飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉生長性能、氮代謝及血清生化指標(biāo)的影響

趙惠媛 申樹瑞 張海華 張鳳敏 張朝生 霍新鈺

(河北科技師范學(xué)院動物科技學(xué)院，河北省特色動物種質(zhì)資源挖掘與創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，秦皇島066004)

膽汁酸具有增強(qiáng)脂類代謝、保護(hù)動物肝臟、促進(jìn)幼畜生長等功能[1]，作為一種飼料添加劑，其在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用較為廣泛。李翠梅等[2]研究表明，在仔豬飼糧中添加膽汁酸可以促進(jìn)脂肪的消化吸收，降低腹瀉率，加快蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化，從而提高仔豬生長性能，其還在一定程度上改善了機(jī)體免疫功能，維護(hù)仔豬身體健康。王改玲[3]在研究中利用不同水平的膽汁酸替代基礎(chǔ)飼糧中的麩皮，進(jìn)行黃羽肉雛雞的飼養(yǎng)試驗(yàn)，結(jié)果表明在飼糧中添加膽汁酸可顯著提高血清中免疫球蛋白、葡萄糖、總蛋白等生化指標(biāo)含量，降低料重比，提高生長性能。朱龍等[4]研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加適宜的膽汁酸可以提高加州鱸魚增重率，降低料重比，促進(jìn)其生長；其還可以促進(jìn)鱸魚體內(nèi)脂肪代謝，降低脂肪沉積，從而達(dá)到提高其肌肉品質(zhì)的目的。Su等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加膽固醇和膽汁酸可以影響凡納濱對蝦的生長、脂質(zhì)代謝及免疫應(yīng)答，還可以影響腸道菌群分布情況，單純添加膽汁酸可以顯著提高對蝦肝胰腺的抗氧化能力。貉作為一種珍貴的毛皮動物，其生產(chǎn)性能的提高可以帶來良好的經(jīng)濟(jì)效益。目前關(guān)于膽汁酸對其他經(jīng)濟(jì)動物生產(chǎn)性能的影響研究較多，而其對貉生產(chǎn)性能的研究尚鮮見報(bào)道。貉在冬毛期主要進(jìn)行肌肉的增長及脂肪的沉淀，因此需要較高的能量和脂肪水平，在此階段提高其對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收率尤為重要。因此，本試驗(yàn)以冬毛期烏蘇里貉為研究對象，探究膽汁酸對其生長性能、氮代謝及血清生化指標(biāo)的影響，為在貉生產(chǎn)實(shí)踐過程中合理利用膽汁酸提供理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用飼料級膽汁酸由山東某動物保健品有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動物與分組

選取135日齡、體重相近、健康的雄性烏蘇里貉64只，隨機(jī)分為4組，每組16個重復(fù)，每個重復(fù)1只。各組間貉初重?zé)o顯著差異(P>0.05)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼糧

本試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，4組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0(Ⅰ組)、100(Ⅱ組)、300(Ⅲ組)、500 mg/kg(Ⅳ組)膽汁酸，基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1982)進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)預(yù)試期5 d，正試期80 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content鈣 Ca0.91總磷 TP0.85賴氨酸 Lys1.42蛋氨酸 Met0.65半胱氨酸 Cys0.35蘇氨酸 Thr0.90色氨酸 Trp0.22粗脂肪 EE9.80

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)前對試驗(yàn)動物的籠舍及食盆進(jìn)行清洗及消毒，采用單籠飼養(yǎng)，每日07:30及15:30各飼喂1次，自由飲水。

1.5 消化代謝試驗(yàn)

消化代謝試驗(yàn)為期3 d，采用全收糞法，各組分別挑選8只體重相近且健康狀況良好的烏蘇里貉進(jìn)行試驗(yàn)，每天記錄采食量。尿液收集桶中提前加入20 mL 10%濃度的硫酸以固氮及防腐，將消化代謝試驗(yàn)期間收集的全部糞樣和尿樣進(jìn)行處理：糞樣收集后按照鮮重的5%噴灑10%硫酸，轉(zhuǎn)至65 ℃烘箱中烘干，研磨過40目篩后置于自封袋于-20 ℃冰箱內(nèi)待測；尿樣需混勻并過濾后置于-20 ℃冰箱保存待測。

