不同刺激量捏脊療法對厭食癥模型大鼠血清鋅、鐵的影響研究

朱 靜，王 英，唐樂平，李 雪

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長沙 410007；2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽 712000)

厭食癥是小兒常見的慢性消化系統(tǒng)功能紊亂綜合征，主要是由于喂養(yǎng)不當、微量元素缺乏、精神壓力、消化系統(tǒng)疾病等因素影響，導(dǎo)致小兒較長時間內(nèi)食欲不振，進食量較前減少1/3～1/2，甚至厭惡進食[1-2]。該病在嬰幼兒及學(xué)齡前兒童中的發(fā)生率高達34%，并有逐年上升趨勢，治療不當可導(dǎo)致營養(yǎng)不良、貧血、免疫功能下降等，嚴重者影響小兒的身體及智力發(fā)育[1，3]。捏脊是小兒推拿治療小兒厭食癥的主要穴位和操作[4]。但是臨床捏脊操作刺激量存在一定爭議[5-6]，本研究通過動物研究發(fā)現(xiàn)中等刺激量能較好地提高厭食癥大鼠血清鋅、鐵水平，為捏脊刺激量的研究提供了理論支撐。

1 資料與方法

1.1一般資料 實驗動物為SPF級健康35～40日齡的SD大鼠40只，雌雄各半，體重(60±10)g，飼養(yǎng)于陜西中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心。

1.2方法

1.2.1飼料 特制飼料：按照1∶1∶2∶1∶1∶2∶2比例將魚松、奶粉、豆粉、白糖、玉米粉、鮮肥肉和鮮雞蛋混勻，捏成約20 g餅干狀，晾干后冷藏[7]。常規(guī)飼料由陜西中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

1.2.2動物分組 將40只SD大鼠隨機分為空白組、模型組、低刺激量捏脊組、中刺激量捏脊組和高刺激量捏脊組，共5組，每組8只，常規(guī)飼養(yǎng)3 d后造模。

1.2.3造模方法 采用病因模擬法建立小兒厭食癥大鼠模型[8]，此造模方法模擬自然病因，造模后與中醫(yī)小兒厭食癥病因病機相同，且可靠性較強。具體方法如下：所有動物均自由飲水進食，單籠喂養(yǎng)，空白組常規(guī)飼料喂養(yǎng)，其余4組特制飼料喂養(yǎng)。每天10：00記錄各組大鼠的體重及攝食量，以大鼠平均攝食量低于空白組20%～ 30%視為造模成功。

1.2.4手法干預(yù) 穴位定位：在解剖學(xué)定位的基礎(chǔ)上參照華興邦主編的大鼠穴位圖譜進行定位[9]。脊：第7頸椎與尾椎連線；脾俞：第11胸椎棘突下旁開7 mm；胃俞：第12胸椎棘突下旁開7 mm[10]。捏脊操作[11]：一助手雙手固定大鼠后，充分暴露大鼠的背部；操作者戴手套后以兩手拇指與食指對稱用力，捏住大鼠脊柱兩側(cè)皮膚，約捏起0.5 cm高，從尾巴根部捏至大椎穴止，此為捏脊1次。干預(yù)方法：空白組和模型組只固定，不捏脊。低刺激量組捏脊3次，中刺激量組捏脊6次，高刺激量組捏脊9次。低刺激量組在第3次捏脊、中刺激量組在第6次捏脊、高刺激量組在第9次捏脊時采用捏3提1法，特別在脾俞、胃俞操作時采用重提手法。為保證捏脊干預(yù)的一致性，重提操作力度以大鼠的最大耐受力為度，即整個操作的力度以大鼠有身體扭動，但又不引起大鼠尖叫、躁動為度。各組每天操作1次，連續(xù)30 d。

1.2.5指標及檢測 干預(yù)結(jié)束后大鼠禁食不禁飲24 h，取新鮮配制10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉。迅速打開腹腔，取腹主動脈血6 mL，試管內(nèi)不加抗凝劑，去離子水稀釋后采用原子光焰吸收分光光度法測定數(shù)據(jù)。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠攝食量比較 實驗第1天，各組大鼠攝食無明顯差異；第10天，其余4組大鼠與空白組比較攝食量平均下降27.3%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，造模成功；模型組、低刺激量組、中刺激量組和高刺激量組之間攝食量比較無明顯差異；連續(xù)手法干預(yù)30 d后，3組捏脊大鼠攝食量均較空白組明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與低刺激量組比較，中、高刺激量組攝食量增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而中、高刺激量組攝食量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組大鼠攝食量比較

