• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    花生果腐病拮抗菌貝萊斯芽胞桿菌Hsg1949鑒定與防效

    2021-10-22 09:32:52曹偉平鹿秀云臧衛(wèi)平
    中國生物防治學(xué)報 2021年4期
    關(guān)鍵詞:花生果芽胞孢菌

    曹偉平,陸 晴,鹿秀云,臧衛(wèi)平,宋 健*

    (1.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所/河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心/農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,保定 071000;2.唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,唐山 063001;3.保定市龍?zhí)豆珗@管理處,保定 071000)

    果腐病是花生生產(chǎn)上最為嚴(yán)重的病害之一,主要癥狀表現(xiàn)為花生莢果腐爛,感病較輕的莢果為褐色或黑色,果仁小而硬實(shí),嚴(yán)重的整個莢果果皮和果仁均腐爛,染病地塊輕者減產(chǎn)20%,嚴(yán)重的減產(chǎn)可達(dá)50%以上,對花生產(chǎn)量和品質(zhì)構(gòu)成了極為嚴(yán)重的威脅[1]。在生產(chǎn)上,抗病品種選育[2]、農(nóng)藝措施[3]和化學(xué)農(nóng)藥防治[4]是目前生產(chǎn)上防控花生果腐病最常用的措施,但目前花生抗性品種有限,同時由于果腐病病原體的宿主范圍較廣[5,6],土壤傳播特性也加重了藥劑防治的難度;長期使用化學(xué)殺菌劑也使得花生果腐病容易產(chǎn)生抗性,同時對土壤微生態(tài)環(huán)境容易產(chǎn)生不良影響[7]。利用拮抗微生物防治農(nóng)作物病害是一種有效且綠色環(huán)保的防治途徑,近年來已得到廣泛的重視和應(yīng)用,尋找一種安全、環(huán)境友好并具有良好防治效果的新型生防菌對花生產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

    利用芽胞桿菌防治植物病害是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上最常用的生物防治技術(shù)之一[8]。芽胞桿菌 Bacillus種類和數(shù)量眾多,抗逆性強(qiáng),繁殖速度快,大多芽胞桿菌可在植物體內(nèi)外定殖,而且芽胞桿菌發(fā)酵工藝成熟,便于生產(chǎn)應(yīng)用。芽胞桿菌能產(chǎn)生多種不同結(jié)構(gòu)的抗菌物質(zhì),如脂肽、聚酮化合物、細(xì)菌素和鐵載體等[9],具有廣譜的抑菌活性,同時對生態(tài)環(huán)境無污染,可以與環(huán)境中的其他微生物互作,誘導(dǎo)植株產(chǎn)生抗病性。趙昱榕等[10]在黃瓜植株中分離到一株對黃瓜棒孢葉斑病具有明顯拮抗作用的貝萊斯芽胞桿菌 Bacillus velezensis ZF2,防效達(dá)90.81%,同時對多種植物病原菌具有顯著拮抗作用。沙月霞等[11,12]應(yīng)用短小芽胞桿菌B.pumilus S09、解淀粉芽胞桿菌B amyloliquefaciens S170、貝萊斯芽孢桿菌E69和枯草芽胞桿菌B.subtilis E66防治稻瘟病,田間防治效果與化學(xué)農(nóng)藥防效相當(dāng)??莶菅堪麠U菌B1409對番茄早疫病和辣椒疫霉病的預(yù)防效果良好,同時可促進(jìn)番茄和辣椒植株生長,增強(qiáng)植物體內(nèi)超氧化物歧化酶、過氧化物酶和過氧化氫酶的活性[13]。但是將生物防治應(yīng)用于花生果腐病的研究尚處于探索階段,孫偉明等[14]報道從花生根際土壤中分離獲得了2株解淀粉芽胞桿菌,可有效降低侵脈新赤殼菌Neocosmospora sp.引起的花生果腐病的發(fā)病指數(shù)。

    生防菌與病原菌之間有相同的生態(tài)位,具有共存、相隨關(guān)系,在有病原菌存在的土壤中,篩選出較強(qiáng)生防作用的菌株可能性較大[15,16]。基于此,我們在河北省多個花生主產(chǎn)區(qū)采集了莢果感染果腐病的花生根際土壤,通過平板對峙法從分離的細(xì)菌中篩選出一株芽胞桿菌Hsg1949,其菌懸液和無菌濾液對花生果腐病主要病原菌鐮孢菌Fusarium spp.的生長均有拮抗活性,結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察、Biolog微生物自動鑒定系統(tǒng)及16S rDNA和gyrA序列分析對其進(jìn)行分類鑒定,測試了該菌株對其他4種植物病原菌的拮抗作用,田間小區(qū)試驗(yàn)評價了菌株Hsg1949對花生果腐病的防治效果,以期為花生果腐病的有效防治提供新的綠色植保資源。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    1.1.1 供試菌株 果腐病供試菌種:鐮孢菌菌株LX、DM、XT分離自感病花生莢果,采用直接挑取分離法[17],并通過柯赫氏法則進(jìn)行致病性回接試驗(yàn)和菌種鑒定。其他供試病原菌:花生白絹病菌 Sclerotium rolfsii、棉花立枯病菌Rhizoctonia solani、棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum和棉花黃萎病菌Verticillium dahliae均由河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所分離提供。

