腫瘤異常糖鏈蛋白在結(jié)直腸癌診療中的應(yīng)用價(jià)值

袁仁順， 施海華

結(jié)直腸癌是最常見(jiàn)的癌癥之一。據(jù)2020年全球癌癥統(tǒng)計(jì)報(bào)告顯示，近20年來(lái)，結(jié)直腸癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。結(jié)直腸癌發(fā)病多隱匿、初期癥狀不典型，目前其主要診斷方法為纖維結(jié)腸鏡[3-4]。但腸鏡檢查價(jià)格昂貴，且為侵襲性檢查，使其在結(jié)直腸癌早期篩查中的應(yīng)用受限，約20%結(jié)直腸癌患者確診時(shí)已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[5]。目前惡性腫瘤血清標(biāo)志物應(yīng)用于腫瘤臨床早期診斷成為研究熱點(diǎn)，結(jié)直腸癌經(jīng)典腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CA19-9)陽(yáng)性率僅約為45%、30%[6]，其敏感度和特異度不高。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體細(xì)胞發(fā)生惡性增殖，其細(xì)胞膜表面的聚糖結(jié)構(gòu)將改變，并分泌腫瘤異常糖鏈糖蛋白(tumor abnormal protein，TAP)，當(dāng)TAP在外周循環(huán)中達(dá)到一定濃度后，可通過(guò)外周血檢出[7]。本研究通過(guò)對(duì)結(jié)直腸癌患者與健康體檢者行外周血TAP檢測(cè)并分析TAP水平探討其在結(jié)直腸癌診療中的應(yīng)用價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2018年12月至2021年10月蘇州市立醫(yī)院東區(qū)胃腸外科收治的結(jié)直腸癌患者109例為試驗(yàn)組，其中男66例，女43例；年齡32～89歲，平均年齡(65.07±10.90)歲；術(shù)后病理分期采取2017年國(guó)際抗癌聯(lián)盟/美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)(UICC/AJCC)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)(第8版)[8]，其中Ⅰ期15例(13.76%)，Ⅱ期31例(28.44%)，Ⅲ期49例(44.95%)，Ⅳ期14例(12.84%)；組織學(xué)分級(jí)參照WHO消化系統(tǒng)腫瘤分類2019版[8]2級(jí)分法，其中低級(jí)別81例(74.31%)，高級(jí)別28例(25.69%)。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)手術(shù)切除(包括R0切除及股息切除)、術(shù)后病理證實(shí)，且術(shù)前未接受針對(duì)腫瘤的特殊治療(包括化療、放療、靶向治療等)。另?yè)裎以和诮】刁w檢者109例為對(duì)照組，其中男63例，女46例，年齡29～82歲，平均年齡(63.92±10.44)歲，均經(jīng)體檢及實(shí)驗(yàn)室檢查，排除惡性腫瘤，既往無(wú)惡性腫瘤、結(jié)直腸慢性炎癥性疾病、結(jié)直腸息肉等病史。兩組性別(χ2=0.171，P=0.679)和年齡(t=0.228，P=0.820)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究獲本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)。

1.2 外周血TAP水平檢測(cè) 對(duì)照組體檢時(shí)、試驗(yàn)組手術(shù)前，以及試驗(yàn)組中56例需行術(shù)后輔助化療者(參照CSCO指南2020版[8])于術(shù)后3周，分別采集空腹靜脈血5 ml，制成均勻血片，自然晾干后，按照TAP檢測(cè)試劑盒(浙江瑞生醫(yī)療儀器廠)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，顯微鏡下觀察并測(cè)量TAP與鈣-組蛋白凝聚而成的類晶體凝聚物的面積。凝聚物顆粒面積>121 μm2為T(mén)AP陽(yáng)性，凝聚物顆粒面積0～121 μm2為T(mén)AP陰性。

2 結(jié)果

2.1 試驗(yàn)組與對(duì)照組TAP水平比較 試驗(yàn)組TAP水平[(134.37±34.06)μm2]明顯高于對(duì)照組[(73.28±19.88)μm2]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=16.174，P<0.001)；且試驗(yàn)組TAP陽(yáng)性率75.23%(82/109)顯著高于對(duì)照組(0/109)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=131.441，P<0.001)。

2.2 試驗(yàn)組行術(shù)后輔助化療者TAP水平 56例患者術(shù)后TAP水平[115.76(96.95,126.89) μm2]明顯低于術(shù)前[134.43(117.04,146.83) μm2]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=4.406，P<0.001)；術(shù)后TAP陽(yáng)性率為32.14%(18/56)，低于術(shù)前69.64%(39/56)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.048，P<0.001)。

