黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種組培快繁技術(shù)研究

田英男 張?zhí)鞚? 秦曉杰 馮壘 胡淞 師凱輝 黃鑫 韓欣妤 朱永平 和鳳美

摘 ?要：本研究以黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種蒴果為外植體，通過對種子無菌萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo)、原球莖增殖及叢生芽誘導(dǎo)、生根壯苗以及移栽馴化研究，建立雜交石斛蘭的組培快繁技術(shù)體系。結(jié)果表明，最適合種子無菌萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+瓊脂6.8 g/L+蔗糖20 g/L+馬鈴薯50 g/L;原球莖增殖及叢生芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為1/2?MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0?mg/L+蔗糖25 g/L+瓊脂6.8 g/L+碳粉1.0 g/L+馬鈴薯50?g/L+香蕉50 g/L，繼代培養(yǎng)50 d，增殖系數(shù)達(dá)6.19;最佳生根壯苗培養(yǎng)基為1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+花寶1號0.5 g/L+蔗糖25 g/L+瓊脂6.8 g/L+碳粉1.0 g/L+馬鈴薯50 g/L+香蕉50 g/L，培養(yǎng)2個月后，平均株高達(dá)7.14 cm，平均根數(shù)6.17條，平均根長6.46 cm，生根率達(dá)100%。體積比為單一松樹皮和松樹皮∶蘭石=1∶1適于移栽，移栽65 d成活率分別達(dá)到96.32%和96.71%。

關(guān)鍵詞：黑毛石斛;鼓槌石斛;雜交育種;組織培養(yǎng)

Abstract： In order to establish a rapid propagation for Dendrobium williamsonii × D. chrysotoxum， the immature hybrid seeds were selected as the explants to study the suitable medium for aseptic seed germination， protocorm-like bodies （PLBs） induction， proliferation of protocorm and shoot induction， rooting and growth and domestication by transplanting were also screened. MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.3 mg/L + agar 6.8 g/L + sucrose 20 g/L + potato 50 g/L was the best medium for hybrid seeds germination and protocorm induction. 1/2 MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L + KT 1.0?mg/L + sucrose 25 g/L + agar 6.8 g/L+AC 1.0 g/L + potato 50 g/L + banana 50 g/L was suitable for protocorm proliferation and shoot induction，and the proliferation coefficient reached 6.19 times after 50d. The best rooting and growth medium was 1/2 MS + 6-BA 0.2 mg/L + NAA 0.5 mg/L + Hyponex No.1 0.5 g/L + sucrose 25 g/L + agar 6.8 g/L + AC 1.0 g/L + potato 50?g/L + banana 50 g/L， cultivated for 2 months， root system was long and strong， plant height was 7.14 cm， average number of roots was 6.17， average root length was 6.46 cm， rooting rate was 100%. In the pine bark and mixture of pine bark∶orchid stone =1∶1 （V∶V）， after cultured for 65 d， the survival percentage was 96.32% and 96.71%， respectively.

Keywords： Dendrobium williamsonii; Dendrobium chrysotoxum; cross breeding; tissue culture

石斛屬（Dendrobium）是蘭科中最大的一個屬，其原種將近2?000種，13?600多個雜交種[1-3]。中國有74種，2變種[4]，分布于西南、華南、臺灣等熱帶、亞熱帶和秦嶺以南各地[5]，以附生為主，生存環(huán)境的氣候一般都是比較濕潤、溫暖以及半蔭的環(huán)境[6-7]。石斛屬植物對生長環(huán)境要求比較苛刻，自然狀態(tài)下生長較緩慢且繁育力極低[8-9]，加之具有較高觀賞性和藥用價值，長期被掠奪性采挖，對石斛屬自然資源造成嚴(yán)重破壞，種質(zhì)資源枯竭嚴(yán)重，培育石斛新品種已變得越來越重要。近年來，石斛雜交育種工作已開展，但報道仍較少[10-12]。

