三尖杉莖葉中的二萜類(lèi)化合物研究

張 鑫，王景麗，趙春雪，姜春宇，景沁雪，袁藝珍，李達(dá)翃，李占林，華會(huì)明，白 皎

沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院 天然藥物化學(xué)教研室，遼寧 本溪 117004

三尖杉Cephalotaxus f ortuneiHook.f.為三尖杉科三尖杉屬植物，我國(guó)特有樹(shù)種，主產(chǎn)于我國(guó)南方[1]。三尖杉味苦、澀，性平、微寒，我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥中主要應(yīng)用于驅(qū)蟲(chóng)、止咳、潤(rùn)肺，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中主要用于治療白血病和惡性淋巴瘤等[2]。藥理學(xué)研究表明，三尖杉中的三尖杉酯堿類(lèi)化合物對(duì)急性非淋巴細(xì)胞性白血病和慢性粒細(xì)胞白血病有較好療效，三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿在我國(guó)已被開(kāi)發(fā)成抗癌藥物[3]。近幾年研究表明，三尖杉中的環(huán)庚三烯酮類(lèi)降二萜類(lèi)化合物也有很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性[4-6]。為了更好地開(kāi)發(fā)利用三尖杉植物資源，本實(shí)驗(yàn)對(duì)三尖杉莖葉75%乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從其二氯甲烷萃取部位分離得到10 個(gè)二萜類(lèi)化合物，分別鑒定為12,16-二羥基松香烷-6,8,11,13-四烯-3-酮（1）、檜醇（hinokiol，2）、柳杉酚（sugiol，3）、margoclin（4）、cephafortoid B（5）、torreyayunnin（6）、貢山三尖杉二萜 D（lanceolatin D，7）、6α-羥基山達(dá)海松酸（6α-hydroxy sandaracopimaric acid，8）、海南粗榧內(nèi)酯（hainanolide，9）、海南粗榧內(nèi)酯醇（hainanolidol，10）。化合物1 為新化合物，化合物4、8 為首次從三尖杉屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

BS124S 電子分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；SB-35 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛(ài)朗有限公司）；101-1BS 恒溫鼓風(fēng)干燥箱 [邦西儀器科技（上海）有限公司]；Shimadzu UV-1700 型紫外光譜儀[島津儀器（蘇州）有限公司]；Perkin-Elmer 241 MC polarimeter 型旋光測(cè)定儀（美國(guó)Perkin-Elmer 公司）；Bruker-600M-AVIII-型核磁共振波譜儀（美國(guó)Bruker公司）；6450-UHD-accurate-Mass-Q-TOF-MS 型高分辨質(zhì)譜儀（美國(guó)Agilent 公司）；Hitachi L-6000 型高效制備液相色譜儀；YOKO-CS 薄層色譜紫外檢測(cè)器（武漢藥科新科技公司）；HP20 大孔樹(shù)脂（美國(guó)Supelco 公司）；ODS 柱色譜填料（GE Heaithcare公司）；Sephadex LH-20（GE Heaithcare 公司）；氘代試劑 CDCl3及 DMSO-d6（Cambridge Isotope Laboratories Inc.）；柱色譜硅膠及薄層色譜硅膠（青島海洋化工廠）；色譜甲醇（天津市康科德科技有限公司）；色譜乙腈（山東禹王和天下新材料有限公司）；其他所有溶劑均為分析純（天津市富宇精細(xì)化工有限公司）。

三尖杉莖葉購(gòu)于安徽真源堂藥業(yè)有限公司，產(chǎn)于安徽南部，經(jīng)沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院袁久志副教授鑒定為三尖杉Cephalotaxus fortuneiHook.f.。

