楊文婧 田鑫雨 金悅 崔福順
(延邊大學(xué),吉林 延吉 133000)
我國為人參主要產(chǎn)地,其中東北三省的人參產(chǎn)量為全國的80%。人參花又名“神草花”,為五加科植物人參屬植物人參的干燥花蕾,4a人參才能開花,且1顆人參1a只開1朵花。人參花采摘期短,營養(yǎng)豐富,素有“綠色黃金”之稱。近些年,科研學(xué)者為高效利用人參的地上部分,相繼對人參莖、葉、果的功效成分展開了深入研究,特別是對人參莖、葉、果等中皂苷類研究較多?,F(xiàn)有研究已證實人參花富含大量功效成分,其皂苷含量高出人參根5倍之多。
20世紀(jì)80年代,邵春杰等[1]研究發(fā)現(xiàn),人參的營養(yǎng)主要集中于花蕾,并不是傳統(tǒng)觀念中的根部;楊明等[2]等研究人參花食用安全性時得出,人參花屬于實際無毒物,未見遺傳毒性,長期服用安全的結(jié)論。
目前,對人參花中皂苷類物質(zhì)的研究較多。1976年,Yahara S等[3]成功提取出3種人參皂苷,分別是Rd、Re和Rg1。1998年,邱峰等[4]從人參花中提取出15種化合物,通過鑒定的高達(dá)11種,其中,9種為已知皂苷,3種為新皂苷。2003年,國外學(xué)者Wang H X通過實驗研究提取到了一種核糖核酸酶。2007年,Yoshikawa等[5]提取了6種新的三萜型皂苷,通過鑒定發(fā)現(xiàn)7種已知皂苷。
人參皂苷是人參花中的最重要的功效活性成分之一。Re和Rg1這2種皂苷具有促進(jìn)智力發(fā)育的功效;并且經(jīng)鑒別發(fā)現(xiàn)其含量占人參總皂苷含量的41.07%和10.47%。焦傳新等以Re和Rg1含量為檢測變量,對人參皂苷的提取工藝進(jìn)行了改進(jìn)與優(yōu)化,通過正交實驗法得到研究結(jié)果,當(dāng)料液比為1∶12、提取次數(shù)為3次、提取時間為1h時提取率最高[6]。
徐斐等[7]采用色譜技術(shù)對人參花的醇提物進(jìn)行分離純化,并根據(jù)理化性質(zhì)和波譜學(xué)數(shù)據(jù)對化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,結(jié)果發(fā)現(xiàn),從人參花70%乙醇水溶液提取物中分離得到11個化合物,其中化合物20(S)-人參皂苷Rh1、20(S)-原人參三醇、達(dá)瑪-20(21),24-二烯-3β,6α,12β-三醇、達(dá)瑪-(E)-20(22),24-二烯-3β,6α,12β-三醇為首次從人參花中分離得到。李沙沙[8]對人參花蕾水層部分分離純化發(fā)現(xiàn)了56個化合物單體,經(jīng)過結(jié)構(gòu)鑒定發(fā)現(xiàn)7個新的化合物。
陳瑞戰(zhàn)等[9]以人參花為提取原料,通過實驗對比優(yōu)化微波法在一定條件下可提取到約為4.3%的多糖,這種方法最大優(yōu)勢在于操作時限短、提取質(zhì)量高,是名副其實的綠色提取技術(shù),提取的多糖可用于美妝、保健等產(chǎn)品研發(fā)中。
王冰清[10]等利用DEAE-Cellulose柱層析分級,成功提取到1個中性糖級分GFLN和4個酸性糖級分;經(jīng)分析后發(fā)現(xiàn),中性糖GFLN的提取率最高,通過分級醇沉獲得了GFLN-I、GFLN-II、GFLN-III和GFLN-S 4個級分;其中,GFLA-2經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow分級生成5個級分。韓丹將酸性級分GFLA-1通過Sepharose CL-6B處理生成了2個級分。至此人參花多糖的系統(tǒng)分級和結(jié)構(gòu)研究較為完整[11]。
黃酮類化合物是藥用植物中最具有標(biāo)識性的物質(zhì),具有多重功效。都宏霞等[12]為了得到微波輔助提取人參花黃酮的最佳工藝,通過單因素實驗得出響應(yīng)面優(yōu)化條件,利用構(gòu)建數(shù)學(xué)模型確定出了人參花黃酮最佳提取參數(shù):微波功率800W、時間30s、乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為54%、料液比1∶21。該實驗為人參花黃酮的研究奠定了重要的基礎(chǔ)。
揮發(fā)性成分具有2大顯著特性,易揮發(fā)和極性低。一般采用氣相色譜-質(zhì)譜進(jìn)行含量測定。但這種方法不適用于酯、酚等中極性的化合物。