    1.1.2 供試培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA):馬鈴薯200 g/L,葡萄糖20 g/L,瓊脂粉15 g/L,pH自然。LB液體培養(yǎng)基:蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,NaCl 10 g/L,pH 7.0。LB固體培養(yǎng)基:蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,NaCl 10 g/L,瓊脂粉15 g/L。

    1.2 拮抗菌株的分離篩選

    1.2.1 細(xì)菌分離 土樣采集自河北邯鄲、石家莊、保定、秦皇島、唐山等縣市花生主產(chǎn)區(qū)的花生根際土,上述采集地點(diǎn)花生果腐病平均發(fā)病率15%~30%。稱取1 g土樣放到裝有99 mL無菌水的滅菌三角瓶中,170 r/min振蕩培養(yǎng)30 min,靜置30 min,取上清液10 mL加入50 mL滅菌離心管中,然后在80 ℃恒溫水浴30 min,取1 mL加無菌水9 mL,制成10 mL 10-3倍土壤微生物懸液,取兩種濃度的微生物懸液100 μL分別涂布于LB培養(yǎng)基平板上,每個濃度重復(fù)3次,在30 ℃恒溫培養(yǎng)3~5 d,待平板長出菌落后,根據(jù)《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》[18]中芽胞桿菌的形態(tài)特征進(jìn)行菌落篩選,鏡檢后采用劃線分離純化,直至得到單菌落的純培養(yǎng)物。

    1.2.2 拮抗菌初篩 采用平板對峙法[19]對1.2.1中單菌落分離株進(jìn)行拮抗活性篩選。在PDA培養(yǎng)基平板(Φ=9 cm)中心接入直徑為5 mm活化的果腐病菌餅,然后在距中心30 mm處4個方向分別接種不同分離株,以不接種分離株的平板為對照,每個處理 3次重復(fù)。28 ℃下恒溫培養(yǎng),待空白對照即將長滿整個培養(yǎng)皿時,觀察抑菌效果,測量抑菌帶(Hsg1949菌落邊緣和和鐮孢菌邊緣之間的透明帶距離)大小。

    1.2.3 拮抗菌的復(fù)篩 選取抑菌圈寬度大于6 mm的分離株,利用平板對峙培養(yǎng)方法對其進(jìn)行復(fù)篩,每處理重復(fù) 3次,以接無菌水為對照,28 ℃下恒溫培養(yǎng)。采用十字交叉法測量對照組直徑和處理組直徑,采用菌絲生長速率法[20]計算抑菌率。 抑菌率(%)=[(對照菌落生長量-處理菌落生長量)/對照菌落生長量]×100%,生長量(mm)=菌落平均直徑-菌餅直徑。

    1.3 菌株Hsg1949鑒定

    1.3.1 形態(tài)特征及生物化學(xué)特性分析 參照《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》對上述分離篩選的高效生防菌株Hsg1949進(jìn)行形態(tài)特征鑒定。應(yīng)用Biolog微生物自動分析系統(tǒng)(美國Biolog公司)對菌株Hsg1949進(jìn)行71種碳源利用測試和23種化學(xué)敏感性測試[10,21],挑取菌株Hsg1949單菌落接種在Biolog推薦的BUG培養(yǎng)基上,33 ℃活化培養(yǎng)24 h,然后在B接種液中制成菌懸液,用Biolog 濁度儀將菌懸液濃度調(diào)至95%~98% T(T為所測得的透光率),將調(diào)好的菌懸液倒入V型加樣水槽中,用8通道電動移液器按每孔100 μL的量將菌懸液加入96微孔板的所有孔中,將微孔板放入OmniLog的孵育讀數(shù)儀中,33 ℃培養(yǎng)24 h后讀板,根據(jù)Biolog微生物鑒定系統(tǒng)給出的相似值判斷菌株Hsg1949的分類地位。

    1.3.2 分子生物學(xué)鑒定 依據(jù)細(xì)菌DNA提取試劑盒(AXYGEN)步驟提取菌株Hsg1949的DNA,以細(xì)菌 16S rDNA 基因的特異引物 27F(5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和 1492R(5′- TACGGCTACCTTG TTACGACTT-3′)以及細(xì)菌持家基因 gyrA 的引物 GyrA-F(5′-CAGTCAGGAAATGCGTACGTCCTT-3′)和GyrA-R(5′-CAAGGTAATGCTCCAGGCATTGCT-3′)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系50 μL,反應(yīng)體系為:基因組 DNA 2 μL,10×PCR buffer 5.0 μL,27F 引物 2 μL,1492R 引物 2 μL,dNTPs 4 μL,Taq酶(5 U/μL)0.5 μL,ddH2O 34.5 μL。反應(yīng)條件:94 ℃預(yù)變性 3 min;94 ℃變性 30 s,54 ℃退火 30 s,72 ℃延伸1.5 min,循環(huán)30次;72 ℃10 min。PCR產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測,送上海派森諾基因科技有限公司測序,利用NCBI網(wǎng)站的BLAST功能對所測的16S rDNA和gyrA序列進(jìn)行同源性比對,確定親緣關(guān)系,利用MEGA6.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