2 提取與分離

取三尖杉莖葉45.8 kg，用75%工業(yè)乙醇浸泡后回流提取3 次，每次2 h，合并提取液，濃縮得到浸膏共6.45 kg。將浸膏懸浮于水，加入2%的稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 值2～3，溶液濾過(guò)，得到沉淀。將上述的沉淀物用水懸浮，并加入無(wú)水碳酸鈉調(diào)節(jié)pH 至中性，分別用二氯甲烷、醋酸乙酯和正丁醇萃取，濃縮干燥后得到二氯甲烷萃取物A（105 g）、醋酸乙酯萃取物B（100 g）和正丁醇萃取物C（300 g）。將二氯甲烷萃取物A（105 g）用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，以二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，結(jié)合薄層色譜檢識(shí)合并，得到7 個(gè)組分（Fr.a1～a7）。Fr.a1 經(jīng)二氯甲烷重結(jié)晶得到化合物3（8.5 mg）。Fr.a2 經(jīng)過(guò)HP20 大孔樹(shù)脂除去色素，經(jīng)硅膠開(kāi)放柱色譜，采用石油醚-醋酸乙酯（100∶0～0∶100）洗脫，得到8 個(gè)亞組分（Fr.a2-1～a2-8），其中Fr.a2-2 經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜（甲醇）純化及重結(jié)晶（甲醇）得到化合物6（10.8 mg）；Fr.a2-5 經(jīng)半制備高效液相色譜（59%乙腈）純化得到化合物2（6.5 mg，tR＝58 min）。Fr.a3 經(jīng)過(guò)HP20大孔樹(shù)脂除去色素，經(jīng)硅膠開(kāi)放柱色譜，二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）洗脫，得到7 個(gè)亞組分（Fr.a3-1～a3-7），其中Fr.a3-1 經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜（甲醇）得2 個(gè)組分（Fr.a3-1-1、Fr.a3-1-2），F(xiàn)r.a3-1-1 經(jīng)甲醇重結(jié)晶得化合物9（20.9 mg）；Fr.a3-1-2 經(jīng)半制備高效液相色譜（68%甲醇）純化得到化合物10（22.7 mg，tR＝22 min）；Fr.a3-5 經(jīng)半制備高效液相色譜（65%甲醇）純化得到化合物1（13.8 mg，tR＝46 min）；Fr.a3-7 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）得到了化合物8（5.3 mg）。Fr.a4經(jīng)過(guò)HP20 大孔樹(shù)脂除去色素，經(jīng)ODS 開(kāi)放柱色譜分離（20%～100%甲醇），得到7 個(gè)亞組分（Fr.a4-1～a4-7），其中Fr.a4-4 經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜（甲醇）得化合物5（3.3 mg）；Fr.a4-5 和Fr.a4-7分別經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜（甲醇）與半制備高效液相色譜（50%甲醇和63%甲醇）純化分別得到化合物7（5.1 mg，tR＝32 min）和4（12.1 mg，tR＝43 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色針狀結(jié)晶（甲醇），[α]20D-45.2 (c1.0, MeOH)。紫外254 nm 下呈暗斑，365 nm 下呈黃色熒光，10%硫酸乙醇試劑顯紫色。UV (MeOH)顯示最大吸收峰λmax(logε)：281 (0.44)，207 (1.12)，248 (0.20) nm。HR-ESI-MS 顯示準(zhǔn)分子離子峰m/z313.178 5 [M－H]-，結(jié)合氫譜和碳譜數(shù)據(jù)確定分子式為C20H26O3，不飽和度為8。

1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) 譜（表1）顯示2 個(gè)芳香質(zhì)子信號(hào)δ6.83 (1H, s, H-14), 6.65 (1H, s, H-11)，推測(cè)為苯環(huán)的對(duì)位質(zhì)子；2 個(gè)順式偶合烯氫質(zhì)子信號(hào)δ6.54 (1H, dd,J =9.6, 3.0 Hz, H-7), 5.76 (1H, dd,J =9.6, 2.6 Hz, H-6)；δ3.55 (1H, dd,J= 10.2, 5.6 Hz, H-16), 3.35 (1H, dd,J =10.2, 7.7 Hz, H-16)，提示存在羥甲基。13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6) 譜（表1）給出20 個(gè)碳信號(hào)，其中δ214.4為酮羰基碳信號(hào)，δ154.9, 144.7, 128.5, 128.1, 125.8, 124.4, 123.6, 109.3 為芳碳或烯碳信號(hào)，提示存在1個(gè)苯環(huán)和1 個(gè)雙鍵，其中δ154.9 為連氧芳碳信號(hào)；δ65.6, 50.9, 46.5, 36.8, 34.6, 34.4, 34.3, 24.7, 22.2, 19.8, 17.1 為脂肪碳信號(hào)，其中δ65.6 為連氧碳信號(hào)。由此推斷該化合物為松香烷二萜類(lèi)化合物。詳細(xì)比較化合物1 與已知化合物5（cephafortoid B）的1H-和13C-NMR 數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，C 環(huán)和側(cè)鏈部分基本一致，主要差別在A 環(huán)和B 環(huán)上，化合物1 相比于cephafortoid B，少了2 個(gè)脂肪碳信號(hào)，多了1 組雙鍵信號(hào)δH6.54 (1H, dd,J= 9.6, 3.0 Hz, H-7),δC128.5；δH5.76 (1H, dd,J= 9.6, 2.6 Hz, H-6),δC124.4。

