• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于科研成果的園藝植物病理學(xué)綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)探索

    2021-10-14 22:36:46向妙蓮徐昭煥馬建陳明
    課程教育研究 2021年7期
    關(guān)鍵詞:綜合實(shí)驗(yàn)科研成果創(chuàng)新能力

    向妙蓮 徐昭煥 馬建 陳明

    【摘要】為增強(qiáng)大學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)和科研素養(yǎng),探討綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)在園藝植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中的應(yīng)用,設(shè)計(jì)了“茉莉酸甲酯(MeJA)誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病的效應(yīng)與機(jī)理”實(shí)驗(yàn),包括MeJA對(duì)青霉病菌(Penicillium italicum)的抑菌活性、誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病效應(yīng)及對(duì)梨果實(shí)病程相關(guān)蛋白幾丁質(zhì)酶(Chitinase,CHI)活性和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)活性的影響。實(shí)踐表明,基于植物病理學(xué)基礎(chǔ)理論的綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)有助于學(xué)生掌握寄主-病原互作的基本原理和實(shí)驗(yàn)技能,提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)研究組織和實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析的能力,激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新精神和科學(xué)意識(shí)。

    【關(guān)鍵詞】科研成果? 園藝植物病理學(xué)? 綜合實(shí)驗(yàn)? 創(chuàng)新能力

    【基金項(xiàng)目】國(guó)家自然科學(xué)基金(31360466);江西省高校省級(jí)教改立項(xiàng)項(xiàng)目(JXJG-18-3-30); 江西省高校省級(jí)教改立項(xiàng)項(xiàng)目(JXJG-19-3-9)。

    【中圖分類號(hào)】G640 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-3089(2021)07-0189-02

    園藝植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)是與園藝植物病理學(xué)理論課程緊密相關(guān)的一個(gè)重要教學(xué)環(huán)節(jié),當(dāng)前傳統(tǒng)的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式限制了創(chuàng)新性園藝人才的培養(yǎng)。因此,增加綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)課程占比,以適應(yīng)新農(nóng)科背景下實(shí)驗(yàn)教學(xué)的需要,是目前實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革創(chuàng)新中值得考慮和重視的問題。高??蒲谐晒瓤纱龠M(jìn)生產(chǎn)發(fā)展,又可豐富教學(xué)資源,有效依托科研優(yōu)勢(shì)提升實(shí)驗(yàn)教學(xué)水平,將科研成果轉(zhuǎn)化為實(shí)驗(yàn)教學(xué)的創(chuàng)新模式??蒲信c教學(xué)相互轉(zhuǎn)化、相互促進(jìn),科研反哺教學(xué),科學(xué)研究思維方法和實(shí)驗(yàn)操作技能融于一體,具有綜合性、前沿性和應(yīng)用性的特點(diǎn),旨在提高學(xué)生的探索精神,鍛煉學(xué)生的創(chuàng)新思維以及運(yùn)用理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能解決具體問題的能力,是目前實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革研究的熱點(diǎn)[1-4]。

    果蔬采后病害是制約園藝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸性障礙,目前主要通過化學(xué)藥劑控制該病害。為了確保果蔬產(chǎn)品生態(tài)、安全,綠色植保防控技術(shù)的應(yīng)用及推廣已迫在眉睫 [5-6]。茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MeJA)作為植物抗病反應(yīng)的重要信號(hào)分子作用于植物受體細(xì)胞進(jìn)而參與防御信號(hào)的傳導(dǎo),調(diào)控植物免疫系統(tǒng),增強(qiáng)植物抗病性[7-8]。幾丁質(zhì)酶(CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(GLU)為兩類重要的病程相關(guān)蛋白,與果蔬采后抗病密切相關(guān)[9-11]。MeJA等外源物質(zhì)處理可誘導(dǎo)果蔬CHI和GLU活性升高,從而減緩果蔬采后病害的發(fā)生[12-13]。

