顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)表達(dá)及意義

張琦瑋 張?bào)?許月坤 李崢

顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤屬于顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中最常見(jiàn)類型，尚未完全明確其發(fā)病機(jī)制，由于缺乏有效的早期診斷方案以及完善的治療措施，該類疾病已成為僅次于腦卒中嚴(yán)重危害人類健康的腦血管疾病之一，引起社會(huì)各界的廣泛關(guān)注[1-2]。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）作為作用較強(qiáng)的一種促血管生長(zhǎng)因子，可促使機(jī)體生成腫瘤血管，導(dǎo)致腫瘤浸潤(rùn)生長(zhǎng)?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）可降解基膜中的IV 型膠原，尤其是基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2） 與MMP-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）已明確可以對(duì)細(xì)胞基膜完整性造成破壞，可能與動(dòng)脈瘤的形成與生長(zhǎng)密切相關(guān)[3-4]。為進(jìn)一步明確上述因子與動(dòng)脈瘤病理特征的關(guān)系，本文主要探討MMP-2、MMP-9、VEGF 在顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤的表達(dá)及意義，旨在為后續(xù)研究提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

所有病例選取于2017年3月1日—2019年6月1日，30例顱內(nèi)多發(fā)動(dòng)脈瘤患者作為A 組，男18例，女12例，平均年齡（44.19±7.98）歲；25例單發(fā)囊性動(dòng)脈瘤患者作為B 組，男11例，女14例，平均年齡（45.06±8.13）歲；20例顱腦損傷患者作為C組，男8例，女12例，平均年齡（45.02±8.06）歲。三組基本資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均經(jīng)臨床診斷均符合疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)；病歷資料與臨床檔案完整；所有患者及其家屬均知情并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并脾、肝、腎等嚴(yán)重器質(zhì)性損傷；處于妊娠哺乳期婦女；患有精神疾病或認(rèn)知功能障礙，無(wú)法正常溝通者；存在惡性腫瘤、自身性免疫疾??；中途退出研究者。

1.2 方法

（1）對(duì)所有患者行頭、頸部CTA 檢查，采用新門子公司128 層螺旋CT 掃描，造影劑采用35 g：100 mL 碘海醇，經(jīng)三位重建后明確診斷入組；（2）對(duì)于既往患有嚴(yán)重器質(zhì)性疾?。ㄈ纾盒募」Ｋ?、心功能衰竭、腎功能衰竭、糖尿病、腦卒中等）、腫瘤、近期（1 個(gè)月內(nèi)）有明確感染性疾病病史的病理給予排除。

1.3 觀察指標(biāo)

MMP-2、MMP-9 及VEGF 在顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤內(nèi)的表達(dá)情況。血清測(cè)量法：于清晨抽取患者空腹靜脈血3 ～5 mL，選購(gòu)北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的計(jì)試劑盒，采用EL1SA 法進(jìn)行測(cè)量，各項(xiàng)操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

血清中判斷標(biāo)準(zhǔn)：使用分光光度儀掃描（450 nm），得出每孔吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與每孔吸光度值繪標(biāo)準(zhǔn)曲線，參照試劑盒說(shuō)明書，MMP-2濃度≥40 ng/mL為陽(yáng)性，＜40 ng/mL為陰性；MMP-2 濃度≥50 ng/mL 為陽(yáng)性，＜50 ng/mL 為陰性；VEGF 濃度≥125 pg/mL 為陽(yáng)性，＜125 pg/mL 為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究均采用SPSS 20.0 軟件分析，用（±s）表示計(jì)量資料，采用t檢驗(yàn)，用（n，%）表示計(jì)數(shù)資料，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

A 組、B 組MMP-2、MMP-9、VEGF 均顯著高于C 組（P＜0.05）；A、B 兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見(jiàn)表1。