肖陽等[13]采用響應(yīng)面法優(yōu)化以固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜(SPME-GC-MS)技術(shù)萃取人參花揮發(fā)性成分的工藝,構(gòu)建了由各因素參與的回歸模型。經(jīng)驗證分析得知,該模型具備可行性。
目前,揮發(fā)油提取方式主要有2種,水蒸氣蒸餾和超臨界CO2萃取。后者憑借無污染、提取純度高等優(yōu)勢受到了廣泛關(guān)注。王恩鵬等[14]利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測提取物及酸催化的人參花脂肪酸衍生物,結(jié)果得出,CO2萃取法提取到的活性物質(zhì)性能更穩(wěn)定,能夠客觀、真實地反映化學(xué)組分。因此這種新萃取技術(shù)具有廣闊的工業(yè)前景。
人參花中富含綠原酸,劉松長等[15]建立以高效液相色譜法測定人參花中綠原酸含量的方法,色譜柱為ODS-C18(250mm×4.6mm,5μm),流動相為乙腈-0.5%磷酸溶液(30∶70),流速為1.0mL·min-1,檢測波長為326nm,柱溫為25℃。綠原酸在0.4~4.0μg與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系(R=0.9991);平均回收率為99.28%,RSD=1.46%(n=6)。
近年來,酒精性脂肪肝一直處于高病發(fā)之勢。酒精性脂肪肝病癥早期發(fā)展階段,是長期飲酒造成生物酶活性異常,使肝細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的脂肪變性,會發(fā)展成為不可逆的酒精性肝炎或酒精性肝硬化。安松蘭等[16]探討了人參花乙醇提取物對酒精性脂肪肝的保護(hù)作用機制,利用雄性SD大鼠,隨機分為正常對照組、模型對照組及人參花乙醇提取物給藥組;健康參照組和模型參照組均灌胃生理鹽水,人參花乙醇提取物給藥組灌胃給予人參花乙醇提取物300mg·kg-1,1次·d-1,共10d;實驗結(jié)束后,處死大鼠取肝組織,通過HE和油紅O染色進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察,利用real-time PCR法測定SREBP1c、FAS、SCD1、GPAT、過氧化物酶體增殖劑激活受體(PPAR-α)及脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(CD36)的基因表達(dá)水平,得到人參花乙醇提取物對大鼠酒精性脂肪肝具有保護(hù)作用的結(jié)論。
人參花皂苷已被證實是人參花最重要的成分,能減少胃液分泌,緩解胃酸酸度,改善酶活性,因此在防治胃潰瘍上具有顯著療效。丘佳玲等[17,18]通過實驗將小刺猴頭菌接種于人參花固體培養(yǎng)基中發(fā)酵,獲得猴頭人參花菌質(zhì)。建立無水乙醇致小鼠胃潰瘍模型,觀察3種模型對小鼠的胃潰瘍面積及對潰瘍抑制率的影響。證實兩者聯(lián)合使用比單一用藥效果更好;同時猴頭人參花菌質(zhì)不僅能加快胃壁血液循環(huán),還能促使受損胃黏膜快速恢復(fù),在治療急性胃潰瘍上具有顯著效果。
金洪鍵[19]等以力竭游泳為造模手段造成氣虛血瘀大鼠模型,并將人參根提取物組與各劑量人參花提取物組與模型組比較發(fā)現(xiàn),全血黏度與血漿黏度間的差異相對比較大,得出人參花提取物可顯著改善血液黏滯狀態(tài)、促進(jìn)血液流動,起到活血化瘀的功效。
林楠等[20]通過對小鼠負(fù)重游泳時間、血乳酸、肌糖原等相關(guān)指標(biāo)檢測,圍繞人參花提取物與小鼠抗疲勞間的作用機制展開了深入研究,得出,人參花提取物0.8g·kg-1劑量組和人參花提取物0.6g·kg-1劑量組能顯著延長小鼠負(fù)重游泳時間;升高肌糖原和肝糖原的儲備;明顯降低運動后血乳酸水平,其中人參花提取物0.8g·kg-1劑量組效果最佳。同時猜測實驗過程中小鼠負(fù)重游泳時間延長根源在于Rm7cd,泳后20~50min是血乳酸恢復(fù)期,通過觀察血乳酸的變化可確定疲勞是否消除。人參花提取物能快速下調(diào)血乳酸,避免乳酸大量堆積,從而有助于加快疲勞恢復(fù)。
王本祥等[21]研究了人參莖葉和人參花皂苷對腫瘤的抑制作用。實驗設(shè)計為給5種腫瘤小鼠注射以生理鹽水配制的不同濃度的人參莖葉皂苷和花皂苷藥品,1次·d-1,連續(xù)給藥7d或10d。結(jié)束給藥后處死動物,稱瘤塊重量。如果得出人參莖葉皂苷和人參花皂苷無論腹腔注射或口服,均對S-180有明顯的抑制作用,對其它實驗?zāi)[瘤效果較差。兩者均能增強環(huán)磷酰胺的抗腫瘤作用,均能增強正常及荷瘤小鼠的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能。
