清洗方法對(duì)葡萄中四種農(nóng)藥殘留的去除效果分析

劉 煒，劉 行，王藝多，楊曉鳳，尹 全，張富麗

（四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，a.農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所；b.經(jīng)濟(jì)作物育種栽培研究所；c.院機(jī)關(guān)，成都 610066）

葡萄是一種柔軟多汁、芳香濃郁、酸甜適度的水果，含有多種礦物質(zhì)、維生素、人體所需的氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分，除此之外，含有豐富的酚類(lèi)化合物，如花青素、酚酸、類(lèi)黃酮等物質(zhì)，主要存在于果皮中［1，2］。食用葡萄和葡萄衍生產(chǎn)品有益身體健康，這主要?dú)w功于酚類(lèi)物質(zhì)具有廣泛的生物活性，包括提高抗氧化能力、抑制血小板聚集、降低血漿蛋白氧化、降低低密度脂蛋白（LDL）氧化，以及改善心血管和神經(jīng)認(rèn)知等功能［3，4］。

近十年來(lái)，中國(guó)葡萄種植面積和產(chǎn)量都取得了迅猛發(fā)展，已成為世界葡萄生產(chǎn)、消費(fèi)大國(guó)。葡萄在其生長(zhǎng)過(guò)程中易發(fā)生霜霉病、黑痘病、炭疽病、白腐病、灰霉病、蚧殼蟲(chóng)等多種病蟲(chóng)侵害，常使用農(nóng)藥進(jìn)行化學(xué)防治。農(nóng)藥的使用，一方面有利于殺滅病蟲(chóng)害、促進(jìn)葡萄的生長(zhǎng)、增加葡萄的產(chǎn)量，獲得更優(yōu)的經(jīng)濟(jì)效益；另一方面不合理使用農(nóng)藥也可造成對(duì)環(huán)境及葡萄的污染，從而對(duì)消費(fèi)者健康帶來(lái)危害［5，6］。為了去除葡萄中的農(nóng)藥殘留，清洗是葡萄在食用前最常用的處理方式，研究不同清洗方法對(duì)葡萄中農(nóng)藥殘留的去除效果具有重要的現(xiàn)實(shí)意義［7］。本研究選取葡萄中殺滅病蟲(chóng)害最常見(jiàn)的4種農(nóng)藥為研究對(duì)象，采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法測(cè)定葡萄中的農(nóng)藥殘留量［8-10］，研究家庭常用的清洗方式（清水沖洗和清水、鹽水溶液、小蘇打水溶液、果蔬清潔劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗）對(duì)農(nóng)藥殘留的去除效果［11-16］，確定最優(yōu)去除農(nóng)藥的清洗方法，對(duì)降低葡萄中農(nóng)藥殘留，為消費(fèi)者日常生活的葡萄食用安全提供指導(dǎo)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

葡萄（紅提、陽(yáng)光玫瑰、巨峰）采購(gòu)于農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。

1.2 主要儀器

Waters ICLASSXEVOTQXS超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配ESI離子源，美國(guó)沃特世公司；A5料理機(jī)，廣東中山市鎧蘭帝電器有限公司；XPE205十萬(wàn)分之一天平，瑞士梅特勒托利多公司；YP2002百分之一天平，上海佑科儀器儀表有限公司；T18 UL?TRA-TURRAX高速勻漿機(jī)，德國(guó)IKA公司；HT-2500渦旋振蕩器，上海郎賦實(shí)業(yè)有限公司；Neofuge 18R高速冷凍離心機(jī)，上海力申科學(xué)儀器有限公司；0.22μm有機(jī)系濾膜，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。

1.3 主要試劑

主要試劑見(jiàn)表1。

1.4 方法

1.4.1 對(duì)樣品模擬噴灑農(nóng)藥 將市售的4種農(nóng)藥對(duì)水稀釋?zhuān)崔r(nóng)藥與水的比例為1∶2 000（V/V）配制農(nóng)藥稀釋液。取1 000 g葡萄樣品均勻分散在農(nóng)藥稀釋液內(nèi)浸泡10 min，取出置于陰涼處自然晾干，冷藏放置24 h，待處理。

1.4.2 樣品清洗方式

1）清水沖洗。取“1.4.1”處理過(guò)的葡萄樣品200 g置于室溫的自來(lái)水下揉搓沖洗2 min，沖洗過(guò)程中樣品不斷翻轉(zhuǎn)，以保證樣品各部分能平均地接觸到水流，置于陰涼處自然晾干，冷藏24 h，待測(cè)定。

2）清水浸泡后再?zèng)_洗。取“1.4.1”處理過(guò)的葡萄樣品200 g置于1 000 mL自來(lái)水中浸泡10 min。浸泡結(jié)束后用流動(dòng)清水沖洗2 min，沖洗過(guò)程中樣品不斷翻轉(zhuǎn)，以保證樣品各部分能平均地接觸到流水，置于陰涼處自然晾干，冷藏24 h，待測(cè)定。

