腫瘤異常糖鏈蛋白在結(jié)直腸癌診療中的應(yīng)用價值

袁仁順， 施海華

結(jié)直腸癌是最常見的癌癥之一。據(jù)2020年全球癌癥統(tǒng)計報告顯示，近20年來，結(jié)直腸癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1-2]。結(jié)直腸癌發(fā)病多隱匿、初期癥狀不典型，目前其主要診斷方法為纖維結(jié)腸鏡[3-4]。但腸鏡檢查價格昂貴，且為侵襲性檢查，使其在結(jié)直腸癌早期篩查中的應(yīng)用受限，約20%結(jié)直腸癌患者確診時已發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移[5]。目前惡性腫瘤血清標(biāo)志物應(yīng)用于腫瘤臨床早期診斷成為研究熱點，結(jié)直腸癌經(jīng)典腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CA19-9)陽性率僅約為45%、30%[6]，其敏感度和特異度不高。近年來研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)機體細胞發(fā)生惡性增殖，其細胞膜表面的聚糖結(jié)構(gòu)將改變，并分泌腫瘤異常糖鏈糖蛋白(tumor abnormal protein，TAP)，當(dāng)TAP在外周循環(huán)中達到一定濃度后，可通過外周血檢出[7]。本研究通過對結(jié)直腸癌患者與健康體檢者行外周血TAP檢測并分析TAP水平探討其在結(jié)直腸癌診療中的應(yīng)用價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2018年12月至2021年10月蘇州市立醫(yī)院東區(qū)胃腸外科收治的結(jié)直腸癌患者109例為試驗組，其中男66例，女43例；年齡32～89歲，平均年齡(65.07±10.90)歲；術(shù)后病理分期采取2017年國際抗癌聯(lián)盟/美國癌癥聯(lián)合委員會(UICC/AJCC)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)(第8版)[8]，其中Ⅰ期15例(13.76%)，Ⅱ期31例(28.44%)，Ⅲ期49例(44.95%)，Ⅳ期14例(12.84%)；組織學(xué)分級參照WHO消化系統(tǒng)腫瘤分類2019版[8]2級分法，其中低級別81例(74.31%)，高級別28例(25.69%)。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)手術(shù)切除(包括R0切除及股息切除)、術(shù)后病理證實，且術(shù)前未接受針對腫瘤的特殊治療(包括化療、放療、靶向治療等)。另擇我院同期健康體檢者109例為對照組，其中男63例，女46例，年齡29～82歲，平均年齡(63.92±10.44)歲，均經(jīng)體檢及實驗室檢查，排除惡性腫瘤，既往無惡性腫瘤、結(jié)直腸慢性炎癥性疾病、結(jié)直腸息肉等病史。兩組性別(χ2=0.171，P=0.679)和年齡(t=0.228，P=0.820)差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。本研究獲本院倫理委員會批準(zhǔn)，且所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 外周血TAP水平檢測 對照組體檢時、試驗組手術(shù)前，以及試驗組中56例需行術(shù)后輔助化療者(參照CSCO指南2020版[8])于術(shù)后3周，分別采集空腹靜脈血5 ml，制成均勻血片，自然晾干后，按照TAP檢測試劑盒(浙江瑞生醫(yī)療儀器廠)說明書進行操作，顯微鏡下觀察并測量TAP與鈣-組蛋白凝聚而成的類晶體凝聚物的面積。凝聚物顆粒面積>121 μm2為TAP陽性，凝聚物顆粒面積0～121 μm2為TAP陰性。

2 結(jié)果

2.1 試驗組與對照組TAP水平比較 試驗組TAP水平[(134.37±34.06)μm2]明顯高于對照組[(73.28±19.88)μm2]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=16.174，P<0.001)；且試驗組TAP陽性率75.23%(82/109)顯著高于對照組(0/109)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=131.441，P<0.001)。

2.2 試驗組行術(shù)后輔助化療者TAP水平 56例患者術(shù)后TAP水平[115.76(96.95,126.89) μm2]明顯低于術(shù)前[134.43(117.04,146.83) μm2]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=4.406，P<0.001)；術(shù)后TAP陽性率為32.14%(18/56)，低于術(shù)前69.64%(39/56)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=19.048，P<0.001)。