2.3 結(jié)直腸癌患者TAP水平與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者TAP陽(yáng)性率明顯高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；不同年齡、性別、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤TNM分期及腫瘤分化級(jí)別之間TAP陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，表1)。

表1 結(jié)直腸癌TAP表達(dá)與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 [例(%)]

2.4 ROC曲線分析TAP對(duì)結(jié)直腸癌的診斷價(jià)值 TAP表達(dá)診斷結(jié)直腸癌的臨界值為93.317 μm2，敏感度、特異度分別為89.00%、80.70%，曲線下面積為0.930(95%CI：0.894～0.966，P<0.001)，約登指數(shù)為0.697，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為82.20%，陰性預(yù)測(cè)值為88.00%，見(jiàn)圖1。

圖1 TAP診斷結(jié)直腸癌的ROC曲線

3 討論

全球范圍內(nèi)，結(jié)直腸癌已成為第三大高發(fā)惡性腫瘤，居癌癥相關(guān)死亡率第2位，且發(fā)達(dá)國(guó)家、城市地區(qū)高發(fā)，或與高脂肪、高蛋白、低纖維飲食習(xí)慣有關(guān)[9]。結(jié)直腸癌治療的關(guān)鍵在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷，并行手術(shù)根治。因此，操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)快捷、可重復(fù)性好、侵襲性小的腫瘤篩查技術(shù)一直是臨床研究的熱點(diǎn)。TAP作為新型非特異性外周血腫瘤指標(biāo)，具有簡(jiǎn)便快捷、敏感度高等優(yōu)點(diǎn)，已逐步應(yīng)用于臨床。有研究發(fā)現(xiàn)，TAP在乳腺癌[10]、肺癌[11]、胃癌[12]、膀胱癌[13]等多種腫瘤中高表達(dá)，在腫瘤早期篩查方面有較高的應(yīng)用價(jià)值。另有文獻(xiàn)報(bào)道，直腸癌[14]、胃癌[15]患者接受治療后TAP陽(yáng)性率明顯降低，TAP可作為臨床療效的監(jiān)測(cè)指標(biāo)，這為本研究提供了理論基礎(chǔ)。

本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組結(jié)直腸癌患者TAP水平明顯高于對(duì)照組，試驗(yàn)組TAP陽(yáng)性率高達(dá)75.23%，而對(duì)照組無(wú)一例陽(yáng)性；試驗(yàn)組中46例TNM Ⅰ、Ⅱ期患者的TAP陽(yáng)性率分別為73.33%、70.97%。本研究TAP陽(yáng)性率高于文獻(xiàn)報(bào)道的胃癌[12](69.90%)，略低于乳腺癌[10](83.02%)、肺癌[11](83.87%)、膀胱癌[13](79.00%)。本研究進(jìn)一步對(duì)56例行術(shù)后輔助化療的患者行外周血TAP檢測(cè)，結(jié)果顯示，患者術(shù)后TAP表達(dá)水平及陽(yáng)性率均低于術(shù)前，提示TAP表達(dá)與腫瘤負(fù)荷量有關(guān)，其在腫瘤臨床療效評(píng)估方面可能亦具有潛在應(yīng)用價(jià)值。

通過(guò)分析結(jié)直腸癌不同臨床病理參數(shù)與TAP水平的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，TAP陽(yáng)性率在不同年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否、腫瘤TNM分期及病理分級(jí)間無(wú)明顯差異；推斷可能原因，TNM分期為腫瘤分期的綜合判斷，本研究中TNM Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期TAP陽(yáng)性率均高于70%且接近，未發(fā)生血運(yùn)轉(zhuǎn)移患者外周循環(huán)TAP含量升高較Ⅳ期患者不明顯；而遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者(亦即Ⅳ期患者)TAP陽(yáng)性率明顯高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者，或與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者外周血中TAP水平較高有關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)TAP水平與疾病進(jìn)展有關(guān)。

本研究采用ROC曲線評(píng)估TAP對(duì)結(jié)直腸癌的診斷價(jià)值，結(jié)果顯示，外周血TAP檢測(cè)輔助診斷結(jié)直腸癌的ROC曲線下面積高達(dá)0.930(95%CI：0.894～0.966)，敏感度、特異度分別為89.00%、80.70%，提示TAP對(duì)結(jié)直腸癌的診斷效能較高，值得臨床推廣。

綜上所述，TAP在結(jié)直腸癌早期診斷及療效評(píng)估方面有一定應(yīng)用價(jià)值，但因本研究存在單中心研究、樣本量少等局限，TAP與腫瘤病理特征的相關(guān)性尚待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。