• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    三種傳統(tǒng)發(fā)酵食品中酵母菌的分離鑒定與特性分析

    2022-04-13 06:46:42謝引榮范文廣曹瑩瑩任海偉
    中國(guó)釀造 2022年3期
    關(guān)鍵詞:紅茶菌馬克斯假絲

    田 輝,謝引榮,王 琰,馬 卓,范文廣,趙 萍,曹瑩瑩,任海偉

    (蘭州理工大學(xué) 生命科學(xué)與工程學(xué)院,甘肅 蘭州 730050)

    發(fā)酵食品可提高食品的營(yíng)養(yǎng)和安全性,改善食品感官特性[1]。而酵母菌是許多發(fā)酵食品中必不可少的功能性微生物之一,在工業(yè)食品生產(chǎn)和傳統(tǒng)發(fā)酵食品中都發(fā)揮著重要作用[2]。酵母菌作為單細(xì)胞真核微生物,長(zhǎng)期以來(lái)不僅被用于面包和酒精類食品生產(chǎn)中,在其他發(fā)酵食品生產(chǎn)中也具有主導(dǎo)作用,如傳統(tǒng)發(fā)酵類的植物、乳制品、魚(yú)類和肉類[3]。酵母菌主要在食品發(fā)酵中起到產(chǎn)生酒精、改善質(zhì)地、酸化保藏、產(chǎn)生抑菌性物質(zhì)、提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、去除抗?fàn)I養(yǎng)因子以及產(chǎn)生生物活性肽和維生素等作用[4]。

    自然界中發(fā)現(xiàn)的酵母菌已有1 500多種[5]。傳統(tǒng)發(fā)酵食品中酵母種類也很多,且不同食品中的酵母菌種類也有差異,如傳統(tǒng)發(fā)酵乳中的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、馬克斯克魯維酵母(Kluyveromyces marxianus)、庫(kù)德畢赤酵母菌(Pichia kudriavzevii)及其他畢赤酵母屬(Pichiaspp.)菌株;發(fā)酵肉制品中的漢遜德巴利酵母(Debaryomyce shansenii)、誕沫假絲酵母(Candida zeylanoides)及解脂耶羅威亞酵母(Yarrowia lipolytica);發(fā)酵橄欖、可可和咖啡中的釀酒酵母、仙人掌有孢漢遜酵母(Hanseniaspora opuntiae)、畢赤酵母屬、威克漢姆酵母屬(Wickerhamomycessp.)及假絲酵母屬(Candidaspp.)[3]。除酵母菌的發(fā)酵特性及有益作用外,部分酵母菌通過(guò)產(chǎn)生水解酶類、形成氣體、分解有機(jī)酸、產(chǎn)生色素或異味等,導(dǎo)致食品(以高酸性或高糖度食品為主)腐敗[6]。

    我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品種類豐富、原料多樣、所含菌種資源豐富。微生物的多樣性研究,有助于闡明傳統(tǒng)食品的發(fā)酵機(jī)制及開(kāi)發(fā)自主產(chǎn)權(quán)發(fā)酵劑,或有效控制腐敗微生物生長(zhǎng),保障食品安全。紅茶菌、藏靈菇及酸菜作為我國(guó)傳統(tǒng)自制發(fā)酵食品,其營(yíng)養(yǎng)特性及所含有的微生物種類逐漸受到人們重視,不同地區(qū)和培養(yǎng)環(huán)境下,其中的酵母菌種類和特性具有一定差異性,有待深入研究及利用[7-9]。本研究從紅茶菌、藏靈菇及甘肅地區(qū)酸菜中分離和鑒定酵母菌,并對(duì)菌株發(fā)酵性能進(jìn)行分析,以期為酵母菌資源利用提供數(shù)據(jù)支持。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    1.1.1 樣品

    紅茶菌:采集自甘肅省蘭州市和陜西省寶雞市,各1份;藏靈菇:采集自山東省德州市和安徽省蕪湖市,各1份;酸菜:采集自甘肅省永登市2個(gè)不同農(nóng)戶,各1份。

    1.1.2 培養(yǎng)基

    紅茶菌活化培養(yǎng)基:綠茶2 g,蔗糖15~20 g,蒸餾水500 mL,煮沸15~20 min,于超凈臺(tái)中用4層無(wú)菌紗布過(guò)濾,密封后備用。

    馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)改良培養(yǎng)基:200 g去皮土豆(切塊)煮沸20 min后,過(guò)濾冷卻,添加瓊脂粉16 g,蛋白胨10 g,葡萄糖20 g,氯霉素0.1 g,蒸餾水定容至1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    PDA培養(yǎng)基:200 g去皮馬鈴薯(切塊)煮沸20 min,冷卻后用四層紗布過(guò)濾,加葡萄糖20 g,固體培養(yǎng)基加瓊脂粉16 g,蒸餾水定容至1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    1.1.3 試劑