    1.4 拮抗菌株繼代培養(yǎng)穩(wěn)定性

    將拮抗作用最強(qiáng)的菌株Hsg1949在LB培養(yǎng)基上采用劃線法進(jìn)行傳代培養(yǎng),培養(yǎng)40代后,采用平板對峙法測定菌株Hsg1949對花生果腐病鐮孢菌的拮抗效果,測量菌落直徑大小,采用菌絲生長速率法計算抑菌率,方法同1.2.3。

    1.5 抑菌活性物質(zhì)的穩(wěn)定性

    將菌株Hsg1949 接種于LB培養(yǎng)液中,30 ℃搖床(180 r/min)培養(yǎng)40 h,得到發(fā)酵液,將發(fā)酵液10000 r/min離心10 min,收集上清并用0.22 μm微孔濾膜過濾,獲得無菌發(fā)酵上清液,取無菌發(fā)酵上清液分別在40 ℃、60 ℃、80 ℃、100 ℃和120 ℃處理30 min,冷卻至室溫后,將無菌上清液和PDA培養(yǎng)基按1:4(v/v)混勻倒平板,于平板中央接直徑為5 mm的果腐病菌餅,以未經(jīng)高溫處理的無菌發(fā)酵上清液為對照,每處理3個重復(fù),27 ℃培養(yǎng)7 d,采用菌絲生長速率法計算抑菌率,方法同1.2.3。

    在無菌發(fā)酵液原始pH值的基礎(chǔ)上,分別用1 mol/L的HCl和1 mol/L NaOH將無菌發(fā)酵液pH分別調(diào)至 3、5、7、9和11,靜置3 h,然后再調(diào)到pH 7,將處理后的上清液用0.22 μm微孔濾膜過濾,按1:4(v/v)與PDA培養(yǎng)基混勻倒平板,以未處理的無菌發(fā)酵上清液為對照,每處理3個重復(fù),27 ℃培養(yǎng)7 d,采用菌絲生長速率法計算抑菌率,方法同1.2.3。

    1.6 菌株Hsg1949抑菌譜測定

    采用平板對峙法,以花生白絹病菌、棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黃萎病菌4株病原菌為指示菌,測定菌株Hsg1949的抑菌活性。用打孔器取直徑5 mm活化的供試病原菌菌塊置于PDA平板中央,在距中心30 mm處4個方向分別接種菌株Hsg1949,以不接種菌株Hsg1949的平板為對照,每處理重復(fù)3次,采用菌絲生長速率法計算抑制率,方法同1.2.3。

    1.7 菌株Hsg1949 對花生果腐病的田間防效試驗(yàn)

    對花生果腐病的田間小區(qū)試驗(yàn)在河北省灤州市百信花生種植專業(yè)合作社進(jìn)行,該合作社常年種植花生,往年花生果腐病發(fā)病率為10%~40%,土質(zhì)為沙壤土。2020年5月4日進(jìn)行播種,花生品種為冀花11(由灤州市百信花生種植專業(yè)合作社提供),田間采用常規(guī)農(nóng)事管理,于花生下針期(7月2日)和莢果初期(7月23日)在莖基部噴淋施藥[22,23]。菌株Hsg1949濃度設(shè)定為1×108、2×108、5×108cfu/mL[10,24];設(shè)定化學(xué)農(nóng)藥50%多菌靈(河北冠龍農(nóng)業(yè)有限公司)(施用量為100 g/畝)和清水對照,各處理藥液用水量均為60 kg/畝,每個處理3次重復(fù),每個重復(fù)20 m2。將相應(yīng)劑量的菌(藥)劑按照設(shè)定濃度分別放入15 L背負(fù)式手動噴霧器中,加水配成菌(藥)液,去掉噴頭,對準(zhǔn)花生莖基部逐一噴淋,每穴噴10~15 mL。噴淋結(jié)束后,立即用大水澆灌試驗(yàn)小區(qū)。于花生收獲時調(diào)查花生果腐病的發(fā)病情況。每處理采用5點(diǎn)取樣法,每點(diǎn)調(diào)查1 m2,記錄總莢果數(shù)和被害莢果數(shù)。莢果發(fā)病率(%)=被害莢果數(shù)/總莢果數(shù)×100,防治效果(%)=(對照區(qū)莢果發(fā)病率-處理區(qū)莢果發(fā)病率)/對照區(qū)莢果發(fā)病率×100。