蘭科植物繁殖主要靠分株繁殖，繁殖系數(shù)低、速度慢，不能滿足日益增長的市場需求[13]。蘭科植物也可以進(jìn)行有性繁殖，主要靠昆蟲授粉，但種子沒有胚乳，且種皮致密，透性差，在自然條件下幾乎不能萌發(fā)[14-15]，因此，主要靠人工授粉雜交培育出種子，再利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜交苗[15-17]，但不同物種所需培養(yǎng)基不同，必須進(jìn)行篩選優(yōu)化。

黑毛石斛（Dendrobium williamsonii Day et. Rchb. f.）生長在海拔約1000 m的林中樹干上，花期4?5月，具有較高的觀賞價值[4]。鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum Lindl）又名金弓石斛、粗黃草，花和莖可入藥，是集食、藥、觀賞于一體的石斛品種，也是被《中國藥典》收錄的5種石斛之一[18]。

本研究以黑毛石斛（D. williamsonii）為母本，鼓槌石斛（D. chrysotoxum）為父本進(jìn)行雜交，并建立種子組培快繁體系，有利于該石斛蘭雜交種的應(yīng)用與推廣，同時對石斛蘭的保育起到一定的作用。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

供試材料黑毛石斛和鼓槌石斛種植于云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院溫室，2018年3—5月進(jìn)行人工雜交授粉，10月進(jìn)行采收。

1.2 ?方法

1.2.1 ?材料消毒與接種 ?取黑毛石斛×鼓槌石斛成熟蒴果，用洗潔精洗后，流水沖洗30 min，再用75%酒精浸泡5 min，無菌水沖洗2次，用0.1%升汞溶液浸泡消毒15 min，無菌水沖洗6～8次，無菌濾紙吸干，備用。

1.2.2 ?種子萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo) ?在1/3 MS、1/2 MS和MS培養(yǎng)基中添加6-BA 0.5?mg/L、NAA 0.3 mg/L、瓊脂6.8?g/L和蔗糖20?g/L。用手術(shù)刀片劃開蒴果，把種子均勻撒播于培養(yǎng)基中，每種配方播種5瓶。

1.2.3 ?原球莖增殖與叢生芽誘導(dǎo) ?將萌發(fā)后的種子接種到原球莖增殖與叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，以1/2 MS為基本培養(yǎng)基，添加蔗糖25 g/L、馬鈴薯50 g/L、香蕉50 g/L、碳粉1 g/L、瓊脂6.8 g/L。每組各5瓶，每個瓶內(nèi)接180個原球莖，培養(yǎng)50?d后，統(tǒng)計原球莖增殖與分化結(jié)果。增殖系數(shù)=培養(yǎng)后原球莖總數(shù)/接種原球莖數(shù)。

1.2.4 ?無菌苗生根壯苗 ?取含2～3片葉、高2～ 3?cm苗轉(zhuǎn)接到生根壯苗培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基配方以1/2 MS為基本培養(yǎng)基，添加蔗糖30 g/L、馬鈴薯50 g/L、香蕉50 g/L、碳粉1 g/L、瓊脂6.8 g/L。每組各5瓶，每瓶接種6株幼苗，培養(yǎng)60 d后，統(tǒng)計生根率、根長、株高等情況。平均生根數(shù)（條）= 生根根數(shù)/生根株數(shù)，平均根長（cm）=根長總和/根總數(shù)量，生根率=（生根苗數(shù)/全部苗數(shù)）100%。

1.2.5 ?培養(yǎng)條件 ?培養(yǎng)溫度為（25±1）℃，光照強度為1500～2000 lx，光照時間為12 h/d，以上每個階段pH為5.8。