    亞甲基藍(lán)、重鉻酸鉀、無(wú)水乙醇、蛋白胨、氯霉素、葡萄糖、蔗糖、乳糖及瓊脂粉(均為分析純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;酵母基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)提取試劑盒:天根生化科技有限公司;ExTaqDNA聚合酶(5 U/mL):寶生物工程有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    LDZX-50KBS立式高壓蒸汽滅菌鍋:上海申安醫(yī)療器械廠;UV2600A型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì):尤尼科(上海)儀器有限公司;TGL-16G離心機(jī):上海安亭科學(xué)儀器廠;SK200生物顯微鏡:麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司;SHZ-82恒溫振蕩器:常州國(guó)華電器有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 酵母菌的分離純化[10]

    無(wú)菌條件下,吸取不同樣品(或發(fā)酵液)25 mL至225 mL生理鹽水(8.5 g/L NaCl)中,充分混勻,并以10倍梯度稀釋法稀釋至10-8,再取100 μL不同梯度的稀釋液涂布于PDA改良培養(yǎng)基(含氯霉素)上,倒置于30 ℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)48 h后觀察菌落形態(tài)特征。使用接種環(huán)挑取不同形態(tài)的菌落,分別劃線于PDA固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)48 h后,根據(jù)菌落形態(tài)進(jìn)行第二次劃線和培養(yǎng),得到酵母菌單一純化菌落。

    1.3.2 菌種的保藏與活化[11]

    挑取單一菌落至PDA 液體培養(yǎng)基中,30 ℃振蕩(200 r/min)培養(yǎng)24 h,連續(xù)培養(yǎng)兩代,按酵母菌液∶甘油溶液=3∶2的比例添加滅菌的體積分?jǐn)?shù)50%的甘油溶液,使甘油最終體積分?jǐn)?shù)為20%,混勻后-20 ℃冷凍保藏。

    保藏菌種使用前需進(jìn)行活化,即將菌種接種于PDA液體培養(yǎng)基中,30 ℃振蕩(200 r/min)培養(yǎng)24 h,連續(xù)活化兩代。

    1.3.3 酵母菌的鑒定

    (1)菌株形態(tài)學(xué)鑒定

    觀察純化單一菌落的顏色、形狀、邊緣、表面光滑度及濕潤(rùn)度等特征。

    挑取單一菌落,進(jìn)行美藍(lán)染色,并在光學(xué)顯微鏡(40×)物鏡下觀察菌體形態(tài)。

    (2)糖發(fā)酵試驗(yàn)

    分別將PDA液體培養(yǎng)基中的碳源設(shè)定為D-葡萄糖、蔗糖及乳糖。采用杜氏管法,將活化三代后菌株以2%的接種量接種至裝有倒置杜氏管的10 mL PDA培養(yǎng)基中,30 ℃培養(yǎng)2~3 d,觀察和記錄菌株對(duì)不同碳源的發(fā)酵情況。對(duì)于不發(fā)酵或發(fā)酵力較弱的菌株,延長(zhǎng)觀察至10 d[12]。

    (3)rDNA基因間隔序列(ITS)測(cè)定

    離心收集菌體,提取基因組,對(duì)rDNA-ITS序列進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序。正反向引物分別為ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCCG-3')和ITS4(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')。采用50 μL反應(yīng)體系為:2.5 U ExTaq酶,5 μL 10×ExTaqBuffer(Mg2+),50 μmol 脫氧核糖核苷三磷酸(deoxynucleotide triphosphate,dNTP)Mixture,2 μg模板,5 μmol正反向引物,無(wú)菌去離子水補(bǔ)齊至50 μL。反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性5 min,35個(gè)循環(huán)包括:94 ℃變性1 min,60 ℃退火1 min,72 ℃延伸1 000 bp/min。最后72 ℃延伸10 min。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后,送測(cè)序公司進(jìn)行序列測(cè)定。所得DNA序列在美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)網(wǎng)站上通過(guò)基于局部比對(duì)算法的搜索工具(basic local alignment search tool,BLAST)程序(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)進(jìn)行比對(duì),初步確定菌株的種屬[13]。并將rDNA-ITS序列提交至GenBank獲取序列注冊(cè)號(hào)。

    使用MEGA 6軟件構(gòu)建基因發(fā)育樹(shù),將目標(biāo)序列與多個(gè)模式菌株的rDNA-ITS,通過(guò)鄰接法(neighborhood-joining method,NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),自展值(bootstrap value)分析設(shè)置重復(fù)1 000次。

    1.3.4 酵母菌的發(fā)酵與生長(zhǎng)特性

    (1)產(chǎn)乙醇試驗(yàn)

