麗江紫烏頭中一種新型C-19二萜生物堿的單晶結(jié)構(gòu)解析

龔元 李詠梅 朱楠 姜艷萍

摘 要：本實(shí)驗(yàn)對(duì)麗江紫烏頭中的二萜生物堿進(jìn)行研究，利用反復(fù)硅膠柱層析、重結(jié)晶等分離手段，從中分離得到一種新型C-19二萜生物堿，利用溶劑緩慢揮發(fā)法得到單晶并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，通過(guò)CCDC數(shù)據(jù)庫(kù)查詢(xún)?yōu)橐恍滦途w結(jié)構(gòu)，CCDC： 2007957。

關(guān)鍵詞：麗江紫烏頭;新型C-19二萜生物堿;晶體結(jié)構(gòu)

中圖分類(lèi)號(hào)：R284;Q949.746.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

麗江紫烏頭Aconitum episcopale Levl.又名紫草烏，堵喇，系毛茛科烏頭屬植物，生長(zhǎng)于海拔2 400～3 200 m的叢林或高山草地中，主要分布于四川西南部和云南西北部 [1]。在民間其塊根常用來(lái)治療風(fēng)濕骨痛、跌打傷痛等病癥。有文獻(xiàn)報(bào)道，不同產(chǎn)地紫烏頭中所含C-19二萜生物堿有著明顯差異[2]。目前，對(duì)產(chǎn)地為麗江的紫烏頭研究報(bào)道不多。本課題對(duì)麗江永勝產(chǎn)的紫烏頭全草進(jìn)行研究，從中分離得到多個(gè)C-19二萜生物堿，其中得到化合物120330A（26 mg），因其結(jié)構(gòu)特殊故對(duì)其進(jìn)行單晶結(jié)構(gòu)解析。

1 實(shí)驗(yàn)部分[3]

1.1 儀器與材料

VG Auto spec-3000型質(zhì)譜儀（英國(guó) VG公司）;德國(guó)Bruker公司生產(chǎn)的Bruker AV300 MHz 超導(dǎo)核磁共振儀; Bruker-X射線單晶衍射儀;青島海洋化工廠出產(chǎn)柱色譜硅膠;北京泰克公司生產(chǎn)的XT24顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀，TLC采用GF254高效硅膠板（北京泰克公司生產(chǎn)）。樣品采自云南麗江永勝縣，經(jīng)云南大學(xué)生物系胡志浩教授鑒定為毛茛科植物麗江紫烏頭（Aconitum episcopale Levl.），標(biāo)本YS-2009-09-21存放于云南大學(xué)教育部自然資源與藥物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 提取與分離

將7.5 kg干燥的麗江永勝產(chǎn)紫烏頭全草用95%乙醇進(jìn)行多次浸泡，通過(guò)減壓濃縮制得浸膏，用水將浸膏溶解，然后經(jīng)過(guò)酸化，過(guò)濾，再進(jìn)行堿化，接著用氯仿為萃取劑進(jìn)行多次反復(fù)萃取，經(jīng)減壓濃縮除去溶劑后制得浸膏245 g。取該浸膏用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，溶劑體系采用石油醚和醋酸乙酯（含5%三乙胺）梯度洗脫（體積比30∶1），洗脫液合并后得7個(gè)部分，第7部分用石油醚和丙酮（含6%三乙胺）溶劑體系梯度洗脫（體積比7∶1～0∶1），采用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，得到化合物120330A（26 mg）。

2 結(jié)果與討論

2.1 化合物120330A的核磁共振部分?jǐn)?shù)據(jù)

化合物120330A：無(wú)色晶體（氯仿），m.p.134～136 ℃，1H-NMR（300 MHz，CDCl3）δ： 3.54（1H，s，OH），4.16（1H，t， J=4.8 Hz，H-14）， 3.36， 3.25， 3.20（各3H，s，OCH3））， 2.64和3.14（各1H，d，J=9.1 Hz，H-18）， C13NMR（CDCl3，75 MHz） δ：84.1 （C-1）， 27.8 （C-2）， 32.8 （C-3），38.7（C-4）， 46.0 （C-5）， 24.5 （C-6）， 45.8 （C-7）， 71.5（C-8）， 47.3 （C-9）， 45.8 （C-10）， 48.0 （C-11）， 27.8 （C-12）， 37.8 （C-13）， 76.6 （C-14）， 38.0 （C-15）， 82.8 （C-16）， 61.9 （C-17），78.4 （C-18）， 166.8 （C-19）， 50.5 （C-20）， 18.4 （C-21）， 55.9（1′-OCH3）， 56.5 （16′-OCH3）， 59.3 （18′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)說(shuō)明化合物120330A 為aconitane 型C-19二萜生物堿，與C-19二萜生物堿中的已知化合物塔拉薩敏數(shù)據(jù)相似[4]，不同之處在C-19處可能有碳基或CN雙鍵存在。因此，初步認(rèn)定其骨架為塔拉薩敏結(jié)構(gòu)，但在其存在碳基或碳氮雙鍵，如圖1。