    1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

    采用Excel計算平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,采用SPSS18.0軟件中的Duncan’s新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 拮抗菌株的分離篩選

    從1523份土樣中共分離獲得芽胞桿菌232株,初篩結(jié)果表明有17株對花生果腐病菌鐮孢菌具有拮抗作用。復(fù)篩結(jié)果顯示其中4個芽胞桿菌分離株對3株鐮孢菌具有穩(wěn)定的抑菌活性,以Hsg1949的抑菌活性最強(qiáng),抑菌率可達(dá)77.4%(表1),選擇Hsg1949開展后續(xù)研究。

    初始菌株Hsg1949對3株鐮孢菌XT、LX和DM的抑制率分別為77.4%、69.3%和62.4%;抑菌帶寬1.2~8.2 mm;繼代培養(yǎng)40代抑菌結(jié)果顯示,菌株Hsg1949表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性,不易發(fā)生變異(表1)。

    2.2 菌株Hsg1949的鑒定

    2.2.1 菌株Hsg1949形態(tài)學(xué)和Biolog生物化學(xué)鑒定 28 ℃恒溫培養(yǎng)24 h,菌株Hsg1949在LB固體培養(yǎng)基上的菌落為圓形或近圓形,邊緣嚙蝕狀,菌落隆起呈饅頭狀,表面濕潤;培養(yǎng)后期,表面干燥有皺褶,顏色為乳白色,無光澤不透明,有黏性,與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密(圖1A),革蘭氏染色為陽性,短桿狀,能夠產(chǎn)生芽胞,芽胞為橢圓形(圖1B)。采用GenIII型96孔板及Biolog自動微生物鑒定系統(tǒng)對Hsg1949的94種(71種碳源利用和23種化學(xué)敏感性)表型進(jìn)行測試(表2)結(jié)果表明,菌株Hsg1949可以利用α-D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖、1%乳酸鈉、D-山梨醇、D-甘露醇、L-谷氨酸、L-天冬氨酸、L-丙氨酸;不能利用丙三醇、D-絲氨酸、D-天冬氨酸、萬古霉素、D-松二糖、水蘇糖、α-D-乳糖、N-Acetyl-β-D甘露糖胺、D-半乳糖、D-海藻糖、肌苷、D-阿拉伯醇,與已報道的貝萊斯芽胞桿菌特征一致[10,25]。

    圖1 菌株Hsg1949形態(tài)學(xué)特征Fig.1 Morphological characteristics of strain Hsg1949

    表2 菌株Hsg1949生理生化特征測定Table 2 Characters of physiology and biochemistry of strain Hsg1949

    2.2.2 分子生物學(xué)鑒定結(jié)果 為了進(jìn)一步明確菌株Hsg1949的分類地位,將 Hsg1949的16S rDNA序列在NCBI中進(jìn)行BLAST分析,結(jié)果顯示,菌株Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌FJ17-4(MT103089.1)、枯草芽胞桿菌ME-1(JQ900635.1)、解淀粉芽胞桿菌 SB1(MF171193.1)、蠟樣芽胞桿菌B.cereus TJ(JX506728.1)、暹羅芽胞桿菌B.siamensis ICMP 20282(MF682396.1)等菌株的16S rDNA同源性達(dá)到99.79%,系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、解淀粉芽胞桿菌處于同一分支(圖2A)。進(jìn)一步利用gyrA基因序列在NCBI中進(jìn)行Blast分析,結(jié)果顯示Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌NRRL B-41580的gyrA基因序列同源性最高,達(dá)到99.40%。系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果(圖2B)顯示,菌株Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌處于同一個分支,綜合上述結(jié)果,確定菌株Hsg1949為貝萊斯芽胞桿菌。

    2.3 菌株Hsg1949發(fā)酵上清液抑菌活性及穩(wěn)定性

    菌株Hsg1949發(fā)酵上清液具有良好的熱穩(wěn)定性(表3),與常溫(25 ℃)相比,上清液經(jīng)40 ℃~100℃處理對3株鐮孢菌分離株的拮抗活性無顯著影響(P>0.05),120 ℃高溫處理后,上清液的抑菌活性顯著下降(P<0.05),對3株鐮孢菌分離株的抑制率分別為0.90%、4.24%和10.56%,基本失去對鐮孢菌的抑制活性。酸性環(huán)境(pH 3.0~5.0)和中性環(huán)境(pH 7.0)未降低菌株Hsg1949發(fā)酵上清液對鐮孢菌的抑菌活性,堿性環(huán)境(pH 11)顯著降低了Hsg1949上清液的抑菌活性(表4)。

    表4 菌株Hsg1949發(fā)酵濾液pH穩(wěn)定性檢測結(jié)果Table 4 The pH stability assay results of strain Hsg1949 cell-free fermentation supernatant