2.2各組大鼠體重比較 實驗第1天，大鼠之間體重?zé)o明顯差異；第10天，其余4組大鼠與空白組比較體重平均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；手法干預(yù)30 d后，模型組及中、高刺激量組大鼠體重與空白組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；低刺激量組與空白組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與模型組比較，3組捏脊大鼠體重均顯著增加(P<0.01)；與低刺激量組比較，中、高刺激量組體重增加，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組大鼠體重比較

2.3各組血清鋅、鐵含量比較 干預(yù)30 d后，與空白組比較，模型組大鼠血清中鋅、鐵含量降低(P<0.05)；與模型組比較，3組捏脊大鼠血清鋅、鐵含量均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 各組大鼠鋅、鐵含量比較

3 討 論

微量元素是參與人體新陳代謝和生長發(fā)育重要的營養(yǎng)元素，其中鋅、鐵等必需微量元素是人體無法合成，需要從食物中攝取的重要元素[12]。同時由于兒童生長發(fā)育較快，較成人來說，兒童對微量元素的需求也相對多些，因此兒童易出現(xiàn)微量元素不足或缺乏。有研究發(fā)現(xiàn)，鋅是構(gòu)成味覺素的主要成分，可促進味蕾生長，兒童長期缺鋅可導(dǎo)致唾液磷酸酶降低，味覺不敏感，食欲下降，異食，甚至厭食[12]；鐵是構(gòu)成血紅蛋白和多種含鐵酶的主要部分，缺鐵可導(dǎo)致缺鐵性貧血及多種含鐵酶活性降低，致使細胞功能紊亂，引起組織器官異常，如舌炎、胃酸分泌減少等，造成小兒吸收不良、食欲下降[13]。因此，鋅、鐵缺乏與厭食癥的發(fā)生關(guān)系密切。

本研究采用捏脊療法觀察厭食大鼠體內(nèi)鋅、鐵微量元素的變化，發(fā)現(xiàn)捏脊能提高血清內(nèi)鋅、鐵元素的含量，其可能是捏脊治療厭食癥的機制之一。捏脊最早記載于《肘后備急方》，在小兒厭食的治療中也是作為首選的手法。捏脊是在背部膀胱經(jīng)區(qū)域進行操作，手法刺激背部膀胱經(jīng)的皮部及背俞穴的淺層，皮部是人體的最外層，同時也是十二經(jīng)絡(luò)功能反映于體表的部位，通過刺激背部皮部可以調(diào)理十二經(jīng)絡(luò)的氣血；且手法刺激背俞穴也可以調(diào)理臟腑功能，從而達到治療相應(yīng)臟腑病變[14-15]。厭食癥屬于中醫(yī)脾胃系統(tǒng)疾病，治療以脾胃為中心，脾胃在背部的體表投影區(qū)在T10～T11附近，與脾俞、胃俞定位相近，刺激該區(qū)域皮部能調(diào)節(jié)脾胃臟腑功能[10]。因此，在脾胃區(qū)重捏的捏脊法能有效激發(fā)脾胃的臟腑功能，達到健脾和胃，扶助運化等作用。胃和脾健，則消化吸收正常，故能有效改善厭食大鼠模型體內(nèi)微量元素的含量。其次，捏脊可刺激督脈經(jīng)氣，督脈乃陽脈之海，足陽明胃經(jīng)是受督脈調(diào)節(jié)的陽經(jīng)之一。通過刺激督脈達到調(diào)理胃經(jīng)，促進胃受納腐熟水谷功能，進而改善厭食大鼠攝食量、體重和微量元素的目的。

本研究中厭食大鼠血清中鋅、鐵元素均有所下降，大鼠模型復(fù)制成功。不同捏脊刺激量均能有效改善厭食癥大鼠的攝食量、體重和大鼠血清中鋅、鐵含量。其中，中、高刺激量組在改善大鼠攝食、體重和鋅、鐵等微量元素方面差異不大，提示捏脊刺激量以中刺激為佳，并非刺激量越大越好。這可能與皮部刺激量累積，從而激發(fā)經(jīng)穴的作用有關(guān)。通過本研究發(fā)現(xiàn)，捏脊手法刺激量的選擇以適宜為度，刺激量的大小還需在臨床進一步驗證，對此，我們分析手法刺激量有如閘門，當刺激量增大到一定程度時，效應(yīng)閘門就會順勢全部打開，推拿對經(jīng)穴的治療作用就持續(xù)發(fā)揮出來，對于這種假說還需進一步深入研究。