炎性細(xì)胞因子與體液免疫動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)小兒支原體肺炎的病情評(píng)估作用

張佳夫 李艷玲

【摘要】 目的：探究炎性細(xì)胞因子與體液免疫動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)小兒支原體肺炎的病情評(píng)估作用。方法：選取2019年1-12月本院收治的46例小兒支原體肺炎患者設(shè)為A組，其中，輕型24例，重型22例，另選取同期在本院體檢的45例健康兒童設(shè)為B組。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)并比較兩組炎性細(xì)胞因子。采用免疫散射比濁法測(cè)定并比較兩組血清補(bǔ)體及免疫球蛋白。結(jié)果：A組治療3、7、15 d的C3與C4水平均低于治療前，且IgM、IgG、IgA水平均高于治療前（P<0.05）。治療3、7 d，A組C3均高于B組，且IgM、IgG、IgA水平均低于B組（P<0.05），而A組C4與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療15 d，A組的C3、C4、IgM、IgG、IgA水平與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療前和治療3、7 d，A組IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平均高于B組（P<0.05）。A組治療3、7、15 d的IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平均低于治療前（P<0.05）。治療15 d，A組IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。重型患兒IgM、IgG及IgA水平均低于輕型患兒及B組，C3與C4水平均高于輕型患兒（P<0.05）。重型患兒的TNF-α、IL-8、IL-10及IL-13水平均高于輕型患兒及B組，且輕型患兒均高于B組（P<0.05）。結(jié)論：在小兒支原體肺炎中，患兒存在體液和細(xì)胞免疫功能紊亂，展開炎性細(xì)胞因子與體液免疫動(dòng)態(tài)檢測(cè)，可對(duì)患兒的疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行合理評(píng)估。

【關(guān)鍵詞】 小兒支原體肺炎 炎性細(xì)胞因子 體液免疫 動(dòng)態(tài)檢測(cè)

Dynamic Detection of Inflammatory Cytokines and Humoral Immunity in the Evaluation of Mycoplasma Pneumonia in Children/ZHANG Jiafu， LI Yanling. //Medical Innovation of China， 2021， 18（05）： 0-020

[Abstract] Objective： To explore the effect of dynamic detection of inflammatory cytokines and humoral immunity on the evaluation of mycoplasma pneumonia in children. Method： A total of 46 children with mycoplasma pneumonia admitted to our hospital from January to December 2019 were selected as group A， including 24 mild cases and 22 severe cases. And 45 healthy children underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as group B. The inflammatory cytokines were detected and compared between the two groups by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Serum complement and immunoglobulin were detected and compared between the two groups by immunoturbidimetry. Result： The levels of C3 and C4 in group A at treatment for 3， 7 and 15 d were lower than those before treatment， the levels of IgM， IgG and IgA in group A were higher than those before treatment （P<0.05）. At treatment for 3， 7 d， the levels of C3 in group A were higher than those in group B， and the levels of IgM， IgG and IgA in group A were lower than those in group B （P<0.05）， while there was no statistically significant difference in C4 between group A and group B （P>0.05）. At treatment for 15 d， there were no statistically significant differences in the levels of C3， C4， IgM， IgG and IgA between group A and group B （P>0.05）. The levels of IL-8， IL-10， IL-13 and TNF-α in group A were higher than those in group B before treatment， at 3 and 7 d for treatment （P<0.05）. The levels of IL-8， IL-10， IL-13 and TNF-α in group A at 3， 7 and 15 d for treatment were lower than those before treatment （P<0.05）. At 15 d for treatment， there were no significant differences in the levels of IL-8， IL-10， IL-13 and TNF-α between group A and group B （P>0.05）. The levels of IgM， IgG and IgA in severe children were lower than those in mild children and group B， and the levels of C3 and C4 were higher than those in mild children （P<0.05）. The levels of TNF-α， IL-8， IL-10 and IL-13 in severe children were higher than those in mild children and group B， and those in mild children were higher than those in group B （P<0.05）. Conclusion： In children with mycoplasma pneumoniae， there are humoral and cellular immune disorders in children， dynamic detection of inflammatory cytokines and humoral immunity can reasonably evaluate the severity of the disease in children.

