基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究銀杏葉治療非動(dòng)脈炎性前部缺血性視神經(jīng)病變的機(jī)制△

張 夢(mèng) 王欣玲

非動(dòng)脈炎性前部缺血性視神經(jīng)病變(NAION)是僅次于青光眼的第二常見的視神經(jīng)病變[1]，一般在 50 歲以上的中老年人群發(fā)病，多發(fā)于57～65歲[2]。在美國(guó)，NAION發(fā)病率為(2.3～10.2)/100 000[3]。有報(bào)道顯示，我國(guó)NAION的發(fā)病率為1/16 000[4]。因該病對(duì)患者視力損害以及生活影響極大，對(duì)其機(jī)制的研究顯得十分重要。有文獻(xiàn)報(bào)道，銀杏葉可通過清除自由基、抗氧化、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞等發(fā)揮藥理作用[5]。目前已經(jīng)將銀杏葉應(yīng)用于臨床NAION患者的治療，并發(fā)現(xiàn)其對(duì)患者的臨床癥狀有明顯的改善，但由于銀杏葉成分復(fù)雜多樣，作用機(jī)制尚未十分明確。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)從多角度對(duì)基因、代謝、蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)整合調(diào)節(jié)，從分子層面揭示藥物作用于復(fù)雜疾病的潛在機(jī)制[6-7]。 本研究便基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)，從銀杏葉治療NAION的主要活性成分和靶點(diǎn)出發(fā)，揭示銀杏葉治療NAION的潛在分子機(jī)制，供臨床應(yīng)用以及科學(xué)研究參考。

1 方法

1.1 藥物活性成分和潛在靶點(diǎn)篩選在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)(https://tcmspw.com/tcmsp.php)中以銀杏葉為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，以藥理活性的兩個(gè)重要評(píng)價(jià)指標(biāo)(口服生物利用度≥ 30%[8]和類藥物≥ 0.18[9])為篩選條件，獲得銀杏葉的生物活性成分，并獲得其潛在的蛋白質(zhì)靶標(biāo)。使用UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.uniprot.org/)，限定條件為人源并已經(jīng)過驗(yàn)證，將各個(gè)活性成分對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行基因名的轉(zhuǎn)換，用于進(jìn)一步研究。

1.2 疾病靶點(diǎn)篩選通過GeneCards、OMIM、disgenet、drugbank、TTD、Digsee數(shù)據(jù)庫(kù)分別獲得NAION的作用靶點(diǎn)，去除重復(fù)值得到其主要作用靶點(diǎn)，同樣經(jīng)過Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因名轉(zhuǎn)換，刪除未經(jīng)過驗(yàn)證的無(wú)效靶點(diǎn)，得到NAION的潛在靶點(diǎn)基因。

1.3 獲取疾病-藥物交集基因利用Venn在線軟件，輸入銀杏葉作用靶點(diǎn)以及NAION的潛在靶點(diǎn)基因，得到交叉靶點(diǎn)，以此作為銀杏葉治療NAION的潛在作用靶點(diǎn)，得到數(shù)據(jù)集。

1.4 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建將上述交集基因?qū)隨TRING網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)(https://string-db.org/)，將蛋白相互作用數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape(version 3.8.2)軟件對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行可視化，以構(gòu)建蛋白網(wǎng)絡(luò)圖(PPI網(wǎng)絡(luò)圖)。

1.5 主要活性成分以及核心靶點(diǎn)的篩選通過Cytoscape 3.8.2 軟件進(jìn)行拓?fù)浞治觯肗etwork Analyzer插件中三個(gè)重要參數(shù)：度值、介數(shù)中心性和中心接近度作為篩選標(biāo)準(zhǔn)，參數(shù)較高的節(jié)點(diǎn)視為關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，從而篩選出Hub靶點(diǎn)基因集，構(gòu)成Hub集。利用CytoHubba插件，選取MCC為最優(yōu)算法[10]篩選出靶點(diǎn)基因集，構(gòu)成MCC集。利用MCODE插件進(jìn)行聚類分析，篩選出各個(gè)功能模塊所涉及的靶點(diǎn)基因集，構(gòu)成MCODE集。以上三種方法得到的交集基因即為核心靶點(diǎn)，其對(duì)應(yīng)的藥物成分認(rèn)為是產(chǎn)生藥效的主要活性成分。

