織漂烘儀（常州市中威電子儀器有限公司）；數(shù)字切片掃描儀（Pannoramic 250，濟(jì)南丹吉爾電子有限公司）。

1.3 分組與造模

將30 只SD 大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、放療模型組、皮膚給藥組、腹腔給藥組和聯(lián)合治療組。除空白對(duì)照組外，其余組大鼠采用直線(xiàn)加速器照射的方式于右側(cè)大腿皮膚處建立放射性皮炎模型。在造模開(kāi)始前1日，對(duì)大鼠右側(cè)大腿皮膚予以剃毛處理，以便于后期進(jìn)行皮膚狀態(tài)觀察。采用10% 水合氯醛（0.3 mL/100 g）對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔注射麻醉，俯臥位固定于大鼠固定板上，采用直線(xiàn)加速器以4 mV X 射線(xiàn)源皮距100 cm 處照射大鼠右側(cè)大腿皮膚，射野為2.5 cm × 2.5 cm 的矩形野，單次劑量為30 Gy，建立急性放射性皮炎模型。

1.4 給藥方法

本次研究已在前期進(jìn)行了預(yù)實(shí)驗(yàn)，并通過(guò)課題組其他實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)，得出復(fù)方苦參注射液的優(yōu)化治療劑量為0.3 mL/100 g。自照射后第2天起開(kāi)始治療，皮膚給藥組予以復(fù)方苦參注射液照射區(qū)域皮膚濕敷，每天2 次，每次10 min；腹腔給藥組以0.3 mL/100 g 劑量進(jìn)行復(fù)方苦參注射液腹腔注射，每日1 次；聯(lián)合治療組同時(shí)予以復(fù)方苦參注射液皮膚濕敷以及腹腔給藥；空白對(duì)照組、放療模型組給予等量生理鹽水1 mL 腹腔注射以及患處濕敷。連續(xù)處理14 d。

1.5 標(biāo)本采集與檢測(cè)指標(biāo)

1.5.1 放射性皮炎分級(jí)

參考人類(lèi)急性放射反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)（RTOG/EORTC）將放射性皮炎分為0～5 級(jí)：0 級(jí)為無(wú)變化；1 級(jí)為出現(xiàn)點(diǎn)、片狀紅斑和干性脫皮；2 級(jí)為出現(xiàn)明顯面積紅斑、少量濕性脫皮、輕度水腫；3 級(jí)為中度以上水腫，大面積的濕性脫皮；4 級(jí)為大面積皮膚潰瘍、出血、壞死；5 級(jí)為因?yàn)榉派湫云ぱ姿劳觥Ｄ┐谓o藥后，觀察大鼠的一般情況及皮膚改變情況，并及時(shí)記錄。

1.5.2 皮膚組織病理形態(tài)

于最后一次給藥的次日，采用頸椎脫臼法處死大鼠，剪去大腿右側(cè)皮膚，用4 ℃磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗，剪碎為約0.5 cm×1.0 cm的大小，分別置于福爾馬林中固定，并凍存于－80 ℃冰箱備用。另剪取0.1 cm × 0.1 cm 大小的皮膚組織放置于電鏡固定液中。在福爾馬林中固定24 h后，常規(guī)梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋、組織切片及常規(guī)HE染色，觀察大鼠皮膚結(jié)構(gòu)、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等情況。

1.5.3 皮膚組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)

電鏡固定液中固定的標(biāo)本送陸軍軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室做電鏡組織包埋、切片，在電鏡下觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。

1.5.4 皮膚組織IL－6、TNF－α表達(dá)情況

將大鼠的皮膚組織在液氮下進(jìn)行研磨，再經(jīng)超聲勻漿，細(xì)胞勻漿液3 000 r/min 離心10 min 后取得上清液，按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）測(cè)定IL－6、TNF－α的相對(duì)表達(dá)量。

1.5.5 皮膚組織線(xiàn)粒體延胡索酸酶、順烏頭酸酶、8－羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8－OHDG）表達(dá)量

按線(xiàn)粒體提取試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行梯度離心操作提取細(xì)胞線(xiàn)粒體，ELISA 試劑盒進(jìn)行組織8－OHDG 測(cè)定；按延胡索酸試劑盒說(shuō)明書(shū)處理標(biāo)本，再使用分光光度法，檢測(cè)450 nm 吸光度值；按順烏頭酸酶試劑盒說(shuō)明書(shū)處理樣本，再使用分光光度法，檢測(cè)340 nm 吸光度值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法計(jì)算以上酶的活性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間均值比較采用單因素方差分析，若Levene 檢驗(yàn)方差齊，則采用單因素方差分析進(jìn)行總均值比較，然后采用LSD 法進(jìn)行兩兩比較，若Levene 檢驗(yàn)方差不齊，則改用welch 檢驗(yàn)進(jìn)行總體均值比較，然后再采用Dunnett T3 檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較；等級(jí)資料進(jìn)行秩和檢驗(yàn)，進(jìn)一步用秩變換分析方法進(jìn)行組間比較。以P＜0.05 代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠放射性皮炎分級(jí)比較