    2.4 菌株Hsg1949對4種植物病原菌的抑制作用

    抑菌譜測定結(jié)果(圖3,表5)表明,菌株Hsg1949對白絹病、黃萎病、枯萎病和立枯病4種土傳病原真菌有較好的抑制效果,抑菌率為 54.4%~79.3%,其中對黃萎病病菌的抑制活性明顯,抑菌率達(dá)到了79.3%。

    表5 菌株Hsg1949對植物病原菌抑制活性Table 5 Inhibition of pathogenic fungi by strain Hsg1949

    2.5 菌株Hsg1949對花生果腐病的田間防效

    田間小區(qū)防病試驗(yàn)表明,菌株 Hsg1949對花生果腐病具有良好的防治效果(表 6)。Hsg1949菌劑1×108~5×108cfu/mL處理和多菌靈處理的花生莢果發(fā)病率差異不顯著(P>0.05),均顯著低于清水對照(P<0.05);Hsg1949菌劑2×108、5×108cfu/mL處理對花生果腐病的防效分別為66.54%和71.27%,與化學(xué)藥劑多菌靈防效(75.11%)相當(dāng),菌劑1×108cfu/mL處理的防效(56.35%)顯著低于多菌靈(75.11%)(P<0.05)。

    表6 不同菌劑對花生果腐病的防治效果Table 6 Control efficiency of the strain Hsg1949 against pod rot of peanut

    3 討論

    國內(nèi)外研究表明,花生果腐病由鐮孢菌屬[26]、腐霉屬Pythium spp.[27]、絲核菌屬Rhizoctonia spp.[28]、麗赤殼屬Calonectria spp.[29]和侵脈新赤殼菌[14]等多種病原引起,不同區(qū)域的主要致病菌有所不同[30]。目前我國山東[31]、河北[32]、海南[33]、河南[34]等地均有花生果腐病病菌分離鑒定的相關(guān)報道,表明我國花生果腐病的主要病原菌為鐮孢菌。本研究在多年種植且果腐病發(fā)生較為嚴(yán)重的花生田根際土中分離到一株對花生果腐病原菌鐮孢菌具有較明顯拮抗作用的芽胞桿菌Hsg1949。根據(jù)菌落形態(tài)特征、Biolog生理生化檢測及利用16S rDNA和gryA序列分析,鑒定菌株Hsg1949為貝萊斯芽胞桿菌。

    貝萊斯芽胞桿菌是芽胞桿菌屬的一個新種,與枯草芽胞桿菌和解淀粉芽胞桿菌親緣關(guān)系密切,最早報道于2005年[35],近年來已用于防治水稻稻瘟病[11]、棉花黃萎病[36]、水稻條斑病[18]、甘蔗赤霉病[37]、生菜軟腐病菌核病[38]、煙草赤星病[39]、番茄青枯病和香蕉枯萎病[40]、黃瓜棒孢葉斑病[10]和桑斷枝爛葉病菌[41]、羅非魚源無乳鏈球菌[42]等幾十種動植物病害的生防研究,表現(xiàn)出良好的防效,具有成為新型生防微生物農(nóng)藥的潛力。近年來,芽胞桿菌的生防機(jī)理成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn),拮抗蛋白和酯肽類抗生素等次生代謝產(chǎn)物可以使拮抗菌株對多種病原菌具有抑制作用[43,44],代謝產(chǎn)物中含有的蛋白酶和纖維素酶對病原細(xì)菌也表現(xiàn)出拮抗作用[10]。菌株Hsg1949次生代謝物拮抗作用穩(wěn)定,下一步有必要定性測定其代謝產(chǎn)物中的抗菌物質(zhì),明確其致病機(jī)制。

    生防菌株的防治效果與植物種類、土壤性質(zhì)及農(nóng)事管理等因素密不可分,不同的菌株對特定的土壤環(huán)境存在著不同的適應(yīng)力。供試菌株對目標(biāo)病原菌抑菌圈的大小并不能代表田間的防治效果,要想達(dá)到較好的田間防治效果,還需室內(nèi)篩選與溫室防效測定相結(jié)合[45]。本研究結(jié)果與這一觀點(diǎn)相吻合,相對于前人研究中芽胞桿菌對鐮孢菌等病原菌的抑菌帶,Hsg1949對鐮孢菌的抑菌帶較小,低于10 mm,但對病原菌的抑菌率達(dá)到了70%左右,田間小區(qū)試驗(yàn)表明Hsg1949對花生果腐病表現(xiàn)出較好的防治效果,與多菌靈的防治效果相當(dāng)。Hsg1949對花生白絹病等其他土傳病原真菌也具有較明顯的抗菌活性,可為花生土傳病害生防菌劑的開發(fā)應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。