    將活化菌株以2%(V/V)的接種量接種于PDA液體培養(yǎng)基中,置于30 ℃發(fā)酵3 d,采用重鉻酸鉀比色法測(cè)定產(chǎn)乙醇能力[13]。以乙醇含量(x)為橫坐標(biāo),吸光度值(y)為縱坐標(biāo)繪制乙醇含量-吸光度值的標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性方程為y=23.886x+0.001 6,相關(guān)性系數(shù)R2=0.996 3。

    (2)生長(zhǎng)曲線測(cè)定

    將酵母菌按5%(V/V)的接種量接入PDA液體培養(yǎng)基中,在30 ℃條件下培養(yǎng),以未接種PDA培養(yǎng)基為對(duì)照,每組設(shè)置兩個(gè)平行,每隔3 h測(cè)定培養(yǎng)液在波長(zhǎng)600 nm處的OD600nm值,連續(xù)測(cè)48 h,繪制酵母菌的生長(zhǎng)曲線。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菌株的分離純化

    經(jīng)過(guò)3次平板劃線培養(yǎng),分別從藏靈菇、紅茶菌及酸菜中分離到14株酵母菌疑似菌株(見(jiàn)表1)。

    表1 不同食品來(lái)源中的酵母菌疑似菌株Table 1 Suspected yeasts from different food sources

    2.2 菌株種屬鑒定

    2.2.1 菌株形態(tài)學(xué)特征

    觀察14株疑似酵母菌的菌落特征與細(xì)胞形態(tài),結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知,菌落形態(tài)基本上都是圓形,顏色分別呈白色、乳白色或淡黃色,大多菌落表面光滑。細(xì)胞形態(tài)有圓形、橢圓形、卵圓形或臘腸狀等。根據(jù)不同食品來(lái)源,其中紅茶菌中的酵母菌菌落較大,而藏靈菇和酸菜中菌落較小。以上特征說(shuō)明不同來(lái)源之間酵母菌具有形態(tài)學(xué)多樣性。

    表2 不同食品來(lái)源疑似酵母菌的菌落特征與菌體細(xì)胞形態(tài)Table 2 Colony characteristics and cell morphology of suspected yeasts from different food sources

    2.2.2 糖發(fā)酵試驗(yàn)

    由表3可知,大部分疑似菌株(X1-1、X1-2、X3-3、Y4-2、R5-1、R5-2、R5-3、R5-4、M2-1、M2-2)可代謝葡萄糖,而對(duì)蔗糖和乳糖發(fā)酵性能較弱或不能發(fā)酵,如發(fā)酵蔗糖時(shí),菌株X1-1和X3-3可較快產(chǎn)氣,而X1-2則需7 d后才產(chǎn)生氣泡;發(fā)酵乳糖時(shí),僅X1-1和X3-3表現(xiàn)出可代謝性能。經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)特征觀察及糖發(fā)酵試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)菌株間存在一定差異,但需配合rDNA-ITS序列測(cè)定對(duì)其種屬進(jìn)行更為精確的鑒定。

    表3 不同食品來(lái)源疑似酵母菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Sugar fermentation test of suspected yeasts from different food sources

    2.2.3 rDNA-ITS序列分析

    rDNA-ITS序列經(jīng)PCR擴(kuò)增及測(cè)序后,通過(guò)美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)中BLAST程序進(jìn)行同源性比對(duì)(見(jiàn)表4)。經(jīng)序列測(cè)定和分析,確定了14株疑似酵母菌中有9株為酵母菌,而其他5株的rDNA-ITS序列未能通過(guò)PCR擴(kuò)增得到相應(yīng)DNA產(chǎn)物,推測(cè)其為單細(xì)胞原核微生物。將9株菌的rDNAITS提交至GenBank后,獲得序列注冊(cè)號(hào)分別為:MZ506852(M2-1)、MZ506853(M2-2)、MZ506854(R5-1)、MZ506855(R5-2)、MZ506856(R5-3)、MZ506857(R5-4)、MZ506858(X1-1)、MZ506859(X1-2)及MZ506860(X3-3)。

    使用MEGA6軟件構(gòu)建了目標(biāo)菌株與參考菌株rDNAITS序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)見(jiàn)圖1。

    由表4、圖1可知,9株酵母菌歸為4個(gè)不同的屬。其中,藏靈菇發(fā)酵乳中分離到的3株菌(X1-1、X1-2、X3-3)鑒定為馬克斯克魯維酵母(Kluyveromy cesmarxianus);紅茶菌發(fā)酵液中獲得的3株菌(R5-2、R5-3、R5-4)鑒定為異常假絲酵母(Candida incommunis)及1株菌鑒定為Starmerella davenportii;酸菜中分離到的2株菌(M2-1、M2-2)鑒定為瑟氏哈薩克斯坦酵母(Kazachstania servazzii)。不同種類食品中菌株屬于不同種類酵母菌。

    圖1 基于rDNA-ITS序列不同食品來(lái)源篩選酵母菌的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.1 Phylogenetic tree of screened yeasts from different food sources based on rDNA-ITS sequences

