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    青脆李采后貯藏過(guò)程糖含量及相關(guān)酶的變化規(guī)律

    2021-11-08 22:04:26曾小峰高倫江曾順德方波曾志紅刁源刁倩趙倩
    南方農(nóng)業(yè)·上旬 2021年10期
    關(guān)鍵詞:貯藏

    曾小峰 高倫江 曾順德 方波 曾志紅 刁源 刁倩 趙倩

    摘 要 為探究青脆李在采后貯藏過(guò)程中糖含量和相關(guān)酶活性的變化規(guī)律,測(cè)定了青脆李可溶性糖含量和糖代謝酶活性,并進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明,青脆李采后蔗糖、果糖、葡萄糖含量均發(fā)生顯著變化(P<0.05),蔗糖磷酸合成酶活性呈先上升后下降的趨勢(shì),蔗糖合成酶活性基本維持微小的下降趨勢(shì),無(wú)顯著變化(P>0.05),酸性轉(zhuǎn)化酶、中性轉(zhuǎn)化酶活性均呈上升趨勢(shì),貯藏結(jié)束時(shí)酶活性分別為貯藏初期的1.62倍、1.21倍。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶活性與蔗糖含量變化呈顯著正相關(guān),與果糖含量呈顯著負(fù)相關(guān);酸性轉(zhuǎn)化酶、中性轉(zhuǎn)化酶活性與蔗糖含量呈顯著負(fù)相關(guān),與果糖含量呈顯著正相關(guān)。青脆李果實(shí)的采后糖代謝中蔗糖主要分解為果糖,且果實(shí)的后熟甜味物質(zhì)主要是果糖。

    關(guān)鍵詞 青脆李;貯藏;糖含量;糖代謝酶活性

    中圖分類號(hào):TS255.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.28.008

    李風(fēng)味鮮美,酸甜可口,其果肉營(yíng)養(yǎng)豐富,與其他果實(shí)相比,李果實(shí)中的膳食纖維含量、多酚類物質(zhì)含量和抗氧化活性能力均相對(duì)較高[1-2],同時(shí),富含多種氨基酸、維生素及礦物質(zhì),具有預(yù)防消化系統(tǒng)疾病、心血管疾病、增強(qiáng)免疫、美容等多種生理活性,有很高的商品價(jià)值。近年來(lái),我國(guó)李產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展,栽培面積和產(chǎn)量持續(xù)上升,種植遍布全國(guó)多個(gè)省市,僅重慶地區(qū)栽培面積就約5.33萬(wàn)公頃,成為重慶市第二大水果,主要集中在巫山、渝北、萬(wàn)州、酉陽(yáng)等地,具有巨大發(fā)展?jié)摿Α?/p>

    青脆李采收正值炎熱夏季,環(huán)境溫度高,果實(shí)代謝旺盛,常溫下3~5 d即失去原有質(zhì)地和風(fēng)味,即果實(shí)發(fā)生后熟軟化,而果實(shí)后熟軟化過(guò)程中,與果實(shí)品質(zhì)相關(guān)的質(zhì)地、風(fēng)味、色澤、糖酸等物質(zhì)也發(fā)生了變化[3-4]。其中,糖類是果實(shí)的重要構(gòu)成物質(zhì),并且糖代謝與果實(shí)的后熟軟化存在顯著的相關(guān)性[5],糖類不僅為果實(shí)提供能量,達(dá)到增強(qiáng)果實(shí)抗逆性的作用,也直接關(guān)系果實(shí)品質(zhì)發(fā)育結(jié)果的優(yōu)劣[6],作為影響果實(shí)風(fēng)味的重要物質(zhì)之一,其組分可直接影響果實(shí)的甜酸味。因此,果實(shí)的內(nèi)在品質(zhì)與商品價(jià)值很大一部分取決于果實(shí)內(nèi)糖類組分[7]。果實(shí)中糖積累和轉(zhuǎn)化又是由多種糖代謝酶共同調(diào)控,研究糖積累機(jī)制必然要先研究糖代謝相關(guān)酶的綜合作用[8-9]。相關(guān)研究表明李是蔗糖代謝型果實(shí),其參與糖代謝酶主要有蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶、轉(zhuǎn)化酶[10]。

    劉碩等分析了57份具有代表性的李屬果實(shí)糖組分及含量,發(fā)現(xiàn)供試不同種/類型的成熟李果實(shí)中可溶性糖既有共性特征又有特異性,李果實(shí)中糖組分及其含量因品種而存在較大差異[11]。本文以重慶青脆李為研究對(duì)象,研究其在低溫貯藏過(guò)程中糖含量及相關(guān)糖代謝酶活性的變化規(guī)律,以期為青脆李的貯藏保鮮技術(shù)提供數(shù)據(jù)參考。

    1? 材料與方法

    1.1? 材料與試劑

    青脆李:將果園采摘下來(lái)的新鮮青脆李果實(shí)盡快放入溫度為(8±0.5) ℃、濕度為90%的冷庫(kù)中,并隨機(jī)取青脆李果實(shí)(約20個(gè))凍入超低溫(-80 ℃)冰箱中待測(cè)。以后每5天取樣1次。在進(jìn)行完最后1次取樣時(shí),對(duì)7次取樣進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。