[Key words] Mycoplasma pneumonia in children Inflammatory cytokines Humoral immunity Dynamic detection

First-authors address： Jiamusi Maternal and Child Health Hospital， Jiamusi 154004， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.05.005

小兒支原體肺炎是肺炎支原體感染后，引起的小兒支氣管和肺泡急性炎癥，臨床主要表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、乏力、頭痛等癥狀，具有傳染性，其病原體可通過患兒口、鼻等經(jīng)飛沫和接觸傳播[1-3]。臨床多通過查體、X線、血清學(xué)檢查、肺炎支原體核酸檢測(cè)等方式對(duì)疾病展開診斷，治療方面則在隔離、供氧、降溫等基礎(chǔ)上，采用以藥物治療為主的干預(yù)方案，多數(shù)患兒預(yù)后良好[4]。但是，在肺炎支原體感染后致病機(jī)制不確定的情況下，增加了多種并發(fā)癥發(fā)生的可能性。有研究指出，肺炎支原體與小兒患者的免疫功能紊亂、炎癥損傷、呼吸道上皮吸附作用等存在密切關(guān)系[5-6]?？紤]到炎性反應(yīng)和免疫損傷在小兒支原體肺炎進(jìn)展中的作用，本次研究選取本院46例小兒支原體肺炎患兒，探究炎性細(xì)胞因子與體液免疫動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)患兒病情的評(píng)估作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1-12月本院收治的46例小兒支原體肺炎患者設(shè)為A組，其中輕型24例，重型22例。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《兒童社區(qū)獲得性肺炎診療規(guī)范（2019年版）》中小兒支原體肺炎相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];智力發(fā)育正常;血液、淋巴等循環(huán)功能正常;自身免疫功能良好。排除標(biāo)準(zhǔn)：先天性器質(zhì)性功能缺陷;合并支氣管哮喘、肺結(jié)核等疾病;合并其他傳染性疾病;參與同期其他醫(yī)療研究者。另選取同期在本院體檢的45例健康兒童設(shè)為B組。所有患兒家屬均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 A組入院后，采取小兒肺炎支原體感染疾病的常規(guī)治療方法，包括抗感染、祛痰、退熱、吸氧等綜合治療。采集B組的外周靜脈血3 mL;A組分別于治療前和治療3、7、15 d，采集外周靜脈血3 mL。血液樣本4 000 r/min離心5 min，取上清液，保存至-70 ℃環(huán)境中待測(cè);采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)炎性細(xì)胞因子，包括白介素（IL）-8、IL-10、IL-13、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）。采用免疫散射比濁法測(cè)定血清補(bǔ)體及免疫球蛋白，包括C3、C4、IgM、IgG及IgA。本次檢測(cè)所用試劑盒均由南京卡米洛生物工程有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 A組男25例，女21例;年齡6個(gè)月～6周歲，平均（3.26±0.74）歲;體重3.8～27.5 kg，平均（15.34±3.65）kg;病程1～6 d，平均（3.46±0.68）d。B組男24例，女21例;年齡6個(gè)月～6周歲，平均（3.44±0.81）歲;體重3.8～27.5 kg，平均（15.29±3.58）kg。兩組性別、年齡、體重比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 A組不同治療時(shí)間點(diǎn)血清補(bǔ)體、免疫球蛋白與B組比較 治療前，A組C3與C4水平均高于B組，且IgM、IgG、IgA水平均低于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。A組治療3、7、15 d的C3與C4水平均低于治療前，且IgM、IgG、IgA水平均高于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療3、7 d，A組C3均高于B組，且IgM、IgG、IgA水平均低于B組（P<0.05），而A組C4與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療15 d，A組的C3、C4、IgM、IgG、IgA水平與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.3 A組不同治療時(shí)間點(diǎn)炎性細(xì)胞因子水平與B組比較 治療前和治療3、7 d，A組IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平均高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。A組治療3、7、15 d的IL-8、

IL-10、IL-13、TNF-α水平均低于治療前（P<0.05）。治療15 d，A組IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.4 A組輕、重型患兒血清補(bǔ)體水平、免疫球蛋白與B組比較 重型患兒IgM、IgG及IgA水平均低于輕型患兒及B組，C3與C4水平均高于輕型患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。輕型患兒C3與C4水平與B組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

2.5 A組輕、重型患兒炎性細(xì)胞因子水平與B組比較 重型患兒的TNF-α、IL-8、IL-10及IL-13水平均高于輕型患兒及B組，且輕型患兒均高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表4。