1.6 測定指標(biāo)及方法

1.6.1 生長性能測定

正式試驗(yàn)開始對各組烏蘇里貉稱重作為初始體重，之后每隔20 d進(jìn)行1次稱重，試驗(yàn)結(jié)束時貉體重為末重，稱重在早上飼喂前進(jìn)行并記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算烏蘇里貉體重的變化及平均日增重和料重比。

1.6.2 飼糧營養(yǎng)物質(zhì)消化率測定

依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)測定干物質(zhì)(GB/T 6435—2014)、粗脂肪(GB/T 6433—2006)及粗蛋白質(zhì)(GB/T 6432—2018)的含量。相關(guān)指標(biāo)計(jì)算公式[6]如下：

干物質(zhì)采食量(g/d)=(給料量×給料中
干物質(zhì)含量)-(剩料量×剩料中干物質(zhì)含量)；
干物質(zhì)排出量(g/d)=鮮糞重×糞中干物質(zhì)含量；
干物質(zhì)消化率(%)=[(干物質(zhì)采食量-干物質(zhì)
排出量)/干物質(zhì)采食量]×100；
粗脂肪消化率(%)=[(粗脂肪進(jìn)食量-糞便中
粗脂肪排出量)/粗脂肪進(jìn)食量]×100；
粗蛋白質(zhì)消化率(%)=[(粗蛋白質(zhì)進(jìn)食量-
糞便中粗蛋白質(zhì)排出量)/粗蛋白質(zhì)
進(jìn)食量]×100。

1.6.3 氮代謝指標(biāo)測定

相關(guān)指標(biāo)的測定和計(jì)算方法參照潘素敏等[6]進(jìn)行,計(jì)算公式如下：

食入氮(g/d)=干物質(zhì)采食量×
飼糧粗蛋白質(zhì)含量/6.25；
尿氮(g/d)=尿體積×尿粗蛋白質(zhì)含量/6.25；
糞氮(g/d)=糞干物質(zhì)量×糞中
粗蛋白質(zhì)含量/6.25；
氮沉積(g/d)=食入氮-尿氮-糞氮；
凈蛋白質(zhì)利用率(%)=(氮沉積/食入氮)×100；
蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值(%)=[氮沉積/
(食入氮-糞氮)]×100。

1.6.4 血清生化指標(biāo)測定

5.一定法，也就是經(jīng)常所說的排除法與定選法的結(jié)合。針對組合型選擇題，找到最準(zhǔn)確的那個選擇肢進(jìn)行定選或者錯得最離譜的那個選擇肢進(jìn)行排除。這兩個過程相結(jié)合基本就能確定應(yīng)選項(xiàng)。

冬毛期試驗(yàn)結(jié)束時，各組分別隨機(jī)選取8只烏蘇里貉并于空腹時進(jìn)行后肢靜脈取血，待血液凝固后4 000 r/min離心10 min吸取上層血清，置于-80 ℃冰箱保存，使用中生北控生物科技股份有限公司試劑盒，通過VITAL-E全自動生化分析儀測定血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、尿素(UREA)含量。

1.6.5 毛皮品質(zhì)測定

毛皮品質(zhì)測定需綜合比較各組貉皮長及皮板評分。

皮長：將貉取皮刮油后套在楦板上晾干，測量從鼻尖至尾根的長度。

皮板評分：綜合貉毛密度、整齊度、針/絨毛比、光澤度4項(xiàng)指標(biāo)，采用10分制評分，根據(jù)烏蘇里貉毛皮特點(diǎn)，每項(xiàng)指標(biāo)最高為2.5分，最低為0分，取總分平均值。

1.6.6 臟器指數(shù)測定

相關(guān)器官的臟器指數(shù)測定參照張新宇等[7]研究方法進(jìn)行。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 2010進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理，SPSS 17.0進(jìn)行單因素方差分析，LSD檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較，P>0.05表示差異不顯著，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著，試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉生長性能的影響

