高 燕,姜 艷,李桂琳,羅 凱,周侯光,李澤生
(云南省德宏熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,云南瑞麗 678600)
鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxumLindl.),又名粗黃草、金弓石斛[1],為蘭科石斛屬多年生附生草本植物,是一種新興的石斛類藥材[2],2010年被列入《中國藥典》[3],以莖入藥,氣微,味淡,嚼之有黏性,具有美容明目、生津益胃、安神補血、增強免疫力等功效[4-7],是常用的名貴中藥材,也是脈絡(luò)寧、通塞脈片、石斛液光丸等著名中成藥的主要原料之一[8-12]。近年來由于需求量的增加,鼓槌石斛野生資源遭受了過度采挖和生境破壞。目前,生產(chǎn)上使用的鼓槌石斛種苗多數(shù)是通過果莢無菌播種獲得,這種途徑培育的種苗性狀不穩(wěn)定、植株差異明顯,種植生長緩慢,大田種植要5~7 年才開花[13]。鼓槌石斛無性繁殖主要有扦插繁殖、高芽位繁殖、分株繁殖,而扦插繁殖為無性繁殖最常見的一種方法,具有繁殖速度快、插穗易采集、遺傳性狀穩(wěn)定、管理方便等優(yōu)點。扦插育苗是保持母本性狀較為理想的一種繁殖方法,因此,鼓槌石斛采用扦插繁殖勢在必行。據(jù)文獻查閱,關(guān)于不同種石斛扦插育苗技術(shù)研究,如金釵石斛(D. nobileLindl)、齒瓣石斛(D.parishiiRchb. f.)、鐵皮石斛(D. officinaleKimura et Migo)等都有相關(guān)報道[14-16],但鼓槌石斛扦插育苗技術(shù)未見報道。為探討鼓槌石斛扦插育苗技術(shù),提高插穗抽芽率,2017-2018 年筆者選用2~3 年生鼓槌石斛假鱗莖為材料,研究了不同基質(zhì)、不同陰干時間、不同插穗部位和生長調(diào)節(jié)劑對扦插抽芽率的影響,以期為鼓槌石斛的扦插繁殖提供技術(shù)支持。
扦插試驗于2017 年12 月至2018 年2 月在云南省德宏熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所溫室大棚內(nèi)進行。
2017 年12 月,選擇從緬甸引入的鼓槌石斛植株假鱗莖作為試驗材料。鼓槌石斛開花期3 月下旬至5 月上旬,抽芽生長期5-8 月,假鱗莖膨大生長期8-10 月。2018 年2 月,選擇未開花且發(fā)育完整的生長健壯、無病蟲害的2~3 年生鼓槌石斛植株假鱗莖,從母株的根基部往上2~3 cm 處剪斷,作為扦插材料。
1.3.1 扦插容器
選擇長×寬×高為42 cm×42 cm×6 cm 的正方形黑色育苗盤(按株行距6 cm×8 cm,每盤扦插30 株)作為扦插容器。
1.3.2 扦插基質(zhì)
選用樹皮、刨花、鋸木渣等原料,設(shè)5 種基質(zhì)處理:A. 樹皮,B. 刨花,C. 鋸木屑,D.樹皮+刨花(1∶1),E. 樹皮+鋸木屑(1∶1)?;|(zhì)采用1 000倍液多菌靈消毒浸泡4 h,撈出晾干水分備用。
1.3.3 扦插材料處理
用75%酒精先將鋒利小刀消毒,將假鱗莖斜切成上部、中部、下部分別作為插穗。(1)消毒,用1 000 倍液多菌靈消毒浸泡10 min。(2)失水處理。插穗經(jīng)消毒處理后設(shè)3 種陰干時間(3 d、30 d、60 d)晾干水后,置于陰涼暗環(huán)境下保存。(3)生長調(diào)節(jié)劑處理。將失水處理后的插穗浸泡于生長調(diào)節(jié)劑組合溶液中20 min,生長調(diào)節(jié)劑組合為①6-BA 200 mg·L-1,②NAA 200 mg·L-1,③6-BA 200 mg·L-1+NAA 200 mg·L-1,清水作為對照,每種假鱗莖部位3 個處理,共12 個處理,每個處理用1 個育苗盤,每盤30 節(jié)插穗。
1.3.4 扦插插穗
扦插時將處理好的插穗分成上部、中部、下部,按株行距6 cm×8 cm,平鋪于基質(zhì)表面,扦插后及時澆透水,以后每天早晚補充水分,保持扦插基質(zhì)的濕度。
1.3.5 插穗管理
采用全光時控霧插技術(shù)進行水分管理,光照控制3 000~5 000 lx,基質(zhì)濕度70%~80%,隨時觀察基質(zhì)濕度,根據(jù)濕度情況適時澆水。待新芽基部有5 條長3 cm 以上的新根且新芽長至高6 cm 以上,莖膨大呈紡錘形,葉片3~5 片,即可進行移栽。
1.3.6 觀測指標(biāo)
扦插后定期觀察插穗生長情況,觀察記錄抽芽時間,扦插90 d 后統(tǒng)計插穗萌芽數(shù)、抽芽率。