萬茜淋等[23]研究結(jié)果表明,在-DPPH清除方面,人參花多糖與維生素C的抗氧化活性基本相近;在羥自由基清除方面,人參花多糖的性能優(yōu)勢明顯高于維生素C。表明人參花多糖不僅在金屬離子螯合方面具有很強優(yōu)勢,還具有很強的還原能力。
研究表明,人參在阻礙老化指標(biāo)表達(dá)、緩解氧化應(yīng)激損傷、阻礙氧化應(yīng)激信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方面具有積極效用,而且人參皂苷在延緩衰老方面起實質(zhì)性作用。田雅娟等[24]通過建立BALB/c小鼠皮膚光老化動物模型,對人參花軟膏與UVB所致皮膚損傷間的修復(fù)機制展開了研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),相較于模型組,人參花軟膏中高劑量組的皮膚損傷得到了顯著修復(fù),可強化皮膚的抗氧化酶SOD活性,有效抑制MDA產(chǎn)生。
鄭維玲[25]通過大鼠離體工作心臟模型、冠狀動脈結(jié)扎法建立大鼠心肌缺血模型、血小板聚集等多種可行且有效的方法,證實人參花總皂苷在動物血液動力學(xué)中起到了積極的調(diào)節(jié)作用,不僅提高了心肌收縮力,還改善了心輸出量。其在防治心機損傷方面也起到了積極作用,具體表現(xiàn)為可抑制心肌肌酸激酶、乳酸脫氫酶含量,促生超氧化物歧化酶含量。除此之外,人參花總皂苷還能有效預(yù)防血栓形成。
王冰清[10]等對人參花水溶性粗多糖進(jìn)行柱層析分級,用HPLC法驗證多糖級分后用紅外光譜分析等方法對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究,得出人參花多糖的各級分中GFLA-2GFLN-II級分多ConA/LPS誘導(dǎo)的T/B淋巴細(xì)胞均表現(xiàn)出強烈的刺激作用;GFLA-4對ConA誘導(dǎo)的T細(xì)胞產(chǎn)生了顯著的刺激影響。而相關(guān)研究也進(jìn)一步證實,GFLA-4對于ConA誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞具有增殖作用。
陳長武等[26]利用人參花豐富的營養(yǎng)和保健價值,通過去苦技術(shù)對人參花提取液進(jìn)行處理,使人參花微苦的口味和獨特的氣味得到保持和改良,同時配以藍(lán)莓汁和木糖醇,通過正交試驗確定最佳配比,研制成良好風(fēng)味且營養(yǎng)豐富的保健飲料。任保國等[27]也利用同樣的原理研發(fā)了人參花蘋果汁保健飲料。林曉琳[28]以人參花和大棗為原料,利用超聲波輔助提取人參花,利用富含皂苷的提取液,輔以大棗汁,加工成復(fù)合型飲料,獲得具有提高人體免疫力、養(yǎng)血安神、緩解更年期綜合癥等功能的飲品。林和興[29]將菊花與人參花配比結(jié)合制成人參花菊花復(fù)合清涼飲料,其功能可互補與增效,口感、風(fēng)味等易于相互協(xié)調(diào)。
除了人參花飲料外,1982年李秀榮[30]研發(fā)了人參花啤酒。人參花啤酒除了具有普通啤酒的特點外,還含有人參花中的有效成分——人參總皂苷的浸出物。該產(chǎn)品口味純正,具有濃郁酒花與人參的苦香味的獨特風(fēng)格。
除食用功效外,田雅娟等[24]利用含皂苷活性物質(zhì)、氨基酸、微量元素等成分豐富的人參花研發(fā)制作人參花軟膏。人參花軟膏在修復(fù)皮膚損傷上具有顯著效果,具體表現(xiàn)可強化皮膚的抗氧化酶SOD活性,有效抑制MDA產(chǎn)生。究其原因在于Nrf2 mRNA過表達(dá)發(fā)揮了關(guān)鍵作用。
人參花中功效成分較多,但主要以人參皂苷及其轉(zhuǎn)化物、脂肪酸、綠原酸等功效成分居多。目前,研究者仍將視線聚焦在人參皂苷提取及應(yīng)用上,其它人參花有效成分提取方法也在不斷優(yōu)化;有關(guān)人參花護(hù)肝、抗炎、抗疲勞、抗腫瘤等功效作用的應(yīng)用實驗亦在不斷探索;人參花有關(guān)產(chǎn)品開發(fā)在飲料方面已經(jīng)取得初步成果。隨著人們對保健食品及保養(yǎng)品的日益重視,研究者對人參花衍生產(chǎn)品開發(fā)亦在不斷進(jìn)行中。