如表2所示，各組之間的初重差異不顯著(P>0.05)，Ⅱ組和Ⅲ組貉的末重、平均日增重及料重比顯著優(yōu)于Ⅰ組(P<0.05)。

表2 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉生長性能的影響

2.2 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

如表3所示，各組間干物質(zhì)采食量、干物質(zhì)排出量、干物質(zhì)及粗蛋白質(zhì)消化率均無顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組的粗脂肪消化率顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.05)。

表3 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

2.3 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉氮代謝的影響

如表4所示，各組間食入氮、糞氮和尿氮無顯著差異(P>0.05)；隨著飼糧中膽汁酸水平的增加，氮沉積存在先升高后降低的趨勢，其中Ⅱ組最高，各試驗(yàn)組之間無顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組的蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值最高，各組間無顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組的凈蛋白質(zhì)利用率顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.05)。

表4 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉氮代謝的影響

2.4 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉血清生化指標(biāo)的影響

如表5所示，各試驗(yàn)組的血清尿素、總蛋白及球蛋白含量隨著膽汁酸水平的提高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，Ⅲ組數(shù)值最大，各組間無顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組間血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性及高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量無顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組血清膽固醇含量顯著低于Ⅳ組(P<0.05)，Ⅳ組血清甘油三酯含量顯著高于其余3組(P<0.05)。

表5 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉血清生化指標(biāo)的影響

2.5 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉毛皮品質(zhì)的影響

如表6所示，試驗(yàn)各組之間皮長無顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組的皮板評分最高，各組之間無顯著差異(P>0.05)。

表6 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉毛皮品質(zhì)的影響

2.6 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉臟器指數(shù)的影響

如表7所示，Ⅰ組的肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)均顯著高于Ⅱ組和Ⅳ組(P<0.05)，極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)；Ⅰ組的脾臟指數(shù)顯著高于Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05)。

表7 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉臟器指數(shù)的影響

3 討 論

3.1 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉生長性能的影響

在本試驗(yàn)條件下，膽汁酸添加水平為300 mg/kg時，公貉末重、平均日增重均最高，料重比最優(yōu)，顯著高于對照組，說明飼糧中添加適量膽汁酸能提高烏蘇里貉生長性能。程偉偉等[8]研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼糧中添加500 g/t的膽汁酸，可以顯著提高肉雞生長前期的平均體重。趙盼月[9]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加500 mg/kg膽汁酸時，可通過提高歐洲鰻鱺的腸道消化酶活性、改善腸道菌群的相對豐度及多樣性、促進(jìn)肝臟膽汁酸產(chǎn)生以及提高脂肪分解酶活性等方式促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，從而提高生長性能。左旭東[10]研究發(fā)現(xiàn)，添加較低水平的膽汁酸時對于母雞平均日增重有促進(jìn)作用，膽汁酸較高時即產(chǎn)生了抑制作用。高水平的膽汁酸會通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)的方式抑制法尼醇X受體激活的膽汁酸合成途徑，從而降低機(jī)體對葡萄糖的進(jìn)食量，從而抑制了機(jī)體的生長性能[11]。通過研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加適量的膽汁酸時，可以適當(dāng)提高冬毛期烏蘇里貉的生長性能。

3.2 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

本研究中，冬毛期烏蘇里貉主要進(jìn)行肌肉增加和脂肪沉積，各組之間的干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)消化率無顯著差異。吳明海[12]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2%的膽汁酸時，對奶牛干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)消化率無顯著影響，與本試驗(yàn)研究一致。本研究中，當(dāng)膽汁酸添加水平為100 mg/kg時，冬毛期貉粗脂肪消化率顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組，這說明高添加水平的膽汁酸會降低機(jī)體對脂肪的消化吸收。Bauer等[13]認(rèn)為，低水平的膽汁酸可以促進(jìn)脂肪的消化吸收，當(dāng)其添加水平較高時，可能會形成某種單分子層結(jié)構(gòu)物質(zhì)，從而阻礙脂肪酶與底物的結(jié)合而產(chǎn)生抑制效果。這說明飼糧中膽汁酸的添加水平需要在一個適宜的范圍。

