普洱端午藥市當歸幾種混偽品藥材的組織比較研究

李劍美　管麗佳　趙芳　周明敏　趙鋒

【摘 要】 目的：端午藥市是一年一度的藥膳藥材盛會，“大蘆山當歸”是普洱地區(qū)有名的藥膳藥材。方法：本文從普洱藥材市場中收集24份“當歸”藥材，采用石蠟切片法制成永久裝片，用CaseViewer來觀察和測量“當歸”藥材的歸頭、歸身、歸尾的木栓層、皮層、韌皮部、木質(zhì)部的厚度和油室的大小、面積、數(shù)量以及分泌細胞的數(shù)量。結(jié)果：8種當歸藥材均有雙子葉植物根的基本構(gòu)造，即從外至內(nèi)有木栓層、皮層、韌皮部和木質(zhì)部組成，均有油室的分布，部分種有樹脂道的分布。結(jié)論：8種“歸”藥材橫切面結(jié)構(gòu)相似，但是其顯微數(shù)量水平差異顯著，因此可以從木栓層厚度、韌皮部厚度、木質(zhì)部厚度、油室面積4個指標的顯微數(shù)據(jù)的差異水平鑒別8種當歸藥材。

【關(guān)鍵詞】 當歸;混偽品;顯微;組織切片

【中圖分類號】R282 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2021）04-0040-09

當歸[Angelica sinensis （Oliv.） Diels]，屬于傘形科植物，多年生草本植物，主要生產(chǎn)在甘肅東南部，岷縣的產(chǎn)量多，質(zhì)量好，其次為云南、四川、陜西、湖北等省。

普洱端午藥市是一年一度民族藥膳藥材盛會，市場上約有136的藥材[1]，常見的藥膳藥材65種[2]，其中文獻記載有毒中草藥19種[3]?！按蟊R山當歸”為當?shù)刂饕厣⒌赖睾退幧潘幉?，“盧山當歸雞”是遠近聞名的一味藥膳。筆者在走訪普洱市其他縣區(qū)時發(fā)現(xiàn)，其他縣區(qū)端午集市也常有“歸”類藥材，多數(shù)以“當歸”為名，均為傘形科植物，外形較為相似。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 收集端午藥市以“歸”為名的藥材，共收集24份當歸混偽品（每種藥材收集3份），經(jīng)DNA鑒定分別為紫花前胡[Angelica decursiva.（Mip.）Franch]、遼藁本[Ligusticum jeholense（Nakai et Kitagawa） Nakai et Kitagawa] 石防風[Peucedanum terebinthaceum（Fisn.）Fisch]、藁本（Ligusticum acuminatum Oliv）、拐芹（Angelica polymorpha Maxim）、滇芹（Meeboldia yunnanensis Wollf）、川明參（Chuanminshen violaceum Sheh et Shan）、藁本（Ligusticum acuminatum Oliv）。材料信息見表1。

按照《中國藥典》規(guī)定的方法，將待測樣品按照歸頭、歸身和歸尾切成厚20～40μm的橫切片，并用CaseViewer來觀察和測量“當歸”藥材的歸頭、歸身、歸尾的木栓層、皮層、韌皮部、木質(zhì)部的厚度和油室的大小、面積、數(shù)量以及分泌細胞的數(shù)量。選取代表性顯微制片拍照。

2 結(jié)果分析

2.1 8種“歸”藥材橫切面以及不同部位的細胞簡圖 比較8種“當歸”的細胞簡圖（見附圖1-8），在細胞簡圖中的字母表示為：ck-木栓層、c-皮層、cle-裂隙、oca-油室、ph-韌皮部、cam-形成層、x-木質(zhì)部、1-樹脂道。

附圖1，墨江大葉當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其中韌皮部極其寬廣，且伴有裂隙的存在。油室主要分布在韌皮部與木質(zhì)部中，數(shù)目較多，分泌細胞數(shù)量在6～10個之間，歸頭中存在少量樹脂道，歸身和歸尾中沒有樹脂道的分布。

