類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清HDL2-c、HDL3-c水平及其臨床意義

向玉林，韻雪雪

（電子科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川成都611731）

炎癥是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA）患者心血管疾病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加的重要原因[1-2]。高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol, HDL）是主要的抗動(dòng)脈粥樣硬化脂肪蛋白，能夠降低心血管疾病發(fā)病率[3-7]。根據(jù)密度不同，可將HDL 分為兩種主要亞型：高密度脂蛋白亞組份2（HDL2-c）和較小的高密度脂蛋白亞組份3（HDL3-c）。HDL2-c 是可變程度更高的HDL 組份，較高水平的HDL2-c亞組份有助于HDL的抗動(dòng)脈粥樣硬化效果。因此，HDL 亞組份水平的降低，尤其是HDL2-c 組份水平降低會(huì)增加RA 患者心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[8-9]。本研究擬通過比較RA患者和健康群眾間HDL2-c 和HDL3-c 水平的差異，分析HDL2-c 和HDL3-c水平與RA疾病活動(dòng)指數(shù)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月—2018年12月于電子科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬成都市婦女兒童中心醫(yī)院收治的45 例RA 患者作為RA 組。其中，男性13 例，女性32 例；平均年齡（58.1±6.4）歲。選取同期于本院行健康體檢群眾45 例作為對(duì)照組。其中，男性15 例，女性30 例；平均年齡（57.3±3.9）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并經(jīng)患者知情同意。兩組性別比例、平均年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），患者均未服用任何降血脂藥物，無任何心血管疾病或糖尿病，同時(shí)對(duì)患者進(jìn)行類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情活動(dòng)度評(píng)價(jià)表（DAS28）評(píng)分。本研究有22 例患者采用甲氨蝶呤治療，11 例采用生物制劑治療，12 例采用糖皮質(zhì)激素治療?；颊咂骄〕虨椋?0.1±1.2）年，根據(jù)平均病程將患者分為長(zhǎng)病程組（病程>10年）和短病程組（病程≤10年），分別有19 例和26 例。

1.2 方法

紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）檢測(cè)采用魏氏法，檢測(cè)儀器Monitor 2.0（意大利Vital Diagnostics公司），正常參考值：0～20 mm/h。選取采集患者清晨空腹血5 ml，進(jìn)行離心操作，分離血清后密封低溫保存，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA） 測(cè)定高敏感C 反應(yīng)蛋白（high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）水平。將試劑盒置于室溫中，并取出板條，選取8個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，滴入不同水平的標(biāo)準(zhǔn)品，向樣本孔中滴入樣本稀釋液和待測(cè)樣本，空白孔不加溶液，封板后于37℃溫育30 min。開封洗滌，向標(biāo)準(zhǔn)品孔及樣本孔中加入檢測(cè)辣根過氧化物酶抗體后，封板37℃溫育30 min，再洗滌。然后加入底物A、B 于37℃避光顯色15 min。加入終止液，15 min 內(nèi)測(cè)定吸光度值，最后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和結(jié)果判斷。收集患者年齡、吸煙史、高血壓、身高、體重等一般性資料，計(jì)算BMI?；颊咴诳崭?fàn)顟B(tài)下，抽取所有患者靜脈血和肝素抗凝。采用聚乙二醇20000 沉淀法檢測(cè)患者血清HDL2-c、HDL3-c 水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較用單因素方差分析，兩組間比較用t檢驗(yàn)，影響因素的分析用多元回歸分析模型。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血脂和脂蛋白水平比較

兩組患者TC、LDL-c 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。兩組患者TG、HDL、HDL2-c、HDL3-c、HDL2/HDL3、ApoA-l 和ApoB 比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），RA 組TG、ApoB 較對(duì)照組高（P<0.05），HDL、HDL2-c、HDL3-c、HDL2/HDL3 和Apo A-1 較對(duì)照組低（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者血脂和脂蛋白水平比較 （n=45，±s）