    表4 基于rDNA-ITS序列菌株對(duì)比結(jié)果Table 4 Comparison of strains based on rDNA-ITS sequences

    2.3 酵母菌發(fā)酵特性分析

    2.3.1 產(chǎn)乙醇能力

    酵母菌屬于兼性厭氧菌,無(wú)氧環(huán)境下會(huì)將葡萄糖分解產(chǎn)生CO2和乙醇。乙醇發(fā)酵是評(píng)價(jià)酵母菌發(fā)酵性能的重要指標(biāo)之一。

    由圖2可知,產(chǎn)乙醇量最低的菌株為馬克斯克魯維酵母X3-3(29.6%),產(chǎn)乙醇量較高的為異常假絲酵母R5-2(75.8%)和瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-2(71.0%)。相對(duì)而言,紅茶菌和酸菜中的酵母菌株產(chǎn)乙醇能力強(qiáng)于藏靈菇中酵母菌,即馬克斯克魯維酵母的產(chǎn)乙醇力較弱,而Starmerella davenportii、異常假絲酵母及瑟氏哈薩克斯坦酵母的產(chǎn)乙醇力較強(qiáng)。

    圖2 不同酵母菌產(chǎn)乙醇能力比較Fig.2 Comparison of ethanol production capacity of different strains

    2.3.2 生長(zhǎng)特性

    選取每個(gè)種屬中乙醇產(chǎn)量最高的菌株,進(jìn)行0~51 h生長(zhǎng)曲線的測(cè)定(見(jiàn)圖3)。由圖3可知,4種酵母菌中馬克斯克魯維酵母生長(zhǎng)能力最佳,菌株X1-2在約6 h時(shí)即進(jìn)入對(duì)數(shù)期,且在約30 h時(shí)達(dá)到最大菌數(shù)(OD600nm值=6.152)。

    圖3 四株酵母菌的生長(zhǎng)曲線Fig.3 Growth curves of 4 yeast strains

    而其他3種酵母在PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較緩慢,其中瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-2在約9 h時(shí)進(jìn)入對(duì)數(shù)期,約15 h進(jìn)入穩(wěn)定期,而此階段OD600nm值<0.6。異常假絲酵母R5-2在0~39 h期間的菌體增殖較為平緩,但在39~51 h期間增殖較為迅速,并在51 h達(dá)到最大吸光度值(OD600nm值=1.313)。Starmerella davenportiiR5-1在0~51 h內(nèi)增殖最為緩慢,整個(gè)階段,OD600nm值<0.2,可能是PDA培養(yǎng)基中缺少該菌株所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)導(dǎo)致的。

    3 討論

    3.1 酵母菌的分類學(xué)研究

    馬克斯克魯維酵母最初曾被歸屬為酵母屬,后來(lái)劃歸至克魯維酵母屬[15]。馬克斯克魯維酵母分別被美國(guó)和歐洲認(rèn)定為滿足“公認(rèn)安全”(generally regarded as safe,GRAS)和“安全資格認(rèn)定”(qualified presumption of safety,QPS)的安全菌株標(biāo)準(zhǔn)[16]。由圖1可知,馬克斯克魯維酵母與瑟氏哈薩克斯坦酵母在一個(gè)進(jìn)化分支上。瑟氏哈薩克斯坦酵母以前被稱為賽瓦酵母,屬于酵母屬[17]。因此,馬克斯克魯維酵母與瑟氏哈薩克斯坦酵母進(jìn)化關(guān)系較為接近,與本實(shí)驗(yàn)中結(jié)果是一致的。Starmerella davenportii與異常假絲酵母在另一個(gè)進(jìn)化分支上。Starmerella davenportii曾被稱為Candida davenportii,后來(lái)被重新命名為Starmerella davenportii,可見(jiàn)二者具有較為接近的進(jìn)化關(guān)系[18]。

    根據(jù)《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》,馬克斯克魯維酵母對(duì)葡萄糖、蔗糖和乳糖的發(fā)酵性能為可變性;異常假絲酵母不可發(fā)酵乳糖,對(duì)葡萄糖的發(fā)酵至7 d后才出現(xiàn)氣泡,對(duì)蔗糖發(fā)酵力具有可變性[19]。而本實(shí)驗(yàn)中馬克斯克魯維酵母X1-1和X3-3對(duì)3種糖都具有發(fā)酵能力;異常假絲酵母R5-2、R5-3及R5-4對(duì)葡萄糖的發(fā)酵至7 d后觀察到氣泡,對(duì)蔗糖和乳糖都不能發(fā)酵。在《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》中,賽瓦酵母(瑟氏哈薩克斯坦酵母)可發(fā)酵葡萄糖,不可發(fā)酵蔗糖和乳糖[19]。哈薩克斯坦酵母屬由于缺乏β-半乳糖苷酶,因此不能利用乳糖[20]。本研究中,瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-1與M2-2可發(fā)酵葡萄糖,對(duì)另兩種糖都未觀察到發(fā)酵能力。因此,馬克斯克魯維酵母、異常假絲酵母及瑟氏哈薩克斯坦酵母的糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果與《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》基本一致。