3.3 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉氮代謝的影響

烏蘇里貉在冬毛期階段可對自身采食的蛋白質(zhì)和能量進(jìn)行調(diào)節(jié)[7]。本試驗(yàn)中，各組的食入氮、尿氮、糞氮及氮沉積均無顯著差異；膽汁酸添加水平為100 mg/kg時，蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值較高，此時凈蛋白質(zhì)利用率顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組。這表明適量膽汁酸的添加可以提高機(jī)體對飼糧中蛋白質(zhì)的利用效率。為了滿足烏蘇里貉在冬毛期對肌肉積累的要求，需要給其供給足量的蛋白質(zhì)，因而提高蛋白質(zhì)的利用率尤為重要。

3.4 飼糧膽汁酸水平對冬毛期烏蘇里貉血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)可以反映動物機(jī)體的生理狀況。血清中葡萄糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量是判斷機(jī)體健康狀態(tài)的重要指標(biāo)[14]。本試驗(yàn)條件下，膽汁酸的添加對于以上指標(biāo)沒有產(chǎn)生顯著影響。Ⅱ組血清膽固醇含量顯著低于Ⅳ組，飼糧中添加膽汁酸水平為100 mg/kg時，可通過肝載脂蛋白A-Ⅰ的表達(dá)，降低膽固醇的含量。膽汁酸可以通過活化法尼酯衍生物X受體(FXR)下調(diào)肝組織固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1(SREBP-1)，進(jìn)而抑制甘油三酯合成酶的轉(zhuǎn)錄，最終導(dǎo)致血清甘油三酯含量的降低[15]。當(dāng)膽汁酸添加水平為500 mg/kg時，血清甘油三酯含量顯著高于其余3組，這可能是由于高添加水平的膽汁酸造成機(jī)體負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制被激活，從而導(dǎo)致血清甘油三酯含量的提高。

3.5 飼糧膽汁酸水平對烏蘇里貉毛皮品質(zhì)的影響

烏蘇里貉作為一種經(jīng)濟(jì)動物，毛皮品質(zhì)是體現(xiàn)其經(jīng)濟(jì)價(jià)值的重要指標(biāo)，其與飼糧營養(yǎng)成分存在很大的相關(guān)性。貉體長和皮長的提升利于獲得較大的毛皮面積，貉毛密度、整齊度、針/絨毛比、光澤度等是衡量毛皮質(zhì)量的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)條件下，雖然各組的皮長和皮板評分均無顯著差異，但是當(dāng)膽汁酸添加水平為100和300 mg/kg時，以上各指標(biāo)較高。這表明在本試驗(yàn)條件下飼糧中添加適量水平的膽汁酸可以提升烏蘇里貉毛皮品質(zhì)。

3.6 飼糧膽汁酸水平對烏蘇里貉臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)在一定程度上可以反映出動物器官的發(fā)育情況及功能強(qiáng)弱，間接體現(xiàn)出動物身體的健康狀況[16]。本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加膽汁酸后肝臟、腎臟及脾臟指數(shù)均顯著下降，心臟指數(shù)無顯著變化。研究發(fā)現(xiàn)，適宜水平的膽汁酸可以促進(jìn)脂肪的消化吸收，當(dāng)其水平過高時則會危害肝臟[17-18]。膽汁酸可以通過對FXR的調(diào)節(jié)來調(diào)控脂代謝過程，F(xiàn)XR主要表達(dá)于肝臟、腎臟、腸道等器官，在本試驗(yàn)條件下，膽汁酸的持續(xù)添加可能在作用于FXR的同時對其所在器官也造成了損傷，從而造成臟器指數(shù)降低。胡田恩等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼糧中添加膽汁酸可以顯著降低牛蛙臟器指數(shù)。朱龍等[4]也發(fā)現(xiàn)，在加州鱸魚飼料中添加膽汁酸也會導(dǎo)致魚體臟器指數(shù)有所降低。這表明在飼糧中添加膽汁酸時不僅需要水平適宜，添加持續(xù)時間也需進(jìn)一步考量。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，通過對冬毛期烏蘇里貉生長性能、氮代謝及血清生化指標(biāo)的測定與分析，綜合各項(xiàng)指標(biāo)得出，當(dāng)飼糧中膽汁酸水平為100～300 mg/kg時，冬毛期烏蘇里貉能獲得較好的生長性能。