    1.綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)特色

    園藝植物病理學(xué)綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)基于果蔬采后貯藏保鮮領(lǐng)域研究熱點(diǎn),依托江西省果蔬采后處理關(guān)鍵技術(shù)及質(zhì)量安全協(xié)同創(chuàng)新中心和江西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院等最新研究成果,將茉莉酸甲酯(MeJA)等外源物質(zhì)誘導(dǎo)果實(shí)抗采后病害研究中取得的部分成果轉(zhuǎn)化為園藝植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一個(gè)教學(xué)內(nèi)容,構(gòu)建具有綜合植物病理學(xué)知識(shí)、強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練和將基礎(chǔ)知識(shí)運(yùn)用于科技前沿研究特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式[14-15]。綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)通過強(qiáng)調(diào)科學(xué)問題熱點(diǎn)引領(lǐng)和學(xué)生自主設(shè)計(jì),學(xué)生通過比較MeJA誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病的效應(yīng)及對(duì)青霉病菌(Penicillium expansum)的抑菌作用差異,逐步將科研成果引入到實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)專業(yè)知識(shí)興趣,培養(yǎng)創(chuàng)新思維和創(chuàng)新能力,為學(xué)生科研實(shí)驗(yàn)和畢業(yè)設(shè)計(jì)奠定基礎(chǔ)。

    2.綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)計(jì)

    2.1實(shí)驗(yàn)材料

    試驗(yàn)用果:“翠冠”梨果實(shí)采自江西省峽江縣金坪鄉(xiāng)果園,于當(dāng)日采摘后放置于實(shí)驗(yàn)室,挑選無(wú)病蟲害、大小統(tǒng)一的果實(shí),放置24h充分散去田間熱后用0.1%次氯酸鈉溶液浸泡果實(shí)1~2min消毒后用自來(lái)水沖洗干凈,室溫下晾干后保鮮袋單果套袋,入庫(kù)備用(冷庫(kù)溫度4~5℃)。

    供試菌株:擴(kuò)展青霉(P.expansum),由江西農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理實(shí)驗(yàn)室提供,-80℃保存,試驗(yàn)前培養(yǎng)5~7d,用無(wú)菌水洗脫孢子,經(jīng)無(wú)菌脫脂棉過濾后用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),配置濃度為1.0×106 spores /mL孢子懸浮液,備用。

    供試試劑:茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MeJA),購(gòu)自美國(guó)Sigma公司,先使用微量0.1% Tween80和少許乙醇混合均勻,后加無(wú)菌水配置為濃度1000 μL/L的MeJA溶液;異羥肟酸(Salicyhydroxamic acid,SHAM,茉莉酸生物合成合成抑制劑),購(gòu)自美國(guó)Sigma公司,先溶于95%乙醇,再用含0.1% Tween 80的無(wú)菌水配置成1000 μL/LSHAM備用;CHI活性和GLU活性測(cè)定采用試劑盒(Solarbio,北京,中國(guó)),乙酸-乙酸鈉緩沖液(含EDTA、β-巰基乙醇)。

    2.2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.2.1 MeJA對(duì)P. expansum的抑菌活性

    采用牛津杯法測(cè)定MeJA對(duì)P.expansum的抑制作用。取6 mL供試菌株孢子懸浮液加入54mL溫度約45℃左右PDA培養(yǎng)基中,搖勻,倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿制成含青霉菌平板。待平板凝固后,在培養(yǎng)皿中心放置無(wú)菌牛津杯(直徑為7mm),取100μL濃度為10μmol/L、經(jīng)0.22μm細(xì)菌微孔濾膜過濾的MeJA溶液注入牛津杯中,每個(gè)處理重復(fù)3次,置25±1℃恒溫培養(yǎng)箱逐日觀察記錄抑菌圈大小。對(duì)照組用等量含0.1% Tween80無(wú)菌水。