    Starmerella davenportii在《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》中未被收錄。但文獻(xiàn)報(bào)道中的益生型酵母Starmerella davenportiiDo18可發(fā)酵D-葡萄糖、棉子糖及果糖,不發(fā)酵乳糖[18]。本研究中Starmerella davenportiiR5-1對(duì)D-葡萄糖的發(fā)酵至7 d后產(chǎn)氣,而對(duì)蔗糖和乳糖則不能發(fā)酵,因此試驗(yàn)結(jié)果與菌株Do18基本一致。

    3.2 傳統(tǒng)發(fā)酵食品中的酵母菌

    藏靈菇即西藏開(kāi)菲爾粒,是由乳酸菌、醋酸菌和酵母菌等微生物組成的共生體[21]。盧曼等[22]從藏靈菇中分離出釀酒酵母屬、克魯維酵母屬及亞羅酵母屬中的16株菌,其中8株確定為馬克斯克魯維酵母菌。馬克斯克魯維酵母菌作為一種食品級(jí)酵母,具有多種益生特性,如可代謝乳糖和菊粉、較高耐熱性、可產(chǎn)生溶解酶類、較高生長(zhǎng)速率及產(chǎn)生乙醇等,因而非常適合工業(yè)應(yīng)用[15]。

    紅茶菌即康普茶,是茶糖水經(jīng)酵母菌、醋酸菌及乳酸菌等微生物發(fā)酵而成的一種功能性飲料[23]。紅茶菌中主要有假絲酵母屬、酒香酵母屬、酵母屬、裂殖酵母屬、類酵母屬、接合酵母屬、畢赤酵母屬、德克酵母屬及德巴利酵母屬等[23-24]。近期報(bào)道的益生型酵母Starmerella davenportiiDo18也分離自紅茶菌[18]。

    酸菜和泡菜是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜類食品,含有多種酵母菌和乳酸菌等微生物。烏日娜等[25]從延邊泡菜中分離出4株耐鹽較強(qiáng)的賽瓦酵母。瑟氏哈薩克斯坦酵母(賽瓦酵母)在一些發(fā)酵食品中可以起到改善風(fēng)味的作用[26]。但有研究認(rèn)為,瑟氏哈薩克斯坦酵母是韓國(guó)泡菜中形成不良白色菌膜的主要酵母之一,會(huì)導(dǎo)致泡菜產(chǎn)品脹包、形成不良?xì)馕都耙鹋莶速|(zhì)地軟化[27]。

    馬克斯克魯維酵母相較于其他酵母菌,具有更快的生長(zhǎng)速率,這與文獻(xiàn)報(bào)道是一致的[15]。在營(yíng)養(yǎng)豐富培養(yǎng)基中,馬克斯克魯維酵母的生長(zhǎng)速率是釀酒酵母的兩倍[28]。馬克斯克魯維酵母同釀酒酵母一樣,屬于兼性厭氧菌,可通過(guò)將糖發(fā)酵成乙醇產(chǎn)生能量,也可通過(guò)氧化磷酸化及三羧酸(tricarboxylic acid,TCA)循環(huán)產(chǎn)生更多能量[15]。而后者有利于菌體生物量的增加。本研究中馬克斯克魯維酵母產(chǎn)乙醇力較弱,而生長(zhǎng)性能優(yōu)異,因此菌株X1-1、X1-2及X3-3更偏向于將更多碳源通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生能量,從而提高了菌體繁殖速率。

    4 結(jié)論

    從3種傳統(tǒng)發(fā)酵食品中分離到4個(gè)不同種屬中的9株酵母菌,包括藏靈菇中的3株馬克斯克魯維酵母(Kluyveromy cesmarxianus)、紅茶菌中的1株Staemerella dovenpoetii酵母和3株異常假絲酵母(Candida incommunis)及酸菜中的2株瑟氏哈薩克斯坦酵母(Kazachstania servazzii)。不同食品來(lái)源的酵母菌種屬及發(fā)酵性能各不相同,且菌株之間發(fā)酵性能具有顯著差異性。3株馬克斯克魯維酵母產(chǎn)乙醇力較弱,但菌株X1-2生長(zhǎng)速率快且活菌數(shù)高;異常假絲酵母R5-2和瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-2產(chǎn)乙醇能力較強(qiáng)。