表1 主要試劑

3）不同溶液浸泡后再?zèng)_洗。分別取“1.4.1”處理過(guò)的葡萄樣品200 g置于不同溶液（2.0%鹽水溶液、2.0%小蘇打水溶液、2.0%果蔬清潔劑水溶液）中浸泡10 min。浸泡后取出分別用流動(dòng)清水沖洗2 min，沖洗過(guò)程中樣品不斷翻轉(zhuǎn)，以保證樣品各部分能平均地接觸到流水，置于陰涼處自然晾干，冷藏24 h，待測(cè)定。

1.4.3 樣品前處理 將清洗過(guò)的葡萄樣品用料理機(jī)全部打碎，備用。稱(chēng)取10.00 g樣品（精確至0.01 g）于50 mL離心管中，加入10 mL乙腈，渦旋振蕩2 min，加入4.0 g干燥過(guò)的無(wú)水硫酸鎂、1.0 g氯化鈉，渦旋振蕩混勻2 min，放入高速冷凍離心機(jī)中，8 000 r/min離心5 min。準(zhǔn)確吸取6.0 mL上清液移至10 mL離心管中，加入150 mg PSA、900 mg無(wú)水硫酸鎂，渦旋振蕩混勻2 min，8 000 r/min離心5 min。取上清液過(guò)0.22μm有機(jī)系濾膜，待測(cè)。

1.4.4 儀器檢測(cè)條件 色譜條件：Waters ACQUITY UPLCBEH C18Column（2.1 mm×100 mm，1.7μm）；樣品室溫15℃；柱溫30℃；流速0.3 mL/min；進(jìn)樣量1.0μL；流動(dòng)相A為0.1%甲酸水溶液，B為甲醇，按表2的梯度洗脫條件進(jìn)行超高效液相色譜分離。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源（ESI）；正離子掃描方式；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）；毛細(xì)管電壓3.0 kV；錐孔反吹氣（氮?dú)猓┝魉?50 L/h；脫溶劑氣（氮?dú)猓┝魉?00 L/h；脫溶劑氣溫度500℃；碰撞氣（氬氣）流速0.17 mL/min；離子源溫度150℃。其他質(zhì)譜分析參數(shù)（保留時(shí)間、母離子、子離子、駐留時(shí)間、錐孔電壓、碰撞電壓）見(jiàn)表3。

表2 梯度洗脫條件

1.5 數(shù)據(jù)處理

葡萄中農(nóng)藥的清洗效果以農(nóng)藥的去除率表示，采用Microsoft excel軟件，計(jì)算去除率。樣品中農(nóng)藥去除率按式（1）進(jìn)行計(jì)算。

式中，A為去除率，%；X為處理組試樣中被測(cè)組分的含量，mg/kg；X1為未清洗組試樣中被測(cè)組分的含量，mg/kg。

1.6 質(zhì)量控制方法

質(zhì)量控制采取計(jì)算加標(biāo)回收率的方法得出。稱(chēng)取10.00 g打碎的樣品（精確至0.01 g）于50 mL離心管中，取標(biāo)準(zhǔn)中間液100μL，中間液濃度為10.0 mg/L，對(duì)應(yīng)添加濃度0.1 mg/kg，按照“1.4.3”的方法對(duì)樣品進(jìn)行處理。

式中，B為加標(biāo)回收率，%；Y為未處理組試樣中被測(cè)組分的含量，mg/kg；Y1為加標(biāo)試樣中被測(cè)組分的含量，mg/kg。

表3 質(zhì)譜分析參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 不同清洗方式對(duì)葡萄中甲霜靈殘留的去除效果

不同清洗方式對(duì)葡萄中甲霜靈殘留的去除效果如圖1所示。甲霜靈是一種具有保護(hù)和治療作用的內(nèi)吸性殺菌農(nóng)藥，在水中的溶解度為8.4 g/L。從圖1可看出，各類(lèi)清洗方式都能有效降低紅提、陽(yáng)光玫瑰、巨峰中的甲霜靈殘留。紅提經(jīng)5種清洗方式清洗后，甲霜靈的去除率為25.80%～55.35%，其中清水沖洗的去除率最低，其他4種清洗方式差異不顯著。陽(yáng)光玫瑰經(jīng)5種清洗方式清洗后，甲霜靈的去除率為30.82%～52.33%，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>清水沖洗>2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗。巨峰經(jīng)5種清洗方式清洗后，甲霜靈去除率達(dá)82.33%～95.52%，去除效果較好，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水浸泡后再?zèng)_洗>清水浸泡再?zèng)_洗>清水沖洗。5種清洗方式都能有效降低葡萄中甲霜靈的殘留，浸泡后清水沖洗比直接用清水沖洗的效果好。