1.2.6 ?移栽馴化 ?選用松樹皮、水苔、椰糠、泥炭（德國進(jìn)口）、蘭石共5種基質(zhì)，設(shè)置單一基質(zhì)及2種復(fù)合基質(zhì)共10種處理。將生長健壯的幼苗（株高為5 cm左右，含4～5片葉，長勢大體一致）置于溫室中煉苗7?d，再打開瓶口煉苗5?d，溫度（25±1）℃。洗去培養(yǎng)基，用1?000倍多菌靈浸泡20 min，蔭干后栽植于各基質(zhì)中，每個處理30盆，每盆栽種3苗，65 d后統(tǒng)計成活率等指標(biāo)。存活率=（存活苗數(shù)/全部苗數(shù)）×100%。

1.3 ?數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2010軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計，采用DPS V9.50軟件對各觀測指標(biāo)進(jìn)行方差分析和極差分析。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?不同因素對種子萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo)的影響

種子在培養(yǎng)15 d后，培養(yǎng)基表面可見綠色點狀物，表明種子在3種（1/3 MS、1/2 MS和MS）培養(yǎng)基中均能萌發(fā)，再經(jīng)過35 d左右，原球莖形成。

其中在MS培養(yǎng)基（圖1C）中原球莖誘導(dǎo)效果最好，原球莖顏色為深綠色，其次是1/2 MS培養(yǎng)基（圖1B），誘導(dǎo)效果最差的是1/3 MS（圖1A），原球莖誘導(dǎo)較少，原球莖顏色為黃色，甚至出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，隨著培養(yǎng)時間的增加這種現(xiàn)象更加嚴(yán)重。

A：雜交種子在1/3 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20?g/L+馬鈴薯50 g/L中培養(yǎng)50 d;B：雜交種子在1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20?g/L+馬鈴薯50 g/L中培養(yǎng)50 d;C：雜交種子在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+馬鈴薯50?g/L中培養(yǎng)50 d。

2.2 ?不同激素配比對原球莖增殖與叢生芽誘導(dǎo)的影響

原球莖經(jīng)過10?d的繼代培養(yǎng)已經(jīng)開始增殖（圖2A），再經(jīng)過15?d繼代培養(yǎng)，6-BA、NAA和KT 3種激素不同配比的培養(yǎng)基均對黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種原球莖產(chǎn)生了影響，原球莖增殖系數(shù)最高的前三組分別達(dá)到5.72、6.05、6.19，其中處理4的原球莖增殖系數(shù)最高（表1），達(dá)6.19（圖2B），再經(jīng)過25 d培養(yǎng)原球莖已經(jīng)完全誘導(dǎo)成叢生芽（圖2C）。

2.3 ?不同激素配比對生根壯苗的影響

由表2可知，經(jīng)過60 d的培養(yǎng)后，雜交苗在9組培養(yǎng)基中均已生根，由方差結(jié)果可知，培養(yǎng)基對株高和平均根長影響達(dá)到極顯著水平。其中處理4的無菌苗生長狀況最好，株高7.14 cm，平均根數(shù)6.17條，平均根長6.46 cm（圖2D，圖2E）。

2.4 ?移栽馴化培養(yǎng)

由表3可知，在經(jīng)歷65 d的移栽培養(yǎng)后，經(jīng)觀察與統(tǒng)計，雜交種苗在10種不同基質(zhì)中均能生長，在供試的5種單一基質(zhì)中，試管苗的移栽成活率在76.16%～96.32%之間，其中水苔的最低，松樹皮的最高;從株高情況看，在6.54～9.67 cm之間，以水苔的最低，松樹皮的最好;從生長狀況看，以松樹皮為基質(zhì)生長最好，葉片綠顏色有光澤，莖綠色粗壯，長勢良好（圖2F）。綜合以上參數(shù)，松樹皮是最適于黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種試管苗移栽的單一基質(zhì)。在試驗的5個復(fù)合基質(zhì)中，試管苗成活率在88.32%～96.71%之間，松樹皮∶蘭石=1∶1的存活率最高，為96.71%，其次分別為泥炭∶蘭石=1∶1（成活率為93.68%）和松樹皮∶泥炭=1∶1（成活率為92.37%），以松樹皮∶椰糠=1∶1的存活率最低，為88.32%;從株高情況看，在8.36～9.75 cm之間，以松樹皮∶椰糠=1∶1的最低，松樹皮∶蘭石=1∶1的最高;從生長狀況看，表現(xiàn)最好的基質(zhì)為松樹皮∶蘭石= 1∶1。綜合以上參數(shù)，最適于黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種試管苗移栽的復(fù)合基質(zhì)為：松樹皮∶蘭石= 1∶1。

