復(fù)方中草藥對貴州黃雞繁殖性能的影響

饒永超，李 維，張 蕓，楊德鳳，李洪林，林家棟，張福平*

（1.貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，高原山地動物遺傳育種與繁殖教育部重點實驗室，貴州省動物遺傳育種與繁殖重點實驗室，貴州貴陽 550025；2.貴州大學(xué)科研雞場，貴州貴陽 550025；3.貴州大學(xué)家禽研究所，貴州貴陽 5 500251；4.貴州省畜禽遺傳資源管理站，貴州貴陽 550001）

種雞的繁殖性能低一直是制約地方雞產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要原因，產(chǎn)蛋后期的種雞產(chǎn)蛋量急劇下降，如何提高產(chǎn)蛋后期種雞的繁殖性能成為增加經(jīng)濟效益的關(guān)鍵[1]。貴州黃雞是貴州省的優(yōu)良地方品種，屬于蛋肉兼用型，成年公雞重2.60～3.30 kg，母雞體重1.99～2.56 kg，開產(chǎn)日齡143～160 d，年產(chǎn)蛋175 枚[2]，具有良好的生長性能和生產(chǎn)性能。但貴州黃雞的產(chǎn)蛋高峰期持續(xù)時間短，產(chǎn)蛋后期種母雞產(chǎn)蛋量迅速下降[3]。因此，如何延長貴州黃雞產(chǎn)蛋高峰期，提高其生產(chǎn)性能值得深入探究。

中草藥添加劑是以天然的中草藥為材料，以動物營養(yǎng)及中獸醫(yī)知識為基礎(chǔ)而制作的單一或復(fù)合型藥方，能促進動物生長發(fā)育、提高生產(chǎn)性能[4]。菟絲子的主要成分是黃酮，其能調(diào)節(jié)機體激素水平、抑制生精細胞凋亡等，提高繁殖性能[5]；菟絲子中的黃酮還能通過提升小鼠血清睪酮濃度發(fā)揮生殖保護作用[6]。淫羊藿的主要活性成分為淫羊藿苷，淫羊藿苷具有調(diào)節(jié)生殖功能、免疫保護和抗氧化等藥理作用[7]，能提高母雞的產(chǎn)蛋率和平均蛋重，降低母雞輸卵管氧化應(yīng)激水平[8]。巴戟天的主要有效成分為巴戟天多糖，其可通過提高垂體生成素釋放激素及卵巢對母鼠生殖激素的分泌、治療不孕等[9]，也能改善、促進雄鼠睪丸的生精功能[10]。目前，關(guān)于菟絲子、淫羊藿和巴戟天對畜禽繁殖性能影響的研究主要集中在豬等哺乳動物，且作用機制尚不明確，同時大多數(shù)研究通常只研究其中某一單組分，對于這3 種中草藥組成的復(fù)方中草藥添加劑對產(chǎn)蛋后期種雞繁殖性能的影響研究報道較少。本試驗旨在探究該復(fù)方中草藥添加劑（由菟絲子、淫羊藿、巴戟天組成）對產(chǎn)蛋后期貴州黃雞種雞（385 日齡）繁殖性能的影響，以期為復(fù)方中草藥添加劑在提高種雞繁殖性能生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)方中草藥添加劑由菟絲子、淫羊藿、巴戟天按照質(zhì)量比1:1:1 混合，菟絲子、淫羊藿、巴戟天等中草藥均采購于貴州省貴陽市花溪區(qū)中醫(yī)院。

1.2 試驗設(shè)計 選取385 日齡貴州黃雞種母雞120 只和種公雞72 只，采用單因子試驗設(shè)計，分為4 個組，每個組3 個重復(fù)，母雞每個重復(fù)10 只，公雞每個重復(fù)6 只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，復(fù)方中草藥組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1.0%、1.5%復(fù)方中草藥添加劑。預(yù)試期7 d，正試期28 d。

試驗采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧參照《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33—2004）和《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表》（2018）設(shè)計，制成顆粒飼糧，基礎(chǔ)日糧成分和營養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗于2019 年4 月17 日開始在貴州大學(xué)科研雞場進行，將中草藥過40 目篩后與基礎(chǔ)日糧混勻，喂料方式采用人工喂料（每天08:00、14:00 各喂食1 次），自由飲水。試驗雞采用半階梯式籠養(yǎng)，試驗前清理雞舍并消毒，每3～5 d 進行1 次帶雞消毒，保證雞舍衛(wèi)生。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 精液品質(zhì) 試驗第28 天，禁食（12 h）不禁水一夜后，早上空腹采用腹背式按摩采精法采精，采集精液后立即用邁朗精子全自動分析儀（mL-210JZ，南寧松景天倫生物科技有限公司）進行分析。