    2.2.2 MeJA誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病效應(yīng)

    將待處理果實(shí)置于熏蒸盒(體積6L)內(nèi),中央放置滅菌濾紙,將適量 MeJA滴在滅菌濾紙上使盒內(nèi)MeJA濃度達(dá)到10μmol/L,迅速密封塑料盒,對(duì)照組用含0.1%Tween80無(wú)菌水,另用100μmol/L的SHAM溶液噴施在果實(shí)表面,于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)36h,在果實(shí)孔內(nèi)注入20μL1.0×106 spores/mL青霉孢子懸浮液。每處理10個(gè)果,3次重復(fù)。以上處理后逐日觀察梨果實(shí)發(fā)病情況,采用十字交叉法測(cè)量病斑直徑,按以下公式計(jì)算誘導(dǎo)效果:誘導(dǎo)效果=(對(duì)照病斑直徑-處理組病斑直徑)/對(duì)照病斑直徑×100%。

    2.2.3 MeJ處理對(duì)梨果實(shí)CHI和GLU活性的影響

    試驗(yàn)設(shè)5組處理:CK處理組;10、100和1000 μmol/L MeJA處理組;100 μmol/L SHAM處理組。其他方法同2.2.2,每組處理10個(gè)果,每組3次重復(fù)。接種后第96 h取病健交界處果肉,液氮迅速冷凍置于-80℃超低溫箱保存,待用。根據(jù)曹建康等方法稍微改進(jìn),提取CHI和GLU粗酶液,采用試劑盒(Solarbio,北京,中國(guó))測(cè)定其活性。

    2.2.4 數(shù)據(jù)分析

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Excel2003和SPSS16.0 統(tǒng)計(jì)分析,用單因素方差比較統(tǒng)計(jì)各處理平均值的差異,Duncan 氏新復(fù)極差法(Duncans new multiple range test)分析各處理間的差異顯著性。

    3.綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

    3.1 MeJA對(duì)P. expansum的抑菌活性

    培養(yǎng)5 d后MeJA對(duì)青霉病菌的抑制作用,與對(duì)照相比,濃度為10 μmol/L MeJA的牛津杯周圍無(wú)抑菌圈。通過抑菌活性實(shí)驗(yàn),學(xué)生掌握了PDA培養(yǎng)基的配制和牛津杯法測(cè)定MeJA對(duì)P. expansum的抑菌方法,逐步熟悉園藝植物病理學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)技能。

    3.2 MeJA誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病的效應(yīng)

    不同濃度MeJA處理對(duì)梨果實(shí)抗青霉病誘導(dǎo)效應(yīng)因濃度不同而各異。10和100μmol/L MeJA處理后誘導(dǎo)效應(yīng)分別為3.45%和14.59%(P <0.05)。

    3.3 MeJA處理對(duì)梨果實(shí)病程相關(guān)蛋白活性的影響

    10和100 μmol/L濃度MeJA處理組均顯著提高了梨果實(shí)CHI活性,分別比對(duì)照處理提高了11.02%和45.24%。1000 μmol/L MeJA處理組則抑制了CHI活性,為對(duì)照組的85.17%(P <0.05)。100 μmol/L MeJA處理組GLU活性最高,為對(duì)照組的1.46倍,而10和100 μmol/L處理之間無(wú)顯著性差異(P <0.05)。

    4 .綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)計(jì)