    猜你喜歡
    紅茶菌馬克斯假絲
    米卡芬凈對(duì)光滑假絲酵母菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)活性的影響
    萆薢滲濕湯治療濕熱下注型外陰陰道假絲酵母菌病的臨床觀察
    紅茶菌的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    紅茶菌
    小老鼠馬克斯在城里
    益生菌的另一個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域:紅茶菌飲料
    紅茶菌和中草藥紅茶菌體外抑制沙門氏菌的比較研究
    中西醫(yī)結(jié)合治療復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病的臨床觀察
    白假絲酵母菌耐吡咯類藥物的ERG11基因分析
    馬克斯的家
    www.av在线官网国产| 男男h啪啪无遮挡| 日本vs欧美在线观看视频 | 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产又色又爽无遮挡免| a级一级毛片免费在线观看| h视频一区二区三区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 中文字幕制服av| 热re99久久精品国产66热6| 简卡轻食公司| 男人爽女人下面视频在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 国产淫语在线视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产乱人偷精品视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 日日啪夜夜爽| 久久6这里有精品| 国产精品三级大全| 国产精品爽爽va在线观看网站| 激情 狠狠 欧美| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲精品国产成人久久av| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 激情 狠狠 欧美| 高清不卡的av网站| 亚洲高清免费不卡视频| 国产av国产精品国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产在视频线精品| av不卡在线播放| 久久国产亚洲av麻豆专区| 91久久精品国产一区二区成人| 午夜福利视频精品| 热99国产精品久久久久久7| 国产美女午夜福利| 国内精品宾馆在线| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲人与动物交配视频| 一级av片app| 国产久久久一区二区三区| av线在线观看网站| 国产色爽女视频免费观看| 男女无遮挡免费网站观看| 国产午夜精品一二区理论片| 免费看光身美女| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲电影在线观看av| 日韩欧美 国产精品| 只有这里有精品99| 久久久久视频综合| 国产视频首页在线观看| 亚洲,一卡二卡三卡| 一本久久精品| 亚洲精品日本国产第一区| 人妻少妇偷人精品九色| 久久人人爽人人片av| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲三级黄色毛片| kizo精华| 国产成人精品福利久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久人妻熟女aⅴ| 男人舔奶头视频| 亚洲精品,欧美精品| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产男女内射视频| av一本久久久久| 一级毛片久久久久久久久女| 好男人视频免费观看在线| 2021少妇久久久久久久久久久| 在线 av 中文字幕| 免费看日本二区| 在线观看人妻少妇| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 人人妻人人看人人澡| 日本黄色日本黄色录像| 国产av码专区亚洲av| 免费观看av网站的网址| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲国产欧美在线一区| 久久久久人妻精品一区果冻| 美女福利国产在线 | 成人美女网站在线观看视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 伦理电影大哥的女人| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲电影在线观看av| 精品人妻一区二区三区麻豆| 日韩亚洲欧美综合| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产成人a∨麻豆精品| 下体分泌物呈黄色| 特大巨黑吊av在线直播| 中文字幕久久专区| 内射极品少妇av片p| 高清黄色对白视频在线免费看 | 日韩精品有码人妻一区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 精品人妻偷拍中文字幕| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 日韩欧美 国产精品| 黄片wwwwww| 国产精品人妻久久久影院| 天堂8中文在线网| 亚洲四区av| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久久a久久爽久久v久久| 尾随美女入室| 日本黄色日本黄色录像| 三级国产精品欧美在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 有码 亚洲区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 免费看日本二区| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 午夜免费男女啪啪视频观看| 女人久久www免费人成看片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 黄片wwwwww| 欧美国产精品一级二级三级 | 国产精品久久久久久av不卡| 久久久色成人| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 99热这里只有是精品50| 国产一区二区三区综合在线观看 | 最黄视频免费看| 国产精品免费大片| 91久久精品国产一区二区成人| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产乱人偷精品视频| 久久久精品免费免费高清| 国产在线免费精品| 日日啪夜夜撸| 我的女老师完整版在线观看| 色视频在线一区二区三区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 中文字幕制服av| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 插逼视频在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片 | 亚洲精品一二三| av.在线天堂| 国产一区二区在线观看日韩| 免费av中文字幕在线| 一本久久精品| 一级av片app| kizo精华| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 五月伊人婷婷丁香| 国产精品三级大全| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲国产精品成人久久小说| 高清毛片免费看| 欧美+日韩+精品| 国产爱豆传媒在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 一级二级三级毛片免费看| av女优亚洲男人天堂| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99re6热这里在线精品视频| 1000部很黄的大片| 成人国产av品久久久| 大香蕉久久网| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久久精品94久久精品| 亚洲va在线va天堂va国产| 超碰97精品在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 国产精品一区二区三区四区免费观看| av.