附圖2，墨江矮歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其中韌皮部相對寬廣，細胞相對緊致，僅歸頭中存在少量裂隙，油室主要分布于皮層、韌皮部與木質(zhì)部中，且數(shù)目較多，分泌細胞的數(shù)量在8～12個之間，在歸身韌皮部中存在大量的樹脂道。

附圖3，墨江栽培當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其韌皮部比較寬廣，細胞結(jié)構(gòu)松散，存在較多的裂隙，油室主要分布于韌皮部，且數(shù)量較少，分泌細胞的數(shù)量在6～15個之間，且歸身中無油室存在，細胞中沒有樹脂道的分布。

附圖4，墨江野生當歸歸頭呈不規(guī)則形狀，歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其韌皮部比較寬廣，細胞結(jié)構(gòu)松散，存在較多裂隙，油室主要分布于皮層、韌皮部與木質(zhì)部中，且數(shù)量較多，分泌細胞的數(shù)量在5～11個之間，細胞中無樹脂道的分布。

附圖5，瀾滄當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其韌皮部相對寬廣，細胞結(jié)構(gòu)松散，存在較多裂隙，油室主要分布于皮層和韌皮部中，且數(shù)量中等，但其歸頭的木質(zhì)部中也存在一些油室，分泌細胞的數(shù)量在5～11個之間，細胞中無樹脂道的分布。

附圖6，西盟當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其韌皮部相對寬廣，歸頭細胞緊致無裂隙存在，但歸身與歸尾的細胞結(jié)構(gòu)松散，存在較多的裂隙，油室主要分布于韌皮部，數(shù)量較多，但其歸頭的木質(zhì)部中也存在油室，分泌細胞的數(shù)量在4～7個之間，細胞中無樹脂道的分布。

附圖7：大蘆山當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其韌皮部相對寬廣，細胞結(jié)構(gòu)松散，存在大量的裂隙，其油室主要分布于皮層、韌皮部與木質(zhì)部中，，數(shù)量較多，分泌細胞的數(shù)量在5～12個之間，細胞中無樹脂道分布。

附圖8，鎮(zhèn)沅秦歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形，且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部，其韌皮部較為寬廣，細胞結(jié)構(gòu)松散，存在大量的裂隙，其油室主要分布于歸尾韌皮部中，且數(shù)量較少，其歸頭、歸身中皆無油室，分泌細胞的數(shù)量在5～7之間，細胞中無樹脂道分布。

8種不同地方的“歸”藥材，橫切面外至內(nèi)可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層和木質(zhì)部，韌皮部相對寬廣，均有油室和分泌細胞。樹脂道僅見于墨江大葉當歸和墨江矮歸中。 因此單從組織結(jié)構(gòu)上不能將8種“歸”藥材鑒別開來，需要做8種“歸”藥材的顯微數(shù)量比較。

