血清Asprosin、Spexin 水平與2 型糖尿病并內(nèi)臟型肥胖的相關性研究

王曉艷，魏楓，王瑋，張悅，周坤，張苑

目前2 型糖尿病（T2DM）患病率逐年升高，預計到2045 年T2DM 患者將達6.29 億，且最新數(shù)據(jù)顯示我國T2DM 患者已達到1.16 億，是全球患T2DM 人數(shù)最多的國家［1］。肥胖和T2DM 密切相關，尤其是內(nèi)臟型肥胖（visceral obesity，VO），易引起胰島素抵抗（insulin resistance，IR）進而導致T2DM 的發(fā)生［2］。VO 與高血壓、心腦血管疾病、骨質(zhì)疏松等相關，且我國超過45.4%的糖尿病患者存在VO［3-4］，其給患者及社會帶來的負擔不容小覷。

T2DM 的發(fā)病機制錯綜復雜，近年來與其相關的脂肪因子已成為國內(nèi)外研究熱點，Asprosin 是一種新的脂肪因子，是Chopra 團隊于2016 年發(fā)現(xiàn)的由白色脂肪細胞分泌的profibrillin 的C 末端蛋白片段分子，可通過肝細胞G蛋白-cAMP-PKA信號通路上調(diào)肝糖合成與釋放，發(fā)揮升高血糖的生理功能［5］。

Spexin 是一種新型的飽腹感因子，由SONMEZ 等［6］于2009 年通過人類蛋白質(zhì)組學隱性Markov 模型篩選并鑒定出的一種分泌型多肽，與糖脂代謝紊亂有關。目前關于Asprosin、Spexin 與肥胖及T2DM 之間的研究較少，本研究通過檢測T2DM 患者血清Asprosin、Spexin 水平，分析其與內(nèi)臟脂肪面積（visceral adipose area，VFA）、糖脂代謝指標及T2DM 并發(fā)癥的相關性，旨在為T2DM并發(fā)VO 患者的治療提供更多依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2019 年1 月至2020 年6 月于內(nèi)蒙古科技大學包頭醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科國家標準化代謝性疾病管理中心就診的381 例T2DM 患者為研究對象。

納入標準：（1）符合2017 版《中國2 型糖尿病防治指南》中的糖尿病診斷標準［7］；（2）年齡18～75 歲。

排除標準：（1）1 型糖尿病患者；（2）合并T2DM 急性并發(fā)癥；（3）有吸毒史；（4）有精神疾病史；（5）嚴重肝腎功不全；（6）妊娠及哺乳期女性。

依據(jù)是否發(fā)生VO 將患者分為T2DM 并發(fā)VO組（T2DM-VO 組，n=226）、T2DM 未 并 發(fā)VO 組（T2DM-nonVO 組，n=155）。本研究中VO 的診斷標準為VFA ≥100 cm2［8］。本研究經(jīng)內(nèi)蒙古科技大學包頭醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院倫理委員會批準?；颊呔押炇鹬橥鈺?。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料及生化指標測定 記錄患者的性別、年齡，測量收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）、身高、體質(zhì)量、腰圍（waist circumference，WC）、臀圍（hip circumference，HC），并計算BMI、腰臀比（waist-to-hip ratio，WHR）。測量空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)PG）、餐后2 h 血糖（2-hour postprandial blood glucose，2 hPG）、糖化血紅蛋白（hemoglobin A1c，HbA1c）、空腹C肽（fasting C-peptide，F(xiàn)CP）、餐后2 小時C 肽（2-hour postprandial C-peptide，2 hCP）、三酰甘油（triglyceide，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesferol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesferol，LDL-C）、 血 肌酐（serum creatinine，Cr）、血尿酸（blood uric acid，UA）等生化指標，并使用改良穩(wěn)態(tài)模型評估胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR），HOMA-IR=1.5+FPG（mmol/L）×FCP（pmol/L）/2 800［9］。

1.2.2 體脂相關指標測定 采用生物電阻抗法（歐姆龍DUALSCANHDS-2000）測量VFA、皮下脂肪面積（SFA），并計算內(nèi)臟脂肪面積比皮下脂肪面積（VSR）。