    依托外源物質(zhì)誘導(dǎo)果實(shí)抗病的研究熱點(diǎn)問題,構(gòu)建MeJA誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病的綜合性創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)課,主要教學(xué)設(shè)計(jì)如下:第一,課前準(zhǔn)備——指導(dǎo)教師引導(dǎo)學(xué)生逐步熟悉實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)目標(biāo)和主要內(nèi)容后,每組4~5人查找果實(shí)采后誘導(dǎo)抗病相關(guān)文獻(xiàn),以組為單位撰寫可行性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃,初擬創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方案,指導(dǎo)教師提出修改意見和建議;第二,課中實(shí)施——課時(shí)總計(jì)8學(xué)時(shí),其中2學(xué)時(shí)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料(PDA、病原菌、果實(shí)預(yù)處理),3學(xué)時(shí)完成MeJA-病原菌-果實(shí)三者互作處理(接種、取樣),3學(xué)時(shí)(病情統(tǒng)計(jì)、GLU和CHI測(cè)定,結(jié)果分析),各組同學(xué)在實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師協(xié)助下不斷完善實(shí)驗(yàn)方案,學(xué)習(xí)使用儀器設(shè)備和統(tǒng)計(jì)軟件;第三,課后討論:各組分析討論后小結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,分析實(shí)驗(yàn)成功和失敗原因,如病原菌污染、接種不發(fā)病以及酶活性單位差異等問題,最后指導(dǎo)教師總結(jié)分析各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,學(xué)生結(jié)合資料查閱,比較MeJA誘導(dǎo)梨果實(shí)抗青霉病的效應(yīng)和病程相關(guān)蛋白活性差異,分析MeJA誘導(dǎo)抗病的可能途徑,撰寫實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告。

    參考文獻(xiàn):

    [1]賈永霞.創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)教學(xué)的探究與實(shí)踐[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索,2018,37(12):206-208.

    [2]賈智偉,賀科學(xué),黃亞飛.大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃的實(shí)施實(shí)踐與思考[J].教育現(xiàn)代化,2019(63):65-68.

    [3]蔣敏,李會(huì),史勁松.基于科研成果的藥理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)探索[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索,2020,39(1):217-220.

    [4]王益林,文輝忠,舒馨,等.鐵含量測(cè)定的研究型教學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)踐[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索,2020,39(3):194-197.

    [5]張維一,畢陽(yáng).果蔬采后病害與控制[M].農(nóng)業(yè)出版社, 1996.

    [6]田世平,產(chǎn)祝龍.誘導(dǎo)抗性在果蔬采后病害防治中的研究與應(yīng)用[J].植物病理學(xué)報(bào),2004,34(5):385-394.

    [7]薛仁鎬, 金圣愛. 茉莉酸甲酯:一種重要的植物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子[J].生物技術(shù)通訊,2006,17(6):985-988.

    [8]崔席席,李富軍,張新華,等.茉莉酸甲酯調(diào)控果蔬采后品質(zhì)的機(jī)制及應(yīng)用研究進(jìn)展[J].食品科學(xué),2019,40(13):304-311.

    [9]陳三鳳,李季倫.幾丁質(zhì)酶研究歷史和發(fā)展前景[J]. 微生物學(xué)通報(bào),1993,20(3):156-160.

    [10]邢全華,王斌.植物葡聚糖酶基因抗病作用的研究進(jìn)展[J].遺傳,2002,24(6):715-720.

    [11]李春娟,單世華,許婷婷,等.幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶基因研究進(jìn)展[J]. 生物技術(shù)通訊, 2004,15(5):502-505.

    [12]王雷.不同激發(fā)子處理對(duì)甜櫻桃果實(shí)采后青霉病的抑制作用及其機(jī)理研究[D].南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2015.

    [13]王英珍,程瑞,張紹鈴,等.采前茉莉酸甲酯(MeJA)處理對(duì)梨果實(shí)抗病性的影響[J].果樹學(xué)報(bào),2016,33(6):694-700.

    [14]徐小彪, 曲雪艷, 鄒菊花,等. 高等農(nóng)業(yè)院校植物生產(chǎn)類本科專業(yè)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的探討[J].高等農(nóng)業(yè)教育,2010(7):67-69.

    [15]朱昌蘭, 李保同, 徐小彪,等. 植物生產(chǎn)類專業(yè)創(chuàng)新型人才培養(yǎng)模式探索——基于江西農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心的改革實(shí)踐[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)教育, 2012(3):71-74.