    猜你喜歡
    花生果芽胞孢菌
    自然干燥法光照對花生果中黃曲霉毒素和酸價的影響
    單細(xì)胞分析研究二氧化氯對殺蚊細(xì)菌球形賴氨酸芽胞桿菌芽胞的影響
    一種簡單高效的芽胞純化方法及其效果評價
    高壓熱殺菌技術(shù)滅活細(xì)菌芽胞機(jī)理研究進(jìn)展
    鐮孢菌與大豆根腐病研究進(jìn)展
    湖北省蔬菜根際土壤中的鐮孢菌分布特征
    四川省套作玉米莖腐病致病鐮孢菌的分離與鑒定
    小松鼠找花生果教學(xué)設(shè)計
    尖鐮孢菌細(xì)胞色素P45055A1與NO相互作用的熒光光譜法研究
    我的萌寵
    露出奶头的视频| xxx96com| 日韩欧美免费精品| 国产成年人精品一区二区| 黄色女人牲交| av国产免费在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 国产精品99久久99久久久不卡| 91九色精品人成在线观看| 99热这里只有是精品50| 国产精品永久免费网站| 少妇的丰满在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 精品久久久久久成人av| 黄色丝袜av网址大全| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 成年女人毛片免费观看观看9| 热99re8久久精品国产| 欧美成人一区二区免费高清观看| 91久久精品国产一区二区成人 | 日韩成人在线观看一区二区三区| 在线观看av片永久免费下载| 久久精品91蜜桃| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲av熟女| 欧美性感艳星| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产成人福利小说| 成人特级av手机在线观看| 国产精品三级大全| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 天天一区二区日本电影三级| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 岛国在线观看网站| 亚洲色图av天堂| 白带黄色成豆腐渣| 久久香蕉精品热| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲电影在线观看av| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 精品人妻偷拍中文字幕| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 色在线成人网| 午夜影院日韩av| 亚洲精品成人久久久久久| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 在线观看av片永久免费下载| 国产三级中文精品| 欧美又色又爽又黄视频| 国产野战对白在线观看| 久久精品人妻少妇| 久久国产乱子伦精品免费另类| 少妇丰满av| 色综合亚洲欧美另类图片| 在线观看一区二区三区| 欧美午夜高清在线| 天堂动漫精品| 国产黄a三级三级三级人| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 午夜福利免费观看在线| 超碰av人人做人人爽久久 | 亚洲av电影不卡..在线观看| 欧美中文综合在线视频| 精品久久久久久久久久免费视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 色综合婷婷激情| 国产精品乱码一区二三区的特点| av福利片在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 少妇人妻一区二区三区视频| 五月伊人婷婷丁香| 男人舔女人下体高潮全视频| 88av欧美| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 嫩草影院入口| 日本a在线网址| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| tocl精华| 黄色片一级片一级黄色片| www.熟女人妻精品国产| 丁香六月欧美| 亚洲av五月六月丁香网| 全区人妻精品视频| 嫩草影视91久久| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产欧美日韩精品亚洲av| 最近最新中文字幕大全免费视频| 制服丝袜大香蕉在线| 老鸭窝网址在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一级毛片女人18水好多| 国产伦一二天堂av在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 一进一出抽搐gif免费好疼| av中文乱码字幕在线| 高清日韩中文字幕在线| 麻豆国产97在线/欧美| 超碰av人人做人人爽久久 | 午夜福利成人在线免费观看| 一本精品99久久精品77| 国产 一区 欧美 日韩| 国产精品电影一区二区三区| 国产毛片a区久久久久| 国内精品美女久久久久久| 在线观看一区二区三区| 国产一区二区激情短视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 最近在线观看免费完整版| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 日韩欧美在线乱码| 国产精品亚洲一级av第二区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美在线黄色| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产伦人伦偷精品视频| a在线观看视频网站| 欧美+日韩+精品| 国产av一区在线观看免费| 特级一级黄色大片| 在线观看av片永久免费下载| 美女黄网站色视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产色爽女视频免费观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 婷婷六月久久综合丁香| 午夜福利免费观看在线| 国产精华一区二区三区| 欧美极品一区二区三区四区| 91在线观看av| 我的老师免费观看完整版| 午夜免费观看网址| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 禁无遮挡网站| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲最大成人中文| 人人妻人人澡欧美一区二区| 90打野战视频偷拍视频| 成人性生交大片免费视频hd| 国产伦一二天堂av在线观看| 免费av毛片视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 成年人黄色毛片网站| 成人精品一区二区免费| 国产一区在线观看成人免费| 美女cb高潮喷水在线观看| 午夜视频国产福利| 久久99热这里只有精品18| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美乱色亚洲激情| 五月玫瑰六月丁香| 人妻久久中文字幕网| 99久久九九国产精品国产免费| 免费av毛片视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 日韩国内少妇激情av| 国产精品久久久久久精品电影| 国产欧美日韩一区二区精品| 免费看光身美女| 18禁国产床啪视频网站| e午夜精品久久久久久久| 国产黄片美女视频| 露出奶头的视频| 欧美中文综合在线视频| 日韩欧美 国产精品| 俄罗斯特黄特色一大片| 午夜精品一区二区三区免费看| 男女午夜视频在线观看| 毛片女人毛片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久久成人免费电影| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 99热只有精品国产| 欧美黄色淫秽网站| 我的老师免费观看完整版| 观看美女的网站| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品乱码一区二三区的特点| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美黑人巨大hd| e午夜精品久久久久久久| 成人精品一区二区免费| 日韩欧美 国产精品| 亚洲内射少妇av| 午夜福利视频1000在线观看| 久久伊人香网站| 99久久九九国产精品国产免费| 欧美日本亚洲视频在线播放| 免费大片18禁| 黄色片一级片一级黄色片| 窝窝影院91人妻| 全区人妻精品视频| 深夜精品福利| 男人的好看免费观看在线视频| 精品久久久久久久久久久久久| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲精品色激情综合| 国产视频内射| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 在线播放无遮挡| 亚洲激情在线av| 亚洲欧美激情综合另类| 不卡一级毛片| 亚洲五月天丁香| 亚洲国产欧美网| www.