表1 化合物1 的核磁數(shù)據(jù) (600/150 MHz, DMSO-d6)Table 1 NMR data of compound 1 (600/150 MHz, DMSO-d6)

在1H-1H COSY 譜中可以觀察到3 個(gè)自旋耦合系統(tǒng)：C1-C2、C5-C6-C7、C16-C15-C17。在HMBC譜中，亞甲基質(zhì)子信號(hào)δ2.30 (1H, ddd,J= 15.3, 14.4, 6.1 Hz, H-1), 2.34 (1H, ddd,J= 15.5, 4.6, 2.8 Hz, H-2), 2.90 (1H, m, H-2) 以及2 個(gè)甲基質(zhì)子δ1.17 (3H, s, 19-CH3), 1.04 (3H, s, 18-CH3) 分別與羰基碳δ214.4 相關(guān)，確定了羰基在C-3 位。烯氫質(zhì)子信號(hào)δ5.76 (1H, dd,J= 9.6, 2.6 Hz, H-6) 與C-4 (δ46.5)、C-5 (δ50.9)、C-7 (δ128.5) 相關(guān)，δ6.54 (1H, dd,J= 9.6, 3.0 Hz, H-7) 與C-5 (δ50.9)、C-6 (δ124.4)、C-9 (δ144.7)、C-11 (δ109.3)、C-14 (δ125.8) 相關(guān)，芳香質(zhì)子信號(hào)δ6.83 (1H, s, H-14) 與C-7 (δ128.5)、C-9 (δ144.7)、C-12 (δ154.9)、C-15 (δ34.6) 相關(guān)，確定雙鍵位于C-6和C-7位；具體1H-1H COSY和HMBC 相關(guān)見(jiàn)圖1。

圖1 化合物1 的結(jié)構(gòu)式及主要 1H-1H C OSY (粗線) 和HMBC (箭頭) 相關(guān)Fig.1 Structure and key 1H-1H COSY, HMBC correlations of compound 1

從NOESY 譜（圖2）中，CH3-18 和H-5 相關(guān)，表明CH3-18，H-5 在同側(cè)，定為α 朝向；CH3-19和CH3-20 相關(guān)，證明CH3-19，CH3-20 在同側(cè)，定為β 朝向；由于苯環(huán)將13 位的羥基異丙基與A/B環(huán)隔離開(kāi)，無(wú)NOESY 相關(guān)信號(hào)，暫未確定其側(cè)鏈的構(gòu)型。

圖2 化合物1 的主要的NOESY 相關(guān)Fig.2 Key NOESY correlations of compound 1

綜上所述，化合物1 的結(jié)構(gòu)確定為12,16-二羥基松香烷-6,8,11,13-四烯-3-酮，經(jīng)文獻(xiàn)檢索，該化合物為未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物?；衔锏?H 和13C-NMR 譜信號(hào)歸屬及HMBC 相關(guān)見(jiàn)表1。