    作者簡(jiǎn)介:

    向妙蓮(1977年10月-),女,苗族,湖南綏寧人,博士,副教授,研究方向:植物寄主與病原物互作。

    陳明(1979年8月-),男,漢族,江西武寧人,博士,副教授,研究方向:果實(shí)采后生物學(xué)。

    猜你喜歡
    綜合實(shí)驗(yàn)科研成果創(chuàng)新能力
    科研成果轉(zhuǎn)化
    高中數(shù)學(xué)課堂教學(xué)中創(chuàng)新能力的培養(yǎng)
    創(chuàng)新能力培養(yǎng)視角下的無(wú)機(jī)化學(xué)教學(xué)研究
    化工管理(2021年7期)2021-05-13 00:44:44
    中國(guó)科研成果震撼全球
    推進(jìn)軟件產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新能力提升
    加強(qiáng)醫(yī)療科技自主創(chuàng)新和科研成果轉(zhuǎn)化
    基于創(chuàng)新能力培養(yǎng)的高職音樂教育改革探討
    北方音樂(2017年4期)2017-05-04 03:40:28
    本科生《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》研討型教學(xué)方法的探索
    審批復(fù)雜 科研成果落地難
    數(shù)字化語(yǔ)音存儲(chǔ)于回放綜合實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)設(shè)計(jì)
    99九九线精品视频在线观看视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 乱人视频在线观看| 高清日韩中文字幕在线| 国产乱人视频| av专区在线播放| 成人二区视频| 天天躁日日操中文字幕| 一边亲一边摸免费视频| 婷婷色综合大香蕉| 免费av不卡在线播放| 亚洲丝袜综合中文字幕| 日韩欧美一区视频在线观看 | 亚洲人成网站在线观看播放| 成人亚洲欧美一区二区av| 成人毛片a级毛片在线播放| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产午夜福利久久久久久| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲怡红院男人天堂| 国产成人精品婷婷| av卡一久久| 亚洲国产色片| 午夜福利成人在线免费观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 两个人的视频大全免费| 国产精品av视频在线免费观看| 国产亚洲91精品色在线| 日日摸夜夜添夜夜爱| 午夜精品在线福利| 精品久久久久久成人av| 高清视频免费观看一区二区 | 欧美zozozo另类| 成人无遮挡网站| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 高清午夜精品一区二区三区| 人妻少妇偷人精品九色| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 日本与韩国留学比较| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国产免费福利视频在线观看| 99热这里只有是精品50| 99久久精品国产国产毛片| 五月天丁香电影| 亚洲精品日韩av片在线观看| 色网站视频免费| av在线老鸭窝| 国产视频内射| 亚洲综合精品二区| 激情五月婷婷亚洲| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 边亲边吃奶的免费视频| 久久这里只有精品中国| 国产黄色小视频在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 韩国av在线不卡| 亚洲久久久久久中文字幕| 久久这里有精品视频免费| 波野结衣二区三区在线| 国产一区二区三区av在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲四区av| 久久99热6这里只有精品| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 永久免费av网站大全| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲国产最新在线播放| 欧美高清性xxxxhd video| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 日日啪夜夜撸| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲精品国产av成人精品| 青春草国产在线视频| 老女人水多毛片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 日本av手机在线免费观看| 国产精品久久久久久精品电影| 国产黄色免费在线视频| 免费大片黄手机在线观看| 女人被狂操c到高潮| 青春草亚洲视频在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产黄频视频在线观看| 国产探花极品一区二区| 中文在线观看免费www的网站| 如何舔出高潮| 日本黄色片子视频| 午夜福利视频1000在线观看| av在线天堂中文字幕| 成人特级av手机在线观看| 亚洲精品久久午夜乱码| 免费看av在线观看网站| 国产免费又黄又爽又色| 国产精品.久久久| 只有这里有精品99| av在线天堂中文字幕| 麻豆成人午夜福利视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 日本熟妇午夜| 一区二区三区高清视频在线| 国产成人免费观看mmmm| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 熟女人妻精品中文字幕| 真实男女啪啪啪动态图| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品av视频在线免费观看| 日韩强制内射视频| 国产麻豆成人av免费视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产又色又爽无遮挡免| ponron亚洲| 久久热精品热| 爱豆传媒免费全集在线观看| 嫩草影院入口| 国产久久久一区二区三区| 亚洲精品一二三| 国产av码专区亚洲av| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产视频首页在线观看| 