表1 兩組患者血脂和脂蛋白水平比較 （n=45，±s）

組別ApoA-l/（mg/L）ApoB/（mg/L）RA組對(duì)照組t 值P 值TC/（mmol/L）5.7±1.1 5.7±0.8 0.271 0.722 TG/（mmol/L）2.1±1.2 1.6±0.8 0.953 0.041 HDL/（mmol/L）1.3±0.3 1.6±0.3 2.712 0.001 HDL2-c/（mmol/L）0.4±0.1 0.7±0.2 1.044 0.012 HDL3-c/（mmol/L）0.6±0.2 1.1±0.2 1.745 0.005 HDL2/HDL3 0.6±0.1 0.8±0.2 0.947 0.043 LDL-c/（mmol/L）3.5±0.9 3.3±0.7 0.586 0.412 1517.2±242.2 1710.1±217.2 4.788 0.001 987.5±220.3 862.2±188.8 5.129 0.005

2.2 兩組不同性別患者的HDL2-c、HDL3-c 水平比較

對(duì)照組男女性患者的HDL2-c、HDL3-c 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.892 和8.664，均P=0.001），女性較男性高。RA 組男女性患者的HDL2-c、HDL3-c 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.473 和0.824，P=0.518 和0.211）。兩組男性患者的HDL2-c、HDL3-c 比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。兩組女性患者的HDL2-c、HDL3-c 比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），RA 組較對(duì)照組低。見表2。

表2 兩組不同性別患者的HDL2-c、HDL3-c水平比較（n=45，mmol/L，±s）

表2 兩組不同性別患者的HDL2-c、HDL3-c水平比較（n=45，mmol/L，±s）

組別女性HDL2-c 0.9±0.3 0.5±0.2 3.842 0.001對(duì)照組RA組t值P值HDL3-c 1.3±0.2 0.8±0.2 4.174 0.001男性HDL2-c 0.6±0.2 0.4±0.1 0.626 0.376 HDL3-c 0.7±0.1 0.7±0.2 0.518 0.428

2.3 不同DSA28評(píng)分患者的HDL2-c、HDL3-c水平比較

依據(jù)DAS28 評(píng)分，將RA 組分為DAS28 < 3.2 分組、DAS28 評(píng)分3.2～5.1 分組和DAS28 評(píng)分> 5.1 分組，分別有31例、6例和8例。結(jié)果顯示，各組患者HDL2-c、HDL3-c水平比較，經(jīng)方差分析，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

表3 不同DSA28評(píng)分患者的HDL2-c、HDL3-c水平比較（mmol/L，±s）

表3 不同DSA28評(píng)分患者的HDL2-c、HDL3-c水平比較（mmol/L，±s）

DSA28評(píng)分DAS28<3.2分組DAS28評(píng)分3.2～5.1分組DAS28評(píng)分>5.1分組F 值P 值n 31 6 8 HDL2-c 0.4±0.1 0.5±0.2 0.3±0.1 0.728 0.322 HDL3-c 0.8±0.3 0.6±0.2 0.7±0.1 0.644 0.392

2.4 RA患者HDL2-c影響因素的一般多元線性回歸分析

以HDL2-c水平作為因變量，以年齡、性別、病程、糖皮質(zhì)激素和DAS28 分值作為自變量，進(jìn)行一般多元線性回歸分析。結(jié)果顯示：DAS28 評(píng)分為RA患者HDL2-c 水平的影響因素（P<0.05）。校正年齡、性別、病程和糖皮質(zhì)激素使用后，DAS28 分值每增加1分，HDL2-c水平降低0.061 mmol/L。見表4。

表4 RA患者HDL2-c影響因素的一般多元線性回歸分析參數(shù)

2.5 RA 患者是否使用甲氨蝶呤、生物制劑和糖皮質(zhì)激素的HDL2-c、HDL3-c水平比較

RA患者是否使用甲氨蝶呤、生物制劑和糖皮質(zhì)激素的HDL2-c、HDL3-c 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表5。