化合物2：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇），[α]20D＋170.0 (c0.08, MeOH)。紫外254 nm 下呈暗斑，365 nm 下黃色熒光，10%硫酸乙醇試劑顯紫色。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ:8.78 (1H, s, 12-OH), 6.69 (1H, s, H-14), 6.60 (1H, s, H-11), 4.42 (1H, d,J= 5.1 Hz, 3-OH), 1.10 (3H, d,J= 6.9 Hz), 1.09 (3H, d,J= 6.9 Hz), 1.07 (3H, s, 18-CH3), 0.96 (3H, s, 19-CH3) ,0.76 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ:152.2 (C-12), 147.2 (C-9), 131.5 (C-13), 125.8 (C-14), 124.6 (C-8), 110.4 (C-11), 76.7 (C-3), 49.0 (C-5), 38.6 (C-4), 36.9 (C-1, 10), 29.7 (C-7), 28.3 (C-19), 27.8 (C-2), 26.1 (C-15), 24.8 (C-20), 22.7 (C-17), 22.5 (C-16), 18.9 (C-6), 15.8 (C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[7]，故鑒定化合物2 為檜醇。

化合物3：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇），紫外燈下254 nm 呈暗斑，365 nm 呈黃色熒光，10%硫酸乙醇顯紫色。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ:10.25 (1H, s, 12-OH), 7.64 (1H, s, H-14), 6.78 (1H, s, H-11), 3.13 (1H, sept,J= 7.0 Hz, H-15), 1.15 (3H, s, 20-CH3), 1.14 (3H, d,J= 7.0 Hz, 16-CH3), 1.12 (3H, d,J= 7.0 Hz, 17-CH3), 0.94 (3H, s, 19-CH3), 0.88 (3H, s, 18-CH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ:196.4 (C-7), 160.2 (C-12), 155.9 (C-9), 132.7 (C-13), 125.2 (C-14), 122.8 (C-8), 109.4 (C-11), 49.2 (C-5), 40.7 (C-3), 40.1 (C-10), 37.4 (C-1), 35.4 (C-6), 32.7 (C-4), 32.2 (C-18), 25.9 (C-15), 22.9 (C-20), 22.2 (C-17), 22.1 (C-16), 21.0 (C-19), 18.4 (C-2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[8]，故鑒定化合物3 為柳杉酚。

化合物4：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇），紫外燈下254 nm 呈暗斑，365 nm 呈淺黃色熒光，10%硫酸乙醇顯棕色。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ:10.18 (1H, s, 12-OH), 7.64 (1H, s, H-14), 6.76 (1H, s, H-11), 4.53 (1H, s, 3-OH), 2.58 (1H, dd,J= 17.8, 3.4 Hz, H-1), 2.43 (1H, dd,J= 17.8, 3.4 Hz, H-1), 1.13 (9H, m, 16, 17, 18-CH3), 0.93 (3H, s, 19-CH3), 0.83 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 196.6 (C-7), 160.1 (C-12), 155.4 (C-9), 132.6 (C-13), 124.9 (C-14), 122.4 (C-8), 109.5 (C-11), 76.0 (C-3),48.3 (C-5), 38.4 (C-4), 37.2 (C-10), 35.8 (C-1), 35.3 (C-6), 27.4 (C-2), 27.4 (C-4), 26.0 (C-15), 23.0 (C-20), 22.4 (C-17), 22.2 (C-16), 15.3 (C-19)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[9]，故鑒定化合物4 為margoclin。

化合物5：無(wú)色針狀針晶（甲醇），[α]20D-11.6 (c0.3, MeOH)。紫外燈下254 nm 呈紫色暗斑，365 nm呈淺黃色瑩光，10%硫酸乙醇試劑顯棕色。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ:10.26 (1H, s, 12-OH), 7.61 (1H, s, H-14), 6.76 (1H, s, H-11), 4.53 (1H, s, 3-OH), 3.55 (1H, dd,J =10.2, 5.7 Hz, H-3), 3.10 (2H, m, H-16), 2.56 (1H, dd,J =17.8, 14.1 Hz, H-6), 2.43 (1H, dd,J =17.8, 3.4 Hz, H-6), 1.14 (3H, s, 18-CH3), 1.11 (3H, d,J =7.0 Hz, 17-CH3), 0.93 (3H, s, 20-CH3), 0.83 (3H, s, 19-CH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ:196.6 (C-7), 160.7 (C-12), 155.5 (C-9), 129.2 (C-13), 126.5 (C-14), 122.2 (C-8), 109.7 (C-11), 75.9 (C-3), 65.4 (C-16), 48.4 (C-5), 38.5 (C-4), 37.2 (C-10), 35.8 (C-15), 35.3 (C-1), 34.5 (C-6), 27.5 (C-2), 27.4 (C-18), 23.1 (C-20), 16.9 (C-17), 15.3 (C-19)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[10]，故鑒定化合物5 為cephafortoid B。