    乙腈、乙酸鋅、亞鐵氰化鉀、石油醚,均購(gòu)于成都市科龍化工試劑廠;葡萄糖、蔗糖、果糖,美國(guó)Sigma公司;蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶、酸性轉(zhuǎn)化酶、堿性轉(zhuǎn)化酶試劑盒,索萊寶科技有限公司。

    1.2? 儀器與設(shè)備

    高速臺(tái)式離心機(jī)3-18KS型,美國(guó)Sigma公司;高效液相色譜儀-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器2695-2420型,美國(guó)Waters公司;冰箱BCD-649WADV,青島海爾股份有限公司;紫外可見分光光度計(jì)754E型,天津普瑞斯儀器有限公司;高速冷凍離心機(jī)GL-12A型,上海菲恰爾分析儀器有限公司;電子恒溫水浴鍋HH-4型,常州國(guó)華電器有限公司。

    1.3? 方法

    1.3.1? 蔗糖、果糖、葡萄糖含量測(cè)定

    參照GB/5009.8—2016《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測(cè)定》[12]。

    樣品處理:稱取約1.5 g試樣,置于100 mL具塞三角瓶中,準(zhǔn)確加入10 mL萃取溶液(0.02 mol·L-1氫氧化鈉溶液),以180 r·min-1振蕩40 min,定性濾紙過(guò)濾,取2 mL濾液,經(jīng)0.45 ?m水相濾膜過(guò)濾后待分析。

    1.3.2? 酶活性測(cè)定

    蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶、酸性轉(zhuǎn)化酶、堿性轉(zhuǎn)化酶均按試劑盒方法測(cè)定。

    樣品處理:稱取約0.1 g青脆李果肉,加入1 mL提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,8 000 g 4 ℃離心10 min,取上清液,置冰箱中待測(cè)。

    1.3.3? 數(shù)據(jù)處理

    采用Microsoft Excel 2007處理數(shù)據(jù),SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析、數(shù)據(jù)相關(guān)性分析,Origin Pro 8.5進(jìn)行圖像處理;所有實(shí)驗(yàn)均做3次重復(fù)測(cè)定。

    2? 結(jié)果與分析

    2.1? 葡萄糖、果糖、蔗糖含量的變化

    采后果實(shí)中的糖主要由蔗糖、果糖和葡萄糖構(gòu)成,這三種糖具有不同的作用,李果實(shí)中糖組分及其含量因品種而存在較大差異[11]。由圖1可以看出,青脆李貯藏期,蔗糖含量維持在一個(gè)比較高的水平,且含量均高于果糖和葡萄糖含量,在整個(gè)貯藏過(guò)程,蔗糖呈現(xiàn)出先緩慢下降后快速下降最后趨于平穩(wěn)的趨勢(shì),第10天到20天含量急速下降。青脆李采后果實(shí)中果糖、葡萄糖大部分都來(lái)源于蔗糖分解,所以蔗糖在維持生命消耗的同時(shí),還有一部分要拿來(lái)分解為果糖、葡萄糖,因此,在貯藏期間蔗糖含量越來(lái)越低。果糖與葡萄糖的初始含量較蔗糖含量低,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),果糖、葡萄糖在15 d前呈上升趨勢(shì),而后總體呈下降的趨勢(shì),這是由于在貯藏后期,可溶性糖成為呼吸作用主要消耗物質(zhì),為維持果實(shí)的生命代謝,消耗了前期積累的果糖和葡萄糖。

    2.2? 蔗糖磷酸合成酶活性的變化

    蔗糖磷酸合成酶是存在于果實(shí)內(nèi)的可溶性酶,在整個(gè)糖代謝中有著極其重要的作用,在果實(shí)的貯藏期間,其對(duì)蔗糖的合成有很重要的影響,其催化合成蔗糖的過(guò)程不是可逆反應(yīng)。由圖2可以看出,在整個(gè)貯藏過(guò)程,蔗糖磷酸合成酶活性呈先上升后下降的趨勢(shì),在貯藏第10天,酶活性達(dá)到最大值(308.61 μg·min-1·g-1,F(xiàn)W),比貯藏初始時(shí)提升了12.29%,貯藏10 d后,蔗糖磷酸合成酶活性不斷降低,當(dāng)貯藏結(jié)束時(shí),青脆李果實(shí)中蔗糖磷酸合成酶活性為貯藏初期的0.87倍。

    2.3? 蔗糖合成酶活性的變化

    蔗糖合成酶既可以參與蔗糖的合成,還可以參與蔗糖的分解,因此,它是一種具有特殊性質(zhì)的可逆酶[13],在蔗糖的合成與分解中具有特殊的地位。青脆李在貯藏過(guò)程中,蔗糖合成酶活性無(wú)明顯變化,其活性基本維持微小的下降趨勢(shì),當(dāng)貯藏結(jié)束時(shí),青脆李果實(shí)中蔗糖合成酶活性為貯藏初期的0.92倍(見圖2)。

