特香型白酒甲醇和丙酸乙酯檢測內(nèi)、外標(biāo)法比較研究

羅 莉，林 培，熊秋萍，昌子恒，王 鍇，陳民中

（四特酒有限責(zé)任公司，江西樟樹 331200）

一直以來甲醇都是特香型白酒的重要控制指標(biāo)，丙酸乙酯為特香型白酒的特征風(fēng)味物質(zhì)，兩種物質(zhì)的含量不僅影響著特香型白酒品質(zhì)等級差異，也影響風(fēng)味口感。目前國標(biāo)檢測這兩種物質(zhì)均使用內(nèi)標(biāo)法定量，但內(nèi)標(biāo)法過程繁瑣，內(nèi)標(biāo)物選擇困難，相較而言外標(biāo)法簡單、便捷、準(zhǔn)確高效。通過實驗研究表明，在確保儀器準(zhǔn)態(tài)和環(huán)境條件下，外標(biāo)法值得推廣應(yīng)用于日常大批量特香型白酒生產(chǎn)檢測過程，提高檢測效率。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

酒樣：特香型白酒樣品，編號為：酒樣1，酒樣2，酒樣3。

試劑及耗材：水，屈臣氏；乙醇，色譜純；甲醇，DR 純度為99.7%；叔戊醇，sigma 純度為99.9%；丙酸乙酯，sigma 純度為99.5%；乙酸戊酯，sigma 純度為99.7%。

儀器設(shè)備：Agilent 氣相色譜儀7820A 和配套工作軟件，氫離子FID 檢測器，自動進(jìn)樣器，安捷倫色譜柱DB-624UI（30 m*0.530 mm*3.00 μm），10 mL比色管，10 mL胖肚移液管，0～100 μL和0～1000 μL移液槍，歐姆尼2 mL 進(jìn)樣小瓶，十萬分之一天平，10 mL、25 mL、50 mL、250 mL容量瓶。

1.2 實驗方法

1.2.1 儀器測定參數(shù)設(shè)置(見表1)

表1 儀器測定參數(shù)

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

乙醇溶液（60 %，v/v）：量取150 mL 無水乙醇（色譜純），用水（屈臣氏）定容于250 mL 容量瓶，混勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。

甲醇儲備液：用十萬分之一天平準(zhǔn)確稱取0.21040 g 甲醇標(biāo)準(zhǔn)品至25 mL 容量瓶中，60%無水乙醇定容混勻，低溫冰箱保存。

丙酸乙酯儲備液：用十萬分之一天平準(zhǔn)確稱取0.20400 g 甲醇標(biāo)準(zhǔn)品至10 mL 容量瓶中，60%無水乙醇定容混勻，低溫冰箱保存。

2%叔戊醇和乙酸戊酯內(nèi)標(biāo)溶液：用十萬分之一天平準(zhǔn)確稱取0.81526 g 叔戊醇和0.85400 g 乙酸戊酯標(biāo)準(zhǔn)品至50 mL 容量瓶中，60%無水乙醇定容混勻，低溫冰箱保存。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

甲醇和丙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線配制：取甲醇儲備液200 μL 加入丙酸乙酯儲備液45 μL 和755 μL的60%無水乙醇溶液得中間液，取200 μL中間液和800 μL 60%無水乙醇混勻的標(biāo)曲5，逐級取500 μL稀釋得甲醇濃度為0.01049 g/L、0.02098 g/L、0.04196 g/L、0.08391 g/L、0.16782 g/L，丙酸乙酯濃度為0.00571 g/L、0.01142 g/L、0.02284 g/L、0.04567 g/L、0.09134 g/L系列標(biāo)準(zhǔn)曲線，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2.4 試樣制備比較

內(nèi)標(biāo)法：用胖肚移液管準(zhǔn)確移取10 mL 酒樣于10 mL 比色管中，用移液槍準(zhǔn)確加入100 μL 2%內(nèi)標(biāo)溶液于比色管內(nèi)，混合均勻后倒入進(jìn)樣小瓶。

外標(biāo)法：直接將酒樣倒入進(jìn)樣小瓶中，簡單易操作。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與峰面積具有良好的線性關(guān)系

線性方程和相關(guān)系數(shù)見圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)溶液甲醇、丙酸乙酯線性標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 內(nèi)標(biāo)法結(jié)果數(shù)據(jù)分析

用內(nèi)標(biāo)法分別對特香型白酒3 個酒樣進(jìn)行測定，分析結(jié)果見表2，酒樣中叔戊醇、乙酸戊酯和甲醇、丙酸乙酯的圖譜見圖2。

圖2 酒樣中叔戊醇、乙酸戊酯和甲醇、丙酸乙酯色譜圖

表2 內(nèi)標(biāo)法檢測定量3個酒樣結(jié)果

2.3 外標(biāo)法結(jié)果數(shù)據(jù)分析

用外標(biāo)法分別對特香型白酒3 個酒樣進(jìn)行測定，分析結(jié)果見表3，酒樣中甲醇、丙酸乙酯的圖譜見圖3。

圖3 酒樣中甲醇、丙酸乙酯色譜圖

表3 外標(biāo)法檢測定量3個酒樣結(jié)果

2.4 內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法結(jié)果比較

通過實驗研究，從內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的數(shù)據(jù)結(jié)果分析來看，兩種方法都能準(zhǔn)確定量特香型白酒（四特酒）中甲醇和丙酸乙酯。內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法分析結(jié)果相對偏差均較小，結(jié)果見表4。均能控制在國標(biāo)要求規(guī)定的相對誤差的5%以內(nèi)，在實驗環(huán)境溫濕度和儀器狀態(tài)良好時，采用外標(biāo)法分析特香型白酒中的甲醇和丙酸乙酯含量也能取得較好的分析結(jié)果。

表4 內(nèi)、外標(biāo)方法精密度比較

2.5 討論

內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法都只是定量的一種方法而已，好與不好不能一概而論，做不同的分析，面對不同的需求，需要結(jié)合實際情況選擇合適有效的定量方式進(jìn)行操作和定量分析。內(nèi)、外標(biāo)定量法各具優(yōu)點和缺點，內(nèi)標(biāo)法優(yōu)點：測定結(jié)果較為準(zhǔn)確，在一定程度上消除了操作條件的變化帶來的誤差；缺點：操作較麻煩，內(nèi)標(biāo)物尋找困難。外標(biāo)法優(yōu)點：操作簡單方便，應(yīng)對大批量樣品時可實現(xiàn)快速、高效；缺點：嚴(yán)格要求與標(biāo)準(zhǔn)物操作條件一致，否則誤差較大。

3 結(jié)論

綜上所述，可以使用外標(biāo)法代替內(nèi)標(biāo)法對特香型白酒中甲醇和丙酸乙酯定量分析，減少了實驗時所需標(biāo)準(zhǔn)品，節(jié)約標(biāo)準(zhǔn)品消耗成本，同時還簡化了操作步驟，降低了實驗操作的難度，在面對大批量樣品檢測分析時可提高檢測分析效率。而且數(shù)據(jù)結(jié)果的相對誤差較內(nèi)標(biāo)法數(shù)據(jù)結(jié)果相對誤差無顯著差異，推廣到日常檢測分析中，可為日常檢測工作提供簡便方法，提高工作效率。