桂東南地區(qū)三種常見(jiàn)雞病毒性免疫抑制病的血清抗體檢測(cè)與分析

呂其壯，李佩倫，張成成，覃 婷，陳旭健 *

（1. 玉林師范學(xué)院生物與制藥學(xué)院，廣西 玉林 537000；2. 廣西農(nóng)產(chǎn)資源化學(xué)與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 玉林 537000；3. 玉林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西 玉林 537000；4. 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州 225009）

0 引言

【研究意義】近年來(lái)，我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展勢(shì)頭良好，特別自2018年我國(guó)發(fā)生非洲豬瘟疫情以來(lái)，不少地區(qū)的養(yǎng)禽生產(chǎn)形勢(shì)發(fā)生了很大變化，總體呈現(xiàn)穩(wěn)中向好。盡管如此，我國(guó)大部分地區(qū)仍有疫苗免疫失敗、多種疾病并發(fā)或繼發(fā)感染，以及禽類生長(zhǎng)受阻等現(xiàn)象的發(fā)生，給我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，更打擊了許多養(yǎng)殖戶的積極性。究其原因，主要是由于雞群中免疫抑制性疾病的普遍存在?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】常見(jiàn)的禽類免疫抑制性疾病包括禽白血病病毒（ALV）、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒（REV）、禽呼腸孤病毒（ARV）、雞傳染性法氏囊病病毒（IBDV）、雞傳染性貧血病毒（CIAV）、馬立克氏病病毒（MDV）、腺病毒和隱孢子蟲等，這些免疫抑制性疾病能夠損害禽的免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致其機(jī)體對(duì)抗原的應(yīng)答能力下降，對(duì)疾病的敏感性增強(qiáng)，經(jīng)常合并、繼發(fā)和加重病毒、細(xì)菌和真菌性感染，危害很大，已引起國(guó)內(nèi)外的高度關(guān)注[1?6]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】國(guó)內(nèi)外關(guān)于免疫抑制性疾病在雞群中的感染有很多報(bào)道，但在廣西壯族自治區(qū)尚有待深入探討。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】為此，本研究對(duì)廣西東南部的玉林、北流、興業(yè)、博白、容縣、陸川、貴港、桂平和平南等地區(qū)散養(yǎng)家禽開(kāi)展了CIAV、REV和ARV病毒抗體的血清學(xué)檢測(cè)，以期為當(dāng)?shù)仉u群的凈化和養(yǎng)殖者在雞病毒性免疫抑制病的防控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集

2018年3月至2019年4月，分別用一次性真空采血管從玉林、北流、興業(yè)、博白、容縣、陸川、貴港、桂平、平南等9個(gè)縣市送檢的疑似免疫抑制性疾病的病雞（臨床表現(xiàn)為生長(zhǎng)不良、消瘦、腫瘤、貧血、疫苗免疫應(yīng)答不佳、臉和冠蒼白等，發(fā)病前均未免疫接種過(guò)以上相關(guān)病毒的疫苗）中自雞翅靜脈采血1～3 mL·只?1，分離血清，編號(hào)并置于?20 ℃冰箱中保存待測(cè)。采樣病雞日齡為10～289日齡 ，品種包括三黃雞、涼亭雞和霞煙雞。

1.2 主要試劑及儀器

CIAV、REV和ARV ELISA抗體檢測(cè)試劑盒均購(gòu) 自美國(guó)愛(ài)德士（IDEXX）公司。

1.3 抗體檢測(cè)

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法（ELISA），按照檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書對(duì)所采集的血清樣本進(jìn)行CIAV、R EV和ARV抗體檢測(cè)，每次檢測(cè)用樣1 μL。

1.4 數(shù)據(jù)分析

根據(jù)Varioskan LUX酶標(biāo)儀上讀取的OD值和各種試劑盒中的檢測(cè)說(shuō)明書判斷試驗(yàn)有效性，用Excel軟件對(duì)上述各種病毒性免疫抑制病的感染率和混合感染率，以及各疾病在各季節(jié)、各區(qū)域和各個(gè)生 長(zhǎng)階段的感染率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 桂東南地區(qū)3種常見(jiàn)雞病毒性免疫抑制病血清抗體的檢測(cè)結(jié)果

