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    無針注射器接種犬瘟熱疫苗免疫效果評價

    2021-03-31 01:05:57翟曉虎賀衛(wèi)華祝正高張春莉
    中國獸醫(yī)雜志 2021年4期
    關(guān)鍵詞:無針頭份犬瘟熱

    翟曉虎 , 曹 斌 , 賀衛(wèi)華 , 祝正高 , 張春莉

    (1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院 , 江蘇 泰州 225300 ; 2. 江蘇珀可醫(yī)療科技有限公司 , 江蘇 泰州 225300)

    犬瘟熱(Canine distemper,CD)是由犬瘟熱病毒(Canine distemper virus, CDV)感染引起的急性、高度接觸性傳染病[1]。CDV可以感染犬科、貓科、浣熊科以及非靈長類等動物[2-3]。CDV主要侵害動物的消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)[4],幼齡動物易感,幼犬感染后死亡率較高[5-6]。動物接種疫苗是控制該傳染病的最有效途徑,主要接種的疫苗有滅活苗和弱毒苗,以弱毒苗為主[7]。

    目前,動物醫(yī)院注射疫苗的方式仍以普通帶針頭注射器為主,而有些犬、貓對疼痛比較敏感,注射后經(jīng)常會出現(xiàn)一些副作用。無針注射可以降低因注射疼痛而出現(xiàn)的并發(fā)癥,得到臨床獸醫(yī)的認可。無針注射是指進行藥物注射時利用機械裝置產(chǎn)生的推力瞬間將藥液穿過皮膚表皮細胞,像水花均勻分布在皮下或皮內(nèi)的注射方法[8]。如今人醫(yī)有關(guān)無針注射技術(shù)的報道主要集中在胰島素的注射和瘢痕組織藥物注射治療[9-10]。其用于疫苗接種方面可表現(xiàn)為注射效率高、避免交叉感染、抗原分散高和降低動物疼痛感等優(yōu)點。周海龍等[11]對豬瘟活疫苗無針注射的免疫效果進行了評價,而有關(guān)犬無針注射疫苗免疫效果評價的文獻并未查到。本試驗采用無針注射接種犬瘟熱疫苗,觀察注射時疼痛反應(yīng)、副作用并評估免疫效果。

    1 材料與方法

    1.1 試驗動物 年齡為42~45日齡健康拉布拉多犬和金毛巡回獵犬,均斷奶且未注射任何疫苗,來自江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院寵物繁育中心。

    1.2 試驗材料 衛(wèi)佳伍疫苗(含犬瘟熱抗原Snyder hill株),購自泰州欣牧寵物用品有限公司(批號:300628A);犬瘟熱病毒抗體(CDV Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒,購自上海聯(lián)碩生物科技有限公司(貨號:AE93755Ca,批號:201911);有針注射器;無針注射器(型號:POK-P-I),由江蘇珀可醫(yī)療科技有限公司提供。

    1.3 試驗方法 將30只42~45日齡幼犬隨機分成3組,每組10只;第1組采用有針注射器注射1頭份衛(wèi)佳伍疫苗,第2組使用無針注射器注射1頭份衛(wèi)佳伍疫苗,第3組使用無針注射器注射1/2頭份衛(wèi)佳伍疫苗。第2組、第3組無針注射接種時CO2氣體壓力為1.5 MPa。首免后14 d和28 d,再用同樣的接種劑量和接種途徑進行二免和三免。

    1.4 比較2種注射方法接種疫苗后對動物的影響 采用有針注射器和無針注射器接種疫苗后,分別于接種后10 min、30 min、1 h、6 h和12 h觀察疫苗接種部位有無出現(xiàn)紅、腫、熱、痛等炎癥反應(yīng);觀察注射后幼犬疼痛反應(yīng)、有無藥液滲出;觀察疫苗注射后1 d、3 d和5 d幼犬的食欲、精神狀態(tài),比較無針注射器和有針注射器接種疫苗后對幼犬的影響。

    1.5 CDV抗體檢測 衛(wèi)佳伍疫苗首免后14 d、二免后14 d、三免后14 d頸靜脈采血,分離血清,按照犬瘟熱病毒抗體(CDV Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒操作步驟進行檢測,在450 nm波長處測定OD值,將OD值帶入標準品制作的直線回歸方程,計算每只犬產(chǎn)生的CDV抗體濃度。