    2.4? 酸性轉(zhuǎn)化酶、中性轉(zhuǎn)化酶活性的變化

    蔗糖轉(zhuǎn)化酶是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一,它不僅可以催化蔗糖不可逆地分解為己糖,還參與組織蔗糖輸入速率的調(diào)節(jié)及同化物的分配,對(duì)果實(shí)獲得作為能量和碳源的果糖、葡萄糖具有重要影響,它又被分為酸性轉(zhuǎn)化酶和中性轉(zhuǎn)化酶兩種。由圖3可以看出,青脆李在貯藏前期(0~15 d),酸性轉(zhuǎn)化酶活性不斷升高,在15 d時(shí)達(dá)到最大值(50.40 μg·min-1·g-1,F(xiàn)W),比貯藏初始時(shí)提高了50.58%,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),酸性轉(zhuǎn)化酶活性呈下降趨勢(shì),當(dāng)貯藏結(jié)束時(shí),青脆李果實(shí)中酸性轉(zhuǎn)化酶活性為貯藏初期的1.62倍,在整個(gè)貯藏過(guò)程。青脆李在貯藏期,中性轉(zhuǎn)化酶活性呈逐漸上升趨勢(shì),貯藏25 d后,呈下降趨勢(shì),當(dāng)貯藏結(jié)束時(shí),中性轉(zhuǎn)化酶活性為貯藏初始的1.21倍。

    2.5? 青脆李糖含量與糖代謝相關(guān)酶活性的相關(guān)性分析

    由表1可以看出,青脆李在整個(gè)貯藏過(guò)程中,果實(shí)可溶性糖含量與糖代謝相關(guān)酶活性具有相關(guān)性。其中,果實(shí)中的蔗糖磷酸合成酶活性、蔗糖合成酶活性與蔗糖含量呈顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.836*、0.941**,而兩種酶活性與果糖、葡萄糖含量的變化均呈負(fù)相關(guān),與果糖含量具有顯著負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為-0.809*、-0.914**,該研究結(jié)果與王君對(duì)采后皇冠梨糖代謝的研究結(jié)果[14]一致。本文結(jié)果蔗糖合成酶與蔗糖的合成相關(guān)性更高,這與已有的文獻(xiàn)報(bào)道略有不同,需要進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

    與前兩種酶相比,果實(shí)中的酸性轉(zhuǎn)化酶活性、中性轉(zhuǎn)化酶活性變化與蔗糖、果糖、葡萄糖相關(guān)性相反,酸性轉(zhuǎn)化酶活性、中性轉(zhuǎn)化酶活性與蔗糖含量呈顯著的負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為-0.771*,-0.905**,與果糖、葡萄糖含量的變化均呈正相關(guān)性,與果糖含量具有顯著正相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)分別為0.963**、0.966*,該研究結(jié)果與戚雯燁等對(duì)毛花獼猴桃‘華特 的研究結(jié)果[15]一致。酸性轉(zhuǎn)化酶、中性轉(zhuǎn)化酶都可以促進(jìn)果糖、葡萄糖含量的增加,貯藏15 d后,果糖含量一直大于葡萄糖含量,這說(shuō)明在青脆李果實(shí)的采后糖代謝中蔗糖主要分解為果糖,并且青脆李果實(shí)后熟作用的甜味物質(zhì)主要是由果糖來(lái)承擔(dān)的。

    3? 討論

    大量實(shí)驗(yàn)證明,蔗糖代謝和相關(guān)代謝酶之間有著密切的聯(lián)系,蔗糖磷酸合成酶可催化合成蔗糖,酸性轉(zhuǎn)化酶可將蔗糖催化分解為葡萄糖和果糖,在獼猴桃、香蕉等水果中得到了證實(shí)。

    青脆李果實(shí)在整個(gè)貯藏期,酸性轉(zhuǎn)化酶和中性轉(zhuǎn)化酶活性呈不斷上升趨勢(shì),貯藏后期有所下降,且酸性轉(zhuǎn)化酶活性強(qiáng)于中性轉(zhuǎn)化酶活性,這與袁揚(yáng)靜等對(duì)香蕉果實(shí)研究的中性轉(zhuǎn)化酶活性高于酸性轉(zhuǎn)化酶活性結(jié)果[16]不一致,與王君等對(duì)皇冠梨的研究結(jié)果[17]一致。蔗糖合成酶在果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程可水解蔗糖,為淀粉合成提供底物,在青脆李的采后貯藏中發(fā)現(xiàn)蔗糖合成酶活性無(wú)顯著性變化,說(shuō)明在采后貯藏過(guò)程,蔗糖合成酶的作用較小。有關(guān)蔗糖合成酶在青脆李果實(shí)采后貯藏過(guò)程中的作用需要進(jìn)一步印證。

    參考文獻(xiàn):

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    (責(zé)任編輯:丁志祥)

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