3 ?討論

石斛屬種間雜交及黑毛石斛組織培養(yǎng)相關(guān)報道較少，故本研究在鐵皮石斛、鼓槌石斛和石斛屬其他植物研究的基礎(chǔ)上，從種子萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo)、原球莖增殖和叢生芽誘導(dǎo)、生根壯苗、移栽馴化培養(yǎng)4個階段進(jìn)行了研究。

3.1 ?不同基本培養(yǎng)基對種子萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo)的影響

隨著石斛屬以及蘭科其他植物越來越多無菌播種技術(shù)的成功，通過無菌播種規(guī)?；旆狈N苗更簡單、快捷，而且育苗成本更低[19]。鑒于此，石斛屬的無菌播種技術(shù)也受到了重視。仇碩等[20]認(rèn)為在培養(yǎng)基中添加一定量的6-BA和NAA有利于種子萌發(fā)和原球莖的誘導(dǎo)。從研究結(jié)果來看，黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種子的萌發(fā)較容易，其中以MS中添加蔗糖20 g/L和馬鈴薯50 g/L為基本培養(yǎng)基，再加入6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.3 mg/L的種子萌發(fā)效果最好，并利于原球莖的誘導(dǎo)，這與前人的研究結(jié)果相似。在1/3MS和1/2MS培養(yǎng)基中出現(xiàn)的黃色原球莖和玻璃化現(xiàn)象有可能是由于培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)隨著培養(yǎng)時間的增加消耗殆盡造成的。

A：原球莖在1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖25 g/L+碳粉1.0?g/L+馬鈴薯50 g/L+香蕉50 g/L原球莖增殖與叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)10?d;B：原球莖在原球莖增殖與叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)25 d;C：原球莖在原球莖增殖與叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)50 d;D：組培苗在1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+花寶1號0.5 g/L+蔗糖25 g/L +碳粉1.0 g/L+馬鈴薯50 g/L+香蕉50 g/L培養(yǎng)基上生根壯苗培養(yǎng)60 d;E：無菌苗生根效果;F：在松樹皮中移栽65 d的生長情況。

3.2 ?不同激素對原球莖增殖和叢生芽誘導(dǎo)的影響

原球莖增殖和叢生芽誘導(dǎo)階段是石斛屬植物擴繁的關(guān)鍵時期。采用激素處理是最常用的方法，通過一定量的生長素并添加細(xì)胞分裂素來提高增殖誘導(dǎo)效果。本研究結(jié)果表明，原球莖在以1/2 MS為基本培養(yǎng)基添加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L、KT 1.0 mg/L及蔗糖25 g/L、馬鈴薯50 g/L、香蕉50 g/L、碳粉1 g/L、瓊脂6.8 g/L的培養(yǎng)基中生長50?d，原球莖增殖系數(shù)達(dá)到6.19且叢生芽生長表現(xiàn)良好，適用于原球莖增殖和叢生芽誘導(dǎo)，這與王一諾等[21]認(rèn)為重唇石斛原球莖增殖和叢生芽誘導(dǎo)的最佳激素組合為6-BA 2.0?mg/L+KT 0.2?mg/L+ NAA 0.4 mg/L得到的結(jié)果相似。