2.2顯微組織切片的數(shù)量比較分析

2.2.1不同部位的木栓層厚度比較 見表2。

以某一指標條件下的兩個物種顯著差異為分支點，建立8種“當歸藥材”的檢索路徑如下：

1.歸頭木栓層厚度大于等于127μm2

1.歸頭木栓層厚度小于127μm3

2.歸身木栓層厚度大于等于101μm 墨江野生當歸

2.歸身木栓層厚度小于101μm 西盟當歸

3.歸頭木栓層厚度為66μm以下瀾滄當歸

3.歸頭木栓層厚度為66～91μm4

4.歸身木栓層厚度大于等于139μm墨江大葉當歸

4.歸身木栓層厚度小于139μm5

5.歸身大于木栓層厚度大于等于77μm 墨江矮歸

5.歸身大于木栓雙層厚度小于77μm6

6.歸身大于木栓層厚度大于等于66μm大蘆山當歸

6.歸身大于木栓層厚度小于66μm7

7.歸尾大于木栓雙層厚度大于30μm墨江栽培當歸

7.歸尾大于木栓層厚度大于30μm鎮(zhèn)沅秦歸

綜上，以木栓層厚度顯微數(shù)量為鑒定依據(jù)，可以鑒別8種“當歸”藥材，由此木栓層可作為獨立的鑒定點。

2.2.2 不同部位的皮層厚度比較 見表3。

以皮層厚度指標下的兩個物種顯著差異為分支點，建立8種“當歸藥材”的檢索路徑如下：

1.歸頭皮層厚度大于113μm墨江栽培當歸

1.歸頭皮層厚度小于113μm2

2.歸尾皮層厚度大于34μm3

2.歸尾皮層厚度小于34μm墨江野生當歸

3.歸尾皮層厚度大于56μm4

3.歸尾皮層厚度小于56μm墨江大葉當歸

4.歸頭皮層厚度大于68μm5

4.歸頭皮層厚度小于68μm瀾滄當歸

5.歸尾皮層厚度大于78μm墨江矮歸

綜上，以木栓層厚度顯微數(shù)據(jù)為鑒定依據(jù)時，只可以鑒別出墨江栽培當歸、墨江野生當歸、墨江大葉當歸、瀾滄當歸和墨江矮歸，其他3種當歸的皮層厚度極其相近，無法進行鑒別。由此皮層厚度不可作為獨立的鑒定點。