2.2 化合物120330A的晶體結(jié)構(gòu)測(cè)定

為了對(duì)化合物結(jié)構(gòu)及構(gòu)型進(jìn)行確定，利用溶劑緩慢揮發(fā)法培養(yǎng)單晶并測(cè)定單晶結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)[5]。取少量化合物120330A，用氯仿溶解，室溫下溶劑緩慢揮發(fā)并析出質(zhì)量合乎要求的無(wú)色塊狀晶體。表1為化合物120330A的晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)，表2為其部分鍵長(zhǎng)和鍵角數(shù)據(jù)。圖2所示為化合物120330A的單晶結(jié)構(gòu)，如圖所示19個(gè)碳形成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，1個(gè)N-CH2CH3，3個(gè)-OCH3均與C19-二萜生物堿塔拉薩敏的結(jié)構(gòu)完全一致，且從圖上顯示C19處與氧以雙鍵相連，即有碳基存在。且根據(jù)單晶結(jié)構(gòu)圖顯示兩個(gè)羥基分別以14α，8β型進(jìn)行連接，C-1上的甲氧基和C-16上的甲氧基也分別以1α，16β方式進(jìn)行連接，此晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)一步證實(shí)了化合物120330A的結(jié)構(gòu)特征。

3 結(jié)論

對(duì)麗江永勝產(chǎn)紫烏頭的全草進(jìn)行研究，首次從該種植物中分離得到化合物120330A，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行波譜分析與單晶衍射數(shù)據(jù)分析，確定其結(jié)構(gòu)為aconitane 型C-19二萜生物堿，在其19號(hào)位有一CO，在14和8號(hào)位有羥基，1。16，18號(hào)位有甲氧基，將其與文獻(xiàn)[6]中化合物1的數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，確定其結(jié)構(gòu)為14α，8β-dihydroxy-1α，16β，18-Trimethoxy -19-oxoaconitan[6]。化合物120330A首次從該種植物中分離得到，并通過(guò)CCDC數(shù)據(jù)庫(kù)查詢(xún)?yōu)橐恍滦途w結(jié)構(gòu)，CCDC： 2007957。

致謝 感謝云南大學(xué)教育部自然資源與藥物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室李良教授團(tuán)隊(duì)對(duì)本實(shí)驗(yàn)的大力支持。

參考文獻(xiàn)：

[1]中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志（第27卷）[M].北京：科學(xué)出版社，1979.

[2]安婧嫻，劉芳，劉芳，等. 近年來(lái)烏頭屬植物二萜生物堿化學(xué)成分及其鎮(zhèn)痛活性研究進(jìn)展[J]. 中南藥學(xué)， 2016， 14（5）： 521-525.

[3]李詠梅，龔元，姜艷萍，等. 紫烏頭中二萜生物堿的研究 [J]. 中草藥， 2013， 44（8）： 951-954.

[4]龔元，李詠梅，趙靜峰，等.麗江紫烏頭中的二萜生物堿[J]. 云南大學(xué)學(xué)報(bào)， 2012， 34（5）： 566-569.

[5]張麗娜，李遙，阮班鋒，等.一種新型白藜蘆醇查爾酮類(lèi)衍生物的單晶結(jié)構(gòu)及合成工藝研究[J]. 安徽化工，2019，45（2）：50-53.

[6]胡疆 ，呂濤 ，蔡建，等. 滇南烏頭中C19二萜生物堿化學(xué)成分研究[J]. 中國(guó)中藥雜志， 2019， 44（4）： 717-722.

（責(zé)任編輯：曾 晶）

Abstract：

The diterpenoid alkaloids of Aconitum episcopale Levl. were studied and a diterpenoid alkaloid were isolated by silica column chromatogramphy. The diterpenoid alkaloids of Aconitum episcopale Levl. was subjected to a slow solvent evaporation method to obtain a single crystal and its structure was analyzed. CCDC： 2007957.

Key words：

Aconitum episcopale Levl.; C-19 diterpenoid alkaloids; single crystal