3.3 ?花寶一號對石斛雜交苗生根壯苗的影響

生根壯苗階段是組織培養(yǎng)最重要的階段之一，本研究在生根壯苗階段添加了一定量的花寶一號（7N-6P-19K），其最早是用作蘭科植物種子萌發(fā)的培養(yǎng)基[22]。在本研究過程中發(fā)現(xiàn)其有利于雜交種苗的生根壯苗，結(jié)果優(yōu)于前人只使用NAA、6-BA的情況[23-24]，這與黃象男等[25]在蝴蝶蘭生根壯苗階段以花寶一號為基本培養(yǎng)基，添加NAA、6-BA，結(jié)果明顯優(yōu)于以1/2 MS、MS為基本培養(yǎng)基的其他組的結(jié)論相一致，表明花寶一號有利于植株生根壯苗，說明在使用NAA、6-BA基礎(chǔ)上添加適量的花寶一號有利于石斛苗的生根壯苗。通過研究得出以1/2 MS為基本培養(yǎng)基，添加6-BA 0.2?mg/L、NAA 0.5?mg/L、花寶1號0.5?g/L，并加入蔗糖25?g/L、碳粉1.0?g/L、馬鈴薯50 g/L、香蕉50 g/L為石斛雜交苗壯苗生根的最適培養(yǎng)基，2個月后，平均株高、平均根數(shù)、平均根長等指標(biāo)最好，生根率達(dá)100%。

3.4 ?石斛雜交苗移栽馴化過程中基質(zhì)的選擇

栽培基質(zhì)的選擇對于石斛苗的生長與發(fā)育影響較大，采用透氣性好的樹皮和蘭石，保水性好的水苔、椰糠和泥炭作為單一基質(zhì)，并根據(jù)它們的透氣和保水的特性配制混合基質(zhì)，保證石斛苗在不同基質(zhì)中能正常生長。結(jié)合移栽后植株的生長狀況和成活率來看，在單一基質(zhì)中，以樹皮為最佳，水苔最差，這與李蕾等[26]在鼓槌石斛移栽馴化過程中將水苔作為基質(zhì)，獲得了97%的成活率不一致，可能是因為水苔保水性較好，昆明地區(qū)在夏秋季陰雨天氣較多，晴天時溫室中更是高溫高濕的環(huán)境，易引起植株根系和假鱗莖腐爛[27]，因而不適宜用水苔作為基質(zhì);椰糠在單一基質(zhì)中表現(xiàn)也較差，可能是因為其保水性較好且在浸泡后鹽分過高，對植物根系傷害較大的緣故。在混合基質(zhì)中植株生長狀況和成活率比單一基質(zhì)都有不同程度提升，其中樹皮∶蘭石=1∶1最佳，其次是樹皮∶泥炭=1∶1，泥炭∶蘭石=1∶1，它們的保水和透水性都很高，且有很好的營養(yǎng)成分。因基質(zhì)為單一樹皮和樹皮∶蘭石=1∶1在成活率和株高差距不大且生長狀況相同，綜合成本考慮，采用樹皮作為基質(zhì)成本低，成活率高，生長狀況良好，適合黑毛石斛×鼓槌石斛雜交苗的生長。

參考文獻(xiàn)

Pridgeon A， Morrison A. The Illustrated Encyclopedia of Orchids - Over 1100 Species Illustrated and Identified[M]. Portland： Timber Press Lid， 2006： 87-103.

Wu Z Y， Raven P H， Hong D Y. Missouri Botanical Garden Press Flora of China （Vol. 25， Orchidaceae）[M]. Beijing： Science Press， 2009： 367-397.

王 ?雁， 周進(jìn)昌， 鄭寶強， 等. 石斛蘭[M]. 北京： 中國林業(yè)出版杜， 2014： 2.

中國科學(xué)院中國植物志編委會. 中國植物志： 第19卷[M]. 北京： 科學(xué)出版社， 1999： 67， 133.

鄒成勇， 劉 ?燕. 我國石斛屬植物研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2010， 38（12）： 6164-6166， 6223.