1.4.2 激素濃度 試驗第28 天，禁食不禁水一夜后，早上禁食12 h，空腹翅靜脈采血，公雞屠宰后取睪丸組織。睪酮（Testosterone，T）、催乳素（Prolactin，PRL）、雌二醇（Estradiol，E2）、促卵泡素（Follicle-Stimulating Hormone，F(xiàn)SH）、促黃體素（Luteinizing Hormone，LH）、孕激素（Progesterone，PROG）均使用ELISA 激素測定試劑盒（江萊生物公司）并按說明書進行檢測。

1.4.3 卵泡數(shù)量 記錄每天的產(chǎn)蛋數(shù)據(jù)，第28 天屠宰母雞后記錄卵泡數(shù)量，采用數(shù)顯式游標(biāo)卡尺（蘇制02050123-1，無錫錫工量具有限公司）測量卵泡直徑后進行分級。

1.4.4 種蛋孵化 試驗結(jié)束后，各個重復(fù)收集60 枚合格種蛋經(jīng)恒溫孵化器進行孵化，統(tǒng)計孵化率、種蛋受精率、健雛率等。

1.5 統(tǒng)計分析 所有試驗數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0 進行統(tǒng)計分析，試驗數(shù)據(jù)均以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示，用ANOVA 過程進行單因素方差分析，進行線性和二次顯著性檢驗分析。P<0.05 表示差異顯著，P>0.05 表示差異不顯著。

表1 基礎(chǔ)日糧成分及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方中草藥添加劑對種公雞精液品質(zhì)的影響 由表2 可知，試驗組的精子密度均高于對照組，其中1.0%、1.5% 復(fù)方中草藥添加劑組與對照組差異顯著。試驗組的精子畸形率均顯著低于對照組，其中1.5%復(fù)方中草藥添加劑組最低。0.5%、1.0%、1.5%復(fù)方中草藥添加劑組比對照組分別低8.88%、13.79%、15.45%。0.5%復(fù)方中草藥添加劑組的精液量較對照組顯著增加，而1.0%、1.5%復(fù)方中草藥添加劑組與對照組差異不顯著。試驗組精子活率均顯著高于對照組，其中0.5%復(fù)方中草藥添加劑組最高，較對照組提高5.83%。結(jié)果表明，在種公雞日糧中添加復(fù)方中草藥添加劑對精液品質(zhì)有顯著的提高作用。

表2 復(fù)方中草藥添加劑對種公雞精液品質(zhì)的影響（n=3）

2.2 復(fù)方中草藥添加劑對種公雞血漿和睪丸中睪酮濃度的影響 由表3 可知，與對照組相比，試驗各組血漿睪酮濃度均有一定程度的提升，其中1.5%復(fù)方中草藥添加劑組顯著高于其他各組。與對照組相比，試驗各組睪丸睪酮濃度均顯著提高，其中1.0%復(fù)方中草藥添加劑組最高。結(jié)果表明，在種公雞日糧中添加復(fù)方中草藥添加劑能提高睪酮濃度。

表3 復(fù)方中草藥添加劑對種公雞睪酮濃度的影響（n=3）pg/mL

2.3 復(fù)方中草藥添加劑對種母雞激素濃度的影響 據(jù)表4 可知，試驗組種母雞血清中PRL 濃度較對照組顯著降低。試驗組種母雞血清中E2、FSH、LH、PROG 濃度均較對照組提高，其中E2濃度試驗組顯著高于對照組；0.5%復(fù)方中草藥添加劑組FSH 濃度與對照組差異不顯著，1.0%、1.5%復(fù)方中草藥添加劑組FSH 濃度顯著高于對照組；試驗組LH、PROG 濃度顯著高于對照組，在種母雞日糧中添加復(fù)方中草藥添加劑能促進促性腺激素分泌。

2.4 復(fù)方中草藥添加劑對蛋雞卵泡發(fā)育及產(chǎn)蛋情況 由表5 可知，對照組的大卵泡直徑與0.5%復(fù)方中草藥添加劑組差異不顯著，顯著低于1.0%、1.5%復(fù)方中草藥添加劑組；對照組中黃卵泡的直徑顯著低于0.5%、1.5%復(fù)方中草藥添加劑組，與1.0%復(fù)方中草藥添加劑組差異不顯著。各組母雞卵巢卵泡發(fā)育情況見圖1。由表6可知，1.5% 復(fù)方中草藥添加劑組的總產(chǎn)蛋數(shù)顯著高于對照組，4 個處理組的蛋重?zé)o顯著差異。

2.5 復(fù)方中草藥添加劑對種蛋孵化效果的影響 由表7可知，試驗組受精率、受精蛋孵化率、健雛率均顯著高于對照組，其中添加復(fù)方中草藥添加劑為1.0%組效果最好。