1.6 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析利用DAVID在線數(shù)據(jù)庫(kù)(https://david.ncifcrf.gov/)進(jìn)行生物富集分析，其包括GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。將藥物和疾病交集靶點(diǎn)導(dǎo)入該數(shù)據(jù)庫(kù)，以P<0.05、錯(cuò)誤檢出率(FDR)<0.05為顯著性閾值，預(yù)測(cè)銀杏葉治療NAION的可能機(jī)制。

1.7 構(gòu)建藥材-化合物-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖通過KEGG通路富集分析得到銀杏葉作用NAION的主要通路以及對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)基因，導(dǎo)入Cytoscape-3.8.2中進(jìn)行可視化，得到藥材-化合物-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖，并對(duì)網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行分析，得到其中作用程度較大的通路，視為銀杏葉治療NAION的主要信號(hào)通路。

1.8 分子對(duì)接驗(yàn)證為進(jìn)一步了解藥物活性成分和核心靶點(diǎn)之間相互作用程度并深入了解其分子對(duì)接情況，將1.1得到的銀杏葉主要活性成分在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索其分子結(jié)構(gòu)，并在Chemoffice 3D(2019版)中進(jìn)行能量最小化等優(yōu)化處理后，保存為mol2格式。再?gòu)腢niprot數(shù)據(jù)庫(kù)中得到核心靶點(diǎn)蛋白的結(jié)構(gòu)，并從RCSB PDB 數(shù)據(jù)庫(kù)篩選含有配體分子(不包括離子和復(fù)雜結(jié)構(gòu))、分辨率高且蛋白鏈數(shù)少的3D 分子結(jié)構(gòu)下載并保存為pdb 格式。最后利用SYBYL-X 2.0軟件構(gòu)建活性成分的分子表單數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)靶點(diǎn)蛋白做刪除無(wú)效配體、分配電荷、去結(jié)晶水、加氫等前處理，選擇與小分子相似的配體作為活性口袋位點(diǎn)，將其與活性成分的分子表單數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行分子對(duì)接，通過Total Score對(duì)對(duì)接結(jié)果進(jìn)行分析，對(duì)接復(fù)合物的穩(wěn)定性與該值大小呈正比，該值越大，說明化合物與受體的結(jié)合程度越好[11]。

2 結(jié)果

2.1 銀杏葉中活性成分與靶蛋白的篩選從TCMSP分析平臺(tái)得到銀杏葉中307種有效成分，并根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)篩選標(biāo)準(zhǔn)，得到銀杏葉中27個(gè)化合物符合標(biāo)準(zhǔn)，其中有7個(gè)成分無(wú)靶點(diǎn)，故得到20個(gè)活性成分(表1)。利用UniProt 數(shù)據(jù)庫(kù)校正并保留有效數(shù)據(jù)之后則得到20個(gè)活性成分的521個(gè)靶點(diǎn)。其中靶點(diǎn)最多的前5個(gè)化合物分別為：槲皮素、山奈酚、毛地黃黃酮、β-谷甾醇、異鼠李素。

表1 銀杏葉中主要化合物以及其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

2.2 NAION靶點(diǎn)篩選通過GeneCards、OMIM、disgenet、drugbank、TTD、Digsee數(shù)據(jù)庫(kù)分別獲得NAION的作用靶點(diǎn)，去除重復(fù)值后得到756個(gè)主要作用靶點(diǎn)。

2.3 藥物和疾病靶點(diǎn)的交集將得到的藥物靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)通過Venny2.1軟件作圖工具平臺(tái)取交集，得到銀杏葉和NAION的共同作用靶點(diǎn)26個(gè)。

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建將26種疾病與藥物的交叉靶點(diǎn)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫(kù)，調(diào)節(jié)參數(shù)：物種限制為 “Homo sapiens”，設(shè)定最低蛋白相互作用閾值為中等可信度(可信度>0.400)，隱藏網(wǎng)絡(luò)中無(wú)關(guān)聯(lián)節(jié)點(diǎn)，獲得蛋白質(zhì)相互作用信息，該網(wǎng)絡(luò)圖中有26個(gè)節(jié)點(diǎn)、114條邊，每個(gè)節(jié)點(diǎn)連接的靶點(diǎn)數(shù)目越多，代表此靶點(diǎn)越重要，可能成為核心靶點(diǎn)。

將上述蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)信息導(dǎo)入Cytoscape中。度值大小決定節(jié)點(diǎn)面積大小以及顏色深淺，節(jié)點(diǎn)面積越大、顏色越深則代表該靶點(diǎn)在蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)中越重要，節(jié)點(diǎn)的平均值為8.77(圖1)。