1.2.3 血清Asprosin、Spexin 水平測定 所有患者空腹8～10 h，采集外周靜脈血，室溫下靜置2 h 后放入離心機，以3 000 r/min 離心15 min 后（離心半徑為13.5 cm）取上清液，-80 ℃冰箱保存，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）〔上海江萊生物公司，變異系數(shù)（CV）<9%，Inter-批間差：CV<11%〕測定血清Asprosin、Spexin 水平。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 26.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，兩組間比較采用成組t 檢驗；計數(shù)資料以相對數(shù)表示，兩組間比較用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson 相關分析；T2DM 并發(fā)VO 的影響因素分析采用二元Logistic 回歸分析。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般資料、生化指標、體脂相關指標及血清Asprosin、Spexin 水平比較 T2DM-VO 組患者DBP、身高、FCP 水平、2 hCP 水平、TG 水平、UA 水平、HOMA-IR、Asprosin 水平高于T2DM-nonVO 組，體質(zhì)量、BMI、WC、HC、WHR、VFA、SFA、VSR 大于T2DM-nonVO 組，男性所占比例、Spexin 水平低于T2DM-nonVO 組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。兩組患者年齡、SBP 及FPG、2 hPG、HbA1c、TC、HDL-C、LDL-C、Cr 水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見表1。

表1 兩組患者一般資料、生化指標、體脂相關指標及血清Asprosin、Spexin 水平比較Table 1 Comparison of general data，biochemical indices，body fat indices and serum Asprosin and Spexin levels between type 2 diabetics with and without visceral obesity

2.2 Asprosin、Spexin 與各指標間的相關性分析Asprosin 與 身 高、體 質(zhì) 量、BMI、WC、HC、WHR、FCP、2 hCP、TG、HOMA-IR、VFA、SFA、VSR 呈 正相關，與Spexin 呈負相關（P<0.05）；Spexin 與體質(zhì)量、BMI、WC、HC、WHR、HbA1c、FCP、2 hCP、Cr、UA、HOMA-IR、VFA、SFA、VSR 呈負相關，與HbA1c呈正相關（P<0.05），見表2。

表2 Asprosin、Spexin 與各指標間的相關性分析Table 2 Correlation analysis of serum Asprosin and Spexin with other indices

2.3 T2DM 并發(fā)VO 影響因素的二元Logistic 回歸分析

以T2DM 并發(fā)VO 為因變量（賦值：是=0，否=1），依據(jù)表1 中有統(tǒng)計學意義的指標及相關文獻［10-11］篩選出自變量（賦值見表3），進行二元Logistic 回歸分析，結(jié) 果 顯 示， 性 別、BMI、WHR、Asprosin、Spexin 是T2DM 并發(fā)VO 的影響因素（P<0.05），見表4。

表3 T2DM 并發(fā)VO 影響因素的二元Logistic 回歸分析賦值表Table 3 Assignment for influencing factors of visceral obesity in type 2 diabetics analyzed using binary Logistic regression

表4 T2DM 并發(fā)VO 影響因素的二元Logistic 回歸分析Table 4 Binary Logistic regression analysis of influencing factors of visceral obesity in type 2 diabetics

3 討論

肥胖與糖尿病已成為全球性的公共衛(wèi)生問題，由其引起的一系列危害值得人們關注與探討。肥胖主要表現(xiàn)為脂肪過度堆積，根據(jù)脂肪堆積部位可分為VO 型肥胖與皮下型肥胖，有報道表明VO 與T2DM、高血壓以及心血管疾病等密切相關，并增加了上述疾病的發(fā)病風險［12］。因此早期、定期檢測T2DM 患者的VFA 水平對評估T2DM 患者的長期預后有重要意義。目前測量VFA的方法主要有MRI、CT、超聲及生物電阻抗法，CT 和MRI 法測量VFA 雖精準，但因檢測時間長、費用高且暴露于射線等缺點致其在臨床應用受限，生物電阻抗法具有成本低、操作簡單、無創(chuàng)、無害等特點，更適用于VO 的檢測。

本研究T2DM-VO 組中BMI、WC、WHR、HOMAIR 均明顯高于T2DM-nonVO 組，兩組間FPG、2 hPG、HbA1c比較差異無統(tǒng)計學意義，與顧麗萍等［13］研究結(jié)果一致。T2DM-VO 組中Asprosin 水平明顯高于T2DM-nonVO 組，Spexin 水平明顯低于T2DM-nonVO 組，與相關研究結(jié)果一致［13-15］，表明Asprosin、Spexin 水平的升高或降低與T2DM 合并VO 發(fā)生有關；同時本研究結(jié)果還顯示：T2DM-VO 組Asprosin 水平相較于T2DMnonVO 組明顯升高，而Spexin 水平明顯下降，表明Spexin 可能是保護因子，國內(nèi)外對于相關研究較少，因此需要進一步明確。