2.3 結(jié)直腸癌患者TAP水平與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 遠處轉(zhuǎn)移患者TAP陽性率明顯高于無遠處轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；不同年齡、性別、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤TNM分期及腫瘤分化級別之間TAP陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表1)。

表1 結(jié)直腸癌TAP表達與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 [例(%)]

2.4 ROC曲線分析TAP對結(jié)直腸癌的診斷價值 TAP表達診斷結(jié)直腸癌的臨界值為93.317 μm2，敏感度、特異度分別為89.00%、80.70%，曲線下面積為0.930(95%CI：0.894～0.966，P<0.001)，約登指數(shù)為0.697，陽性預(yù)測值為82.20%，陰性預(yù)測值為88.00%，見圖1。

圖1 TAP診斷結(jié)直腸癌的ROC曲線

3 討論

全球范圍內(nèi)，結(jié)直腸癌已成為第三大高發(fā)惡性腫瘤，居癌癥相關(guān)死亡率第2位，且發(fā)達國家、城市地區(qū)高發(fā)，或與高脂肪、高蛋白、低纖維飲食習(xí)慣有關(guān)[9]。結(jié)直腸癌治療的關(guān)鍵在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷，并行手術(shù)根治。因此，操作簡單、經(jīng)濟快捷、可重復(fù)性好、侵襲性小的腫瘤篩查技術(shù)一直是臨床研究的熱點。TAP作為新型非特異性外周血腫瘤指標(biāo)，具有簡便快捷、敏感度高等優(yōu)點，已逐步應(yīng)用于臨床。有研究發(fā)現(xiàn)，TAP在乳腺癌[10]、肺癌[11]、胃癌[12]、膀胱癌[13]等多種腫瘤中高表達，在腫瘤早期篩查方面有較高的應(yīng)用價值。另有文獻報道，直腸癌[14]、胃癌[15]患者接受治療后TAP陽性率明顯降低，TAP可作為臨床療效的監(jiān)測指標(biāo)，這為本研究提供了理論基礎(chǔ)。

本研究結(jié)果顯示，試驗組結(jié)直腸癌患者TAP水平明顯高于對照組，試驗組TAP陽性率高達75.23%，而對照組無一例陽性；試驗組中46例TNM Ⅰ、Ⅱ期患者的TAP陽性率分別為73.33%、70.97%。本研究TAP陽性率高于文獻報道的胃癌[12](69.90%)，略低于乳腺癌[10](83.02%)、肺癌[11](83.87%)、膀胱癌[13](79.00%)。本研究進一步對56例行術(shù)后輔助化療的患者行外周血TAP檢測，結(jié)果顯示，患者術(shù)后TAP表達水平及陽性率均低于術(shù)前，提示TAP表達與腫瘤負荷量有關(guān)，其在腫瘤臨床療效評估方面可能亦具有潛在應(yīng)用價值。

通過分析結(jié)直腸癌不同臨床病理參數(shù)與TAP水平的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，TAP陽性率在不同年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否、腫瘤TNM分期及病理分級間無明顯差異；推斷可能原因，TNM分期為腫瘤分期的綜合判斷，本研究中TNM Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期TAP陽性率均高于70%且接近，未發(fā)生血運轉(zhuǎn)移患者外周循環(huán)TAP含量升高較Ⅳ期患者不明顯；而遠處轉(zhuǎn)移患者(亦即Ⅳ期患者)TAP陽性率明顯高于無遠處轉(zhuǎn)移者，或與遠處轉(zhuǎn)移患者外周血中TAP水平較高有關(guān)，進一步證實TAP水平與疾病進展有關(guān)。

本研究采用ROC曲線評估TAP對結(jié)直腸癌的診斷價值，結(jié)果顯示，外周血TAP檢測輔助診斷結(jié)直腸癌的ROC曲線下面積高達0.930(95%CI：0.894～0.966)，敏感度、特異度分別為89.00%、80.70%，提示TAP對結(jié)直腸癌的診斷效能較高，值得臨床推廣。

綜上所述，TAP在結(jié)直腸癌早期診斷及療效評估方面有一定應(yīng)用價值，但因本研究存在單中心研究、樣本量少等局限，TAP與腫瘤病理特征的相關(guān)性尚待進一步研究驗證。