圖1 基于Cytoscape軟件的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 主要活性成分和靶點(diǎn)的篩選在Cytoscape-v3.8.2中對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)圖使用Network Analyzer工具行拓?fù)浞治觯肊xcel獲取拓?fù)鋮?shù)度值、介數(shù)中心性和中心接近度的中位數(shù)分別是9.5、0.025、0.59，并篩選出大于其中位數(shù)的靶點(diǎn)構(gòu)成Hub集。

在CytoHubba插件拓?fù)浞治鲋杏?2種算法，選擇MCC為最優(yōu)算法，篩選出排名前1/2的靶點(diǎn)基因12個(gè)，排名由高到低分別為：VEGFA、RELA、JUN、EGF、FOS、ESR1、MMP2、HIF1A、MYC、NOS3、APP、IL2，構(gòu)成MCC集。

同樣利用MCODE插件對(duì) PPI 網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行聚類分析，默認(rèn)參數(shù)設(shè)置識(shí)別出3個(gè)蛋白質(zhì)模塊，同一蛋白質(zhì)模塊中的蛋白質(zhì)靶點(diǎn)相互作用更緊密且功能特征相近，共涉及關(guān)鍵靶點(diǎn)24個(gè)，構(gòu)成MCODE集(表2)。其中MCODE1中有12個(gè)節(jié)點(diǎn)和58條邊,核心節(jié)點(diǎn)為NOS3，剩余節(jié)點(diǎn)圍繞其聚集，MCODE1的分?jǐn)?shù)為10.545，為三個(gè)模塊中分?jǐn)?shù)最高的蛋白模塊，可認(rèn)為最主要核心和功能靶點(diǎn)在此聚集。

表2 PPI網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)聚集分析結(jié)果

將以上3種方法篩選出的核心靶點(diǎn)導(dǎo)入在線網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)Venny2.1得到三者的交集，篩選出交集靶點(diǎn)共8個(gè)，分別為VEGFA、JUN、EGF、RELA、APP、ESR1、FOS、MYS，經(jīng)過Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)校正并得到銀杏葉治療NAION的主要靶點(diǎn)。

2.6 GO功能富集分析與KEGG通路富集分析利用 David 數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)銀杏葉治療NAION的26個(gè)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能富集分析(P<0.05、FDR <0.05)，共得到62條信號(hào)通路，其中生物過程19條、細(xì)胞成分12條、分子功能31條(圖2列出了生物過程、細(xì)胞成分和分子功能中的前10個(gè)條目)，發(fā)現(xiàn)銀杏葉治療NAION的交集靶點(diǎn)GO功能富集分析主要涉及血管生成反應(yīng)、RNA聚合酶II啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄正調(diào)控、血小板活化反應(yīng)、應(yīng)對(duì)缺氧等，參與細(xì)胞膜、轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合體、細(xì)胞空隙以及滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞組分，以及參與酶結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、蛋白質(zhì)結(jié)合、生長(zhǎng)因子結(jié)合、一氧化氮合酶活性等分子功能。

圖2 GO功能富集分析

對(duì)銀杏葉與NAION的共同靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析(P<0.05、FDR <0.05)，得到77條信號(hào)通路，其中前15條富集結(jié)果利用R語(yǔ)言軟件進(jìn)行可視化(圖3)。富集基因數(shù)和P值決定節(jié)點(diǎn)的顏色與大小，顏色從紅色到紫色代表P值從小到大，節(jié)點(diǎn)從大到小代表富集基因數(shù)從多到少，F(xiàn)DR與相關(guān)聯(lián)基因數(shù)呈反比。篩選出用于研究?jī)?nèi)容相關(guān)的信號(hào)通路，結(jié)果顯示，銀杏葉主要通過癌癥通路、癌癥中膽堿代謝信號(hào)通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路等多條通路對(duì)NAION起作用，通路上涉及的靶點(diǎn)越多則代表該通路在銀杏葉治療NAION過程中發(fā)揮作用的可能性越大。