亚洲高清免费不卡视频| 久久6这里有精品| 国产黄频视频在线观看| av天堂中文字幕网| 高清在线视频一区二区三区| 中文字幕亚洲精品专区| 内射极品少妇av片p| 日本免费在线观看一区| 色5月婷婷丁香| 99热这里只有精品一区| 精品久久久久久成人av| 美女高潮的动态| 毛片一级片免费看久久久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 99久国产av精品国产电影| 久久精品久久久久久久性| 国产淫语在线视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 高清av免费在线| 最近手机中文字幕大全| 午夜精品在线福利| 最近最新中文字幕大全电影3| 波野结衣二区三区在线| 一级毛片 在线播放| 91久久精品国产一区二区三区| 国内精品宾馆在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲美女视频黄频| 国产高清有码在线观看视频| 婷婷色av中文字幕| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 好男人在线观看高清免费视频| 国产高清三级在线| 人体艺术视频欧美日本| 国产 亚洲一区二区三区 | 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲国产欧美在线一区| 国内精品宾馆在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 不卡视频在线观看欧美| 日韩中字成人| 欧美激情在线99| 成人鲁丝片一二三区免费| 日韩欧美一区视频在线观看 | 久久热精品热| 美女主播在线视频| 黄色日韩在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 中文欧美无线码| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 午夜爱爱视频在线播放| av国产久精品久网站免费入址| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 天堂影院成人在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产乱人视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产成人freesex在线| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲av福利一区| 午夜久久久久精精品| 国产综合懂色| 91狼人影院| 日本-黄色视频高清免费观看| 国产爱豆传媒在线观看| eeuss影院久久| 91久久精品国产一区二区三区| 久久国内精品自在自线图片| 精品久久久久久久末码| 免费看av在线观看网站| 波野结衣二区三区在线| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 天堂√8在线中文| 综合色丁香网| av女优亚洲男人天堂| 亚洲精品第二区| 能在线免费观看的黄片| 久久久久网色| 午夜爱爱视频在线播放| 免费黄色在线免费观看| 久久人人爽人人片av| 久久久久九九精品影院| av国产久精品久网站免费入址| 国产高清有码在线观看视频| 久久久久久伊人网av| 亚洲欧洲日产国产| 国产视频内射| 亚洲经典国产精华液单| xxx大片免费视频| 在线 av 中文字幕| 亚洲久久久久久中文字幕| 午夜精品一区二区三区免费看| 边亲边吃奶的免费视频| 91久久精品国产一区二区三区| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚洲av不卡在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲伊人久久精品综合| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成年av动漫网址| 国产在视频线在精品| 日韩av在线大香蕉| 免费观看a级毛片全部| 免费看a级黄色片| 日韩av在线免费看完整版不卡| 男女边摸边吃奶| 国产精品一区二区在线观看99 | 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产精品久久视频播放| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 精品人妻熟女av久视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品欧美国产一区二区三| 看非洲黑人一级黄片| 老司机影院毛片| 国产黄色视频一区二区在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 一个人看的www免费观看视频| 在线天堂最新版资源| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 亚洲成人一二三区av| 高清毛片免费看| av在线老鸭窝| 内射极品少妇av片p| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久国产乱子免费精品| 91av网一区二区| 嘟嘟电影网在线观看| 成人美女网站在线观看视频| 久久这里有精品视频免费| 熟女电影av网| 91av网一区二区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 直男gayav资源| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美精品国产亚洲| 久久6这里有精品| 春色校园在线视频观看| 秋霞在线观看毛片| 亚洲人成网站高清观看| 成年版毛片免费区| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 毛片女人毛片| av线在线观看网站| 免费看光身美女| 日韩av不卡免费在线播放| 七月丁香在线播放| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲内射少妇av| 国产av国产精品国产| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲美女搞黄在线观看| 91狼人影院| 永久免费av网站大全| 亚洲av成人精品一二三区| 国产av不卡久久| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产片特级美女逼逼视频| 18禁动态无遮挡网站| 成人二区视频| 在现免费观看毛片| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲一区高清亚洲精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 啦啦啦韩国在线观看视频| 成人欧美大片| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产成人a区在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 久久久色成人| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲欧美清纯卡通| 在线天堂最新版资源| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲色图av天堂| 日本爱情动作片www.