在线天堂| 国产精品一及| 91精品国产国语对白视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 成人美女网站在线观看视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 少妇人妻一区二区三区视频| 在线观看三级黄色| 丰满少妇做爰视频| 久热久热在线精品观看| 精品一品国产午夜福利视频| 免费观看av网站的网址| 少妇人妻久久综合中文| 高清不卡的av网站| 免费看日本二区| 在线播放无遮挡| 国产乱人视频| 夫妻午夜视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久久久久久国产电影| 日本黄色日本黄色录像| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久人人爽人人爽人人片va| 春色校园在线视频观看| 丝瓜视频免费看黄片| 九草在线视频观看| 黄片无遮挡物在线观看| 久久久精品94久久精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 美女中出高潮动态图| 日本-黄色视频高清免费观看| 我的女老师完整版在线观看| 欧美成人a在线观看| 美女高潮的动态| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产爱豆传媒在线观看| 午夜激情久久久久久久| 国产亚洲精品久久久com| 精品人妻一区二区三区麻豆| 黑人高潮一二区| 超碰av人人做人人爽久久| 久久人人爽人人片av| 中文资源天堂在线| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品国产色婷婷电影| 一级黄片播放器| 亚洲,欧美,日韩| 日本色播在线视频| 国产av国产精品国产| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产在线一区二区三区精| 久久久久久久久久成人| 91aial.com中文字幕在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一区二区av电影网| 一区二区三区四区激情视频| 美女高潮的动态| 国产欧美亚洲国产| 国产 一区精品| 色视频在线一区二区三区| 妹子高潮喷水视频| 亚洲欧美日韩东京热| 免费观看a级毛片全部| 日本av手机在线免费观看| 亚洲成人一二三区av| 国产成人freesex在线| 国产精品福利在线免费观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| h视频一区二区三区| 男女啪啪激烈高潮av片| 男女边吃奶边做爰视频| 在线观看一区二区三区激情| 伦理电影免费视频| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 在线天堂最新版资源| 国产男女内射视频| 午夜精品国产一区二区电影| 91久久精品电影网| 啦啦啦视频在线资源免费观看| a级毛色黄片| 午夜激情久久久久久久| 少妇丰满av| 国产精品一二三区在线看| 成年免费大片在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 日韩三级伦理在线观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲av中文av极速乱| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 久久99热这里只频精品6学生| av国产免费在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| 久久韩国三级中文字幕| 简卡轻食公司| 伊人久久国产一区二区| 免费观看的影片在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 男人舔奶头视频| 97热精品久久久久久| 亚洲国产精品999| 美女国产视频在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲熟女精品中文字幕| 丝袜脚勾引网站| av福利片在线观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 成人午夜精彩视频在线观看| 各种免费的搞黄视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 街头女战士在线观看网站| 女性被躁到高潮视频| 国产黄片美女视频| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲性久久影院| 精品久久久久久久久av| 成人美女网站在线观看视频| 久久久久久久久大av| 免费看日本二区| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲精品日本国产第一区| 黄色日韩在线| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲欧洲日产国产| 秋霞伦理黄片| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 老熟女久久久| 男女下面进入的视频免费午夜| 韩国av在线不卡| 在线看a的网站| 天天躁日日操中文字幕| 岛国毛片在线播放| 日本爱情动作片www.在线观看| 午夜视频国产福利| 精品久久国产蜜桃| 联通29元200g的流量卡| 黑人高潮一二区| 丝瓜视频免费看黄片| 国产一区二区三区av在线| 精品人妻熟女av久视频| 国产免费福利视频在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 久久青草综合色| 国产成人午夜福利电影在线观看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 欧美高清性xxxxhd video| 一区在线观看完整版| 天堂俺去俺来也www色官网| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产精品熟女久久久久浪| 熟女电影av网| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲成色77777| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲国产精品999| 国产精品爽爽va在线观看网站| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产伦精品一区二区三区视频9| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲精品日本国产第一区| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲色图综合在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 久久久a久久爽久久v久久| 一个人看的www免费观看视频| 在线看a的网站| 日韩av不卡免费在线播放| 欧美另类一区| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲成人一二三区av| 91狼人影院| 亚洲天堂av无毛| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲av综合色区一区| 国产成人一区二区在线| 日本av免费视频播放| 一二三四中文在线观看免费高清| 免费看日本二区| 中文资源天堂在线| 国产 一区精品| 在线观看国产h片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av黄色大香蕉| 在线观看av片永久免费下载| 七月丁香在线播放| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 99久久人妻综合| 三级经典国产精品| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 大片免费播放器 马上看| 国产精品伦人一区二区| 亚洲在久久综合| 日韩中字成人| 日韩欧美精品免费久久| av在线app专区| 两个人的视频大全免费| 欧美国产精品一级二级三级 | 亚洲av综合色区一区| 亚洲最大成人中文| 午夜福利在线在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产 精品1| 中文在线观看免费www的网站| 全区人妻精品视频| 国国产精品蜜臀av免费| 国产一级毛片在线| .