3 討論

小兒支原體肺炎在早期階段，臨床癥狀無(wú)特異性[8]。因患兒的免疫系統(tǒng)未發(fā)育完全，組織器官功能尚不成熟，在感染小兒肺炎支原體后，極易形成肺部以外的并發(fā)癥，在疾病較嚴(yán)重的情況下，可危及患兒的生命健康[9]。在感染肺炎支原體后，正常機(jī)體會(huì)經(jīng)歷免疫抑制、蓄積、調(diào)節(jié)、逃逸等系列過程，自身的免疫抗體與細(xì)胞因子相互誘導(dǎo)、制約，產(chǎn)生作用，以形成復(fù)雜的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制[10]。

在小兒支原體肺炎中，機(jī)體最早出現(xiàn)的抗體為IgM，但多數(shù)患兒在疾病恢復(fù)期時(shí)，IgM可以恢復(fù)至正常水平[11-13]。與IgM相比，IgG在小兒支原體肺炎患者中的出現(xiàn)時(shí)間較晚，但是可以誘導(dǎo)疾病并促進(jìn)其不斷發(fā)展;在免疫球蛋白含量中，IgA的含量?jī)H次于IgG，占血清免疫球蛋白的10%～20%，廣泛存在于黏膜組織中[14]。作為重要的黏膜局部免疫抗體，當(dāng)患兒體內(nèi)缺乏IgA時(shí)，呼吸道抗病毒能力會(huì)降低，增加感染危險(xiǎn)性。本研究結(jié)果顯示，A組治療3、7、15 d的C3與C4水平均低于治療前，且IgM、IgG、IgA水平均高于治療前（P<0.05）;治療3、7 d，A組C3均高于B組，且IgM、IgG、IgA水平均低于B組（P<0.05）;重型患兒IgM、IgG及IgA水平均低于輕型患兒及B組，C3與C4水平均高于輕型患兒（P<0.05）。在長(zhǎng)期肺炎支原體感染情況下，可以導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)激活，生成大量的中性粒細(xì)胞趨化因子，病變部位有大量白細(xì)胞聚集并分泌水解酶，引起自身免疫損傷[15-17]。肺炎支原體感染早期可激活補(bǔ)體系統(tǒng)，為清除和對(duì)抗病原體將有大量C3、C4生成。在小兒肺炎支原體肺炎患兒中，多存在免疫功能紊亂，且紊亂程度與病情嚴(yán)重程度呈正比。細(xì)胞因子可直接作用于細(xì)胞對(duì)免疫功能起反饋性調(diào)節(jié)，細(xì)胞因子間的相互作用將對(duì)免疫平衡造成影響[18]。本研究結(jié)果顯示，治療前和治療3、7 d，A組IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平均高于B組（P<0.05）;A組治療3、7、15 d的IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α水平均低于治療前（P<0.05）;重型患兒的TNF-α、IL-8、IL-10及IL-13水平均高于輕型患兒及B組，且輕型患兒均高于B組（P<0.05）。IL-8為趨化性炎性因子，由單核細(xì)胞分泌，在呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生中起到關(guān)鍵性作用;TNF-α為雙向作用因子，能對(duì)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)，但其持續(xù)增高可加重或誘導(dǎo)炎癥反應(yīng);IL-10對(duì)單核巨噬細(xì)胞有強(qiáng)效活性抑制作用，屬抗炎因子，可對(duì)TNF-α的生成起到抑制作用，抑制炎癥反應(yīng);IL-13為抗炎因子，可增強(qiáng)其MHCⅡ類分子的表達(dá)，控制炎癥反應(yīng)[19]。肺炎支原體感染后，可引起組織損傷和炎癥持續(xù)，依賴特異性抗炎細(xì)胞因子IL-13等細(xì)胞因子呈高表達(dá)，是一種保護(hù)性免疫反應(yīng)，利于機(jī)體控制感染。

綜上所述，考慮到小兒支原體肺炎患兒存在體液和細(xì)胞免疫功能紊亂的情況，合理開展炎性細(xì)胞因子與體液免疫動(dòng)態(tài)檢測(cè)，可評(píng)估患兒的疾病嚴(yán)重程度。

參考文獻(xiàn)

[1]李香梅，鄧群花.阿奇霉素和布地奈德霧化治療支原體肺炎臨床療效及炎癥因子變化[J].山西醫(yī)藥雜志，2019，48（10）：1218-1220.