相關性分析結(jié)果顯示，Asprosin 與BMI、WC、HOMA-IR、TG、VFA、SFA、VSR 呈正相關，與Spexin呈負相關，提示Asprosin 與VFA、IR、血脂密切相關，與ZHANG 等［16］報道相符，與LI 等［17］研究結(jié)果稍有不同，后者結(jié)果表明Asprosin 還與FPG、HbA1c呈正相關。另外DUERRSCHMID 等［18］在肥胖小鼠和肥胖患者中發(fā)現(xiàn)血清Asprosin 水平升高，但肥胖小鼠在被注射了Asprosin 抗體后體質(zhì)量明顯減輕。LONG 等［14］研究發(fā)現(xiàn)肥胖兒童血清Asprosin 水平明顯高于體質(zhì)量正常兒童，且Asprosin與IR、血脂等相關，本研究結(jié)果與之一致。以上均提示Asprosin 與肥胖、IR、脂代謝紊亂有關。

Spexin 與BMI、WHR、HOMA-IR、VFA、VSR 呈負相關，與HbA1c呈正相關，與HDL-C、LDL-C、TG無相關關系，與GU 等［19］研究結(jié)果存在一定差異，后者研究發(fā)現(xiàn)Spexin 與HbA1c、TG、LDL-C 呈負相關，與HDL-C 呈正相關，這可能與樣本量較少、存在個體差異有關。有研究發(fā)現(xiàn)患有肥胖癥的小鼠相較于體質(zhì)量正常小鼠血清Spexin 水平降低［20］，提示Spexin 可在一定程度上改善IR，Spexin 可能是治療肥胖癥、T2DM 的有效方法。

進一步行二元Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，Asprosin、Spexin 是T2DM 并發(fā)VO 的影響因素，隨著Asprosin 水平的升高或Spexin 水平的降低，T2DM 患者發(fā)生VO 的風險增加。Asprosin 是一種肽類激素，可以通過第二信使系統(tǒng)調(diào)節(jié)葡萄糖的動態(tài)平衡，從而發(fā)揮升糖效應，還可通過PKC 素依賴的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激/炎癥依賴途徑促進骨骼肌IR［21］，進而加速T2DM、肥胖的發(fā)生。本研究也證實了Asprosin 水平與IR、血脂異常密切相關，而且表明T2DM 合并VO 的發(fā)生發(fā)展與Asprosin 水平升高有關，Spexin 水平則有著相反的作用，本研究結(jié)果提示Spexin 可能是T2DM 的保護因子，且對VO 的發(fā)生有著不容忽視的作用。本研究通過對血清Asprosin、Spexin 水平與T2DM 合并VO 的相關性研究，為臨床T2DM 及VO 患者的治療提供了一定的理論依據(jù)及臨床意義。本研究結(jié)果還顯示男性、BMI>26 kg/m2是T2DM并發(fā)VO 的獨立危險因素，進一步說明肥胖在T2DM 并發(fā)VO 起著重要的作用。

綜上所述，血清Asprosin、Spexin 水平與T2DM 并發(fā)VO 密切相關，可能在T2DM 患者的內(nèi)臟脂肪代謝中具有重要作用。血清Asprosin、Spexin 水平與血脂異常、IR 明顯相關，T2DM 患者血清Spexin 水平與脂肪肝、腦梗死的發(fā)生風險有關。本研究為進一步明確血清Asprosin、Spexin 水平對肥胖、T2DM 及糖脂代謝的作用機制提供了新的思路，同時為治療T2DM、預防T2DM并發(fā)癥提供了新的、可能的治療靶點。

作者貢獻：王曉艷、魏楓負責研究的構(gòu)思與設計、實施與可行性分析，文章的質(zhì)量控制及審校、修訂；王曉艷、王瑋、張悅、周坤、張苑負責數(shù)據(jù)收集；王曉艷、周坤、張苑負責數(shù)據(jù)整理；王曉艷、王瑋、張悅負責統(tǒng)計學處理；王曉艷負責結(jié)果的分析與解釋及撰寫論文；魏楓對文章整體負責，監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。