国产精品久久| 大片电影免费在线观看免费| 在线 av 中文字幕| 国产爱豆传媒在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 午夜日本视频在线| 久热久热在线精品观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲国产精品国产精品| 久久久久视频综合| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲无线观看免费| 在线观看免费高清a一片| 成人亚洲精品一区在线观看 | 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲,一卡二卡三卡| 五月开心婷婷网| 亚洲高清免费不卡视频| 全区人妻精品视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 日本av免费视频播放| 欧美极品一区二区三区四区| 成人毛片a级毛片在线播放| 久久久久视频综合| 亚洲熟女精品中文字幕| 18禁在线播放成人免费| av在线app专区| 成人亚洲欧美一区二区av| 少妇被粗大猛烈的视频| 99久久综合免费| 直男gayav资源| 亚洲中文av在线| 七月丁香在线播放| 午夜激情福利司机影院| 丰满少妇做爰视频| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产男女超爽视频在线观看| 丰满乱子伦码专区| 国产v大片淫在线免费观看| 大话2 男鬼变身卡| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲人成网站在线播| 熟女电影av网| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 日韩,欧美,国产一区二区三区| 一级毛片 在线播放| 国产淫片久久久久久久久| 99热网站在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产男女内射视频| 99国产精品免费福利视频| 国产免费视频播放在线视频| 欧美xxⅹ黑人| 99热这里只有是精品在线观看| 日韩中字成人| 在线观看一区二区三区激情| 国产高清国产精品国产三级 | 性色avwww在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 久久鲁丝午夜福利片| 好男人视频免费观看在线| 久久人妻熟女aⅴ| 黄色视频在线播放观看不卡| 日本午夜av视频| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲精品一二三| av在线播放精品| 亚洲国产高清在线一区二区三| 成年人午夜在线观看视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产69精品久久久久777片| 日韩伦理黄色片| 在线观看人妻少妇| 搡老乐熟女国产| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲精品国产av成人精品| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 极品教师在线视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 免费人成在线观看视频色| 我要看日韩黄色一级片| 色综合色国产| 男人和女人高潮做爰伦理| 只有这里有精品99| 丝瓜视频免费看黄片| 久久久国产一区二区| 久久久a久久爽久久v久久| 又大又黄又爽视频免费| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产黄色视频一区二区在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 午夜老司机福利剧场| 天天躁日日操中文字幕| 又爽又黄a免费视频| 三级经典国产精品| 中国三级夫妇交换| 少妇 在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久婷婷青草| 有码 亚洲区| 青春草视频在线免费观看| 国产精品三级大全| 各种免费的搞黄视频| 赤兔流量卡办理| 高清不卡的av网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美3d第一页| 亚州av有码| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品久久久久久av不卡| 91久久精品电影网| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国国产精品蜜臀av免费| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲国产精品成人久久小说| 精品国产乱码久久久久久小说| 联通29元200g的流量卡| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产成人精品久久久久久| 国产精品伦人一区二区| 欧美精品国产亚洲| 黄色一级大片看看| 亚洲国产色片| 婷婷色综合大香蕉| 精品一区二区三卡| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产永久视频网站| 99热这里只有精品一区| 精品久久久久久久久av| 一个人看的www免费观看视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 99久久精品一区二区三区| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产在线一区二区三区精| 一区二区三区精品91| 国产精品久久久久久精品古装| 日本午夜av视频| 伊人久久国产一区二区| 欧美国产精品一级二级三级 | 男女啪啪激烈高潮av片| 欧美国产精品一级二级三级 | 久久久久久伊人网av| 日韩视频在线欧美| 国产黄片视频在线免费观看| 三级国产精品欧美在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 91精品一卡2卡3卡4卡| 久久97久久精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲国产欧美在线一区| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 一本久久精品| 欧美精品一区二区免费开放| 国产 一区 欧美 日韩| 一级毛片电影观看| 成人亚洲精品一区在线观看 | 简卡轻食公司| 黄片wwwwww| 久久婷婷青草| 91精品伊人久久大香线蕉| 久久精品人妻少妇| 97在线人人人人妻| 中国国产av一级| 日本免费在线观看一区| 婷婷色av中文字幕| 亚洲av福利一区| 五月开心婷婷网| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产成人91sexporn| 熟女av电影| 国产精品久久久久成人av| 久久国产乱子免费精品| 男女无遮挡免费网站观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 日韩一本色道免费dvd| 国产乱人偷精品视频| 国产综合精华液| 亚洲av日韩在线播放| 免费黄网站久久成人精品| 91久久精品国产一区二区三区| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲成人一二三区av| 午夜激情久久久久久久| 成人免费观看视频高清| 少妇人妻精品综合一区二区| 中国三级夫妇交换| 国产成人freesex在线| 水蜜桃什么品种好| 最近最新中文字幕免费大全7| 99re6热这里在线精品视频| 国产片特级美女逼逼视频| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品国产av在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲三级黄色毛片| 天天躁日日操中文字幕| 一区二区三区精品91| 精品亚洲成a人片在线观看 | 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 美女高潮的动态| 亚洲内射少妇av|