[2]馬淑霞，閆永彬，張驍，等.喜炎平注射液聯(lián)合阿奇霉素治療小兒支原體肺炎的療效及對(duì)血清細(xì)胞因子的影響[J].中草藥，2019，50（12）：2945-2949.

[3]于暢，張晗，尚云曉.兒童難治性肺炎支原體肺炎支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞因子檢查意義及與血清C反應(yīng)蛋白相關(guān)性研究[J].國(guó)際兒科學(xué)雜志，2019，46（11）：845-851.

[4]徐鳳琴，張琪，畢良學(xué).支氣管肺泡灌洗液肺炎支原體核酸聯(lián)合血清特異性IgM檢測(cè)對(duì)兒童肺炎支原體感染的診斷價(jià)值[J].臨床肺科雜志，2018，23（1）：35-37.

[5]閻娜，蘇寶鳳，陳峻峰.小兒哮喘患者外周血炎癥因子IL-4、IL-17、IL-33對(duì)病情判斷及與免疫功能、氣道功能的相關(guān)關(guān)系[J].解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2019，37（8）：100-102.

[6]阿迪亞·別爾哈什.免疫功能與超敏C反應(yīng)蛋白檢驗(yàn)對(duì)小兒肺炎支原體肺炎的臨床效果分析[J/OL].臨床檢驗(yàn)雜志（電子版），2018，7（2）：307-308.

[7]中華人民共和國(guó)國(guó)家健康委員會(huì)，國(guó)家中醫(yī)藥局.兒童社區(qū)獲得性肺炎診療規(guī)范（2019年版）[J].中華臨床感染病雜志，2019，12（1）：6-13.

[8]袁江，德桂榮.炎性指標(biāo)和胸部影像動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)在小兒支原體肺炎臨床診治中的意義[J].中國(guó)婦幼保健，2019，34（10）：2297-2300.

[9]宋貝，楊麗元.阿奇霉素滴注時(shí)長(zhǎng)治療小兒支原體肺炎的療效及對(duì)白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-13水平的影響[J].中國(guó)婦幼保健，2019，34（10）：2287-2290.

[10]陳建萍，余榮環(huán).TIPE2對(duì)肺炎支原體感染的負(fù)向調(diào)控作用及其機(jī)制研究[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，39（3）：252-257.

[11]韋瑞含，羅晶丹，王毅.小兒肺炎支原體肺炎發(fā)病機(jī)制與血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G水平相關(guān)性研究[J].臨床軍醫(yī)雜志，2018，46（4）：454-455.

[12]李智瓊，孫承謀，朱玲娜，等.MP-IgM、YKL-40、APOC1和IL-6在兒童支原體肺炎治療及預(yù)后中的意義[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2019，26（4）：576-579，619.

[13]張靜，張冠，李倩，等.血清補(bǔ)體與IgA、IgM、IgG聯(lián)合檢測(cè)在肺炎支原體肺炎診斷中的價(jià)值研究[J].河北醫(yī)藥，2019，41（19）：2990-2992，2996.

[14]梁振明，辜德明，陳運(yùn)旺，等.支原體肺炎患兒血清補(bǔ)體、免疫球蛋白含量與炎性應(yīng)激反應(yīng)的相關(guān)性[J].疑難病雜志，2019，18（4）：358-363.

[15]陳勇，李博，魏怡然，等.免疫球蛋白G4相關(guān)硬化性膽管炎中黏膜相關(guān)恒定T細(xì)胞的免疫生物學(xué)特性[J].國(guó)際消化病雜志，2019，39（2）：96-101.

[16]劉鳳英，胡建鋒，蔣彬.慢性蕁麻疹患者T細(xì)胞亞群、白細(xì)胞介素、免疫球蛋白與補(bǔ)體的檢測(cè)及臨床意義[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2018，28（1）：76-78.

[17]薛寶強(qiáng)，王廷智.支原體肺炎患兒的機(jī)體炎癥反應(yīng)、Th1/Th2免疫應(yīng)答評(píng)估及其與病原菌負(fù)荷的相關(guān)性[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，24（3）：338-341.

[18]屠昌明，田園.支原體肺炎患兒外周血Th17，Treg細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子表達(dá)及CRP，PCT水平的研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2019，34（4）：108-111.

[19]陳燕，馮錦錦，閆少華，等.佛司可林對(duì)活化的人單核巨噬細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-1β的抑制作用[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2018，33（23）：1823-1827.

（收稿日期：2020-05-26） （本文編輯：田婧）