細針穿刺BRAF單基因檢測在診斷甲狀腺微小乳頭狀癌中的價值分析

王旭紅 趙宏彩

摘要：目的 分析探討細針穿刺BRAF基因檢測技術(shù)在甲狀腺微小乳頭狀癌診斷中的臨床應(yīng)用價值。方法 將本院收治的接受甲狀腺結(jié)節(jié)手術(shù)治療的患者作為研究對象，共計80例，所有患者的結(jié)節(jié)均<1cm。將患者術(shù)后組織病理學(xué)檢查作為參照標準，探討患者接受甲狀腺細針穿刺細胞學(xué)檢測、BRAF單基因檢測對于診斷甲狀腺微小乳頭狀癌的臨床價值。結(jié)果 細針穿刺檢測的診斷準確率為88.75%，BRAF單基因檢測的診斷準確率為92.50%，后者更高;二者聯(lián)合檢測，診斷準確率則達到了98.75%，明顯高于兩種方法單獨檢測。結(jié)論 本研究使用的兩種甲狀腺微小乳頭狀癌診斷方法中，BRAF單基因檢測的診斷效果相對更好，能夠作為診斷此類疾病的重要輔助診斷標準。為了確保較高的診斷準確率，還可以聯(lián)合使用多種診斷方法。

關(guān)鍵詞：細針穿刺;BRAF單基因檢測;甲狀腺微小乳頭狀癌;診斷價值

【中圖分類號】R736.1 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）11-01

甲狀腺癌為發(fā)生率較高的內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤。其中甲狀腺微小乳頭狀癌在甲狀腺癌患者中占有較高的比重，確診患者人數(shù)也不斷增多。這主要與當前比較先進的影像學(xué)診斷技術(shù)有關(guān)。通過對患者實施高頻超聲檢查，能夠通過影像學(xué)征象判斷甲狀腺腫瘤的性質(zhì)。甲狀腺細針穿刺細胞學(xué)檢查安全可靠，但是受到操作者專業(yè)水平、取材質(zhì)量等因素的影響，會影響最終檢測結(jié)果[1]。隨著臨床研究的深入，發(fā)現(xiàn)BRAF基因檢測在該疾病的診斷中也有較高的價值。本文主要對比了細針穿刺細胞學(xué)檢測、BRAF單基因檢測的臨床診斷價值。

1資料與方法

1.1一般資料

將2020年3月至2021年3月在本院接受診斷和治療的80例（80枚結(jié)節(jié)）甲狀腺微小乳頭狀癌患者納入研究，結(jié)節(jié)直徑均<1cm。其中男性患者共計20例，女性患者60例，年齡范圍為20-73歲，均值為（46.22±6.78）歲。

1.2方法

所有患者均接受細針穿刺細胞學(xué)、BRAF基因突變檢測，詳情如下：（1）細針穿刺檢測方法：讓患者仰臥在檢查床上，對操作位置的皮膚做好消毒鋪巾準備之后，使用超聲儀進行甲狀腺結(jié)節(jié)的探查，超聲引導(dǎo)下將25G針頭穿刺結(jié)節(jié)之后，在無負壓狀態(tài)下進行10-15次的反復(fù)提插，然后用注射器針筒吸空氣到4-5ml刻度的位置，連接獲取標本的針頭，通過推氣使標本置于載玻片上，用95%乙醇進行固定，實施HE染色。采取以上方法繼續(xù)將標本置入盛有2ml生理鹽水的離心管，放置于冰箱4℃環(huán)境下[2]。細胞病理學(xué)醫(yī)生對涂片進行鏡下觀察、判讀，若判讀結(jié)果為惡性腫瘤、可疑惡性腫瘤，認定為細胞學(xué)檢測陽性，其余情況為陰性。（2）BRAF單基因檢測：將冰箱保存的細胞學(xué)標本在3000轉(zhuǎn)速下進行10min離心處理，將上清液去除?；驒z測采取突變擴增阻滯系統(tǒng)法，試劑盒為人類BRAF基因V600E突變檢測試劑盒，上游引物、下游引物分別為5-TCA TAA TGC TTG CTC TGA TAG GA3，5-GGC CAA AAA TTT AATCAG TGG A-3，通過常規(guī)反轉(zhuǎn)錄方法獲取cDNA。將混合液進行解凍之后，和Taq酶、待測DNA樣品按照20∶0.25∶5進行配置并混勻，然后將其放入到PCR儀擴增。60℃狀態(tài)下進行HEX信號、FAM信號的收集，若結(jié)果顯示Ct值<28，表示基因突變檢測結(jié)果為陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理工具使用SPSS18.0軟件，其中（）表示計量資料，檢驗方式為t檢驗，（%）表示計數(shù)資料，檢驗方式為X2檢驗，P<0.05代表組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

細針穿刺檢測的診斷準確率為88.75%（71/80），BRAF單基因檢測為92.50%（74/80），二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。另外，二者聯(lián)合檢測準確率為98.75%，顯著高于兩種方法單獨檢測（P<0.05）。

3討論

近年來報告的甲狀腺癌診斷病例不斷增多，而在這些新增的患者中，約有半數(shù)屬于甲狀腺微小乳頭狀癌。由于結(jié)節(jié)體積小，給臨床鑒別診斷帶來了一定難度。當前的甲狀腺微小乳頭狀癌診斷措施中，超聲引導(dǎo)下的細針穿刺細胞學(xué)檢查比較常用，這種方法的操作簡便，且可以保障安全，在沒有其他干擾因素的情況下，檢測準確率也較高。但是受到操作者、取材質(zhì)量等因素的影響，實際操作中可能會出現(xiàn)誤診現(xiàn)象。隨著臨床診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，基因檢測技術(shù)在臨床診斷中發(fā)揮了越來越重要的作用。本研究中，BRAF基因突變檢測比細針穿刺檢測的準確率更高。而為了保證較高的準確率，也可以二者聯(lián)合使用，以減少誤診率。

參考文獻：

[1]高秋霞，張國輝，李賢蘭，等. 超聲引導(dǎo)下細胞穿刺標本BRAF～（V600E）基因檢測在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的意義[J]. 中國超聲醫(yī)學(xué)雜志，2020，36（10）：879-882.

[2]鄭海紅，謝伯劍，朱優(yōu)優(yōu)，等. BRAF～（V600E）基因檢測在術(shù)前輔助細針穿刺細胞學(xué)診斷甲狀腺微小乳頭狀癌中的意義[J]. 實用腫瘤雜志，2020，35（03）：228-230.

2017年省衛(wèi)計委科研課題：

BRAFV600E基因突變指導(dǎo)cN0甲狀腺乳頭狀微小癌中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)清掃的應(yīng)用研究 課題編號2017070

作者簡介：王旭紅（1972-），男，2004年在山西省腫瘤醫(yī)院頭頸外科工作，1997年畢業(yè)于新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院，現(xiàn)任山西省腫瘤醫(yī)院頭頸科外科主任醫(yī)師。

通訊作者：趙宏彩，與第一作者為同一單位，現(xiàn)任山西省腫瘤醫(yī)院頭頸外科主任護師。