2.2 不同清洗方式對(duì)葡萄中多菌靈殘留的去除效果

不同清洗方式對(duì)葡萄中多菌靈殘留的去除效果如圖2所示。多菌靈是一種具有保護(hù)和治療作用的內(nèi)吸性殺菌農(nóng)藥，在水中的溶解度為0.029 g/L。從圖2可看出，各類(lèi)清洗方式對(duì)多菌靈殘留均有明顯的去除效果。紅提經(jīng)5種清洗方式清洗后，多菌靈的去除率為19.79%～88.87%，其中清水沖洗的去除率最低，其他4種清洗方式去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗。陽(yáng)光玫瑰經(jīng)5種清洗方式清洗后，多菌靈的去除率為54.08%～86.93%，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水沖洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水浸泡后再?zèng)_洗。巨峰經(jīng)5種清洗方式清洗后，多菌靈去除率達(dá)到63.86%～93.75%，去除效果最好，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水溶液浸泡后再清洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水沖洗>清水浸泡后再?zèng)_洗。5種清洗方式都能有效降低葡萄中多菌靈的殘留，浸泡后清水沖洗比直接用清水沖洗的效果差。

2.3 不同清洗方式對(duì)葡萄中戊唑醇?xì)埩舻娜コЧ?/h3>

戊唑醇是一種內(nèi)吸性殺菌農(nóng)藥，微溶于水，從圖3可看出，各類(lèi)清洗方式對(duì)戊唑醇?xì)埩艟忻黠@去除效果。紅提經(jīng)5種清洗方式清洗后，戊唑醇的去除率為65.96%～94.97%，其中清水沖洗的去除率最低，其他4種清洗方式去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗，2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗、2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗的去除能力差異不顯著，清水浸泡后再?zèng)_洗、2.0%果蔬清潔劑水溶液浸泡后再清洗的去除能力差異不顯著。陽(yáng)光玫瑰經(jīng)5種清洗方式清洗后，戊唑醇的去除率為89.93%～95.42%，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水浸泡后再?zèng)_洗>清水沖洗，清水沖洗去除率低于其他4種清洗方式，其他4種清洗方式對(duì)戊唑醇的去除能力差異不顯著。巨峰經(jīng)5種清洗方式清洗后，戊唑醇去除率達(dá)到89.42%～98.53%，去除效果較好，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水沖洗，其中清水沖洗、2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗對(duì)戊唑醇的去除能力無(wú)顯著差異，清水浸泡后再?zèng)_洗和2.0%鹽水溶液浸泡后對(duì)戊唑醇的去除能力無(wú)顯著差異。對(duì)葡萄中戊唑醇的清洗效果最佳的是2.0%果蔬清潔劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗。

2.4 不同清洗方式對(duì)葡萄中霜霉威殘留的去除效果

從圖4可看出，各類(lèi)清洗方式對(duì)霜霉威殘留均有明顯去除效果。紅提經(jīng)5種清洗方式清洗后，霜霉威的去除率為34.21%～50.20%，其中清水沖洗的去除率最低，2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗、2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗、2.0%果蔬清潔劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗對(duì)霜霉威的去除能力無(wú)顯著差異，清水浸泡后再?zèng)_洗對(duì)霜霉威的去除能力最強(qiáng)。陽(yáng)光玫瑰經(jīng)5種清洗方式清洗后，霜霉威的去除率為18.08%～53.49%，去除能力為清水沖洗>清水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%果蔬清潔劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水溶液浸泡后再?zèng)_洗，清水沖洗、清水浸泡后再?zèng)_洗的對(duì)霜霉威的去除能力差異不顯著。巨峰經(jīng)5種清洗方式清洗后，霜霉威去除率達(dá)77.38%～85.49%，去除效果較好，去除能力為2.0%果蔬清洗劑水溶液浸泡后再?zèng)_洗>2.0%鹽水浸泡后再?zèng)_洗>2.0%小蘇打水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水溶液浸泡后再?zèng)_洗>清水沖洗。

2.5 質(zhì)量控制

4種農(nóng)藥在紅提、陽(yáng)光玫瑰及巨峰中的回收率為86.1%～94.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.3%～3.1%，該分析方法的準(zhǔn)確性和精密度滿(mǎn)足葡萄中4種農(nóng)藥殘留分析的要求，具體結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 葡萄中4種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率

3 結(jié)論

本研究采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定清水沖洗，清水、2.0%鹽水溶液、2.0%小蘇打溶液、2.0%果蔬清潔劑水溶液浸泡后清水沖洗等5種不同方式對(duì)模擬樣品葡萄中農(nóng)藥殘留的去除效果，發(fā)現(xiàn)5種不同清洗方式均能有效去除供試葡萄中農(nóng)藥的殘留，清水沖洗，清水、2.0%食鹽水、2.0%小蘇打水、2.0%果蔬清潔劑水溶液浸泡10 min后再用清水沖洗處理，對(duì)葡萄中甲霜靈、多菌靈、戊唑醇?xì)埩舻钠骄コ史謩e是61.32%、74.85%、73.26%、72.25%、84.64%，最好的方式是果蔬清潔劑清洗，其次是清水浸泡。對(duì)霜霉威而言，最好的清洗方式為清水浸泡，平均去除率為61.28%，其次是蔬果清洗劑清洗，平均去除率為55.37%。相對(duì)于其他清洗方式，清水浸泡處理與果蔬清潔劑去除農(nóng)藥殘留的效果相近，而且清水浸泡既安全又方便，因此值得推廣。