色视频.com| 99久久精品国产亚洲精品| av天堂中文字幕网| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 一个人免费在线观看电影| 亚洲在线观看片| 91av网一区二区| 99精品久久久久人妻精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 18禁在线播放成人免费| 国产在线精品亚洲第一网站| 91av网一区二区| 一级作爱视频免费观看| 欧美日韩精品网址| 一夜夜www| 看免费av毛片| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 精品不卡国产一区二区三区| 免费观看人在逋| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 搡老岳熟女国产| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 欧美激情在线99| 99久久精品一区二区三区| 99久久精品热视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 午夜免费成人在线视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 老司机在亚洲福利影院| 精品免费久久久久久久清纯| 久久久久久久久中文| 黄片小视频在线播放| 久久草成人影院| 国产爱豆传媒在线观看| 久久九九热精品免费| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 免费观看人在逋| 国产激情欧美一区二区| 天堂动漫精品| 国产色爽女视频免费观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 可以在线观看的亚洲视频| 小说图片视频综合网站| 免费看美女性在线毛片视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲精品456在线播放app | 老司机深夜福利视频在线观看| 长腿黑丝高跟| xxx96com| 国产精品,欧美在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 此物有八面人人有两片| 午夜福利视频1000在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 日本成人三级电影网站| 免费看美女性在线毛片视频| 国产激情欧美一区二区| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产免费男女视频| 90打野战视频偷拍视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 一进一出好大好爽视频| 精品日产1卡2卡| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产精品三级大全| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | av在线蜜桃| 一区二区三区免费毛片| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲男人的天堂狠狠| 91久久精品电影网| 久久久久久久久久黄片| 亚洲欧美日韩高清专用| 久久久久免费精品人妻一区二区| 一a级毛片在线观看| 欧美激情在线99| 亚洲国产中文字幕在线视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产三级黄色录像| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 午夜两性在线视频| 有码 亚洲区| 国产精品久久久久久久久免 | 可以在线观看毛片的网站| 亚洲精品在线观看二区| 日韩av在线大香蕉| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 国产高清三级在线| 国产精品影院久久| 亚洲黑人精品在线| 欧美精品啪啪一区二区三区| 51午夜福利影视在线观看| 9191精品国产免费久久| 午夜福利免费观看在线| 午夜日韩欧美国产| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 午夜日韩欧美国产| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美高清成人免费视频www| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲,欧美精品.| av黄色大香蕉| 久久久久久久久大av| 国产久久久一区二区三区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美一级毛片孕妇| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产单亲对白刺激| 欧美在线黄色| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美在线黄色| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 老司机午夜福利在线观看视频| 午夜福利在线在线| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产三级中文精品| 两人在一起打扑克的视频| 久久精品人妻少妇| 很黄的视频免费| 91字幕亚洲| 女警被强在线播放| 午夜福利在线在线| 性欧美人与动物交配| 日本与韩国留学比较| 精品无人区乱码1区二区| 成人国产一区最新在线观看| 免费在线观看亚洲国产| 久久国产乱子伦精品免费另类| xxxwww97欧美| 欧美av亚洲av综合av国产av| 又爽又黄无遮挡网站| 午夜福利18| 亚洲一区高清亚洲精品| 一级a爱片免费观看的视频| 美女高潮的动态| 亚洲美女黄片视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 在线视频色国产色| 欧美黄色淫秽网站| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 色综合欧美亚洲国产小说| www日本黄色视频网| 免费看日本二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲国产中文字幕在线视频| 精品国产美女av久久久久小说| www.熟女人妻精品国产| 国产精品,欧美在线| 国产高清三级在线| 国产黄a三级三级三级人| 国产av麻豆久久久久久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 免费电影在线观看免费观看| 久久人妻av系列| 欧美午夜高清在线| 国产高清三级在线| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 波多野结衣巨乳人妻| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久久久久久中文| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 一本综合久久免费| а√天堂www在线а√下载| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 欧美在线一区亚洲| 欧美最新免费一区二区三区 | 国产麻豆成人av免费视频| 成人国产一区最新在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 日本三级黄在线观看| 高清日韩中文字幕在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 久久精品综合一区二区三区| 国产熟女xx| 亚洲av一区综合| www日本在线高清视频| 观看美女的网站| 成人国产综合亚洲| 