野韭菜組織培養(yǎng)及快速繁殖研究

葉青雷 馬云橋 劉海軍 于永強(qiáng)

摘 要：通過對(duì)野韭菜組織培養(yǎng)過程中外植體及激素配比的研究，建立野韭菜植株再生體系。結(jié)果表明，根尖外植體最適合野韭菜離體培養(yǎng)，MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT為最佳愈傷組織培養(yǎng)基，MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT為最佳不定芽分化培養(yǎng)基，MS+0.1mg/L NAA為生根培養(yǎng)基，移栽成活率達(dá)98%以上。

關(guān)鍵詞：野韭菜;組織培養(yǎng);外植體;快速繁殖

中圖分類號(hào) S633.3;S604+.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 1007-7731（2021）11-0036-02

Tissue Culture and Rapid Propagation of Wild Chinese Chive

YE Qinglei1 et al.

（1Heilongjiang Agricultural Technology Extension Station，Harbin 150090， China）

Abstract： Regeneration System of wild Chinese chive is established by studying the ratio of explant and hormones in the process of tissue culture. Research shows that the apical explant is most suitable for in vitro culture of wild Chinese chive， MS+0.2mg/L 2， 4-D+0.5mg/L ZT is the best medium for callus，MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT is the best medium for the differentiation of adventitious buds， MS+0.1mg/L NAA is used as rooting medium， the survival rate of transplanting is more than 98%.

Key words： Wild Chinese chive;Tissue culture;Explant;Rapid propagation

野韭菜別名巖蔥、觀音菜、山韭菜、寬葉韭等，屬百合科蔥屬多年生草本植物，主要生長在海拔400m以上的山區(qū)。野韭菜富含多種營養(yǎng)元素，是一種營養(yǎng)保健型野生蔬菜，具有很好的食療價(jià)值，可作餡、炒食或湯用[1-2]，但產(chǎn)量極少，普通菜市場(chǎng)上鮮有出售。為此，筆者通過研究野韭菜組培技術(shù)，建立野韭菜植株再生體系，為野韭菜的快速繁殖及產(chǎn)量和商品價(jià)值的提升提供有效途徑。

1 材料與方法

1.1 材料 山區(qū)采集的野韭菜。

1.2 方法

1.2.1 無菌外植體的制備 野韭菜采回后用流水沖洗干凈，分別切取根、葉和子房0.3～0.6cm的組織，放入75%酒精中浸泡約50s，再用0.1% HgCl2溶液消毒2min，之后用無菌水沖洗3次，再用滅菌濾紙吸干水分，作為接種的外植體[3]。

1.2.2 愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及生根培養(yǎng) 以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加7g/L瓊脂粉（Agar）和30g/L蔗糖，pH 5.8。愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及生根培養(yǎng)基中添加不同濃度的2，4-D、ZT、6-BA、IAA或NAA（見表1）。將無菌外植體接種于不同激素配比的培養(yǎng)基上（圖1），25d后觀察記錄愈傷組織誘導(dǎo)情況。將愈傷組織切成小塊后接種于不定芽分化培養(yǎng)基上，20d后觀察記錄不定芽分化情況。將不定芽切下，然后接種于生根培養(yǎng)基上，25d后觀察記錄生根情況。培養(yǎng)條件：溫度25℃，光照12h/d，光照強(qiáng)度1500～2000Lx。

愈傷誘導(dǎo)率（%）=產(chǎn)生愈傷組織的外植體數(shù)/接種外植體數(shù)×100[4]

分化率（%）=產(chǎn)生不定芽的外植體數(shù)/接種愈傷組織塊數(shù)×100

生根率（%）=長根的不定芽數(shù)/接種芽數(shù)×100[5]

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素配比對(duì)野韭菜外植體愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽分化及生根的影響 由表1可知，野韭菜葉片組織不能誘導(dǎo)出愈傷組織，子房組織愈傷誘導(dǎo)率非常低，根尖組織最適合野韭菜離體培養(yǎng)，最佳愈傷組織培養(yǎng)基A1為MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT，愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)62.6%;最佳不定芽分化培養(yǎng)基B1為MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT，不定芽分化率達(dá)83.3%;生根培養(yǎng)基C1為MS+0.1mg/L NAA，生根率為100%。

2.2 野韭菜繼代苗根尖組織培養(yǎng)再生植株 野韭菜繼代苗在C1生根培養(yǎng)基上誘根產(chǎn)生，根長1.0～4.0cm時(shí)（圖2A），切下0.5～1cm的根尖轉(zhuǎn)接于A1愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上（圖2B），長出愈傷后再在B1培養(yǎng)基上進(jìn)行誘芽分化（圖2C、D），可以得到較高的出愈率和不定芽分化率。不定芽轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基（圖2E、F），在生根培養(yǎng)20～30d后，將其移至基質(zhì)中，用保鮮膜覆蓋保濕，5d后將保鮮膜去除，幼苗成活率達(dá)98%以上（圖2G）。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)以山區(qū)采集的野韭菜為研究對(duì)象，研究不同激素組合對(duì)野韭菜葉片、子房及根尖組織的愈傷誘導(dǎo)及不定芽分化的影響。結(jié)果表明，愈傷誘導(dǎo)和不定芽分化的最佳培養(yǎng)基分別為MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT和MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT，生根最適培養(yǎng)基為MS+0.1mg/L NAA，組培苗經(jīng)馴化移栽后成活率達(dá)98%。通過野韭菜根尖組織培養(yǎng)再生植株，可以解決野韭菜的保存與快速繁殖問題。

參考文獻(xiàn)

[1]劉朝安，曾文丹，武鵬，等.野韭菜的植物學(xué)特性及其栽培技術(shù)[J].北方園藝，2013，13：211.

[2]萬正林，黃雄彪，龍明華，等.野韭菜水培栽培技術(shù)[J].北方園藝，2014，19：55-56.

[3]王桂英.韭菜根尖培養(yǎng)及植株再生[J].北方園藝，2007，12：199-200.

[4]王茜.建立野韭菜離體培養(yǎng)體系的研究[D].西寧：廣西大學(xué)，2015.

[5]高行英.韭菜根再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化相關(guān)因素研究[D].晉中：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.

（責(zé)編：徐世紅）