插穗扦插后,不同基質(zhì)與不同陰干時間對鼓槌石斛插穗抽芽率的影響較大。從表1 可以看出,在選擇基質(zhì)方面以樹皮+刨花=1∶1(體積比)的復(fù)合基質(zhì)為好,原因是復(fù)合基質(zhì)可以集合多種基質(zhì)的優(yōu)點,克服單一基質(zhì)的不足,既可達到保水、透氣的良好效果,又能保持插穗的濕度,更能滿足插穗抽芽生長對營養(yǎng)的需要。在陰干時間方面,以陰干失水保存時間30 d 較好,原因是鼓槌石斛莖呈紡錘形,莖粗壯,失水保存時間相對較長,假鮮莖經(jīng)消毒處理后置于陰涼暗環(huán)境下保存30 d 更利于萌發(fā)。D、E 兩種復(fù)合基質(zhì)的組合抽芽率分別達70%和66.7%,對鼓槌石斛扦插的效果優(yōu)于單一基質(zhì),抽芽率高。最適宜鼓槌石斛插穗陰干失水時間30 d 后扦插的是D 復(fù)合基質(zhì),即樹皮+刨花=1∶1。
表1 不同基質(zhì)與插穗陰干時間對鼓槌石斛插穗抽芽率的影響
將插穗的不同部位(上部、中部、下部)分別用不同組合的植物生長調(diào)節(jié)劑浸泡處理,與清水作對照,插入相同的復(fù)合基質(zhì)中,統(tǒng)計各部位插穗的出芽數(shù)和抽芽率。從表2 可以看出,假鱗莖不同部位、不同植物生長調(diào)節(jié)劑對鼓槌石斛插穗抽芽率影響較大,在相同的植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA 200 mg·L-1+NAA 200 mg·L-1組合處理中,不同部位插穗抽芽率大小順序為:上部>中部>下部,其中,上部插穗的抽芽率高達76.7%,中部抽芽率為46.7%,下部抽芽率僅20%。不同植物生長調(diào)節(jié)劑處理的插穗抽芽率比清水處理(CK)的要高,說明不同植物生長調(diào)節(jié)劑對鼓槌石斛插穗出芽具有一定的促進作用。
表2 不同插穗部位與生長調(diào)節(jié)劑對鼓槌石斛插穗抽芽率影響
不同陰干時間與不同基質(zhì)配比對插穗抽芽率影響較大,在本試驗3 種陰干時間和5 種基質(zhì)方案中,陰干時間30 d 更適合插穗扦插,不同基質(zhì)對插穗抽芽率影響較大,復(fù)合基質(zhì)比單一基質(zhì)更適合扦插,復(fù)合基質(zhì)樹皮+刨花=1∶1(體積比)抽芽率高達70%,說明不同插穗基質(zhì)中的水分、溫度、濕度、pH 值、營養(yǎng)成分與扦插抽芽率有直接關(guān)系[17],而復(fù)合基質(zhì)可以集合多種基質(zhì)的優(yōu)點,克服單一基質(zhì)的不足,更能滿足插穗抽芽生長對營養(yǎng)的需要。
在相同植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA 200 mg·L-1+NAA 200 mg·L-1組合處理,不同部位插穗抽芽率大小順序為上部>中部>下部,其中,上部插穗的抽芽率高達76.7%,中部抽芽率為46.7%,下部抽芽率僅為20%,這與敖茂宏[18]報道的結(jié)果一致。原因有可能是新根萌芽率與插穗營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)[19],上部插穗節(jié)間密集、中部插穗粗壯且分生組織旺盛,更容易滿足新芽生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì),抽芽率較高,而下部插穗細(xì)弱,木質(zhì)化程度高,不能滿足新芽生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),抽芽率低。不同植物生長調(diào)節(jié)劑處理的插穗比清水處理(CK)的插穗抽芽率要高,說明不同植物生長調(diào)節(jié)劑對鼓槌石斛插穗萌發(fā)具有一定的促進作用。
本試驗方案所選擇的3 種不同陰干失水時間與5 種不同基質(zhì)配比、3 個不同部位與3 種不同植物生長調(diào)節(jié)劑組合,根據(jù)萌芽數(shù)、抽芽率的綜合指標(biāo)考慮,陰干失水處理時間以30 d 較好;插穗基質(zhì)以復(fù)合基質(zhì)樹皮+刨花=1∶1(體積比)較好;插穗選擇以上部或中部為好,下部插穗因木質(zhì)化程度較高,抽芽率低,可留在母株上作為莖基部萌芽的材料,避免繁殖材料浪費;生長調(diào)節(jié)劑組合6-BA 200 mg·L-1+NAA 200 mg·L-1浸泡時間以20 min 為好。新芽萌發(fā)后,加強水肥管理,待新芽基部有5 條長3 cm 以上新根且新芽長至6 cm 以上,莖膨大呈紡錘形,葉片3~5 片,即可以進行移栽。