采用ELISA方法對(duì)所采集的637份血清樣品進(jìn)行了CIAV、REV和ARV病毒抗體的檢測(cè)，結(jié)果有215份抗體陽(yáng)性，抗體陽(yáng)性率為33.75%，其中單一感染陽(yáng)性血清數(shù)為162份，單一感染率為25.43%，混合感染陽(yáng)性血清數(shù)為53份，混合感染率為8.32%，表明該地區(qū)雞群中存在CIAV、REV和ARV感染，且以CIAV 感染率最高（23.86%），以ARV 感染率最低（7.06%）（表1）。

表1 3種常見(jiàn)雞病毒性免疫抑制病的血清抗體檢測(cè)結(jié)果Table 1 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases

2.2 不同日齡雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的檢測(cè)結(jié)果

由表2可知，各個(gè)生長(zhǎng)階段的雞群均存在不同程度的感染，40日齡以下的雛雞感染率2.01%～23.49%，40～140日齡的雞群的感染率9.26%～24.07%，141～240日齡的雞群的感染率4.55%～25.00%，240日齡以上雞群的感染率0～25.00%。

表2 不同日齡雞群三種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的血清抗體檢測(cè)結(jié)果Table 2 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases at different day ages

2.3 不同季節(jié)雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的檢測(cè)結(jié)果

由表3可知，3種常見(jiàn)雞病毒性免疫抑制病在一年四季均可發(fā)生，春季的感染率5.15%～28.35%，夏季的感染率8.05%～14.77%，秋季的感染率8.70%～28.99%，冬季的感染率7.05%～22.44%。

表3 不同季節(jié)雞群3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的血清抗體檢測(cè)結(jié)果Table 3 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases in different seasons

2.4 不同地區(qū)雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的檢測(cè)結(jié)果

由表4可知，桂東南地區(qū)農(nóng)戶散養(yǎng)雞群中三種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的感染已成普遍趨勢(shì)，感染率0～40.17%，其中以玉林和北流為代表的養(yǎng)雞主產(chǎn)區(qū)呈現(xiàn)廣泛分布，表明這些地區(qū)的防控形勢(shì)依然嚴(yán)峻。

表4 不同生長(zhǎng)區(qū)域雞群3種病毒性免疫抑制病的血清抗體檢測(cè)陽(yáng)性率Table 4 Positive rates of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases from different areas

2.5 不同品種雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的檢測(cè)結(jié)果

本次血清學(xué)檢測(cè)的樣品采自桂東南地區(qū)的3種常見(jiàn)品種雞，分別是玉林三黃雞[7]、容縣霞煙雞[8]和北流涼亭雞[9]，3種品種雞的病毒性免疫抑制病的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表5。結(jié)果表明被檢測(cè)的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病在不同品種雞群中均有發(fā)生，三黃雞的感染率8.20%～26.50%，霞煙雞的感染率5.31～18.58%，涼亭雞的感染率6.28%～22.71%，可見(jiàn)3種不同品種雞對(duì)雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病的易感性并無(wú)明顯差異。

表5 不同品種雞群3種病毒性免疫抑制病的血清抗體檢測(cè)結(jié)果Table 5 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases in different chicken breeds

2.6 桂東南地區(qū)雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病混合感染結(jié)果

檢測(cè)結(jié)果顯示桂東南地區(qū)農(nóng)戶散養(yǎng)雞群中病毒性免疫抑制病呈現(xiàn)混合感染的血清數(shù)為53份，占陽(yáng)性樣品的比例為24.65%，其中以二重感染類型為主，二重感染占混合感染樣品的比率為66.04%。在混合感染的樣品中，以CIAV混合感染其他病原最為常見(jiàn)，占混合感染樣品的比例為98.11%（表6），表明CIAV是桂東南地區(qū)農(nóng)戶散養(yǎng)雞群中病毒性免疫抑制病混合感染的主要病原。

表6 三種常見(jiàn)雞病毒性免疫抑制病混合感染的檢測(cè)結(jié)果Table 6 Investigation results of mixed infection of three common chicken viral immunosuppressive diseases