表5 RA患者是否使用甲氨蝶呤、生物制劑和糖皮質(zhì)激素的HDL2-c、HDL3-c水平比較 （mmol/L，±s）

表5 RA患者是否使用甲氨蝶呤、生物制劑和糖皮質(zhì)激素的HDL2-c、HDL3-c水平比較 （mmol/L，±s）

甲氨蝶呤生物制劑糖皮質(zhì)激素指標(biāo)是（n=22）0.4±0.1 0.8±0.1 HDL2-c HDL3-c否（n=23）0.5±0.2 0.9±0.3 t 值0.321 0.142 P 值0.702 0.943是（n=11）0.4±0.1 0.8±0.2否（n=34）0.4±0.1 0.9±0.2 t 值0.161 0.662 P 值0.832 0.361是（n=12）0.5±0.2 0.8±0.1否（n=33）0.5±0.2 0.8±0.2 t 值0.142 0.673 P 值0.872 0.346

2.6 不同病程對(duì)RA 患者HDL2-c、HDL3-c 水平的影響

長(zhǎng)病程組與短病程組患者的HDL2-c、HDL3-c水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），長(zhǎng)病程組較短病程組高。見表6。

表6 不同病程對(duì)RA組HDL2-c、HDL3-c水平的影響（mmol/L，±s）

表6 不同病程對(duì)RA組HDL2-c、HDL3-c水平的影響（mmol/L，±s）

組別長(zhǎng)病程組短病程組t值P值n 19 26 HDL2-c 0.6±0.4 0.3±0.1 3.684 0.001 HDL3-c 0.9±0.1 0.7±0.2 4.000 0.001

3 討論

在炎癥狀況下，HDL 的抗動(dòng)脈粥樣硬化性能會(huì)減弱，甚至?xí)@得促動(dòng)脈粥樣硬化的功能[7]。HDL2-c、HDL3-c 和腦血管疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)[10]。此外，RA 組和對(duì)照組間HDL2-c 水平差異最大，因此，RA 患者HDL2/HDL3 比值也較低，提示膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)功能受損，而該功能是HDL 抗動(dòng)脈粥樣硬化的重要機(jī)制。膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)依賴于HDL2-和HDL3-c 的水平，包括膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白在內(nèi)的膽固醇酶能夠影響HDL2-c 和HDL3-c的水平[11]，RA 患者中，較高的膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白水平導(dǎo)致HDL2-c 水平下降，本研究中也觀察到類似的結(jié)果。

本研究RA 組和對(duì)照組的男性HDL2-c、HDL3-c的水平均低于女性。RA 組女性患者與對(duì)照組女性患者HDL2-c 和HDL3-c 水平比較有差異，而RA 組男性患者與對(duì)照組男性患者無差異。既往研究表明，女性RA 患者腦血管疾病和死亡發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)高于男性[12]。因此，RA 女性患者CVD 風(fēng)險(xiǎn)過高可能與有益的HDL 亞組份HDL2-c 水平相對(duì)較低有關(guān)。以往研究結(jié)果也支持這一結(jié)論，與絕經(jīng)前婦女相比，絕經(jīng)后婦女HDL 和HDL2-c 水平均下降，且腦血管疾病風(fēng)險(xiǎn)升高[13]。但目前RA 患者疾病活動(dòng)指數(shù)對(duì)血脂水平影響的研究結(jié)論存在一定的分歧。ARTS等[14]表明，RA 患者疾病活動(dòng)指數(shù)和病程與心血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無相關(guān)性。而DEL RINCóN 等[15]研究發(fā)現(xiàn)RA 患者病程與動(dòng)脈粥樣硬化形成加速有關(guān)。因此，未來仍需對(duì)這一課題進(jìn)行更為深入的研究，以便更為詳細(xì)的了解RA 患者疾病活動(dòng)指數(shù)和病程與心血管疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。本研究結(jié)果表明，DAS28 評(píng)分是RA 患者HDL2-c 水平的影響因素。DAS28 評(píng)分每增加1 分，HDL2-c 水平下降0.06 mmol/L。因此，抑制疾病活動(dòng)指數(shù)能夠提高HDL2-c 水平，從而降低CVD 發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

本研究存在一定的局限性。吸煙和BMI 也是影響血脂水平的混雜變量，但是對(duì)照組未收集這一組數(shù)據(jù)，因此未對(duì)這一混雜變量進(jìn)行校正。此外，持續(xù)性暴露在較高的疾病活動(dòng)指數(shù)可能對(duì)HDL 水平有影響，需進(jìn)一步研究。