3 討 論

3.1 復(fù)方中草藥添加劑對種公雞的影響 有研究表明，睪酮可以刺激精子生成，提高精子密度及精液量、精子活率[11-12]，精子活率與受精率的高低密切相關(guān)。睪酮通過對間質(zhì)細胞和支持細胞的調(diào)節(jié)，為整個生精過程及精液儲存提供有利環(huán)境[13]。菟絲子中的黃酮可通過下調(diào)凋亡基因Fas、Fasl的表達而抑制生精細胞凋亡，從而提高精子活率、降低精子畸形率[14-15]。淫羊藿苷具有類似雄激素的功能，可促進動物精液生成，在提高睪酮激素方面具有潛在的作用[16]。巴戟天中的多聚糖可以緩解精子的氧化應(yīng)激反應(yīng)，保護精子頂體的結(jié)構(gòu)和功能，提高精子運動能力和穿透能力[17]。本研究結(jié)果表明，由菟絲子、巴戟天、淫羊藿組成的復(fù)方中草藥添加劑可顯著提升種公雞的血漿睪酮及睪丸睪酮濃度，并顯著改善精液品質(zhì)，提高了種蛋的孵化率，說明該復(fù)方中草藥可顯著提高種公雞的繁殖性能。

3.2 復(fù)方中草藥添加劑對種母雞的影響 隨著種用時間的延長，母雞體內(nèi)生殖激素水平的變化是其種用性能降低的主要因素之一[18]。母雞產(chǎn)蛋是通過“下丘腦—垂體—性腺（卵巢）”來促進或抑制相關(guān)激素的分泌調(diào)節(jié)的結(jié)果[19]。FSH 促進卵泡生長，LH 促進成熟卵泡排卵，抑制PRL 的分泌，并促進卵巢分泌E2及PROG，促使雞輸卵管蠕動運輸成熟卵泡和蛋的形成；PRL 分泌量增加會抑制FSH、LH 分泌，導(dǎo)致排卵減少甚至停止，抑制卵巢分泌E2和PROG 等激素，促使母雞開始并持續(xù)就巢行為，停止排卵；另一方面卵巢分泌E2及PROG協(xié)同促使下丘腦、垂體釋放FSH、LH，繼而發(fā)生排卵，卵巢分泌E2和PROG 受到抑制后促使下丘腦、垂體釋放PRL，繼而發(fā)生就巢行為[20-22]。

表4 復(fù)方中草藥添加劑對種母雞血清激素濃度的影響（n=3）

表5 復(fù)方中草藥添加劑對卵母細胞直徑的影響（n=3） mm

圖1 4 組母雞的卵巢圖片

表6 復(fù)方中草藥對種母雞產(chǎn)蛋數(shù)量的影響（n=3）

中草藥含有豐富的蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素、脂肪和礦物質(zhì)，在營養(yǎng)平衡、提高生長性能和調(diào)節(jié)生理功能等方面發(fā)揮著重要作用[23]。張琴等[24]研究證實，淫羊藿本身具有性激素、腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，能激發(fā)卵巢激素分泌，繼而促使下丘腦、垂體釋放FSH、LH，抑制PRL 的分泌，增加成熟卵泡數(shù)量及產(chǎn)蛋量。巴戟天主要通過提高垂體對促卵泡素及促黃體素的調(diào)控來增強下丘腦垂體—性腺（卵巢）的功能，在家禽飼料中添加巴戟天寡糖后可改善生長性能與健康狀況[25-26]。菟絲子黃酮對下丘腦—垂體—性腺軸功能具有多方面的影響。在雌性小鼠和大鼠中，菟絲子黃酮表現(xiàn)出雌激素樣活性，能提高成年大鼠腺垂體、卵巢和子宮的重量，能增強卵巢人絨毛膜促性腺激素促黃體生成素受體功能[27]。菟絲子的生物學(xué)作用及臨床療效與黃酮類化合物有關(guān)，已知這些黃酮類物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上與雌激素近似[6]。雞的產(chǎn)蛋性能主要取決于卵泡發(fā)育的狀況，母雞卵巢上的卵泡可以連續(xù)發(fā)育和成熟、排卵，每次排卵都相繼形成一個蛋并排出體外。產(chǎn)蛋量高的母雞卵巢上布滿葡萄串樣的體積大小不一、顏色或深或淺的卵泡[28-29]。本研究中，試驗組的大黃卵泡比對照組多，中黃卵泡顯著數(shù)量顯著高于對照組，試驗組的產(chǎn)蛋數(shù)也優(yōu)于對照組，可能是由于復(fù)方中草藥對機體進行了一定修復(fù)并促進“下丘腦—垂體—性腺（卵巢）”軸功能導(dǎo)致的產(chǎn)蛋量提高，繼而提高種用性能。本試驗以1.5%劑量添加效果較好，1.5%組產(chǎn)蛋量顯著高于對照組。

表7 復(fù)方中草藥添加劑對種蛋孵化性能的影響（n=3） %

4 結(jié) 論

本試驗結(jié)果表明，在貴州黃雞產(chǎn)蛋后期日糧中添加中草藥添加劑可促進E2、FSH、LH、PROG 等激素的釋放以及提高卵泡數(shù)量和產(chǎn)蛋量，可顯著提高睪酮激素分泌及精液品質(zhì)，提高種蛋受精率、孵化率，故可提高貴州黃雞的繁殖性能，可延長種用時間，降低制種成本。