化合物6：白色針狀結(jié)晶（甲醇），[α]20D＋92.1 (c0.95, MeOH)。紫外燈下254 nm 呈暗斑，365 nm 呈黃色熒光，10%硫酸乙醇試劑顯紫色。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ:8.78 (2H, m, 11, 12-OH), 7.38 (1H, s, H-14), 1.15 (3H, d,J= 6.9 Hz, 17-CH3), 1.13 (3H, d,J= 6.9 Hz, 16-CH3), 1.07 (3H, s, 18-CH3), 1.06 (3H, s, 19-CH3) ；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ:215.5 (C-3), 196.5 (C-7), 148.9 (C-12), 143.0 (C-11), 137.3 (C-9), 133.5 (C-13), 123.5 (C-8), 115.9 (C-14), 48.6 (C-5), 46.4 (C-4), 38.3 (C-10), 35.5 (C-6), 35.1 (C-1), 34.1 (C-2), 26.5 (C-15), 26.0 (C-18), 22.6 (C-16), 22.5 (C-17), 20.4 (C-19), 17.3 (C-20)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[11]，故鑒定化合物6 為torreyayunnin。

化合物7：白色針狀結(jié)晶（甲醇），[α]20D-40.0 (c0.37, MeOH)。紫外燈下254 nm 呈暗斑，365 nm 呈黃色熒光，10%硫酸乙醇試劑顯紫色。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ:8.50 (1H, s, 11-OH), 6.63 (1H, s, H-14), 4.27 (1H, d,J= 8.9 Hz, H-20), 3.63 (3H, s, 12-OCH3), 3.50 (1H, dd,J= 10.1, 6.2 Hz, H-16), 3.36 (1H, dd,J= 10.1, 7.7 Hz, H-16), 3.08 (1H, dd,J= 8.9, 1.5 Hz, H-20), 1.22 (3H, s, 18-CH3), 1.12 (3H, d,J= 7.1 Hz, 17-CH3), 0.88 (3H, s, 19-CH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 215.3 (C-3), 145.6 (C-12), 144.2 (C-11), 136.2 (C-8), 135.5 (C-13), 127.8 (C-9), 112.6 (C-14), 69.7 (C-7), 67.5 (C-20), 66.5 (C-16), 61.1 (12-OCH3), 47.0 (C-4), 42.1 (C-5), 38.5 (C-10), 35.3 (C-2), 34.4 (C-15), 28.4 (C-6), 26.8 (C-1), 24.4 (C-18), 20.4 (C-19), 18.3 (C-17)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[12]，故鑒定化合物7 為貢山三尖杉二萜D。

化合物8：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇），[α]20D-6.5 (c0.3, MeOH)。10%硫酸乙醇試劑顯棕色。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 12.01 (1H, s, 19-COOH), 4.60 (1H, s, 6-OH), 5.74 (1H, dd,J= 17.5, 10.6 Hz, H-15), 5.20 (1H, s, H-14), 4.88 (1H, dd,J= 17.5, 1.4 Hz, H-16b), 4.87 (1H, dd,J= 10.6, 1.5 Hz, H-16a), 3.80 (1H, d,J= 9.6 Hz, H-6), 0.99 (3H, s, 18-CH3), 0.97 (3H, s, 17-CH3), 0.74 (3H, s, 20-CH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ:178.6 (C-19), 148.4 (C-15), 136.1 (C-8), 128.7 (C-14), 110.5 (C-16), 74.0 (C-6), 52.7 (C-10), 49.8 (C-5), 49.5 (C-9), 37.1 (C-13), 37.0 (C-4), 36.5 (C-1), 34.9 (C-7), 33.9 (C-12), 27.2 (C-11), 25.9 (C-17), 23.9 (C-3), 18.3 (C-2), 14.8 (C-20), 11.4 (C-18)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[13]，故鑒定化合物8 為6α-羥基山達(dá)海松酸。