在线观看| 免费看不卡的av| 午夜激情久久久久久久| 免费观看精品视频网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲综合色惰| 亚洲精品一区蜜桃| 久久久久久久久大av| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产极品天堂在线| 久久99热6这里只有精品| 中文字幕av成人在线电影| 老司机影院成人| 欧美区成人在线视频| 国产精品久久久久久av不卡| www.av在线官网国产| 成人漫画全彩无遮挡| 午夜免费观看性视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 青春草视频在线免费观看| 国产成年人精品一区二区| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲欧洲国产日韩| 国产在线一区二区三区精| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲精品456在线播放app| freevideosex欧美| 天堂俺去俺来也www色官网 | 婷婷色综合大香蕉| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品无大码| 成年免费大片在线观看| 人人妻人人澡欧美一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网 | 免费黄色在线免费观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 97精品久久久久久久久久精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产成人aa在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 久久热精品热| 日韩一区二区三区影片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | av在线蜜桃| 一本一本综合久久| ponron亚洲| 国产精品一区www在线观看| 国产高潮美女av| 成年人午夜在线观看视频 | videossex国产| av福利片在线观看| 日本一二三区视频观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 亚州av有码| 亚洲图色成人| 热99在线观看视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 日韩制服骚丝袜av| 久久久a久久爽久久v久久| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 午夜久久久久精精品| 久久久久久伊人网av| videos熟女内射| 日韩欧美三级三区| 成人一区二区视频在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 18+在线观看网站| 激情 狠狠 欧美| 久久亚洲国产成人精品v| 欧美性感艳星| 岛国毛片在线播放| videossex国产| 国产熟女欧美一区二区| 春色校园在线视频观看| 91久久精品电影网| 午夜免费激情av| 熟女电影av网| 免费观看性生交大片5| 久久亚洲国产成人精品v| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久久久伊人网av| 最近最新中文字幕大全电影3| 26uuu在线亚洲综合色| 内地一区二区视频在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 成人综合一区亚洲| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 神马国产精品三级电影在线观看| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 高清毛片免费看| 七月丁香在线播放| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产一区二区亚洲精品在线观看| av在线亚洲专区| 69人妻影院| 黄色一级大片看看| 最近手机中文字幕大全| ponron亚洲| 日韩一区二区三区影片| 国产一区二区在线观看日韩| 国产在线一区二区三区精| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产高清三级在线| 少妇的逼好多水| 午夜视频国产福利| 偷拍熟女少妇极品色| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 精品久久久精品久久久| 人妻夜夜爽99麻豆av| 最近的中文字幕免费完整| 日本与韩国留学比较| 亚洲国产成人一精品久久久| 美女黄网站色视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 97在线视频观看| 欧美日本视频| 卡戴珊不雅视频在线播放| 九九在线视频观看精品| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 又爽又黄无遮挡网站| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产日韩欧美在线精品| 舔av片在线| 久久久久国产网址| 能在线免费看毛片的网站| 精品熟女少妇av免费看| 最近2019中文字幕mv第一页| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 日本三级黄在线观看| ponron亚洲| 