空白對(duì)照組大鼠大腿皮膚未見(jiàn)異常，毛發(fā)生長(zhǎng)良好；放療模型組大鼠皮膚反應(yīng)在2～3級(jí)，以3級(jí)反應(yīng)為主；皮膚給藥組大鼠皮膚反應(yīng)在1～3 級(jí)，以2 級(jí)為主；腹腔給藥組大鼠皮膚反應(yīng)在1～2級(jí)，以1級(jí)為主；聯(lián)合治療組大鼠皮膚反應(yīng)在1～2 級(jí)，以2 級(jí)為主。見(jiàn)圖1。各組大鼠放射性皮炎分級(jí)情況經(jīng)等級(jí)數(shù)據(jù)進(jìn)行秩和檢驗(yàn)（Kruskal－Wallis 法）后發(fā)現(xiàn)放射性皮炎的總體分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=52.084，P＜0.001）；進(jìn)一步用秩變換分析方法進(jìn)行組間比較，發(fā)現(xiàn)皮膚給藥組與放療模型組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.240），腹腔給藥組與聯(lián)合給藥組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.419），其余各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠放射性皮炎分級(jí)（例）

圖1 各組大鼠放射性皮炎分級(jí)比較

2.2 各組大鼠皮膚組織病理形態(tài)及電鏡下超微結(jié)構(gòu)比較

空白對(duì)照組大鼠皮膚組織表皮結(jié)構(gòu)完整清晰，角化層明顯，復(fù)層扁平上皮層較薄，細(xì)胞排列整齊緊密；真皮層內(nèi)膠原纖維交錯(cuò)排列，較致密，胞質(zhì)紅染、均勻；毛囊和皮脂腺等附屬器結(jié)構(gòu)完整，皮下結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)。放療模型組大鼠皮膚組織角化層明顯，復(fù)層扁平上皮層明顯增厚；真皮層內(nèi)膠原纖維較疏松，少量表皮層細(xì)胞壞死，胞核崩解或消失，毛囊和皮脂腺等附屬器數(shù)量較少，較多毛囊壞死，內(nèi)部結(jié)構(gòu)均消失，且伴有桿狀核中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。皮膚給藥組表皮角化層明顯，復(fù)層扁平上皮層增厚，真皮層少量的膠原纖維壞死，胞核固縮，毛囊和皮脂腺等附屬器數(shù)量稍少，少許桿狀核中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。腹腔給藥組大鼠皮膚組織表皮結(jié)構(gòu)完整清晰，角化層明顯，復(fù)層扁平上皮層稍有增厚，真皮層內(nèi)膠原纖維多呈交錯(cuò)排列，毛囊和皮脂腺等附屬器數(shù)量較多，少許桿狀核中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，皮下結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)。聯(lián)合治療組大鼠皮膚組織表皮結(jié)構(gòu)完整清晰，角化層明顯，真皮層少量的膠原纖維壞死，胞核固縮，少量毛囊壞死；伴粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，皮下結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)。見(jiàn)圖2。

圖2 各組大鼠皮膚組織光鏡圖（HE，×100）

空白對(duì)照組大鼠皮膚細(xì)胞排列整齊緊密；基底膜細(xì)胞偽足多，見(jiàn)橋粒鏈接致密，核糖體等細(xì)胞器豐富，線(xiàn)粒體數(shù)量多、形態(tài)正常。放療模型組大鼠皮膚細(xì)胞排列疏松，細(xì)胞連接疏松，基底膜偽足明顯減少，核糖體高爾基體等細(xì)胞器減少，線(xiàn)粒體明顯減少，形態(tài)難以辨認(rèn)。皮膚給藥組大鼠見(jiàn)皮膚細(xì)胞排列較為緊密，基底膜偽足減少，見(jiàn)部分核固縮，但線(xiàn)粒體明顯空泡腫脹、部分線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)破壞。腹腔給藥組大鼠皮膚細(xì)胞排列致密，橋粒鏈接較多，但部分線(xiàn)粒體出現(xiàn)空泡腫脹，線(xiàn)粒體嵴減少。聯(lián)合治療組大鼠皮膚排列致密，較多線(xiàn)粒體出現(xiàn)空泡腫脹，線(xiàn)粒體嵴減少及斷裂、嵴排列紊亂。見(jiàn)圖3。