    1.6 統(tǒng)計分析 用SPSS軟件統(tǒng)計每組犬在免疫后同一時間節(jié)點產(chǎn)生抗體濃度,結(jié)果以平均值±標準差表示,分析各組之間的差異,確定無針注射器對犬瘟熱疫苗免疫效果的影響。

    2 結(jié)果

    2.1 不同接種方法接種衛(wèi)佳伍疫苗后對犬的影響 2種注射方法接種疫苗后均未出現(xiàn)食欲減退、精神萎靡、藥液滲出等現(xiàn)象。結(jié)果顯示(表1),有針注射接種疫苗后1只犬接種部位皮膚出現(xiàn)輕微炎癥反應(yīng),12 h后消失;有針注射接種疫苗時,針刺入皮膚到藥液注射完畢,8只犬出現(xiàn)掙扎和呻吟等疼痛反應(yīng),而無針注射接種疫苗時,只在接種瞬間因設(shè)備內(nèi)部擊發(fā)裝置撞擊時產(chǎn)生的聲響,犬會出現(xiàn)立耳等集中注意力表現(xiàn),并無疼痛反應(yīng)。

    表1 不同接種方法接種疫苗對犬的影響Table 1 Effects of different vaccination methods on dogs

    2.2 各組CDV抗體濃度比較 分別于首免后14 d、 二免后 14 d和三免后14 d采血分離血清,檢測血液里CDV抗體濃度,根據(jù)上海聯(lián)碩生物科技有限公司犬瘟熱病毒抗體(CDV Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒說明書,當測得抗體濃度大于12 ng/L 時,判斷該樣本抗體呈陽性,具有保護作用。結(jié)果顯示(圖1),采用有針注射方法接種1頭份疫苗和無針注射方法接種1頭份、1/2頭份疫苗,首免、二免和三免后14 d所測的抗體濃度均能達到保護水平。首免后14 d、二免后14 d和三免后14 d所測抗體水平,無針注射方法略高于有針注射。二免后14 d 后體內(nèi)產(chǎn)生的抗體水平大于首免后14 d,說明第2次加強免疫可繼續(xù)提高抗體水平,但是三免后14 d,3種注射方法抗體水平均呈現(xiàn)下降趨勢,但仍可達到保護水平。

    圖1 免疫后CDV抗體濃度檢測Fig.1 Detection of CDV antibody concentration after immunization注:小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05),字母相同或無標記表示差異不顯著(P>0.05)Note: Different lowercase letter superscripts show significant difference (P<0.05),same letter or no letter superscript show no significant difference (P>0.05)

    3 討論

    3.1 無針注射接種疫苗的有效性 2種注射方法接種衛(wèi)佳伍疫苗后,首免后14 d的CDV濃度均達到最低有效濃度,具有保護作用,說明犬采用無針注射接種疫苗是有效的;本試驗首免后14 d、二免后14 d和三免后14 d對比2種注射方法抗體生成濃度,無針注射組抗體水平略高;無針接種1/2頭份疫苗和有針注射1頭份疫苗相比,相同階段無針注射1/2頭份疫苗產(chǎn)生的抗體水平略高,這可能是因為無針注射藥液進入體內(nèi)瞬間分散,這種分散的抗原有利于與免疫細胞的接觸,生成相對較多的抗體。周海龍等[11]也曾報道,無針注射1/2頭份豬瘟活疫苗和使用有針注射器注射1頭份疫苗產(chǎn)生抗體相當。本試驗檢測三免后14 d的CDV抗體濃度低于首免后14 d、二免后14 d。其原因是按照該疫苗免疫程序接種,二免后抗體水平已經(jīng)很高,第3次免疫中和了部分抗體,導(dǎo)致血清抗體濃度下降,但仍大于12 ng/L,具有保護作用。

    3.2 無針注射的安全性 本試驗采用的2種接種疫苗方法,無針注射后沒有出現(xiàn)食欲不振、精神萎靡及注射部位炎癥反應(yīng)等副作用,而且明顯降低犬疼痛感,說明采用無針注射器接種疫苗是安全的。朱文勇等[12]在無針皮內(nèi)免疫接種Sabin IPV疫苗的安全性及免疫原性研究中也評估了無針接種sIPV疫苗是安全的。

    綜上所述,采用無針注射器給犬接種疫苗是安全的、有效的,而且最大的優(yōu)點是降低了動物注射時的疼痛感,進而減小了獸醫(yī)人員給犬接種疫苗時被犬咬傷的風險,可代替普通注射器進行疫苗接種。

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