索氏抽提儀測定粗脂肪的方法研究

◎ 金 凱，丁 萍，蔡燕斌

（1.江蘇君信新華安全科技有限公司，江蘇 張家港 215600；2.張家港檢驗(yàn)認(rèn)證有限公司，江蘇 張家港 215600）

脂肪是食物的重要成分之一，包括動(dòng)物脂肪和植物脂肪。植物脂肪廣泛存在于許多植物的種子果實(shí)中，其中大豆使用最為廣泛。準(zhǔn)確測定大豆的粗脂肪含量為收購大豆以質(zhì)論價(jià)、計(jì)算出油率、研究大豆油料營養(yǎng)價(jià)值以及對其進(jìn)行合理利用等提供參考，是評價(jià)產(chǎn)品品質(zhì)和組織生產(chǎn)的重要依據(jù)[1]，因此測定大豆中粗脂肪含量顯得尤為重要。測定大豆中粗脂肪含量的方法很多，目前最常用的有經(jīng)典索氏抽提法[2-5]和索氏抽提儀法[4-5]，近年來不少文獻(xiàn)對大豆粗脂肪含量測定影響因素進(jìn)行分析[6-8]，對兩種測定方法也做過對比[4]。目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用索氏抽提儀測定粗脂肪，不同型號的儀器對樣品的前處理方法沒有明確的要求，對于儀器操作方法介紹的比較籠統(tǒng)，也未見有文獻(xiàn)關(guān)于這方面的相關(guān)報(bào)道。筆者采用索氏抽提儀，通過對稱樣量、浸提溶劑、沸騰溫度、沸騰時(shí)間、以及淋洗時(shí)間等條件的改進(jìn)，最終篩選出了最優(yōu)測定條件。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

索氏抽提儀（FOSS 8000型）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（DGH-9070A）。

石油醚60～90 ℃、石油醚30～60 ℃（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

大豆樣品由張家港檢驗(yàn)認(rèn)證有限公司實(shí)驗(yàn)室提供，使用前需要除去雜質(zhì)和損傷粒，并使用刀式樣品磨研磨均勻。

1.2 方法步驟

稱取已磨碎充分混勻試樣0.5 g（準(zhǔn)確至0.000 1 g），全部轉(zhuǎn)移到濾紙筒內(nèi)；將濾紙筒放入索氏抽提器的抽提筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器冷凝管上端加入60～90 ℃石油醚80 mL于接收瓶內(nèi)；在沸騰溫度125 ℃，沸騰時(shí)間20 min，淋洗時(shí)間45 min，回收時(shí)間10 min的條件下，使石油醚不斷回流抽提，提取結(jié)束后，取下接收瓶，再于（100±5）℃干燥30 min，放干燥器內(nèi)冷卻45 min后稱量，重復(fù)以上操作直至恒重。

2 結(jié)果與分析

2.1 浸提溶劑的選擇

使用30～60 ℃石油醚浸提，沸騰溫度為90 ℃，沸騰時(shí)間為1 h，淋洗時(shí)間為4 h，回收時(shí)間為10 min；使用60～90 ℃石油醚浸提，沸騰溫度為125 ℃，沸騰時(shí)間為20 min，淋洗時(shí)間為45 min，回收時(shí)間為10 min。分別使用兩種方法測定同一個(gè)大豆樣品，平行測定6次。結(jié)果如表1所示。

由表1可知，兩種測定粗脂肪方法中使用60～90 ℃石油醚，浸提時(shí)間短，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差低，因此選用60～90 ℃石油醚作為浸提溶劑。

表1 兩種浸提溶劑的測定大豆的粗脂肪表

2.2 稱樣量

大豆的油分比較高，稱樣量太小則沒有代表性，太大浸提又不完全，分別稱取0.400 0 g、0.500 0 g、0.600 0 g和0.700 0 g已磨碎充分混勻試樣，按照實(shí)驗(yàn)方法測定大豆的粗脂肪，稱樣量與脂肪含量的關(guān)系見表2。由表2可知，稱樣量為0.500 0 g時(shí)結(jié)果最佳。

表2 稱樣量與脂肪含量的關(guān)系表

2.3 抽提條件

將樣品全部轉(zhuǎn)移到濾紙筒內(nèi)，將濾紙筒放入抽提筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的接收瓶，加入80 mL石油醚，在合適的沸騰溫度下沸騰、淋洗一段時(shí)間。影響測定結(jié)果的主要因素是沸騰溫度、沸騰時(shí)間、淋洗時(shí)間，為了找到既準(zhǔn)確又省時(shí)的檢測條件，設(shè)計(jì)L9(34)的正交試驗(yàn)，因素水平和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表3和表4。最優(yōu)條件測定結(jié)果與其他實(shí)驗(yàn)室結(jié)果比較情況見表5。東海糧油實(shí)驗(yàn)室采用國標(biāo)GB 5009.6—2016第一法[9]測定，抽提時(shí)間為6～10 h。由表5可知，實(shí)驗(yàn)條件A2B3C3是最準(zhǔn)確又省時(shí)的，即在125 ℃沸騰溫度下，沸騰20 min，淋洗45 min。

表3 L9(34)因素水平表

表4 L9（34）試驗(yàn)計(jì)劃、結(jié)果記錄及分析計(jì)算表

表5 最優(yōu)條件測定結(jié)果與其他實(shí)驗(yàn)室結(jié)果比較表

3 結(jié)論

本文建立了索氏抽提儀測定大豆中粗脂肪的方法，該方法準(zhǔn)確度高、精密度好，極大的縮短了操作時(shí)間，可用于批量樣品檢測，提升了檢測效率。該方法使用60～90 ℃石油醚浸提，該石油醚沸點(diǎn)高、不易揮發(fā)、毒性小，不僅減輕了對人體的危害，也減少了對環(huán)境的污染；實(shí)驗(yàn)沸騰溫度高達(dá)125 ℃，能適應(yīng)各種常規(guī)的實(shí)驗(yàn)檢測條件，不同檢測環(huán)境對結(jié)果帶來的影響不大，檢測重復(fù)性好。