化合物9：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇），紫外燈下254 nm 呈暗斑，10%硫酸乙醇顯紫色。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 6.82 (1H, s, H-10), 6.80 (1H, s, H-2), 5.36 (1H, d,J= 5.5 Hz, H-5), 5.24 (1H, t,J= 5.6 Hz, H-15), 3.94 (1H, d,J= 5.6 Hz, H-16), 3.37 (1H, m, H-11), 2.87 (1H, m, H-11), 2.58 (2H, m, H-12), 2.29 (3H, d,J= 0.8 Hz, 19-CH3), 0.73 (3H, d,J= 7.6 Hz, 18-CH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 185.3 (C-1), 173.4 (C-17), 146.2 (C-9), 145.6 (C-8), 145.5 (C-4), 143.6 (C-3), 140.0 (C-10), 138.2 (C-2), 85.7 (C-16), 79.6 (C-5), 78.8 (C-15), 48.9 (C-7), 45.2 (C-13), 41.4 (C-6), 39.9 (C-14), 31.3 (C-11), 23.1 (C-19), 21.8 (C-12), 14.4 (C-18)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照基本一致[4]，故鑒定化合物9 為海南粗榧內(nèi)酯。

化合物10：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇），紫外燈下254 nm 呈暗斑，10%硫酸乙醇顯紫色。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 6.79 (1H, s, H-10), 6.72 (1H, s, H-2), 5.56 (1H, d,J= 3.8 Hz, 15-OH), 4.52 (1H, t,J= 4.2 Hz, H-16), 3.48 (3H, m, H-15, 7), 3.48 (1H, m, H-11), 3.11 (1H, dd,J= 18.3, 11.3 Hz, H-5), 2.96 (1H, m, H-11), 2.78 (1H, m, H-12), 2.58 (1H, m, H-12), 2.16 (1H, m, H-5), 2.14 (3H, d,J= 0.8 Hz, 19-CH3), 1.74 (1H, m, H-6), 1.34 (1H, m, H-14), 0.84 (3H, d,J= 7.1 Hz, 18-CH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 184.7 (C-1), 175.1 (C-17), 147.3 (C-9), 145.7 (C-8), 144.6 (C-4), 142.2 (C-3), 139.5 (C-10), 137.0 (C-2), 77.7 (C-16), 74.5 (C-15), 50.6 (C-7), 43.9 (C-13), 37.0 (C-14), 36.8 (C-6), 33.6 (C-5), 29.6 (C-11), 24.3 (C-12), 21.3 (C-19), 16.7 (C-18)。與文獻(xiàn)的NMR 數(shù)據(jù)對(duì)照一致[14]，故鑒定該化合物為海南粗榧內(nèi)酯醇。

4 討論

本課題從三尖杉干燥莖葉的75%工業(yè)乙醇提取物分離鑒定了10 個(gè)二萜類(lèi)化合物，包括7 個(gè)松香烷類(lèi)二萜、1 個(gè)海松烷類(lèi)二萜和2 個(gè)環(huán)庚三烯酮降二萜類(lèi)化合物。其中化合物1 為未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物，化合物4、8 首次從三尖杉屬植物中分離得到。松香烷二萜類(lèi)化合物廣泛分布于自然界主要存在于松柏類(lèi)植物和微生物中，本研究分離得到的檜醇、柳杉酚等具有一定的抗?jié)兒涂咕钚訹16]；環(huán)庚三烯酮降二萜類(lèi)化合物為三尖杉屬所特有，是具有多環(huán)稠合結(jié)構(gòu)的高剛性化合物，結(jié)構(gòu)新穎，具有顯著的抗癌活性。其中海南粗榧內(nèi)酯對(duì)L615 白血病細(xì)胞、S180肉瘤瘤細(xì)胞、W256Walker 癌細(xì)胞、Lewis 肺癌細(xì)胞、P388 白血病細(xì)胞和L1210 白血病細(xì)胞均有較好抑制活性[15]。本研究對(duì)闡明三尖杉的物質(zhì)基礎(chǔ)有一定的意義，為三尖杉屬植物資源的開(kāi)發(fā)利用以及植物化學(xué)分類(lèi)學(xué)提供科學(xué)依據(jù)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突