圖3 大鼠皮膚細(xì)胞透射電鏡圖（×20 000）

2.3 各組大鼠皮膚組織IL－6、TNF－α表達(dá)量比較

各組大鼠皮膚組織中IL－6、TNF－α水平分布差異總體具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），經(jīng)LSD法兩兩分析后發(fā)現(xiàn)，除了腹腔給藥組與聯(lián)合給藥組的IL－6、TNF－α水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外（P=0.431，P=0.334），其余各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠皮膚組織IL－6、TNF－α的表達(dá)（±s，ng/mL）

表2 各組大鼠皮膚組織IL－6、TNF－α的表達(dá)（±s，ng/mL）

注：IL－6、TNF－α的總體分布差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P ＜0.001；數(shù)據(jù)后面所標(biāo)相同符號(hào)表示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P ＞0.05，所標(biāo)符號(hào)不同表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P ＜0.05。

組別空白對(duì)照組放療模型組皮膚給藥組腹腔給藥組聯(lián)合給藥組n6 6 6 6 6 IL－6 211.17±6.53#335.26±18.81$290.98±20.19*250.26±15.75※257.31±10.57※TNF－α 102.37±6.71#189.50±9.34$161.48±3.89*132.32±5.01※136.51±9.92※

2.4 各組大鼠皮膚組織線(xiàn)粒體延胡索酸酶、順烏頭酸酶、8－OHDG表達(dá)量比較

各組大鼠皮膚組織中延胡索酸酶、順烏頭酸酶水平差異總體具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），經(jīng)LSD 法兩兩分析后發(fā)現(xiàn)皮膚給藥組與放療模型組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P= 0.196，P= 0.136）、腹腔給藥組與聯(lián)合給藥組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P= 0.053，P=0.074），其余各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；各組大鼠皮膚組織中8－OHDG 分布不符合方差齊性，使用welch 檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)總體差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），經(jīng)Dunnett T3 法兩兩分析后發(fā)現(xiàn)，除腹腔給藥組與聯(lián)合給藥組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.946）外，其余各組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠延胡索酸酶、順烏頭酸酶、8－OHDG的表達(dá)（±s，ng/mL）

表3 各組大鼠延胡索酸酶、順烏頭酸酶、8－OHDG的表達(dá)（±s，ng/mL）

注：延胡索酸酶、順頭烏酸酶、8－OHDG 的總體分布差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P ＜0.001；數(shù)據(jù)后面所標(biāo)相同符號(hào)表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P ＞0.05，所標(biāo)符號(hào)不同表示組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P ＜0.05。

組別空白對(duì)照組放療模型組皮膚給藥組腹腔給藥組聯(lián)合給藥組n6 6 6 6 6延胡索酸酶62.58±4.89#42.41±3.45$45.35±4.24$56.51±2.81※52.01±3.46※順烏頭酸酶31.75±1.87#22.61±1.16$23.90±1.49$27.99±0.89※26.43±1.62※8－OHDG 23.93±0.42#45.47±2.21$38.84±1.91*31.61±2.15※32.91±2.06※

3 討論

放射性皮炎是放療過(guò)程中由電離輻射照射引起的皮膚黏膜炎癥性損害，表現(xiàn)為疼痛、紅腫等皮炎反應(yīng)，色素沉著，或表皮糜爛、脫皮，繼之形成潰瘍，皮脂腺、汗腺的毀損、皮膚可逆或永久萎縮，永久性的毛發(fā)缺失，甚至放射性壞死。電離輻射造成的生物學(xué)效應(yīng)主要分為直接作用和間接作用，間接作用約占放療2/3，其主要是指活性氧（ROS）產(chǎn)生的作用［7］。線(xiàn)粒體作為內(nèi)源性ROS 產(chǎn)生以及代謝的主要細(xì)胞器以及細(xì)胞內(nèi)主要能源代謝產(chǎn)生的場(chǎng)所，其DNA 以及酶的活性與正常生理功能及放療敏感性密切相關(guān)［8］。在放射性心肌損傷模型中發(fā)現(xiàn)，線(xiàn)粒體膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，通透性增強(qiáng)，膜兩側(cè)的離子平衡紊亂，使其進(jìn)行性腫脹，結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞。而對(duì)線(xiàn)粒體膜具有穩(wěn)定和保護(hù)作用的苦參能保持細(xì)胞內(nèi)離子的相對(duì)穩(wěn)定，對(duì)放療引起的心肌損傷起到保護(hù)作用，提示針對(duì)線(xiàn)粒體的保護(hù)可能減輕放射性損傷［9］。已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道，復(fù)方苦參注射液的主要有效成分苦參堿及氧化苦參堿等在其他模型中對(duì)線(xiàn)粒體具有保護(hù)作用，張鳴號(hào)等發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿能對(duì)抗大鼠感染性休克引起的心肌線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)和功能損傷、改善感染性休克過(guò)程中心肌細(xì)胞能量代謝狀況，減少心肌細(xì)胞損傷［10］。鄢衛(wèi)華發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿可以改善大鼠腦線(xiàn)粒體氧化磷酸化效率、提高缺氧模型大鼠腦線(xiàn)粒體膜電位，抑制缺氧引起的線(xiàn)粒體脫耦聯(lián)效應(yīng)，增加ATP 生成，從而使得密閉缺氧小鼠的存活時(shí)間明顯提高，且有量效依賴(lài)效果［11］。因此本課題組推測(cè)，在臨床使用中復(fù)方苦參注射液減輕放射性炎癥反應(yīng)的機(jī)制，可能是通過(guò)保護(hù)線(xiàn)粒體來(lái)達(dá)到的。