桃红色精品国产亚洲av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久午夜亚洲精品久久| 国产三级中文精品| 欧美一级毛片孕妇| 国产精品一及| 国产综合懂色| 欧美bdsm另类| 久久久久性生活片| 欧美一区二区精品小视频在线| av视频在线观看入口| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 高清在线国产一区| 国产成人系列免费观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 在线观看免费视频日本深夜| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 成人精品一区二区免费| 老汉色av国产亚洲站长工具| 午夜精品一区二区三区免费看| 宅男免费午夜| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲国产精品999在线| 午夜激情福利司机影院| 日韩中文字幕欧美一区二区| 色播亚洲综合网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| or卡值多少钱| 看免费av毛片| 天天躁日日操中文字幕| 免费av观看视频| 国产一区二区激情短视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 少妇丰满av| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 看免费av毛片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国内精品一区二区在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲天堂国产精品一区在线| 精品国产三级普通话版| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲国产欧美人成| 日本熟妇午夜| www.www免费av| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲成a人片在线一区二区| avwww免费| 99热这里只有是精品50| 90打野战视频偷拍视频| 99久久九九国产精品国产免费| 男人的好看免费观看在线视频| 在线观看av片永久免费下载| 欧美中文日本在线观看视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 成人永久免费在线观看视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美日韩黄片免| 一进一出抽搐动态| 91久久精品电影网| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲久久久久久中文字幕| www.熟女人妻精品国产| 国产真人三级小视频在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美日韩黄片免| 久久性视频一级片| 国产精品久久久久久久电影 | 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲真实伦在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲成av人片免费观看| 国产精品1区2区在线观看.| 一个人观看的视频www高清免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 听说在线观看完整版免费高清| 两个人看的免费小视频| 丁香欧美五月| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产美女午夜福利| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 精品熟女少妇八av免费久了| ponron亚洲| 一进一出抽搐动态| 精品电影一区二区在线| 一级作爱视频免费观看| 精品电影一区二区在线| 女警被强在线播放| 大型黄色视频在线免费观看| 麻豆国产av国片精品| 亚洲成人免费电影在线观看| 性色avwww在线观看| 色老头精品视频在线观看| 极品教师在线免费播放| 中文字幕高清在线视频| 亚洲国产欧美人成| 怎么达到女性高潮| 日本精品一区二区三区蜜桃| 色尼玛亚洲综合影院| 草草在线视频免费看| 老司机福利观看| 精品国产三级普通话版| 在线播放国产精品三级| 国产私拍福利视频在线观看| 制服人妻中文乱码| 久久久久久久久大av| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产高清视频在线观看网站| 中文字幕久久专区| 亚洲国产欧美人成| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美日本视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 日本熟妇午夜| 欧美成人性av电影在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 男女视频在线观看网站免费| h日本视频在线播放| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| a在线观看视频网站| 我的老师免费观看完整版| 亚洲成人久久爱视频| 啦啦啦免费观看视频1| 国产探花在线观看一区二区| 69av精品久久久久久| 成人av一区二区三区在线看| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲国产欧美人成| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 午夜激情福利司机影院| 香蕉av资源在线| 亚洲无线观看免费| 久久性视频一级片| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 最近最新中文字幕大全电影3| 90打野战视频偷拍视频| 久久香蕉精品热| 国产精品亚洲av一区麻豆| 天堂动漫精品| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久久久久大av| 亚洲一区二区三区不卡视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| av国产免费在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品久久视频播放| 日本与韩国留学比较| 日韩欧美国产在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 国产高潮美女av| 热99re8久久精品国产| 久久久久亚洲av毛片大全| 性欧美人与动物交配| 精华霜和精华液先用哪个| 色av中文字幕| 99精品欧美一区二区三区四区| 757午夜福利合集在线观看| 操出白浆在线播放| 亚洲激情在线av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 在线观看日韩欧美| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 久久精品国产综合久久久| 禁无遮挡网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 午夜日韩欧美国产| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲精品成人久久久久久| 真人做人爱边吃奶动态| 午夜福利在线观看吧| 国产野战对白在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 一区二区三区免费毛片| 无遮挡黄片免费观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品久久久久久久末码| 色在线成人网| 免费一级毛片在线播放高清视频| 最后的刺客免费高清国语| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 桃红色精品国产亚洲av| 国产不卡一卡二| 久久精品国产综合久久久| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产不卡一卡二| 久久精品国产综合久久久| 最近在线观看免费完整版| 久久久成人免费电影| 日韩国内少妇激情av| 热99re8久久精品国产| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一个人看的www免费观看视频|