杜佳林. 蘭花育種現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 廣西熱帶農(nóng)業(yè)， 2009（5）： 32-35.

郭麗霞， 莫 ?饒. 蘭花育種研究現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2007（3）： 303-309.

李風(fēng)童， 包建忠， 孫 ?葉， 等. 蘭花種子萌發(fā)研究進(jìn)展及對國蘭雜交育種的啟示[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2015， 43（10）：

13-16.

王卜瓊， 李枝林， 余朝秀. 蘭花育種研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報， 2005（3）： 551-556.

符岸軍， 李娟玲， 李勁松， 等. 石斛蘭“綠色星辰×出水芙蓉”雜交種子無菌萌發(fā)與組培快繁研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011， 39（5）： 2577-2580.

陳和明， 呂復(fù)兵， 李 ?佐， 等. 秋石斛蘭F1代主要觀賞性狀的遺傳表現(xiàn)[J]. 熱帶作物學(xué)報， 2016， 37（9）： 1664-1669.

朱勝蕾. 中國石斛屬植物育種潛力研究[D]. 中國林業(yè)科學(xué)研究院， 2016.

范成明， 李枝林， 何月秋. 蘭花組織培養(yǎng)及分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報， 2003（4）： 487-491.

丁秋露， 趙旵軍. 蘭花組織培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 生物學(xué)雜志， 2010， 27（2）： 76-79.

曾碧玉， 朱根發(fā)， 劉海濤. 蘭花選育種研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報， 2005（12）： 272-276.

周 ?銀， 徐嘉敏， 肖 ?政， 等. 蘭花繁殖和育種研究進(jìn)展[J]. 北方園藝， 2013（13）： 204-207.

吳根良， 商世能， 沈國正， 等. 蘭花育種現(xiàn)代技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 杭州農(nóng)業(yè)科技， 2006（3）： 25-28.

杜溶訖， 于增金， 殷 ?彪， 等. 鼓槌石斛研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2018， 46（23）： 6-8.

葉秀仙， 黃敏玲， 林榕燕， 等. 素心建蘭無菌播種快繁技術(shù)研究[J]. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報， 2015， 30（10）： 939-943.

仇 ?碩， 趙志國， 趙 ?健， 等. 翅萼石斛組織培養(yǎng)及快繁技術(shù)研究[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2018， 45（9）： 48-52， 173.

王一諾， 李林軒， 韋 ?瑩， 等. 不同濃度激素配比對重唇石斛組織培養(yǎng)的影響[J]. 北方園藝， 2016（10）： 148-151.

Nishimura G. Japanese Orchids[M]//Arditti J. Orchid Biology Ⅱ： Reviews and Perspectives， Orchid seed germination and seeding culture – a manual. Ithaca： Cornell University Press， New York， 1982： 331-346.

崔 ?波， 康瑩瑩， 王潔瓊， 等. 鼓槌石斛組織培養(yǎng)及快繁技術(shù)研究[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報， 2015， 31（19）： 111-116.

徐 ?紅， 劉 ?峻， 王崢濤， 等. 鼓槌石斛組織培養(yǎng)研究[J]. 中國中藥雜志， 2001（6）： 18-21.

黃象男， 臧 ?新， 呂曉輝， 等. 蝴蝶蘭組培快繁技術(shù)研究[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2008（1）： 91-93， 109.

李 ?蕾， 劉 ?偉. 鼓槌石斛組培苗移栽試驗[J]. 安徽農(nóng)學(xué)通報， 2018， 24（Z1）： 63-64.

Zhou H， Gao Q， Gong Q F， et al. First report of stem and root rot of the medicinal herb Dendrobium officinale （Orchidaceae） caused by Ceratobasidium sp. AG-R in Guangxi， China[J]. Plant Disease， 2017， 101（9）： 1679-1680.

責(zé)任編輯：謝龍蓮