午夜免费激情av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产中年淑女户外野战色| 国产免费福利视频在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 欧美区成人在线视频| 久久国内精品自在自线图片| 熟女电影av网| 日韩av在线大香蕉| 亚洲av日韩在线播放| 禁无遮挡网站| 亚洲欧美精品自产自拍| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 精品久久久久久久久久久久久| 日韩三级伦理在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 九色成人免费人妻av| 色5月婷婷丁香| 性插视频无遮挡在线免费观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 亚洲无线观看免费| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲人与动物交配视频| 又大又黄又爽视频免费| 精品久久久噜噜| or卡值多少钱| 波野结衣二区三区在线| 国产成人aa在线观看| 日本午夜av视频| 真实男女啪啪啪动态图| 成人漫画全彩无遮挡| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产亚洲91精品色在线| 欧美日本视频| videossex国产| 中文字幕av成人在线电影| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲精品乱久久久久久| 人妻一区二区av| 丰满少妇做爰视频| 边亲边吃奶的免费视频| 18禁动态无遮挡网站| xxx大片免费视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 婷婷色麻豆天堂久久| 免费黄网站久久成人精品| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲在久久综合| 99久久精品国产国产毛片| 人人妻人人澡欧美一区二区| videos熟女内射| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲欧美日韩东京热| 国产亚洲精品久久久com| 久久久午夜欧美精品| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲欧洲日产国产| 国产白丝娇喘喷水9色精品| av女优亚洲男人天堂| av国产免费在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产熟女欧美一区二区| 麻豆av噜噜一区二区三区| 我的女老师完整版在线观看| 尾随美女入室| 免费观看的影片在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 日日啪夜夜爽| 国产精品精品国产色婷婷| 波野结衣二区三区在线| 久久人人爽人人片av| 国产成人91sexporn| 97超碰精品成人国产| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 三级国产精品欧美在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲精品乱久久久久久| 精品少妇黑人巨大在线播放| 五月天丁香电影| 精品久久久久久久久亚洲| 亚洲在线自拍视频| 视频中文字幕在线观看| av在线蜜桃| 亚洲国产成人一精品久久久| 男女边吃奶边做爰视频| 成年版毛片免费区| 色视频www国产| 亚洲真实伦在线观看| 极品教师在线视频| 国产精品久久久久久精品电影| 午夜久久久久精精品| 国产成人精品婷婷| 97超碰精品成人国产| 国产黄片视频在线免费观看| av福利片在线观看| 在线 av 中文字幕| 2022亚洲国产成人精品| 欧美 日韩 精品 国产| 26uuu在线亚洲综合色| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久久国产一区二区| kizo精华| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产黄片美女视频| 亚洲四区av| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲精品成人av观看孕妇| 2021天堂中文幕一二区在线观| 欧美成人精品欧美一级黄| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产大屁股一区二区在线视频| 天堂√8在线中文| 亚洲欧美成人精品一区二区| 两个人视频免费观看高清| 精品不卡国产一区二区三区| av女优亚洲男人天堂| av在线观看视频网站免费| 午夜福利成人在线免费观看| 免费电影在线观看免费观看| 国产探花在线观看一区二区| 中国国产av一级| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 永久免费av网站大全| 天堂俺去俺来也www色官网 | 最近手机中文字幕大全| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 成人二区视频| 99热网站在线观看| 秋霞伦理黄片| 天美传媒精品一区二区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 午夜爱爱视频在线播放| 国产一区二区三区av在线| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲精品色激情综合| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 欧美激情在线99| 天堂中文最新版在线下载 | 国产精品美女特级片免费视频播放器| 精品一区二区免费观看| 日韩成人伦理影院| 亚洲精品日本国产第一区| 亚洲美女视频黄频| 国产成人一区二区在线| 亚洲国产精品成人久久小说| www.色视频.com| 一个人看视频在线观看www免费| 精品人妻熟女av久视频| 一级毛片 在线播放| 免费大片黄手机在线观看| 少妇熟女欧美另类| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲成色77777| 韩国高清视频一区二区三区| 日韩av免费高清视频| 人体艺术视频欧美日本| 欧美日韩亚洲高清精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 精品一区二区三区人妻视频|