復(fù)方苦參注射液由苦參和白土苓提取精制而成，具有緩解癌性疼痛、出血，放化療增效減毒等效果，苦參與白土苓的配伍，比起使用單味藥材，增強(qiáng)了抗炎、止痛和止血功效［12］。在本次試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，復(fù)方苦參注射液在減輕放射性皮炎上方面較為明顯的效果，腹腔給藥組和聯(lián)合治療組大鼠放射性皮炎的發(fā)生嚴(yán)重程度較輕；與放療模型組相比，腹腔給藥組、聯(lián)合治療組大鼠皮膚組織炎癥因子IL－6 與TNF－α 的含量顯著降低，提示復(fù)方苦參注射液能減輕放射線(xiàn)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。在光鏡和電鏡下，發(fā)現(xiàn)腹腔給藥組、聯(lián)合治療組大鼠皮膚組織和細(xì)胞微結(jié)構(gòu)的損傷相對(duì)較小，特別是皮膚細(xì)胞線(xiàn)粒體的空泡、臌脹現(xiàn)象明顯減少。線(xiàn)粒體的幾個(gè)關(guān)鍵酶，如與三羧酸循環(huán)相關(guān)酶延胡索酸酶（其活性中心無(wú)硫鐵簇，不受氧自由基影響）以及三羧酸循環(huán)限速順烏頭酸酶（NO 信號(hào)傳導(dǎo)的重要靶酶和效應(yīng)器，受氧化自由基抑制）的活性也較放療模型組更高，而DNA 氧化損傷標(biāo)志物8－OHDG 的含量則更低，以上表現(xiàn)提示經(jīng)復(fù)方苦參注射液干預(yù)，大鼠皮膚組織線(xiàn)粒體的結(jié)構(gòu)、相應(yīng)酶的功能及細(xì)胞的氧化損傷均得到減輕。可以認(rèn)為，復(fù)方苦參注射液具有減輕放射性炎癥反應(yīng)、保護(hù)皮膚組織及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的效果，其機(jī)制可能與保護(hù)線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)和其關(guān)鍵酶功能有關(guān)。

在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，腹腔注射組、聯(lián)合治療組的對(duì)放射性皮炎的改善效果明顯優(yōu)于皮膚給藥組，但皮膚給藥組的效果與放療模型組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這一現(xiàn)象與試驗(yàn)預(yù)期有所差異。經(jīng)研究以及課題組組內(nèi)討論分析，認(rèn)為可能由以下原因?qū)е拢孩偎幬镉行С煞值臐B透性差異，可能部分有效成分因分子量或極性的原因，在藥物外敷時(shí)進(jìn)入皮膚真皮深層減少，無(wú)法起到相應(yīng)的效果。②在實(shí)際試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)歷濕敷時(shí)SD 大鼠均出現(xiàn)了強(qiáng)烈的攻擊和掙扎行為，與通常SD 大鼠較為溫順的行為不符，提示藥物濕敷可能對(duì)大鼠造成了不適。經(jīng)研究分析，正常皮膚微環(huán)境為偏酸性的，pH 值大概在4.5～6.5 左右，而該藥物pH 值偏堿性（實(shí)測(cè)pH 值在7.5～8.5 之間），這可能與藥物含有較多的活性生物堿有關(guān)，而偏堿性的藥物直接濕敷可能對(duì)皮膚造成了刺激，特別是在放療后皮膚損傷的情況下。③老鼠具有舔舐行為，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)大鼠會(huì)舔舐濕敷后的皮膚，可能會(huì)將附著于皮膚表面的藥液舔舐掉，無(wú)法保持皮膚有效藥用濃度和作用時(shí)間，也可能影響到藥物外用的效果。

綜上所述，苦參注射液能防治大鼠急性放射性皮炎，其機(jī)制可能與保護(hù)線(xiàn)粒體的結(jié)構(gòu)和酶的功能有關(guān)，這一結(jié)果為其在臨床治療放射性皮炎的有效性上提供了一定的理論依據(jù)；實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦提示若在臨床上如濕敷外用，需要注意皮膚刺激性或進(jìn)一步研究更適合的藥物劑型或載體。