2.2.3 不同部位的韌皮部厚度比較 見表4。

1.歸頭韌皮部厚度大于6748μm墨江大葉當歸

1.歸頭韌皮部厚度小于6748μm2

2.歸頭韌皮部厚度大于3015μm墨江栽培當歸

2.歸頭韌皮部厚度小于3015μm3

3.歸頭韌皮部厚度大于1456μm大蘆山當歸

3.歸頭韌皮部厚度小于1456μm4

4.歸頭韌皮部厚度大于1301μm5

4.歸頭韌皮部厚度小于1301μm6

5.歸身韌皮部厚度大于1945μm鎮(zhèn)沅秦歸

5.歸身韌皮部厚度小于1945μm墨江野生當歸

6.歸身韌皮部厚度大于1705μm墨江矮歸

6.歸身韌皮部厚度小于1705μm7

7.歸身韌皮部厚度大于625μm瀾滄當歸

7.歸身韌皮部厚度小于625μm西盟當歸

綜上，以韌皮部的顯微數(shù)據(jù)為鑒定依據(jù)，可以鑒別8種“當歸”藥材，由此韌皮部可作為獨立的鑒定點。

2.2.4 不同部位木質(zhì)部厚度比較 見表5。

1.歸頭木質(zhì)部厚度大于5901μm墨江栽培當歸

1.歸頭木質(zhì)部厚度小于5901μm2

2.歸頭木質(zhì)部厚度大于4813μm墨江大葉當歸

2.歸頭木質(zhì)部厚度小于4813μm3

3.歸頭木質(zhì)部厚度大于1875μm大蘆山當歸

3.歸頭木質(zhì)部厚度小于1875μm4

4.歸頭木質(zhì)部厚度大于1281μm5

4.歸頭木質(zhì)部厚度小于1281μm6

5.歸身木質(zhì)部厚度大于1968μm墨江矮歸

5.歸身木質(zhì)部厚度小于1968μm7

6.歸頭木質(zhì)部厚度大于1166μm瀾滄當歸

6.歸頭木質(zhì)部厚度小于1166μm鎮(zhèn)沅秦歸

7.歸身木質(zhì)部厚度大于668μm墨江野生當歸

7.歸身木質(zhì)部厚度小于668μm西盟當歸

綜上，以木質(zhì)部的顯微數(shù)據(jù)為鑒定依據(jù)，可以鑒別8種“當歸”藥材，由此木質(zhì)部可作為獨立的鑒定點。

2.2.5 不同部位的油室面積比較 見表6。

1.歸頭油室面積大于7834πμm墨江矮歸

1.歸頭油室面積小于7834πμm2

2.歸頭油室面積大于1186πμm3

2.歸頭油室面積小于1186πμm西盟當歸

3.歸身油室面積大于5033πμm4

3.歸身油室面積小于5033πμm5

4.歸尾油室面積大于2936πμm墨江大葉當歸

4.歸尾油室面積小于2936πμm墨江野生當歸

5.歸身油室面積大于2413πμm6

5.歸身油室面積小于2413πμm瀾滄當歸

6.歸身有油室大蘆山當歸

6.歸身無油室7

7.歸頭有油室墨江栽培當歸

7.歸頭無油室鎮(zhèn)沅秦歸

綜上，以木質(zhì)部的顯微數(shù)據(jù)為鑒定依據(jù)，可以鑒別8種“當歸”藥材，由此木質(zhì)部可作為獨立的鑒定點。

在普洱藥材市場上流通著的8種“當歸”中，墨江矮歸的歸身中存在大量的樹脂道，墨江大葉當歸的歸頭中有少量的樹脂道，通過檢索表檢索，可以從木栓層、韌皮部、木質(zhì)部、油室面積這四個方面確定當歸的物種，皮層檢索表只可鑒別出部分，要想鑒別出其他還需要其他的輔助手段。

3 結(jié)論與討論

當歸作為普洱當?shù)刂饕囊晃端幧攀巢模凇岸宋缢幨小鄙贤锂惷?，同名異物的現(xiàn)象非常普遍，嚴重干擾了當歸藥材的秩序。市場流通的“當歸”都是傘形科的植物塊根，分屬于當歸屬（2種）、藁本屬（4種）、川明參屬（1種）、滇芹屬（1種）?！吨袊幍洹穂4]收錄的有藁本、遼藁本、紫花前胡3種。藁本、遼藁本有祛風，散寒，除濕，止痛。用于風寒感冒，巔頂疼痛，風濕痹痛。紫花前胡當歸屬植物，降氣化痰，散風清熱。用于痰熱喘滿，咯痰黃稠，風熱咳嗽痰多。川明參屬只有1種，特產(chǎn)于中國，根入藥，為利肺、和胃、化痰、解毒的作用[5]。滇芹屬只產(chǎn)1種，產(chǎn)于云南，主治感冒風寒，發(fā)熱頭痛[5]。正品當歸為當歸屬當歸植物，能補血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤腸通便，用于經(jīng)閉。痛經(jīng)，風濕痹痛，跌打損傷。

傘形科植物多數(shù)可入藥，花小、形態(tài)差異小，因此彼此之間互為混偽品的現(xiàn)象較為普遍，石防風常作為前胡的混偽品[6]。同科同屬植物的顯微結(jié)構(gòu)很類似，因此顯微數(shù)量差異比較分析是近緣屬種鑒別的主要依據(jù)，如李劍美[7]利用顯微數(shù)量的差異鑒別了蘭科白及及其混偽品。

本文以某一指標條件下的兩個物種顯微數(shù)量顯著差異為分支點，利用平行檢索表鑒別“當歸”藥材，在觀察分析的5個指標中，除皮層厚度不能鑒別外，其余的木栓層厚度、韌皮部厚度、木質(zhì)部厚度、油室面積4個指標都可以鑒別8種藥材。但是其方法有一定的局限性，例如生長周期、生育期、地理環(huán)境都都會受到一定程度的影響。因此還應以油室的數(shù)量，分布的區(qū)域，樹脂道的有無作為鑒別8種“當歸”藥材的輔助手段。

參考文獻

[1]蔡秀江，周葵，黃美艷，等.普洱民俗“五月端午吃藥根”的藥用植物資源調(diào)查[J]中國民族民間醫(yī)藥，2018，27（8）：138-146.

[2]劉穎穎，姚昕，李海濤，等.普洱端午藥市植物的民族植物學研究[J].中國民族民間醫(yī)藥，2016，25（22）：128-131.

[3]康國嬌，周葵，姜俊玲，等.普洱“端午藥膳”常見毒性藥材分析[J].中國民族民間醫(yī)藥，2018，27（10）：25-2.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（第一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[5] 中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M]. 北京：科學出版社，2004.

[6]吳沿勝，吳沿友，劉宇婧，等.前胡及其混偽品的中藥鑒定學研究進展[J].中草藥，2017，48（11）：2335-2339.

[7]李劍美，尚宇南，葉德平，等.白及與其代用品的形態(tài)組織學對比研究[J].中藥材，2016，39（4）：747-752.

（收稿日期：2020-8-30 編輯：劉斌）