3 討論

目前，臨床對(duì)于囊性動(dòng)脈瘤發(fā)病機(jī)制還未完全了解，缺乏理想預(yù)防、篩選手段，危害性大。多位學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，囊性動(dòng)脈瘤中特別是多發(fā)動(dòng)脈瘤常位于頸內(nèi)動(dòng)脈海綿竇段、水平段等非分叉部，僅采用血流動(dòng)力學(xué)難以完全解釋[5-6]。基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）作為內(nèi)切肽酶，無(wú)活性酶原形式分泌的鋅對(duì)其具有依賴性，對(duì)于血管壁基底膜細(xì)胞外基質(zhì)具有降解作用[7]。MMP-2、MMP-9 作為內(nèi)肽酶家族成員，由Ⅳ、V 家族膠原酶參與體內(nèi)生理病理過(guò)程形成，可降解極大多數(shù)基底膜骨架成分。相關(guān)研究證實(shí)[8]，顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤患者瘤壁中均出現(xiàn)MMP-2、MMP-9 不同程度過(guò)度表達(dá)，且其多數(shù)表達(dá)過(guò)程集中于患者瘤壁中膜與近內(nèi)膜區(qū)，含有較多浸潤(rùn)細(xì)胞成分，多為細(xì)小且不連續(xù)的膠原成分，排列紊亂，說(shuō)明過(guò)度表達(dá)與動(dòng)脈瘤瘤壁中膠原降解存在相關(guān)性。故MMP-2、MMP-9 明顯增加且過(guò)度降解血管壁是導(dǎo)致顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤主要發(fā)病機(jī)制之一。VEGF 也被稱為血管通透因子，是血管生長(zhǎng)的必不可少的因子，在眾多血管形成因子中具有最強(qiáng)、最高特異性[9]。正常情況下，體內(nèi)血管平滑肌細(xì)胞可合成并分泌VEGF，之后經(jīng)各種途徑作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，有效維護(hù)血管內(nèi)膜完整性，及時(shí)修復(fù)內(nèi)皮損傷，生物學(xué)意義重大[10]。本文研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤患者VEGF 過(guò)度表達(dá)時(shí)，免疫陽(yáng)性產(chǎn)物主要分布于患者瘤壁中層或尚存的血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)，說(shuō)明VEGF 與腦血管退行性變具有密切聯(lián)系。而顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤患者近外膜區(qū)通常形成新生小血管，極有可能是VEGF 分泌量加大的結(jié)果，導(dǎo)致管壁外擴(kuò)，即VEGF 過(guò)度表達(dá)對(duì)于顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤患者病情進(jìn)一步加重具有重要影響。由以上推測(cè)VEGF 可在MMP-2、MMP-9 協(xié)同作用下引發(fā)血管基底膜裂解，同時(shí)高度表達(dá)的VEGF 可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖以及生成病理性血管，提升新生毛細(xì)血管、微血管通透性，局部出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)增生、膠原組織積聚、變性等血管壁組織學(xué)改變，血管正常生物學(xué)功能難以正常運(yùn)行[11-12]。當(dāng)病情持續(xù)發(fā)展至一定程度時(shí)，血管壁脆弱易破裂出血，這也是顱內(nèi)囊性動(dòng)脈瘤血管退行性變以及瘤體形成的重要因素。

綜上所述，在本試驗(yàn)中，單發(fā)組與多發(fā)組各指標(biāo)無(wú)顯著差異，不能完全除外顱內(nèi)動(dòng)脈瘤數(shù)量與上述兩種因子關(guān)系，可能與樣本量少及所選樣本均為破裂動(dòng)脈瘤、處于急性出血應(yīng)激狀態(tài)有關(guān)；但是經(jīng)血清測(cè)量實(shí)驗(yàn)證實(shí)，顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中均存在MMP-2、MMP-9 與VEGF 的高表達(dá)，而且這兩項(xiàng)指標(biāo)與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成發(fā)展密切相關(guān)。因此臨床可通過(guò)檢測(cè)MMP-2、MMP-9 與VEGF 表達(dá)水平，用于指導(dǎo)臨床干預(yù)治療。此外，考慮到本次研究樣本例數(shù)少，為了進(jìn)一步深化研究，需進(jìn)一步增加研究樣本量與研究時(shí)間。

表1 MMP-2、MMP-9、VEGF 對(duì)比 （ ±s）

表1 MMP-2、MMP-9、VEGF 對(duì)比 （ ±s）

注：與A 組比較，aP ＜0.05；與B 組比較，bP ＜0.05，A、B 組間比較得出t=0.171、0.553、1.264，P=0.209、0.291、0.106，A、C 組間比較得出t=24.434、7.236、4.279，P =0.000、0.000、0.000；B、C 組間比較得出t=23.244、6.599、3.040，P =0.000、0.000、0.002

組別例數(shù) MMP-2（ng/mL） MMP-9（ng/mL） VEGF（pg/mL）A 組 3053.72±5.1265.44±13.10154.02±21.87 B 組 2553.48±5.2363.50±12.79146.75±20.44 C 組 2020.05±4.19ab 40.23±10.30ab 131.02±12.07ab