圖3 KEGG通路富集分析氣泡圖

2.7 藥材-化合物-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖將銀杏葉與NAION的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape中，得到藥材-化合物-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)(圖4)，圖4中紅色v形代表藥物，淺紫色橢圓代表銀杏葉主要化合物，綠色菱形代表銀杏葉與NAION的交集靶點(diǎn)，橙色四邊形代表KEGG通路。網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)越大代表此化合物、靶點(diǎn)或通路在相互作用網(wǎng)絡(luò)圖中越重要。可見圖中節(jié)點(diǎn)數(shù)量有112個(gè)，386條邊，平均相鄰節(jié)點(diǎn)數(shù)量為6.86。在化合物中節(jié)點(diǎn)最大的為槲皮素、毛地黃黃酮以及山奈酚，提示銀杏葉可能通過槲皮素等化合物起到治療NAION的作用。此網(wǎng)絡(luò)中度值排名前5的靶點(diǎn)為PIK3CG、PRKCA、PRKCB、RELA、VEGFA。KEGG網(wǎng)絡(luò)通路中節(jié)點(diǎn)度值靠前的有癌癥通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路等，提示銀杏葉可能通過這幾條通路對(duì)NAION起治療作用。

圖4 藥材-化合物-靶點(diǎn)-通路

2.8 分子對(duì)接模擬驗(yàn)證基于 SYBYL2.0軟件，將銀杏葉20個(gè)主要化合物與8個(gè)核心靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行對(duì)接計(jì)算，以更直接的方式檢驗(yàn)化合物與靶蛋白之間的分子對(duì)接緊密性，經(jīng)篩選，5個(gè)化合物與7個(gè)核心靶點(diǎn)對(duì)接結(jié)果良好，而與FOS靶點(diǎn)結(jié)合程度不佳?？偡衷礁邉t代表分子與靶標(biāo)之間結(jié)合程度越好，總分>4.25分表示有結(jié)合活性，總分>5.00分表示有良好的結(jié)合活性，總分>7.00分則表示有較強(qiáng)的結(jié)合活性[12](表3)。

表3 與靶標(biāo)結(jié)合良好的化合物數(shù)量及其靶標(biāo)生物效應(yīng)

3 討論

NAION為供應(yīng)篩板前區(qū)及篩板區(qū)的睫狀后血管的小分支發(fā)生缺血，致使視盤發(fā)生局部梗死，以致患者突發(fā)單側(cè)視力喪失，無(wú)疼痛，但伴有典型的視野缺損(與生理盲點(diǎn)相連的扇形缺損)[13]。長(zhǎng)期以來，臨床上對(duì)NAION的治療一直以西醫(yī)為主，且大部分臨床醫(yī)生以經(jīng)驗(yàn)治療為主，國(guó)際上目前尚無(wú)公認(rèn)、有效的治療方案。除此之外，NAION的發(fā)病機(jī)制同樣存在爭(zhēng)議。有研究顯示，視神經(jīng)缺血后導(dǎo)致視盤充血、水腫,進(jìn)而釋放炎癥因子,導(dǎo)致視神經(jīng)進(jìn)一步損傷[14-15]。同樣有研究推測(cè)，視神經(jīng)受到缺血缺氧的刺激后,啟動(dòng)了細(xì)胞凋亡機(jī)制,造成視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的數(shù)量減少,從而進(jìn)一步導(dǎo)致視功能的損傷[16]。

銀杏葉主要含黃酮類化合物及萜類成分，為銀杏科植物的干燥葉，主歸心、肺經(jīng)，味甘、苦、澀，性質(zhì)平和。《中藥志》記載：銀杏葉可以收斂肺氣，止咳平喘[17]。中藥藥理學(xué)研究顯示，銀杏葉的治療作用較為廣泛，如改善心血管及周圍循環(huán)功能，改善心肌缺血，促進(jìn)記憶力、改善腦功能等。此外，銀杏葉還具有降低血液黏稠程度及有效清除氧自由基的功效[18]。目前，銀杏葉也逐漸用于NAION的治療，但其詳細(xì)的治療機(jī)制尚不明確。故基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析銀杏葉單味中藥在治療NAION中的作用機(jī)制和關(guān)鍵通路有重要意義。

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，檢索到銀杏葉包含的20個(gè)活性化合物的521個(gè)靶點(diǎn)，與NAION的756個(gè)疾病相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行基因映射，獲得26個(gè)映射基因，構(gòu)建了蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)。銀杏葉中槲皮素、山柰酚和毛地黃黃酮幾個(gè)成分自由度較高，表明這幾個(gè)成分在治療NAION方面起主要作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，槲皮素能夠清除超氧自由基并減輕氧化應(yīng)激的損傷，還可以通過降低對(duì)炎癥因子的反應(yīng)和抑制細(xì)胞凋亡來發(fā)揮抗炎和抗凋亡作用[19]，與此同時(shí)，槲皮素還可以舒張血管，繼而起到治療NAION的效果[20]。山奈酚與木犀草素也具有抗炎與抗氧化作用[21]，且與本研究結(jié)果相一致的是，木犀草素在腦內(nèi)神經(jīng)缺血缺氧過程中可減輕神經(jīng)炎癥并有神經(jīng)保護(hù)的作用[22-23]。

在蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)中經(jīng)過三種方法的篩選并相互整合，得到銀杏葉治療NAION的核心靶點(diǎn)基因：VEGFA、JUN、EGF、RELA、APP、ESR1、FOS、MYC;銀杏葉主要通過這幾個(gè)核心靶點(diǎn)治療NAION。由于NAION主要機(jī)制為睫狀后短動(dòng)脈供應(yīng)不足引起的視盤循環(huán)的短暫破壞導(dǎo)致灌注不足和缺血，有研究表明[24-25]，VEGFA、EGF在缺血缺氧環(huán)境中可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生成并促使血管通透性的增加。在NAION的病理過程中，缺血缺氧則會(huì)使細(xì)胞處于氧化應(yīng)激的狀態(tài)，促使細(xì)胞內(nèi)釋放大量的炎癥因子，MYC基因與RELA基因在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用。RelA/p65是NF-κB復(fù)合體，有研究指出，凋亡的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGC)中NF-κB和TNF-α的表達(dá)增加[26]。抑制AMPK、激活和刺激HCAR1-ARRB2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可減少NF-κB和TNF-α的表達(dá)增加，具有抗炎和神經(jīng)保護(hù)作用[27]。MYC基因是較早發(fā)現(xiàn)的一組癌基因,有研究發(fā)現(xiàn)，N-Myc下游調(diào)控基因(NDRG)在囊泡運(yùn)輸、應(yīng)激反應(yīng)以及神經(jīng)再生等方面具有明顯的作用[19]。 對(duì)于APP、FOS、ESR1，均有報(bào)道顯示它們參與神經(jīng)疾病損傷的病理過程[28-29]，在神經(jīng)元細(xì)胞的興奮性以及神經(jīng)元細(xì)胞的可塑性和突觸的可塑性方面起著重要的神經(jīng)保護(hù)作用[30-33]。綜上，銀杏葉通過多靶點(diǎn)參與缺血缺氧、氧化應(yīng)激以及炎癥等病理過程以治療NAION。

KEGG通路富集分析發(fā)現(xiàn)，銀杏葉治療NAION涉及多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，這些通路主要使RGC適應(yīng)缺血缺氧的環(huán)境，并產(chǎn)生細(xì)胞保護(hù)因子以延長(zhǎng)RGC的壽命，減少凋亡。在諸多通路中，癌癥信號(hào)通路排第一，其中最為典型的可有Wnt信號(hào)通路[34]。研究表明，高水平的Norrin和隨后在RGC中Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活可防止通過IGF-1引起的視神經(jīng)軸突損傷，從而引起PI3K-Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活性增加；并且Norrin可減輕青光眼小鼠模型中RGC及其軸突的慢性損傷，從而起到一定的保護(hù)RGC的作用[35]。這與本研究結(jié)果相一致，即銀杏葉通過提高Norrin蛋白的表達(dá)，減輕因缺血而造成的RGC的損傷。此外本研究還顯示，銀杏葉治療NAION過程中涉及PI3K-Akt信號(hào)通路，這與之前報(bào)道的提高PI3K-Akt信號(hào)通路以及相關(guān)蛋白且提高缺氧誘導(dǎo)因子-1α的表達(dá)可以提高組織對(duì)缺血缺氧的適應(yīng)相符合[36-38]。而Wang等[39]研究顯示，抑制MAPK信號(hào)通路可以有效地改善缺血缺氧造成的神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡與損傷，并能促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞的功能修復(fù)。

綜上，本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探究了銀杏葉活性成分治療NAION的潛在作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，銀杏葉可通過多成分、多靶點(diǎn)、多途徑對(duì)NAION發(fā)揮治療作用。與以往的傳統(tǒng)藥理學(xué)研究相比，本文基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的相關(guān)研究獲得了一定的突破，為后期圍繞預(yù)測(cè)得到的化合物、作用靶點(diǎn)及信號(hào)通路進(jìn)一步深入探究銀杏葉治療NAION機(jī)制的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證開辟新思路。