3 討論

廣西屬于亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候，擁有發(fā)展畜牧業(yè)的良好自然條件，其中家禽養(yǎng)殖是廣西畜牧業(yè)中的傳統(tǒng)經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目，儼然成為廣西農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中的支柱產(chǎn)業(yè)，占整個(gè)廣西畜牧業(yè)產(chǎn)值的三分之一[10]。然而，近年來(lái)存在的一些歷史和現(xiàn)實(shí)的原因嚴(yán)重制約了廣西家禽養(yǎng)殖業(yè)的正常提速。其中禽免疫抑制性疾病，尤其是病毒性免疫抑制病，就是困擾當(dāng)前廣西養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的重要原因之一。該類疾病的大面積暴發(fā)給廣西養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[11?13]。為了解目前廣西地區(qū)雞群中免疫抑制性疾病存在的情況，本試驗(yàn)采用ELISA方法對(duì)桂東南地區(qū)家禽養(yǎng)殖優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)區(qū)雞的3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病進(jìn)行了一次血清學(xué)調(diào)查，評(píng)估了這3種疫病對(duì)雞群的影響。

檢測(cè)結(jié)果顯示，桂東南地區(qū)的農(nóng)戶散養(yǎng)雞群中存在病毒性免疫抑制病的感染，其中以CIAV感染率為最高，提示今后該地區(qū)應(yīng)將CIAV作為防控的重點(diǎn)。從感染的類型來(lái)看，雖然單一感染率占比25.43%，但混合感染也不容忽視，占比8.32%，且以CIAV+其他病原混合感染類型最為常見(jiàn)。在混合感染的樣品中，二重感染占比最高達(dá)66.04%，且以“CIAV+REV”雙重感染最為常見(jiàn)。從不同日齡、不同季節(jié)雞群的病毒性免疫抑制病檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，被檢測(cè)的3種常見(jiàn)雞病毒性免疫抑制病的發(fā)病特點(diǎn)與之前報(bào)道的各自的流行病學(xué)基本一致[6,13]，總體呈現(xiàn)普遍感染的趨勢(shì)。值得注意的是，CIAV的混合感染多出現(xiàn)在雛雞雞群，ARV的感染多發(fā)于40～140日齡，REV的感染多發(fā)于春季。其中REV的感染率為13.97%，明顯高于石夢(mèng)雅等[14]針對(duì)廣西及周邊地區(qū)地方品種雞群中REV（2.43%）的調(diào)查結(jié)果，提示近兩年REV呈現(xiàn)暴發(fā)趨勢(shì)，應(yīng)予以重視，但由于采用的檢測(cè)方法不同，所以二者之間的具體差異還有待進(jìn)一步商榷。與此同時(shí)，與李桂喜等[15]針對(duì)蘇、魯、豫、皖4省的23個(gè)縣市區(qū)的蛋雞雞群中腫瘤相關(guān)疾病的調(diào)查結(jié)果（占比4.01%）相比，桂東南地區(qū)REV等疫病感染的形勢(shì)還很嚴(yán)峻，有關(guān)這類疫病的防疫仍需持續(xù)加強(qiáng)。

從地域分布上看，玉林、北流、容縣、貴港和興業(yè)5個(gè)市縣均檢測(cè)到了CIAV、REV和ARV的抗體，表明這3種病毒性免疫抑制病在以上5個(gè)區(qū)域呈現(xiàn)廣泛分布，但在博白和桂平兩地卻未檢測(cè)到以上3種病毒的抗體，這可能與當(dāng)?shù)氐姆酪叽胧┹^好有關(guān)，也可能與該地區(qū)雞群的養(yǎng)殖密度和采集病料較少有關(guān)。從雞的品種來(lái)看，3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病在3種地方品種雞中基本都存在，不存在明顯的種間感染差異。

4 結(jié)論

總體來(lái)看，3種常見(jiàn)病毒性免疫抑制病在桂東南地區(qū)的農(nóng)戶散養(yǎng)雞群中呈現(xiàn)廣泛分布，其中CIAV是主要病原體，且以CIAV與其他病毒組成的混合感染類型為主。因此，無(wú)論生產(chǎn)上是否有有效的疫苗，都要重視并加強(qiáng)雞病毒性免疫抑制病，尤其是CIAV的防治工作。